Nghiên cứu đặc điểm sinh học của một số chủng vi sinh vật phân giải xenlulo được phân lập từ các mẫu đất dưới tán rừng thông đuôi ngựa (piius massoniana) ở tam đảo, vĩnh phúc

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM CAM VĂN SẰN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA MỘT SỐ CHỦNG VI SINH VẬT PHÂN GIẢI XENLULO ĐƯỢC PHÂN LẬP TỪ CÁC MẪU ĐẤT DƯỚI TÁN RỪNG THÔNG ĐUÔI NGỰA (Pinus massoniana) Ở TAM ĐẢO, VĨNH PHÚC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo Chuyên ngành Khoa Khóa học : Chính quy : NLKH : Lâm nghiệp : 2015 - 2019 Thái Nguyên - năm 2019 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM CAM VĂN SẰN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA MỘT SỐ CHỦNG VI SINH VẬT PHÂN GIẢI XENLULO ĐƯỢC PHÂN LẬP TỪ CÁC MẪU ĐẤT DƯỚI TÁN RỪNG THÔNG ĐUÔI NGỰA (Pinus massoniana) Ở TAM ĐẢO, VĨNH PHÚC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành : NLKH Lớp : K47 NLKH Khoa : Lâm nghiệp Khóa học : 2015 - 2019 Giảng viên hướng dẫn: TS Vũ Văn Định Th.S Phạm Thu Hà Thái Nguyên - năm 2019 i LỜI CẢM ƠN Trên sở hợp tác Đại học Nông Lâm Thái Nguyên với Viện Khoa Học Lâm Nghiệp Việt Nam phân công khoa Lâm Nghiệp, trường Đại học nông Lâm Thái Nguyên thực đề tài “ Nghiên cứu đặc điểm sinh học số chủng vi sinh vật phân giải xenlulo phân lập từ mẫu đất tán rừng thông đuôi ngựa (Piius massoniana) Tam Đảo, Vĩnh Phúc” Để hồn thành khóa luận trước hết tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo TS Vũ Văn Định - Bộ môn Vi sinh vật Bảo vệ rừng, Trung tâm Nghiên cứu Bảo vệ rừng, Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt Nam người thầy tận tâm, định hướng nghiên cứu, trực tiếp hướng dẫn bảo tận tình cho tơi suốt thời gian học tập nghiên cứu Tơi bày tỏ lòng biết ơn tới cô giáo ThS Phạm Thu Hà - Khoa Lâm Nghiệp, trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên Tôi xin trân trọng cám ơn tới KS Phạm Văn Nhật, KS Trần Nhật Tân cán Trung tâm Nghiên cứu Bảo vệ rừng giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho việc triển khai thí nghiệm nghiên cứu Tơi trân trọng cảm ơn thầy giáo, cô giáo, cán Khoa Lâm nghiệp, trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên giúp đỡ trang bị tơi kiến thức hữu ích đồng hành suốt thời gian học tập nghiên cứu Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè yêu quý nguồn động viên chỗ dựa tinh thần vững cho suốt thời gian qua Xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, ngày 30 tháng năm 2019 Sinh viên Cam Văn Sằn ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu trình bày khóa luận kết thí nghiệm thực tế tơi Viện Khoa Học Lâm Nghiệp Việt Nam, có sai sót tơi xin chịu hồn tồn trách nhiệm Thái Nguyên, ngày 30 tháng năm 2019 XÁC NHẬN CỦA GVHD NGƯỜI VIẾT CAM ĐOAN Th.S Phạm Thu Hà Cam Văn Sằn iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT VÀ CÁC KÝ HIỆU Chữ viết tắt/ký hiệu Giải nghĩa đầy đủ CFU : Đơn vị khuẩn lạc ml gam CT : Cơng thức D1.3 : Đường kính ngang ngực ĐC : Đối chứng Do : Đường kính gốc DTB : Đường kính trung bình DNA : Deoxyribonucleic acid Hdc : Chiều cao cành Hvn : Chiều cao vút KV : Khu vực LSD : Khoảng sai dị MĐ : Mật độ ODB : Ô dạng OTC : Ô tiêu chuẩn PDA : Potato Dextrose Agar Sd : Sai tiêu chuẩn TCLN : Tổng cục Lâm nghiệp TB : Trung bình VSV : Vi sinh vật iv DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Một số VSV sản xuất cellulase Bảng 4.1 Sinh trưởng phát triển VSV phân giải xenlulo điều kiện ẩm độ khác sau ngày nuôi cấy 27 Bảng 4.2: Sinh trưởng phát triển VSV phân giải xenlulo điều kiện ẩm độ khác sau ngày nuôi cấy 29 Bảng 4.3: Sinh trưởng phát triển VSV phân giải xenlulo điều kiện ẩm độ khác sau 12 ngày nuôi cấy 31 Bảng 4.4 Đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng chủng VSV sau ngày nuôi 33 Bảng 4.5 Đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng chủng VSV sau ngày nuôi 35 Bảng 4.6: Đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng chủng VSV sau 12 ngày nuôi 37 Bảng 4.7: Mức độ phân giải xenlulo chủng vsv 39 Biểu 4.8: Kết đánh giá phân hủy xenlulo chủng VSV 41 v DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 2.1: Bản đồ ranh giới huyện Tam Đảo 19 Hình 4.1: chủng VSV đánh giá điều kiện sinh trưởng phát triển 26 Hình 4.2: Biểu đồ sinh trưởng phát triển VSV phân giải xenlulo điều kiện ẩm độ khác sau ngày nuôi cấy 27 Hình 4.3: Chủng VSV LSN6.2 chủng khuẩn HBN1.1 sau ngày phát triển ẩm độ 80% 28 Hình 4.4: Biểu đồ sinh trưởng phát triển VSV phân giải xenlulo điều kiện ẩm độ khác sau ngày nuôi cấy 29 Hình 4.5: Chủng VSV LSN6.2 chủng khuẩn LSN5.2 sau ngày phát triển ẩm độ 90% 30 Hình 4.6: Sinh trưởng phát triển VSV phân giải xenlulo điều kiện ẩm độ khác sau 12 ngày nuôi cấy 31 Hình 4.7 Chủng VSV LSN6.2 chủng VSV HBN3.1 sau 12 ngày phát triển ẩm độ 80% 32 Hình 4.8 Đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng chủng VSV sau ngày nuôi cấy 34 Hình 4.9: Chủng VSV LSN9.2 chủng VSV SSN5.4 sau ngày phát triển thang nhiệt độ 100C 34 Hình 4.10 Biểu đồ đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng chủng VSV sau ngày nuôi cấy 36 Hình 4.11: Chủng VSV LSN7.1 chủng VSV LSN 10.1 sau 12 ngày phát triển thang nhiệt độ 250C 36 Hình 4.12: Biểu đồ đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng chủng VSV sau 12 ngày nuôi 38 Hình 4.13: Chủng VSV LSN6.1 chủng VSV LSN 10.1 sau 12 ngày phát triển thang nhiệt độ 300C 38 Hình 4.14: Biểu đồ mức độ phân giải xenlulo chủng vsv 40 Hình 4.15: Độ phân giải xenlulo từ không đến mạnh 40 Hình 4.16: Các chủng vi sinh vật có hoạt tính phân giải xenlulo cao đưa vào thí nghiệm 42 vi MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i LỜI CAM ĐOAN ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT VÀ CÁC KÝ HIỆU iii DANH MỤC CÁC BẢNG iv DANH MỤC CÁC HÌNH v MỤC LỤC vi PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Ý nghĩa đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn PHẦN 2: TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 2.1 Tổng quan tài liệu nghiên cứu 2.1.1 Tổng quan Emzym xenlulo 2.1.1.1 Phân loại cellulase 2.1.1.2 Cơ chế tác dụng enzyme cellulase 2.1.1.3 Ứng dụng emzym cellulose 2.1.2 Vi sinh vật phân giải cellulose 2.1.2.1 Tình hình nghiên cứu giới 2.1.2.2 Tình hình nghiên cứu nước 11 2.1.3 Chế phẩm vi sinh vật có chứa vi sinh vật phân giải cellulose 14 2.1.3.1 Tình hình nghiên cứu giới 14 2.1.3.2 Tình hình nghiên cứu nước 16 2.2 Tổng quan khu vực nghiên cứu 18 vii 2.2.1 Vị trí địa lý 18 2.2.2 Điều kiện địa hình 19 2.2.3 Điều kiện khí hậu thời tiết 20 PHẦN 3: ĐỐI TƯỢNG, PHAM VI, NỘI DUNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 3.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 21 3.2 Vật liệu nghiên cứu 21 3.3 Nội dung nghiên cứu 21 3.3.1 Đánh giá ảnh hưởng ẩm độ khơng khí đến sinh trưởng chủng VSV phân giải xenlulo 21 3.3.2 Đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng chủng VSV phân giải xenlulo 21 3.4 Phương pháp nghiên cứu 22 3.4.1 Phương pháp đánh giá ảnh hưởng ẩm độ đến sinh trưởng chủng VSV phân giải xenlulo 22 3.4.2 Phương pháp đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng chủng VSV phân giải xenlulo 22 3.4.3 Tuyển chọn chủng vi sinh vật có khả phân hủy xenlulo 23 3.4.3.1 Phương pháp xác định hoạt tính phân giải xenlulo chủng 23 3.4.3.2 Thí nghiệm chủng mạnh vật liệu cháy (trong bình thí nghiệm) 24 PHẦN 4: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 26 4.1 Kết đánh giá ảnh hưởng ẩm độ đến sinh trưởng chủng VSV phân giải xenlulo 27 4.1.1 Sinh trưởng phát triển VSV phân giải xenlulo sau ngày nuôi cấy 28 viii 4.1.2 Sinh trưởng phát triển VSV phân giải xenlulo sau 12 ngày nuôi cấy 30 4.2 Ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng phát triển chủng VSV 33 4.2.1 Đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng chủng VSV sau ngày nuôi 33 4.2.2 Đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng chủng VSV sau ngày nuôi 35 4.2.3 Đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng chủng VSV sau 12 ngày nuôi 37 4.3 Tuyển chọn chủng vi sinh vật có khả phân hủy xenlulo 39 4.3.1 Phương pháp xác định phân giải hoạt tính xenlulo chủng 39 4.3.2 Thí nghiệm chủng mạnh vật liệu cháy (trong bình thí nghiệm) 41 PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 43 5.1 Kết luận 43 5.2 Tồn 43 5.3 Kiến nghị 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO 44 I TIẾNG VIỆT 44 II TIÊNG ANH 48 37 Ở thang nhiệt độ 00C chủng VSV sau ngày nuôi cấy khơng có khả sinh trưởng Ở thang nhiệt độ 100C có thêm chủng LSN10.1 sinh trưởng độ dài hệ sợi nhỏ 2mm Ở thang nhiệt độ 300C chủng nấm LSN6.2 phát triển mạnh với độ dài hệ sợi 47.2mm 4.2.3 Đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng chủng VSV sau 12 ngày ni cấy Thí nghiệm đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng thực với chủng vi sinh vật phân giải xenlulo Kết thí nghiệm được thu nhận sau 132 ngày thể Bảng 4.6, Hình 4.12 Hình 4.13 Bảng 4.6: Đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng chủng VSV sau 12 ngày nuôi Đơn vị (mm) STT Ký hiệu Nhiệt độ thí nghiệm 50C 100C 150C 200C 250C 300C 350C 400C LSN7.1 0 18.8 44.2 57.4 71.3 60.5 30.3 LSN6.2 4.5 29.4 57 68.5 85.4 72 41.8 LSN5.2 0 17.3 49.5 55.1 75.4 60.1 32 LSN10.1 2.8 20.7 51.2 61 78.7 57 37.7 LSN6.1 0 17 40.3 49 63.7 46.3 32.9 HBN3.1 0 14.4 32.7 42.6 53 41.3 26.7 SSN 5.4 0 20.2 38.9 48 60 50.2 27.3 LSN9.4 3.2 26.3 42.4 54 69.5 56.4 27 HBN1.1 0 7.5 17 21.2 34.5 22.4 19.6 38 90 80 50C 70 100C 60 150C 50 200C 40 250C 30 300C 20 350C 10 400C LSN7.1 LSN6.2 LSN5.2 LSN10.1 LSN6.1 HBN3.1 SSN 5.4 LSN9.4 HBN1.1 Hình 4.12: Biểu đồ đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng chủng VSV sau 12 ngày nuôi LSN6.1 LSN10.1 Hình 4.13: Chủng VSV LSN6.1 chủng VSV LSN 10.1 sau 12 ngày phát triển thang nhiệt độ 300C Qua Bảng 4.6, Hình 4.12 Hình 4.13 sau 12 ngày nuôi cấy chủng VSV thang nhiệt độ khác chủng vi sinh vật có phân hóa sinh trưởng rõ rệt Sau 12 ngày nuôi cấy thang nhiệt độ 00C chủng VSV khơng có khả sinh trưởng 39 Ở hai thang nhiệt 250C 300C thấy sinh trưởng phát triển tốt đường kính hệ sợ lên tới 85.4mm với chủng nấm LSN6.2 thang nhiệt độ 300C Thông qua việc nghiên cứu ảnh hưởng thang nhiệt độ đến sinh trưởng phát triển chủng VSV ta có sở để tăng hiệu việc sử dụng chế phẩm vi sinh vật phân giải xenlulo có hiệu cao 4.3 Tuyển chọn chủng vi sinh vật có khả phân hủy xenlulo 4.3.1 Phương pháp xác định phân giải hoạt tính xenlulo chủng Từ chủng vsv phân lập ta tiếp tục cấy truyền mẫu nấm này, thử nghiệm môi trường CMC kết mức độ phân giải xenlulo chủng nấm thể Bảng 4.7 Hình 4.14 Hình 4.15 Bảng 4.7: Mức độ phân giải xenlulo chủng vsv Đơn vị (mm) STT Ký hiệu chủng LSN7.1 LSN6.2 LSN5.2 LSN10.1 LSN6.1 HBN3.1 SSN 5.4 LSN9.4 HBN1.1 Chú thích: _ + ++ +++ ++++ Đường kính vòng phân giải tính theo thời gian (mm) 12 ngày 0 13.4 40.9 68.8 17.6 31.4 16.3 45.4 76.1 11.6 18.5 4.3 10.2 17.7 0 17 36 70,5 0 Khơng có khả phân giải xenlulo Phân giải xenlulo yếu Phân giải xenlulo trung binh Phân giải xenluo mạnh Phân giải xenlulo mạnh Đánh giá _ +++ ++ ++++ + + _ ++++ _ 40 Khơng có khả phân giải xenlulo 22.3% 33% Phân giải xenlulo yếu Phân giải xenlulo trung binh 11.1% Phân giải xenluo mạnh 11.1% Phân giải xenlulo mạnh 22.3% Hình 4.14: Biểu đồ mức độ phân giải xenlulo chủng vsv Không phân giải Phân giải trung bình Phân giải yếu Phân giải mạnh Phân giải mạnh Hình 4.15: Độ phân giải xenlulo từ không đến mạnh 41 Qua kết Bảng 4.7, Hình 4.14 Hình 4.15 nhận thấy hoạt tính phân giải xenlulo chủng VSV hồn tồn khác Chủng LSN10.1 có hoạt tính phân giải xenlulo tốt với đường kính vòng phân giải lên đến 76.1mm sau 12 ngày thí nghiệm Các chủng LSN7.1, SSN 5.4, HBN1.1 khơng có khả phân giải xenlulo Qua việc xác định hoạt tính phân giải xenlulo chủng vi sinh vật ta tuyển chọ chủng VSV có khả phân giải xenlulo cao nhằm đưa vào sản xuất chế phẩm sinh học phân giải xenlulo có hiệu cao 4.3.2 Thí nghiệm chủng mạnh vật liệu cháy (trong bình thí nghiệm) Từ chủng có khả phân giải xenlulo mạnh LSN6.2, LSN 10.1, LSN9.4 ta tiếp tục thí nghiệp chủng nấm vật liệu cháy, chủng nấm nhân sinh khối môi trường PD lỏng với tốc độ lắc 180 vòng/phút Kết đánh giá phân hủy xenlulo chủng VSV mạnh sau 60 ngày thí nghiệm thể qua Bảng 4.8 Hình 4.16 Biểu 4.8: Kết đánh giá phân hủy xenlulo chủng VSV Đơn vị (%) Tên chủng mo mt X% LSN6.2 9.5 8.4 11.5 LSN10.1 9.5 8.0 15.8 LSN9.4 9.5 8.2 13.7 42 Hình 4.16: Các chủng vi sinh vật có hoạt tính phân giải xenlulo cao đưa vào thí nghiệm Qua kết Bảng 4.8 Hình 4.16 ta thấy khả phân giải xenlulo chủng VSV tốt Chủng LSN 10.1 có độ giảm trọng lượng mẫu thí nghiệm lớn 15.8% Chủng LSN6.2 có độ giảm trọng lượng mẫu thí nghiệm nhỏ 11.5% Qua kết thí nghiệm đánh giá phân hủy xenlulo chủng VSV bình thí nghiệm ta thu kết khả quan tiền đề để tiến hành thí nghiệm thực tế ngồi rừng Thông 43 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận - Các chủng VSV phát triển nhiều thang độ ẩm khác từ 60% đến 100% độ ẩm thích hợp cho chủng VSV từ 70% đến 90% - Thang nhiệt độ phù hợp cho chủng VSV phát triển tốt 300C đến 350C - Tìm chủng có hoạt tính phân giải xenlulo cao là LSN6.2, LSN 10.1, LSN9.4 - Bước đầu thí nghiệm thành cơng phân hủy xenlulo chủng VSV có hoạt tính mạnh quy mơ bình thí nghiệm 5.2 Tồn - Do thời gian thực tập ngắn nên thí nghiệm phân giải xenlulo phòng thí nghiệm, chưa thực ngồi trường, tán rừng - Chưa có điều kiện giám định để biết tên chủng nấm có khả phân giải xenlulo 5.3 Kiến nghị Những kết nghiên cứu luận án cho thấy tiềm ứng dụng VSV phân giải xenlulo lớn, cần tiếp tục nghiên cứu để nhận biết VSV có khả phân hủy xenlulo mạnh qua trực tiếp nuôi cấy chủng VSV tán rừng góp phần phân hủy nhanh cành rơi rụng, tạo chất hữu cho đất làm giảm phần khả cháy rừng Cần tiếp tục thử nghiệm chủng nấm với vật liệu cháy để tìm chủng phân hủy cao phục vụ cho nghiên cứu 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO I TIẾNG VIỆT Lý Kim Bảng (2001), Xử lý tàn dư thực vật chế phẩm vi sinh vật tự tạo, Báo cáo tổng kết nghiên cứu, NXB Hà Nội Lý Kim Bảng, Tăng Thị Chính, Nguyễn Thị Phương Chi, Lê Gia Huy (2003), “Hiệu sử dụng chế phẩm Micromix xử lý rác thải phương pháp ủ hiếu khí nhà máy chế biến phế thải Việt Trì, Phú Thọ”, Những vấn đề NCCB khoa học sống (Kỷ yếu Hội nghị NCCB lần thứ 2-7/2003) Chu Thị Thanh Bình, Nguyên Lân Dũng, Lương Thùy Dương (2002), “Phân lập, tuyển chọn nghiên cứu chủng nấm men có khả phân giả cellulose Tăng Thị Chính, Lý Kim Bảng, Lê Gia Hy (1999), Nghiên cứu sản xuất cellulase số chủng vi sinh vật ưa nhiệt phân lập từ bể ủ rác thải Báo cáo khoa học, Hội nghị công nghệ sinh học toàn quốc, NXB khoa học kỹ thuật, Hà Nội Tăng Thị Chính (2007), Nghiên cứu sản xuất chế phẩm vi sinh vật ứng dụng để xử lý ô nhiễm môi trường, Viện Công nghệ môi trường, Viện KH CN Việt Nam Nguyễn Danh (2009), “Phân lập tuyển chọn số chủng xạ khuẩn có khả phân hủy xenlulo cao từ vỏ cà phê Gia Lai”, Tạp chí NN & PTNT số 138 năm 2009 Nguyễn lân Dũng (1978), Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật học, Tập 1, Tập 2, Tập 3, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật nông nghiệp Lê Thị Việt Hà Lê Văn Tri (2006), “Tuyển chọn hình thành tổ hợp vi sinh vật phân giải phế thải phụ phẩm mía đường đạt hiệu cao”, Tạp chí Nơng nghiệp & PTNT số 21 kỳ tháng năm 2006, Tr 43 - 47 45 Phan Bá Học (2007), Ứng dụng chế phẩm vi sinh vật xử lý tàn dư thực vật đồng ruộng thành phân hữu chỗ bón cho trồng đất phù sa sông Hồng, Luận văn thạc sĩ Nông Nghiệp 10 Đặng Minh Hằng (1999), Nghiên cứu yếu tố ảnh hưởng đến khả sinh tổng hợp cellulase số chủng vi sinh vật để sử lý rác, Báo cáo khoa học, Hội nghị cơng nghệ sinh học tồn quốc NXB khoa học kỹ thuật, Hà Nội: 333-339 11 Võ Bích Hạnh cộng (2005), “Nghiên cứu sản xuất chế phẩm BIO-F sản xuất phân bón hữu vi sinh từ rác thải sinh hoạt” Báo cáo khoa học đề tài, Viện Sinh học Nhiệt đới 12 Bùi Huy Hiền cộng (2011), Báo cáo tổng kết nghiệm thu đề tài “Nghiên cứu chế phẩm vi sinh sử lý nhanh phế thải chăn nuôi”, thuộc chương trình Cơng nghệ sinh học-Bộ NN PTNT 13 Hồng Quốc Khánh, Ngô Đức Duy, Nguyễn Duy Long (2003), Khả sinh tổng hợp đặc điểm cellulase Aspergillus niger RNNL-363, Báo cáo khoa học, Hội nghị công nghệ sinh học toàn quốc, NXB khoa học kỹ thuật 14 Trịnh Đình Khả, Quyền Đinh Thi, Nguyễn Sữ Lê Thanh (2007), “Tuyển chọn nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố môi trường lên khả sinh tổng hợp cellulasecủa chủng Penicilium sp DTQ-HK1”, Tạp trí cơng nghệ sinh học 15 Phạm Thị Ngọc Lan, Phạm Thị Hòa, Lý Kim Bảng (1999), Tuyển chọn số chủng xạ khuẩn có khả phân giải xenlulo từ mùn rác, Báo cáo khoa học, Hội nghị cơng nghệ sinh học tồn quốc, NXB kỹ thuật, Hà Nội 16 Nguyễn Đức Lượng, Đặng Vũ Bích Hạnh (1999), Khả sinh tổng hợp cellulase Actinomyces grise Báo cáo khoa học, hội ghị cơng nghệ sinh học tồn quốc, NXB kỹ thuật 46 17 Lưu Hồng Mẫn (2010), Ứng dụng chế phẩm sinh học để sản xuất phân rơm rạ hữu chỗ cải thiện độ phì đất canh tác lúa, Hội thảo, Ứng dụng biện pháp sinh học lĩnh vực trồng trọt theo hướng phát triển 18 Nguyễn Thị Thúy Nga cộng (2015), “Phân lập, tuyển chọn vi khuẩn phân giải xenlulo sản xuất phân hữu sinh học”, Tạp chí Khoa học Lâm nghiệp, Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt Nam số 3/2015 19 Nguyễn Thị Thúy Nga (2010), “Phân lập, tuyển chọn vi sinh vật có khả phân giải xenlulo hiệu lực cao, phù hợp với điều kiện đất bạc màu đặc điểm sinh học chúng để sản xuất phân vi sinh cho lâm nghiệp”, Tạp chí khoa học lâm nghiệp, Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt Nam số 4/2010 20 Lê Văn Nhương, Nguyễn Lan Hương (2001), Công nghệ xử lý số phế thải nông sản chủ yếu (vỏ mía, vỏ thải cà phê, rác thải nơng nghiệp) thành phân bón hữu sinh học, Báo cáo tổng kết đề tài cấp nhà nước KHCN.02-B04, 1999-2001 21 Võ Văn Phước Quệ Cao Ngọc Điệp (2011), “Phân lập nhận diện vi khuẩn phân giải cellulose”, Tạp chí khoa học - Đại học Cần Thơ, 18a: 177-184 22 Trần Thị Ngọc Sơn, Lưu Hồng Mẫn, Vũ Tiến Khang, Nguyễn Ngọc Hà, Nguyễn Thị Hồng Hân, Trần Thị Anh Thư Nguyễn Ngọc Nam (2010), Đánh giá hiệu xử lý rơm rạ nấm Trichoderma sp địa Đồng Bằng Sông Cửu Long 23 Phạm Văn Tý, Nguyễn Lân Dũng (1988), Nghiên cứu vi sinh vật phân hủy xenlulo dùng công nghiệp nông nghiệp, Đề tài khối SEV OKKFT - G8 - 1.3 với Hungary (chủ trì phía Việt Nam) 24 Nguyễn Xn Thành, Đinh Hồng Duyên, Vũ Thị Hoàn, Nguyễn Thị Minh (2004), Xử lý giác thải hữu sinh hoạt khu dân cư Đại học Nông 47 Nghiệp I, Báo cáo tổng kết đề tài Nghị định thư Việt Nam - Ý - Áo năm 2003- 2004 25.Phạm Quang Thu, Nguyễn Thị Thuý Nga (2009), Phân lập, tuyển chọn vi sinhvật phân giải lân có hiệu lực cao đặc điểm sinh học chúng để sản xuấtphân vi sinh cho lâm nghiệp Tạp chí Khoa học Lâm nghiệp số 3/2009 Tr 1044 - 1045 26.Lê Văn Tản (2008), “Những vấn đề môi trường xúc nông nghiệp nông thôn-nguyên nhân, định hướng biện pháp khắc phục”, Tạp chí Nơng nghiệp phát triển nơng thơn, Số đặc sản môi trường nông nghiệp, nông thôn 10/2008, tr-5-10 27 Nguyễn Quang Thạch CTV (2001), Báo cáo nghiệm thu đề tài độc lập cấp nhà nước “Nghiên cứu thử nghiệm tiếp thu công nghệ vi sinh vật hữu hiệu (EM) nông nghiệp vệ sinh môi trường”, Trung tâm thông tin tư liệu khoa học công nghệ, Bộ Khoa học Công nghệ 28 Phạm Văn Toản, Trần Huy Lập, Nguyễn Kim Vũ (2004), Cơng nghệ sinh học phân bón, Chương trình kỹ thuật kinh tế Công nghệ sinh học, Viện khoa học kỹ thuật nông nghiệp Vệt Nam 29 Phạm Quang Thu Nguyễn Thị Thuý Nga (2007), Phân lập tuyển chọn vikhuẩn nội sinh để phòng trừ nấm Cryptosporiopsis eucalypti Sankaran & Sutton gây bệnh cháy bạch đàn, Thông tin Khoa học kỹ thuật Lâm nghiệp số 4/2007 30 Phạm Văn Toản, Trần Huy Lập, Nguyễn Kim Vũ (2004), Cơng nghệ sinh học phân bón, Chương trình kỹ thuật kinh tế Công nghệ sinh học, Viện khoa học kỹ thuật nông nghiệp Vệt Nam 31 Lê Văn Tản (2008), “Những vấn đề môi trường búc xúc nông nghiệp nông thôn-nguyên nhân, định hướng biện pháp khắc phục”, Tạp chí Nơng nghiệp phát triển nơng thôn, Số đặc sản môi trường nông nghiệp, nông thôn 10/2008, tr-5-10 48 32 Nguyễn Quang Thạch CTV (2001), Báo cáo nghiệm thu đề tài độc lập cấp nhà nước “Nghiên cứu thử nghiệm tiếp thu công nghệ vi sinh vật hữu hiệu (EM) nông nghiệp vệ sinh môi trường”, Trung tâm thông tin tư liệu khoa học công nghệ, Bộ Khoa học Công nghệ 33 Bùi Huy Hiền cộng (2011), Báo cáo tổng kết nghiệm thu đề tài “Nghiên cứu chế phẩm vi sinh sử lý nhanh phế thải chăn ni”, thuộc chương trình Cơng nghệ sinh học-Bộ NN PTNT II TIÊNG ANH 34 Bayer, E.A., et al (2004) The cellulosomes: multienzyme machines for degradation of plant cell wall polysaccharides Annu Rev Microbiol 58, 521-554 35 Bashir Ahmad, Sahar Nigar, S Sadaf Ali Shah, Shumaila Bashir, Javid Ali, Saeeda Yousaf an Javid Abbas Bangash (2013), “Isolation and Identification of Xenlulo Degrading Bacteria from Municipal Waste and their Scereening for potenital Antimicrobitial Activity”, World applied sciences Journal 27 (11): 1420-1426, 2013 36 Cellulosome System http://www.weizmann.ac.il/Biological_Chemistry/scientist/Bayer/cellul osome_system 37 Cellulose http://www.chemwiki.ucdavis.edu 39 Gaur A.C (1987), “Recycling of organic waste by improved techniques of composting and other methods”, Resource and Conservation 13, pp 154-174 40 His-jien Chen, Han-Ja Chang, Chahhao Fan, Wen-Hsin Chen, Meng (2011) “Screening, biotransformation isolation bacteria and from charcaterization specific soils”, of xenlulo International Conference on Environment and Industrial Innovation IPCBEE vol.12 (2011) IACSIT press, Singapore 49 41 Hungate R.E (1946), “Studies on xenlulo fermentation, II An anaerobic xenlulo-decomposing Actimycetes, Micromonospora propinici n.ssp.” Journal of Bacteriolgy.51, pp.51-56 42 Hesham M.Abulla (2007), “Enhancement of Rice Straw Composting by Lignocellulolytic Actimomycete Strains”, International Journal of Adriculture & Biology (1), pp 106-109 43 Huang, S., et al (2012) Isolation and identification of cellulolytic bacteria from the gut of Holotrichia parallela larvae (Coleoptera: Scarabaeidae) International journal of molecular sciences 13, 2563-2577 44 Jeris J.S., Regan RW (1973), “Controlling envỉonmental parameter optimum composting I Experimental procedures and temperature”, Compost Science 14,pp 10-15 45 Jeffrey, L (2008) Isolation, characterization and identification of actinomycetes from agriculturesoils at Semongok, Sarawak African Journal of biotechnology 46 Kluepfel, D., et al (1986) Characterization of cellulase and xylanase activities of Streptomyces lividans Applied microbiology and biotechnology 24, 230-234 47 K.M.D Gunathilakel, R.R Ratnayake, S.A, Kulasooriyal and D.N Karunaratne (2013), “Evaluation of xenlulo degrading efficency of some fungi and bacteria and their biofilms” J.Natn.Sci.Foundation Sri Lanka 2013 41(2): 155-163 48 Kluepfel, D., et al (1986) Characterization of cellulase and xylanase activities of Streptomyces lividans Applied microbiology and biotechnology 24, 230-234 49 Lamot E.L and Voets J.P (1978), “Microbial bio - degradation of cellophane”, Zeitschrift fur allgemeine.18, pp.183-188 50 50 Lo, C., et al (2002) Actinomycetes isolated from soil samples from the Crocker Range Sabah ASEANReview on Biodiversity and Environmental Conservation 51 Manuel Veiga, Azucena Esparis, Jaime, Fabregas (1983), “Isolation of Cellulolytic Actinomycetes from Marine Sediments”, Applied and Environmental Microbiology 46(1), pp 286-287 52 Mandels M., Sternberg D., Andreotti R.E (1975), "Growth and cellulase production by Trichoderma", In Symposium on Enzymatic Hydrolysis of Cellulose, ed Bailey M., Enari T & Linko M, pp 81-110, Finland Technical Research Centre 53 Mawadza C, Hatti Kaul R, Zvau R, Mattiasson B (2000), “Purification and characterization of cellulase produced by two Bacillus strins” Journal of Biotechnology, Vol.83,p,177-187 54 Ogawa K, Toyma D, Fujii N (1991), “Microcrystalline xenlulo hydrolyzing cellulase from Trichoderma reseii CDU-II” Jounal of General and Applie Microbiology, Vol.37, p.249-259 55 Reddy BR, Narasimha G Babu GVAK (1998) “Cellulolytic activity of fungal cultures”, Indian Jourmal of science and Research,.5: 617-620 56 Rastogi, G., et al (2009) Isolation and characterization of cellulosedegrading bacteria from the deep subsurface of the Homestake gold mine, Lead, South Dakota, USA Journal of industrial microbiology &biotechnology 36, 585-598 57 Schurz, J., et al (1985) Reaction-mechanism and structural-changes at enzymatic degradation of xenlulo by Trichoderma-reesei-Cellulase Acta Polymerica 36, 76-80 58 Shahriarinour, M., et al (2011) Screening, isolation and selection of cellulolytic fungi from oil palm empty fruit bunch fibre Biotechnology 10, 108-113 51 59 Shewale, J (1982) β-Glucosidase: its role in cellulase synthesis and hydrolysis of cellulose International Journal of Biochemistry 14, 435-443 60 Stutzevberger (1971) “Xenlulo Production by Thermomonospora curvate Isolated from Municipal solid Waste Compost”, Applied Microbiology 22(2), pp 147-152 61 Sivakumaran Sivaramanan (2014), “Isolation of Cellulolytic Fungi and their Degradation on" 62 V Makeshkumar P.U Mahalingam (2011), “Isolation and Characterization of Rapid Xenlulo Degrading Fungal Pathogens from Compost of Agro 63 Wen-Jing Lu, Hong-Tao Wang, Shi-Jian Yang, Zhi-Chao Wang, YongFeng Nie (2005), “Isolation and characterization of mesophilic cullulose-degrading bacteria from flower stalks-vegetable waste cocomposting system”, Journal of General and Applied Microbiology 51, pp 353-360 64 Willke V, Seligy L (1985), “Multiplicity in cellulases of Schizoppullum commune derivation partly from hetterogencity in tramscription and glycosylation” European Journal of Biochemistry, Vol.151, p.89-96 65 Wilson, D.B (2011) Microbial diversity of xenlulo hydrolysis Current opinion in microbiology 14,259-263 66 Yan-Ling Liang, Zheng Zhang, Min Wu, and Jia-Xum Feng (2014), “Isolation, Secreening, and Identification of Cellulolytic Bacteria from Natural Reserves in the Subtropicar Region of China and Optimization of Cellulase Production by Paenibacillus terrae ME27-1”, Hindawi publishing Corporation BioMed Research International Volume 2014, Article ID 512497, 13 pages ...ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM CAM VĂN SẰN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA MỘT SỐ CHỦNG VI SINH VẬT PHÂN GIẢI XENLULO ĐƯỢC PHÂN LẬP TỪ CÁC MẪU ĐẤT DƯỚI TÁN RỪNG THÔNG ĐUÔI NGỰA... nghiên cứu phát triển lợi ích chủng VSV thực đề tài: Nghiên cứu đặc điểm sinh học số chủng vi sinh vật phân giải xenlulo phân lập từ mẫu đất tán rừng thông đuôi ngựa (Pinus massoniana) Tam Đảo,. .. PHAM VI, NỘI DUNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu - Đối tượng nghiên cứu: Thông Đuôi Ngựa; Vi sinh vật phân lập từ mẫu đất tán rừng thông Đuôi Ngựa (Pinus massoniana)