Kỹ thuật miễn dịch ứng dụng trong chẩn đoán

Kỹ thuật miễn dịch ứng dụng chẩn đoán I ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) II Kỹ thuật sắc ký miễn dịch III Kỹ thuật hóa mơ miễn dịch I ELISA TỔNG QUAN ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) kỹ thuật xét nghiệm miễn dịch đánh dấu phổ biến ELISA dựa nguyên lý kháng thể có gắn enzyme có khả phát kháng nguyên cố định bề mặt rắn TỔNG QUAN ELISA Trực Tiếp ELISA Gián Tiếp Sandwich ELISA ELISA Cạnh Tranh ELISA Trực Tiếp Ưu điểm ELISA Gián Tiếp Sandwich ELISA ELISA Cạnh Tranh - Nhanh nhiều so với phương pháp - Độ nhạy cao - Độ nhạy cao (2-5 lần so với gián tiếp) - Mẫu phân tích khơng cần qua xử lý, ELISA khác - Linh hoạt việc sử dụng kháng thể - Độ linh hoạt cao xử dụng mẫu thô, mẫu không qua tinh - Độ đặc hiệu cao - Mẫu phân tích khơng cần tinh - Sai khác xét nghiệm trùng lặp - Độ linh hoạt cao Nhược điểm - Ít linh hoạt việc chọn kháng thể - Có khả xảy phản ứng chéo - Cần chọc lọc cặp kháng thể bắt kháng - Có nhược điểm hình thức - Độ nhạy không cao - Lâu so với ELISA trực tiếp thể sơ cấp phù hợp ELISA áp dụng tương ứng - Có khả nhuộm màu cao Ứng dụng - Có khả xảy phản ứng chéo Ứng dụng chủ yếu việc kiểm tra, phân Ứng dụng nhiều việc xác định nồng Ứng dụng việc phân tích mẫu - Ứng dụng để phát kháng nguyên tích phản ứng đáp ứng miễn dịch độ kháng thể có mẫu phức tạp nhỏ bị ràng buộc hai kháng kháng nguyên thể khác kỹ thuật ELISA sandwich II Sắc ký miễn dịch Sắc ký miễn dịch kỹ thuật đơn giản nhằm phát diện vắng mặt chất phân tích đích Khái niệm sắc ký miễn dịch kết hợp sắc ký (tách thành phần mẫu dựa khác biệt chuyển động chúng thông qua chất hấp thụ) phản ứng miễn dịch hóa Sắc ký miễn dịch ứng dụng phổ biến que thử Tấm conjugate: có chứa kháng thể đánh dấu Vạch C: có chứa kháng thể thứ Miếng thấm cấp (kháng thể kháng kháng thể đánh dấu) mẫu Miếng hút Dòng chảy mẫu Màng Nitrocellulose Tấm đế Vạch T: có chứa kháng thể Sơ cấp (kháng thể kháng kháng nguyên) • Ưu điểm: - Dễ dàng sản xuất - Bảo quản lâu 12-24 tháng không cần tủ lạnh - Thao tác đơn giản, thời gian phân tích nhanh - Lượng mẫu cần dùng • Nhược điểm: - Phân tích đồng thời nhiều chất gặp nhiều khó khăn - Việc tái sử dụng phân tích gặp nhiều khó khăn III Hóa mơ miễn dịch TỔNG QUAN Hóa mô miễn dịch (IHC) kết hợp kỹ thuật mô học, miễn dịch sinh hóa để xác định thành phần mô cụ thể phương pháp phản ứng kháng nguyên / kháng thể cụ thể gắn nhãn IHC cho phép mô tả phân bố vị trí thành phần tế bào cụ thể tế bào mô Kỹ thuật sử dụng rộng rãi nghiên cứu chẩn đoán da liễu Các ứng dụng tiếp tục mở rộng tính dễ sử dụng, độ tin cậy tính linh hoạt  I Thu thập mơ II. Cố định III. Ngâm parafn IV. Phân cắt VI. Bộc lộ kháng nguyên VII. Phản ứng kháng thể sơ cấp VIII. Phản ứng kháng thể thứ cấp IX. Nhuộm V Đặt mẫu • Ưu điểm: - Có thể quan sát xác có mặt kháng thể tế bào ung thư mơ Qua đánh giá hình thái học kiểu hình miễn dịch tế bào ung thư đưa cách thuận lợi - Hóa mơ miễn dịch giúp xác định loại ung thư biểu mô di không rõ nguồn gốc nguyên phát… - Với bệnh nhân ung thư di căn, hóa mơ miễn dịch phương pháp chẩn đốn hiệu so với tiêu nhuộm Bởi tiêu nhuộm thường quy khó đưa gợi ý phù hợp để khẳng định tình trạng bệnh • Nhược điểm: - Nhuộm hóa mơ miễn dịch kỹ thuật phức tạp Để hiểu chi tiết nhuộm hóa mơ miễn dịch cần nhiều kiến thức chuyên môn THANKS FOR WATCHING ... dụng - Có khả xảy phản ứng chéo Ứng dụng chủ yếu việc kiểm tra, phân Ứng dụng nhiều việc xác định nồng Ứng dụng việc phân tích mẫu - Ứng dụng để phát kháng nguyên tích phản ứng đáp ứng miễn dịch. .. kháng nguyên thể khác kỹ thuật ELISA sandwich II Sắc ký miễn dịch Sắc ký miễn dịch kỹ thuật đơn giản nhằm phát diện vắng mặt chất phân tích đích Khái niệm sắc ký miễn dịch kết hợp sắc ký (tách... tái sử dụng phân tích gặp nhiều khó khăn III Hóa mơ miễn dịch TỔNG QUAN Hóa mơ miễn dịch (IHC) kết hợp kỹ thuật mơ học, miễn dịch sinh hóa để xác định thành phần mô cụ thể phương pháp phản ứng