KỸ THUẬT PLASMID và ỨNG DỤNG TRONG CHĂN

KỸ thuật Plasmid và ứng dụng trong chăn nuôi thú y

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÁI NGUYÊN KHOA CHĂN NUÔI THÚ Y  Bài tiểu luận Hãy trình bày những hiểu biết của em về kỹ thuật plasmit và ứng dụng của nó trong chăn nuôi thú y? Lớp : thú y-k44 Nhóm : 4 Năm : 2014  NỘI DUNG CHÍNH: I. Mở đầu II. Nội dung 1. Khái niệm plasmit 2. Kĩ thuật Plasmit 3. Ứng dụng của plasmit trong chăn nuôi thú y III. Kết luận IV. Tài liệu tham khảo I. Mở đầu  Plasmid có hiều loại chứa những gen sản xuất kháng sinh mà chúng ta có thể tận dụng và sản xuất kháng sinh chữa bệnh cho người và động vật.  Xét về mặt chuyển giao gen trong môi trường, Plasmid là những phương tiện hết sức linh hoạt vận chuyển AND từ cá thể này sang cá thể khác.  Khai thác các đặc tính sinh học của plasmid, ngày nay plasmid được ứng dụng một cách rộng rãi trong chăn nuôi và di truyền. II. Nội dung . 1. Khái niệm plasmid Plasmid là 1 thể truyền Plasmid là những phân tử DNA mạch vòng có khả năng tái bản độc lập và có kích thước 0,05- 10% kích thước của nhiễm sắc thể vi khuẩn Chúng có ở nhiều loài vi khuẩn và thường không quan trọng đối với sự sinh trưởng của tế bào.  Sơ đồ minh họa một tế bào vi khuẩn với plasmid ở bên trong. (1) DNA nhiễm sắc thể. (2) Plasmids Sơ đồ plasmid với gene kháng kháng sinh (1&2) và một ori(3) Plasmid thường chứa các gene hay nhóm gene (gene- cassettes) mang lại một ưu thế chọn lọc nào đó cho tế bào vi khuẩn chứa nó, ví dụ như khả năng giúp vi khuẩn kháng kháng sinh. Mỗi plasmid chứa ít nhất một trình tự DNA có vai trò vị trí bắt đầu sao chép (ori hay origin of replication), mang lại cho plasmid khả năng tự sao chép độc lập với DNA nhiễm sắc thể  Các loại plasmid • dựa vào khả năng truyền sang vi khuẩn khác của chúng:  Plasmid tiếp hợp (conjugative) chứa các tra-genes, giúp thực hiện một quá trình phức tạp gọi là tiếp hợp (conjugation), chuyển một plasmid sang vi khuẩn khác  Plasmid không tiếp hợp là những plasmid không có khả năng tự thực hiện tiếp hợp, vì thế chúng chỉ có thể được chuyển sang một vi khuẩn khác khi có sự trợ giúp (ngẫu nhiên) của plasmid tiếp hợp. Sơ đồ về tiếp hợp ở vi khuẩn 1 DNA nhiễm sắc thể. 2 Plasmids. 3 Pilus. • Phân loại plasmid là dựa vào chức năng. Có 5 nhóm chính:  Plasmid giới tính mang các tra gene, có khả năng tiếp hợp.  Plasmid mang tính kháng mang các gene có khả năng kháng lại các thuốc kháng sinh hay các chất độc. Được biết dưới thuật ngữ R-factor trước khi phát hiện ra bản chất của nó là plasmid.  Col-plasmid, chứa gene mã hóa cho sự tổng hợp colchicine, một protein có thể giết chết các vi khuẩn khác.  Plasmid phân hủy, giúp phân hủy các chất lạ như toluene hay salicylic acid.  Plasmid mang độc tính, làm cho sinh vật trở thành sinh vật gây bệnh. 2. Kỹ thuật plasmid NGUYÊN TẮC Biểu hiện gen mong muốn Chuyển vào tế bào đích AND tái tổ hợp VectorSinh vật cho gen  Ba giai đoạn của kĩ thuật cấy gen Tách ADNnst tb cho ADN tái tổ hợp Tách plasmit Chuyển ADNtth vào tb nhận Enzim cắt Enzim cắt [...]... dễ dàng đi qua màng  B3: Phân lập dòng tế bào chứa ADN tái tổ hợp • Chọn thể truyền có gen đánh dấu • - Bằng các kỹ thuật nhất định nhận biết được sản phẩm đánh dấu • - Phân lập dòng tế bào chứa gen đánh dấu 3 Ứng dụng của kỹ thuật plasmid trong chăn nuôi thú y  .Ứng dụng công nghệ gen trong tạo giống biến đổi gen .3.1: Khái niệm sinh vật biến đổi gen • Khái niệm : Sinh vật biến đổi gen là sinh vật...Khái niệm Các bước của kỹ thuật cấy gen Bước 1 Là kĩ thuật chuyển một đoạn ADN từ tế bào cho sang tế bào nhận bằng cách dùng plasmit (hoặc thể thực khuẩn) làm thể truyền Bước 2 Bước 3 Tách ADN NST của tế bào cho và tách plasmid ra khỏi tế bào vi khuẩn Cắt và nối đoạn ADN của tế bào cho và ADN plasmid ở những điểm xác định tạo nên ADN tái tổ hợp • Việc cắt nhờ... vật: + Đưa thêm một gen lạ vào hệ gen của sinh vật tạo ra sinh vật chuyển gen + Làm biến đổi 1 gen có sẵn trong hệ gen + Loại bỏ hoặc làm bất hoạt một gen nào đó trong hệ gen 3.2: Tạo giống động vật chuyển gen  * Cách tiến hành : • Lấy trứng cho thụ tinh trong ống nghiệm • - Tiêm gen cần chuyển vào hợp tử và hợp tử phát triển thành phôi • - Cấy phôi đã được chuyển gen vào tử cung con vật khác để... tiêm: • Lấy trứng ra khỏi con vật rồi cho thụ tinh trong ống nghiệm • + Tiêm gen cần chuyển vào hợp tử (nhân non) và nuôi hợp tử phát triển thành phôi • + Cấy phôi vào tử cung con cái khác để nó mang thai và đẻ bình thường g con vật biến đổi gen  Phương pháp cấy nhân có gen đã cải biến: • Nuôi tế bào và bổ sung ADN mang gen cải biến • Chọn lọc tế bào thay thế gen • Dung hợp với tế bào trứng đã loại... được cấy vào bò mẹ Thành tựu thu được : • - Chuyển gen prôtêin người vào cừu tạo cừu biến đổi gen sản sinh prôtêin người trong sữa cừu • - Chuyển gen hoocmôn sinh trưởng của chuột cống vào chuột bạch → chuột bạch biến đổi gen có kích thước và khối lượng cơ thể gấp đôi chuột bình thường cùng lứa Sơ đồ tạo động vật chuyển gen Chuột chuyển gen horrmone sinh trưởng (bên phải) và chuột đối chứng (bên... bảo quản tốt hơn III Kết Luận: Nhờ có kỹ thuật chuyển gen mà chúng ta có ta có thể tạo ra được những giống vật nuôi có thể sinh trưởng nhanh, cho chất lượng sản phẩm tốt và chất lượng rồi dào Đáp ứng được những nhu cầu ngày càng tăng của con người, cả về số lượng và chất lượng Đem lại nguồn thu nhập khổng lồ cho người nông dân từ chăn nuôi (sản lượng thịt, trứng, sữa…tăng,hàm lượng các chất cần thiết... tổ hợp vào tế bào nhận và tạo điều kiện cho gen đã ghép được biểu hiện (tự nhân đôi, sao mã, dịch mã tổng hợp protein) B1: Tạo ADN tái tổ hợp Nguyên liệu: • ADN chứa gen cần chuyển • Thể truyền : Plasmit (là ADN dạng vòng nằm trong tế bào chất của vi khuẩn và có khả năng tự nhân đôi độc lập với ADN vi khuẩn) hoặc thể thực khuẩn (là virut chỉ ký sinh trong vi khuẩn) • Enzim cắt (restrictaza) và enzim... hormone của tuyến tụy có chức năng điều hòa glucose trong máu Trường hợp insulin do cơ thể sản xuất không đủ hoặc mất chức năng sẽ gây bệnh tiểu đường do glucose bị thải ra qua nước tiểu  - Gen tổng hợp insulin được tách từ cơ thể người và chuyển vào vi khuẩn E.coli bằng plasmid Sau đó, nuôi cấy vi khuẩn để sản xuất insulin trên qui mô công nghiệp đáp ứng nhu cầu chữa bệnh cho con người Tạo chủng vi... đặc biệt được tổng hợp từ não động vật, có chức năng điều hòa hormone sinh trưởng và insulin đi vào máu  - Bằng công nghệ gen hiện nay đã tạo được chủng E.coli sản xuất somatostatin  Mục tiêu tạo động vật chuyển gen:  Tạo nên giống mới có năng suất và chất lượng cao hơn  Sinh vật biến đổi gen có thể được tạo ra dùng trong ngành công nghiệp dược phẩm (như nhà máy sinh học sản suất thuốc cho con người)... hơn bò đến 3 lần Chúng ít bị bệnh tật hơn và dù bị bệnh thì bệnh của chúng cũng khác với bệnh của người" Elba, thỏ chuyển gen protein huỳnh quang màu xanh lá cây 3.3 Tạo giống cây trồng biến đổi gen  Tạo ADN tái tổ hợp: tách thể truyền và gen cần chuyển ra khỏi tế bào  - Xử lí plasmit và ADN chứa gen cần chuyển bằng enzim cắt restrictaza  - Nối đoạn vừa cắt vào plasmit nhờ enzim ligaza  - Tái sinh . các kỹ thuật nhất định nhận biết được sản phẩm đánh dấu. • - Phân lập dòng tế bào chứa gen đánh dấu. 3. Ứng dụng của kỹ thuật plasmid trong chăn nuôi thú y . Ứng dụng công nghệ gen trong. đặc tính sinh học của plasmid, ngày nay plasmid được ứng dụng một cách rộng rãi trong chăn nuôi và di truyền. II. Nội dung . 1. Khái niệm plasmid Plasmid là 1 thể truyền Plasmid là những phân. ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÁI NGUYÊN KHOA CHĂN NUÔI THÚ Y  Bài tiểu luận Hãy trình bày những hiểu biết của em về kỹ thuật plasmit và ứng dụng của nó trong chăn nuôi thú y? Lớp : thú y-k44