Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 6226:2012 về Chất lượng nước - Phép thử sự ức chế khả năng tiêu thụ oxy của bùn hoạt hóa dùng để oxy hóa các hợp chất cacbon và amoni quy định phương pháp đánh giá ảnh hưởng ức chế của một vật liệu thử lên khả năng tiêu thụ oxy của các vi sinh vật trong bùn hoạt hóa.
TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 6226:2012 ISO 8192:2007 CHẤT LƯỢNG NƯỚC - PHÉP THỬ SỰ ỨC CHẾ KHẢ NĂNG TIÊU THỤ OXY CỦA BÙN HOẠT HÓA DÙNG ĐỂ OXY HÓA CÁC HỢP CHẤT CACBON VÀ AMONI Water quality - Test for inhibition of oxygen consumption by activated sludge for carbonaceous and ammonium oxidation Lời nói đầu TCVN 6226:2012 thay TCVN 6226:1996 TCVN 6226:2012 hoàn toàn tương đương với ISO 8192:2007 TCVN 6226:2012 Ban kỹ thuật Tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC 147 Chất lượng nước biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng đề nghị, Bộ Khoa học Công nghệ công bố Lời giới thiệu Phương pháp đưa thông tin để đánh giá độc tính tiềm ẩn chất, hỗn hợp nước thải với bùn hoạt hóa giúp ích việc ước tính ảnh hưởng chất thử lên quần thể vi khuẩn hỗn hợp môi trường nước, đặc biệt hệ thống xử lý sinh học ưa khí Sự nhạy cảm tiêu thụ oxy số quần thể nhỏ cộng thể vi khuẩn với ức chế gây số loại hóa chất, số loại nước thải không giống hiệu ứng chọn lọc ảnh hưởng tới kết phép thử Có hai nhóm vi sinh vật chủ yếu tiêu thụ oxy tổng bùn hoạt hóa: sinh vật dị dưỡng chủ yếu làm phá vỡ chuỗi cacbon (sự oxy hóa cacbon) sinh vật nitrat hóa tự dưỡng làm oxi hóa amoni thành nitrat (sự nitrat hóa) Tiêu chuẩn sử dụng để đánh giá độc tính chất tới tiêu thụ oxy tổng (tức kết hợp oxy hóa cacbon nitrat hóa) hoặc, thêm cách cẩn trọng chất ức chế trình nitrat hóa đặc trưng, để đánh giá độc tính chất tới thành phần chứa cacbon thành phần nitrat hóa riêng rẽ Để xác định ức chế nitrat hóa theo phương pháp này, cần bùn hoạt hóa có q trình nitrat hóa vừa đủ Chỉ thị nitrat hóa điều tra thêm áp dụng ISO 9509 [4] Người sử dụng phương pháp phải nhận thức vấn đề đặc thù phụ thuộc vào quy định điều kiện bổ sung bên lề Tác dụng ức chế chất thử sử dụng hai thành phần sử dụng chủ yếu hai Sự nitrat hóa q trình thường dễ bị ức chế chọn lọc CHẤT LƯỢNG NƯỚC - PHÉP THỬ SỰ ỨC CHẾ KHẢ NĂNG TIÊU THỤ OXY CỦA BÙN HOẠT HÓA DÙNG ĐỂ OXY HÓA CÁC HỢP CHẤT CACBON VÀ AMONI Water quality - Test for inhibition of oxygen consumption by activated sludge for carbonaceous and ammonium oxidation CẢNH BÁO - Người sử dụng tiêu chuẩn cần phải thành thạo với thực hành phòng thí nghiệm thơng thường Tiêu chuẩn khơng đề cập tới vấn đề an toàn liên quan đến người sử dụng Trách nhiệm người sử dụng phải xác lập thực hành an toàn, bảo đảm sức khỏe phù hợp với quy định quốc gia QUAN TRỌNG - Chỉ nhân viên qua đào tạo thích hợp phép tiến hành phép thử theo tiêu chuẩn Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn quy định phương pháp đánh giá ảnh hưởng ức chế vật liệu thử lên khả tiêu thụ oxy vi sinh vật bùn hoạt hóa Phương pháp nhằm giới thiệu điều kiện trạm xử lý nước thải phương pháp sinh học Phương pháp cung cấp thông tin tác dụng ức chế kích thích chất thử tới vi sinh vật bùn hoạt hóa sau thời gian tiếp xúc ngắn (thường 30 tới 180 nữa) Phương pháp áp dụng để thử nước, nước thải, hóa chất tinh khiết hợp chất hỗn hợp Liên quan đến hóa chất, phương pháp ưu tiên cho chất tan điều kiện thử Cần đặc biệt cẩn thận với chất hòa tan nước, chất có khả bay cao vật liệu tiêu thụ phi sinh vật tạo oxy Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn Đối với tài liệu viện dẫn ghi năm cơng bố áp dụng phiên nêu Đối với tài liệu viện dẫn không ghi năm cơng bố áp dụng phiên bao gồm sửa đổi, bổ sung (nếu có) TCVN 4851 (ISO 3696), Nước dùng để phân tích phòng thí nghiệm - Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử Thuật ngữ định nghĩa Trong tiêu chuẩn áp dụng thuật ngữ sau: 3.1 Bùn hoạt hóa (activated sludge) Sinh khối tích tụ (kết tủa) tạo xử lý nước thải phát triển vi khuẩn vi sinh vật khác có mặt oxy [TCVN 8184-1:2009 (ISO 6107-1:2004)[3], định nghĩa 2] 3.2 Nồng độ chất rắn lơ lửng bùn hoạt hóa (concentration of suspended solids of an activated sludge) Lượng chất rắn thu cách lọc ly tâm thể tích bùn hoạt hóa biết sấy khô khoảng 105 °C tới khối lượng không đổi [TCVN 6917:2001 (ISO 9888:1999)[6], định nghĩa 3.4] 3.3 Tốc độ tiêu thụ oxy (oxygen cunsumption rate) Lượng oxy bị tiêu thụ vi sinh vật bùn hoạt hóa đơn vị thể tích bùn, tính đơn vị thời gian CHÚ THÍCH: Đại lượng tính miligam lít [mg/(L.h)] 3.4 Tốc độ tiêu thụ oxy đặc trưng (specific oxygen consumption rate) Lượng oxy bị tiêu thụ vi sinh vật bùn hoạt hóa đơn vị khối lượng bùn khơ (chất rắn lơ lửng), tính đơn vị thời gian CHÚ THÍCH: Đại lượng tính miligam gam [mg/(g.h)] 3.5 Sự ức chế khả tiêu thụ oxy (inhibition of oxygen consumption) Sự giảm tốc độ tiêu thụ oxy bùn hoạt hóa với (a) chất phân hủy(s) có mặt chất thử, so sánh với hỗn hợp tương tự mà chất thử CHÚ THÍCH 1: Đại lượng tính phần trăm CHÚ THÍCH 2: Trong trường hợp khơng có chất nền, số hóa chất (ví dụ tách liên kết q trình phosphoryl hóa) làm tăng tiêu thụ oxy 3.6 Khoảng độc (toxic range) Khoảng nồng độ chất thử gây ức chế từ % đến 100 % 3.7 EC50 Nồng độ hiệu dụng chất thử gây ức chế tiêu thụ oxy tính nội suy 50 % khả tiêu thụ oxy so với mẫu trắng kiểm tra 3.8 Sự nitrat hóa (nitrification) Sự oxy hóa hợp chất amoni vi khuẩn CHÚ THÍCH: Thơng thường, sản phẩm trung gian oxy hóa nitrit sản phẩm cuối nitrat [TCVN 8184-1:2009 (ISO 6107-1:2004)[3], định nghĩa 49] Nguyên tắc Khi có mặt chất dễ phân hủy sinh học, bùn hoạt hóa tiêu thụ oxy tốc độ cao khơng có chất dễ phân hủy sinh học, tùy thuộc vào nồng độ vi sinh vật nhiều yếu tố khác Việc thêm chất thử nồng độ gây độc dẫn đến làm giảm tốc độ tiêu thụ oxy Sử dụng điện cực oxy để đo tốc độ Phần trăm ức chế tiêu thụ oxy đánh giá cách so sánh tốc độ với tốc độ hỗn hợp đối chứng không chứa chất thử Kiểm tra độ nhạy bùn hoạt hóa chất đối chứng phù hợp Ức chế tiêu thụ oxy gây tất vi sinh vật bùn, vi sinh vật dị dưỡng oxi hóa muối amoni vi sinh vật tạo đạm thể riêng rẽ phép đo tốc độ tiêu thụ có khơng có N-allylthioure (ATU), chất ức chế đặc trưng cho oxi hóa amoni thành nitrit vi khuẩn nitrat hóa bước đầu Sự khác hai giá trị nitrat hóa vi sinh vật dị dưỡng có allylthiourea Có thể phát tiêu thụ oxy trình phi sinh vật cách xác định tốc độ hỗn hợp chất thử, môi trường tổng hợp nước, khơng có bùn hoạt hóa Trong trường hợp định (hiếm gặp), đo tiêu thụ oxy phi sinh vật chất thử có tính khử mạnh gây Trong trường hợp vậy, cần thử phi sinh vật để phân biệt tiêu thụ oxy chất thử tiêu thụ oxy hô hấp vi khuẩn Phép đối chứng tiêu thụ oxy phi sinh vật chuẩn bị cách khơng cho vi sinh vật nuôi cấy vào hỗn hợp thử, gây độc vi sinh vật nuôi cấy dùng dung dịch thủy ngân (II) clorua Thuốc thử, môi trường vi sinh vật nuôi cấy Chỉ sử dụng thuốc thử chứng nhận cấp phân tích 5.1 Nước, đạt loại qui định TCVN 4851 (ISO 3696), nước cất hòa tan nước loại ion có chứa cacbon hữu hòa tan (DOC) nhỏ mg/L 5.2 Chất ức chế nitrat hóa đặc trưng, N-allylthioure (ATU) Hòa tan 2,50 g N-allylthioure (ATU) vào 000 mL nước (5.1) Thêm 2,32 mL dung dịch gốc vào 500 mL mẫu cho nồng độ cuối 11,6 mg/L (10-4 mol/L) 5.3 Dung dịch thủy ngân (II) clorua Nếu cần (xem Điều 4), chuẩn bị dung dịch có 0,10 g thủy ngân (II) clorua (HgCI2) pha 10 mL nước (5.1) CẢNH BÁO - Áp dụng biện pháp đề phòng an tồn nghiêm ngặt biện pháp thải bỏ chất thải đặc biệt dùng muối thủy ngân phòng thí nghiệm Khơng khuyến khích việc thử phi sinh học dùng thủy ngân (II) clorua 5.4 Chất chống bọt, khơng có silicon 5.5 Chất đối chứng, dung dịch gốc Chuẩn bị dung dịch chứa 1,00 g 3,5-diclophenol (3,5-DCP) pha 1000 mL nước (5.1) Sử dụng nước ấm và/hoặc máy siêu âm để gia tăng hòa tan sau dung dịch nguội tới nhiệt độ phòng, điều chỉnh thể tích dung dịch đạt tới 1000 mL Có thể sử dụng N-metylanilin thay chất đối chứng, đặc biệt ức chế nitrat hóa Khi sử dụng chất này, chuẩn bị dung dịch chứa 1,00 g N-metylanilin (MNA) pha 1000 mL nước (5.1) 5.6 Môi trường thử, nước cống tổng hợp (gấp 100 lần nước cống môi trường OECD) Pepton 16 g Cao thịt 11 g Ure [CO(NH2)2] 3g Natri clorua (NaCl) 0,7 g Canxi clorua ngậm hai phân tử nước (CaCl2.2H2O) 0,4 g Magie sunphat ngậm bảy phân tử nước (MgSO4.7H2O) 0,2 g Kali anhydrit monohydrophosphat (K2HPO4) 2,8 g Nước (5.1) 1L pH môi trường tổng hợp phải đạt 7,5 ± 0,5 Nếu không sử dụng môi trường tổng hợp chuẩn bị, bảo quản mơi trường tổng hợp tối °C đến °C, không tuần 5.7 Chất thử, dung dịch gốc Chất thử hóa chất tinh khiết, hỗn hợp hóa chất, sản phẩm hóa học, nước thải Chuẩn bị dung dịch gốc chất thử nước (5.1) nồng độ thích hợp, ví dụ g/L 10 g/L Có thể dùng nước thải mà khơng pha lỗng Với chất khơng tan, chuẩn bị dung dịch huyền phù dung dịch phân tán, thêm trực tiếp chất thử vào bình thử Cẩn thận để đảm bảo đồng tốt Đối với xử lý chất hòa tan, xem ví dụ TCVN 6918 (ISO 10634) [7] 5.8 Vi sinh vật nuôi cấy Nói chung, bùn hoạt hóa phải lấy từ lối bể sục khí (nơi mà nồng độ chất thấp nhất) trạm xử lý nước thải, chủ yếu xử lý nước thải sinh hoạt, hoạt động hiệu Tùy theo mục đích phép thử, sử dụng loại bùn hoạt hóa kể bùn tạo phòng thí nghiệm bùn tạo nước thải cơng nghiệp có nồng độ chất rắn lơ lửng phù hợp, ví dụ từ g/L đến g/L Tuy nhiên, bùn hoạt hóa từ trạm xử lý khác có đặc tính độ nhạy khác Thiết bị, dụng cụ Các thiết bị dụng cụ phòng thí nghiệm thơng thường, dụng cụ sau (xem Phụ lục A) 6.1 Bình thử: nên sử dụng bình nhu cầu oxy sinh hóa (BOD) 250 mL đến 300 mL bình Erlenmeyer có nắp (xem Hình A.1) Hoặc sử dụng bình thử lớn (xem Hình A.2) Khi sử dụng bình BOD để đo oxy cần chuẩn bị chỉnh lưu thích hợp để gắn điện cực oxy với cổ bình thử (xem Hình A.1) Để tránh bị chất lỏng tràn đưa điện cực oxy vào, nên cắm trước phễu ống thủy tinh qua, sử dụng bình có miệng loe 6.2 Thiết bị đo nồng độ oxy: bao gồm điện cực oxy thích hợp, ngăn chứa mẫu ghi (xem Hình A.2) 6.3 Khuấy từ, bọc vật liệu trơ 6.4 Thiết bị sục khí Nếu cần cho khí nén qua màng lọc thích hợp để loại bỏ bụi dầu, sau qua bình chứa nước để làm ẩm khơng khí Sục khí bình thử pipet Pasteur, thiết bị sục khí khác mà khơng hấp phụ hóa chất 6.5 pH-met 6.6 Máy li tâm, loại thơng thường, có khả 10 000 m/s2 6.7 Thiết bị dụng cụ dùng cho nuôi cấy bùn hoạt hóa nitrat hóa (xem Phụ lục B) Mơi trường thử Tiến hành phép thử nhiệt độ khoảng (22 ± 2) °C khí khơng có bụi độc Cách tiến hành 8.1 Khái qt Tồn quy trình thử nêu Phụ lục C Quy trình áp dụng cho bùn nitrat hóa khác với quy trình áp dụng cho bùn khơng nitrat hóa Vì vậy, nên kiểm tra bùn hoạt hóa hoạt tính nitrat hóa bùn (xem Phụ lục C) Chỉ sử dụng bùn nitrat hóa cần để xác định ảnh hưởng chất thử lên nitrat hóa Khơng u cầu sử dụng bùn nitrat hóa xác định hô hấp dị dưỡng Để kiểm tra hoạt tính nitrat hóa bùn, áp dụng phép thử nitrat hóa (8.8) tính tốc độ nitrat hóa, cần, theo 9.2 Phép thử sơ để phép thử công cụ tìm kiếm cho phép thử thức sau Xem 8.9 phác thảo phép thử sơ 8.2 Loại bỏ bọt Có thể phát sinh khó khăn xảy tạo bọt trình ủ, đến mức bọt chất rắn bùn bám bọt, đẩy khỏi bình sục khí Đơi khi, tạo bọt đơn giản có nước thải tổng hợp, tạo bọt dự đốn trước chất thử là, có chứa, chất hoạt động bề mặt Sự thất thoát chất rắn bùn từ hỗn hợp thử dẫn tới tốc độ hơ hấp tổng hợp thấp, ngun nhân diễn giải nhầm với kết ức chế Hơn nữa, việc sục khí dung dịch chất hoạt động bề mặt làm đậm đặc chất hoạt động bề mặt lớp bọt, tượng bọt khỏi hệ thống thử làm nồng độ tiếp xúc thấp Nếu tạo bọt, thêm chất chống bọt (5.4) nhũ tương silicon khơng có chất hoạt động bề mặt Nếu gặp khó khăn có nước thải tổng hợp, thay đổi nồng độ nước thải (5.6) chất chống bọt (5.4) tỷ lệ 50 /L Nếu bọt sinh chất thử, cần xác định số lượng chất loại bọt (bằng cách sử dụng pipet Pasteur nhỏ vài giọt) cần thiết để làm giảm bọt với nồng độ chất thử cao nhất, sau xử lý tất bình sục khí riêng lẻ (kể việc xử lý, ví dụ, bình mẫu trắng kiểm tra bình đối chứng bình khơng có bọt) 8.3 Chuẩn bị vi sinh vật nuôi cấy Khi cần, loại bỏ hạt thô cách để lắng thời gian ngắn, ví dụ 15 min, gạn lớp chất rắn mịn phía để sử dụng Cách khác, đồng bùn sử dụng máy trộn vài giây Khi cần, loại bỏ hạt thơ rây thích hợp Có thể rửa bùn sau: li tâm (6.6) bùn khoảng 10 tốc độ khoảng 10 000 m/s2 gạn bỏ lớp chất lỏng bề mặt Tái tạo lại bùn nước vòi khơng có clo, tách bùn tái tạo cách li tâm lại sau lặp lại trình rửa li tâm cần Xác định khối lượng khơ thể tích bùn biết trước Cuối tái tạo lại bùn nước vòi khơng có clo để thu nồng độ bùn hoạt hóa yêu cầu, khoảng g/L chất rắn Sau điều chỉnh nồng độ chất rắn lơ lửng, tiếp tục sục khí bùn hoạt hóa và, có thể, sử dụng bùn hoạt hóa vòng 24 h sau lấy mẫu Nếu sử dụng 24 h sau lấy, bùn hoạt hóa nuôi dưỡng thêm ngày môi trường tổng hợp (xem 5.6) tốc độ không 50 mL lít ngày, thay đổi khơng đáng kể hoạt tính cuối bùn nitrat hóa, hình thức ban đầu, khơng bị Cách khác, thay đổi hoạt tính giảm tối thiểu cách làm lạnh bùn hoạt hóa °C ngày mà không cần nuôi dưỡng [13] Trong tất trường hợp, nguồn gốc, nồng độ bùn, cách xử lý sơ trì bùn hoạt hóa phải ghi báo cáo thử Kiến thức đầy đủ thay đổi xảy bùn trình bảo quản Vì thế, trình bảo quản và/hoặc xử lý bùn phải tất mẫu nghiên cứu điều tra nghiên cứu CẢNH BÁO - Bùn tạo phòng thí nghiệm hoạt tính hơn, có thành phần chất thành phần bùn từ trạm xử lý nước thải 8.4 Hỗn hợp thử Ủ hỗn hợp thử điều kiện sục khí cưỡng Bắt đầu ủ (sục khí) cho đợt chuẩn bị với tiếp xúc ban đầu vi sinh vật nuôi cấy bùn hoạt hóa với thành phần khác hỗn hợp, hoàn thành sau thời gian tiếp xúc qui định tốc độ suy giảm nồng độ oxi hòa tan đo Khả thiết bị sử dụng để đo tốc độ tiêu thụ oxy định cách thức mà theo việc ủ bắt đầu Ví dụ, thiết bị gồm đầu đo đơn, phép đo thực riêng lẻ Trong trường hợp này, chuẩn bị vài hỗn hợp yêu cầu cho phép thử, giữ lại vi sinh vật ni cấy, thêm vi sinh vật vào bình bắt đầu ủ lần lượt, khoảng thời gian định, ví dụ 10 đến 15 Ngồi ra, hệ thống đo bao gồm nhiều đầu đo thuận tiện cho nhiều phép đo đồng thời, trường hợp vi sinh vật ni thêm vào thời điểm cho tương ứng với nhóm bình Nồng độ bùn hoạt hóa hỗn hợp thử thường chứa chất rắn lơ lửng 500 mg/L Đo tiêu thụ oxy sau ủ 30 Nếu cần thông tin sau khoảng thời gian dài hơn, đo sau ủ 180 Tùy thuộc vào mục đích phép thử, thời gian ủ kéo dài thêm, ví dụ tới 27 h Đối với phép thử kéo dài 27 h, thêm môi trường tổng hợp (5.6) sau ủ 24 h (khơng có mơi trường tổng hợp) sục khí thêm khoảng h Sự kéo dài thời gian thử phải ghi rõ báo cáo thử CHÚ THÍCH: Thơng thường, thời gian ủ khoảng 30 đủ Có thể phải ủ thời gian dài hơn, ví dụ, yêu cầu chất hòa tan nước Thời gian ủ kéo dài làm tăng thêm cơng việc Chuẩn bị bình thử (6.1) hỗn hợp, FT, chứa nước pha loãng (5.1), môi trường tổng hợp (5.6) chất thử (5.7), để thu nồng độ biết khác yêu cầu Xem Bảng D.1 Phụ lục D ví dụ thể tích thành phần Điều chỉnh pH tới 7,5 ± 0,5, pha loãng nước thêm vi sinh vật nuôi cấy (5.8) để thu thể tích cuối Nếu thử ảnh hưởng ức chế pH, khơng điều chỉnh pH 8.5 Hỗn hợp đối chứng Thông thường, hầu hết trường hợp, chuẩn bị hỗn hợp, FR, với chất đối chứng thích hợp (5.5) theo cách 8.4 (xem 8.10.2) 8.6 Mẫu trắng kiểm tra Tiến hành thử mẫu trắng, FB, có chứa thể tích bùn hoạt hóa mơi trường tổng hợp với hỗn hợp thử, khơng có chất thử Pha lỗng nước tới thể tích hỗn hợp thử 8.7 Thử phi sinh vật Nếu cần, (ví dụ chất thử biết nghi ngờ có tính khử mạnh), chuẩn bị hỗn hợp, FA, để đo tiêu thụ oxy phi sinh vật Các hỗn hợp chứa lượng chất thử, môi trường tổng hợp nước hỗn hợp thử, không chứa bùn hoạt hóa Nếu cần, thêm chất ức chế thủy ngân clorua để phòng ngừa tiêu thụ oxy sinh học, ví dụ dung dịch HgCI (5.3) 1,0 mL/L 8.8 Thử nitrat hóa Chuẩn bị hỗn hợp, (FB) mẫu trắng kiểm tra (8.6) hỗn hợp thử bổ sung (F N) hỗn hợp chứa ATU 11,6 mg/L (5.2) Sục khí ủ 30 (8.4) sau đo tốc độ tiêu thụ oxy (8.12) tính tốc độ tiêu thụ oxy nitrat hóa (như 9.2) 8.9 Thử sơ Phép thử sơ giúp ước lượng khoảng nồng độ cần thiết phép thử thức để xác định ức chế tiêu thụ oxy Cách khác, khơng có ức chế tiêu thụ oxy phép thử sơ chứng minh phép thử thức khơng cần thiết Tiến hành phép thử (8.10.2, 8.10.3) sử dụng ba nồng độ chất thử (5.7), ví dụ 1,0 mg/L; 10 mg/L; 100 mg/L, mẫu trắng kiểm tra (8.6) và, cần, phép thử phi sinh vật (8.7) có chất thử nồng độ cao (xem ví dụ Phụ lục D, Bảng D.1) Trong trường hợp lý tưởng, nồng độ thấp chất thử sử dụng phải khơng có ảnh hưởng đến tiêu thụ oxy Tính tốc độ tiêu thụ oxy (9.1) tốc độ nitrat hóa (9.2), có liên quan; tính phần trăm ức chế (9.3) CHÚ THÍCH: Tùy thuộc vào mục đích phép thử, có khả xác định độ độc nồng độ giới hạn, ví dụ 100 mg/L, mà nồng độ bao trùm toàn dự đoán thực tế cho chất thử quan tâm Nếu khơng có dấu hiệu ảnh hưởng độc tính đáng kể nồng độ này, khơng cần thực phép thử thêm nồng độ thấp nồng độ cao 8.10 Phép thử thức 8.10.1 Khái quát Có thể xác định ức chế ba tiêu thụ oxy khác nhau, cụ thể là, ức chế tiêu thụ oxy tổng, ức chế tiêu thụ oxy dị dưỡng, ức chế tiêu thụ oxy nitrat hóa Đối với tiêu thụ tổng số, chuẩn bị hỗn hợp phản ứng 8.10.2, đó, hai ức chế tiêu thụ oxy lại, chuẩn bị hỗn hợp 8.10.2 8.10.3 8.10.2 Ức chế hấp thụ oxy tổng Tiến hành phép thử với khoảng nồng độ suy luận từ thử sơ Cần thử với năm nồng độ theo thang logarit kể mẫu trắng kiểm tra Không cần lặp lại thử phi sinh vật thử sơ cho thấy khơng có tiêu thụ oxy trình phi sinh vật Tuy nhiên, xảy tiêu thụ oxy đáng kể, phải thử phi sinh vật cho nồng độ chất thử Sử dụng chất đối chứng [ví dụ 3,5-diclophenol N-metylanilin (5.5)] để kiểm tra độ nhạy bùn Khi có thể, kiểm tra độ nhạy loạt phép thử CHÚ THÍCH: Độ nhạy bùn hoạt hóa biết dao động [13], yếu tố khác nhau, theo cách trì bùn phòng thí nghiệm khoảng thời gian từ lấy mẫu/chuẩn bị mẫu đến sử dụng Vì thế, khơng phép dựa vào tín hiệu phản hồi chất ức chế đối chứng thu trường hợp khác, với bùn hoạt hóa từ nguồn mẻ 8.10.3 Phân biệt ức chế hô hấp dị dưỡng nitrat hóa liên kết với tiêu thụ oxy Sử dụng chất ức chế nitrat hóa đặc trưng, ATU, ảnh hưởng ức chế chất thử lên oxy hóa dị dưỡng đánh giá trực tiếp, và, cách lấy tốc độ tiêu thụ oxy tổng (khơng có ATU) trừ tốc độ tiêu thụ oxy có mặt ATU, tính ảnh hưởng lên tốc độ nitrat hóa (xem Phụ lục C) Chuẩn bị hai dãy hỗn hợp phản ứng 8.10.2, thêm ATU vào dãy hỗn hợp nồng độ cuối 11,6 mg/L (5.2), Khi ức chế hồn tồn nitrat hóa Tốc độ tiêu thụ oxy hỗn hợp dãy lại đo oxy hóa dị dưỡng, chênh lệch giá trị tương ứng hai dãy hỗn hợp cho giá trị tiêu thụ oxy nitrat hóa Nếu khơng biết liệu có xảy nitrat hóa bùn hoạt hóa hay khơng, chuẩn bị bình mẫu trắng kiểm tra (FB, 8.6) hỗn hợp thứ hai (được biểu thị F N) có chứa ATU nồng độ 11,6 mg/L 8.8 Sục khí cốc khoảng 30 sau xác định tốc độ tiêu thụ oxy Sự oxy hóa amoni thị tốc độ bình FB cao đáng kể so với tốc độ đo bình FN CHÚ THÍCH: ATU có nồng độ 11,6 mg/L gây ức chế hồn tồn q trình nitrat hóa qua 180 8.11 Ủ Sục khí tất hỗn hợp (8.4 đến 8.9) oxy gần bão hòa tốt, ý khơng để q bão hòa Cần khuấy để trộn kỹ bình ủ Đảm bảo tất hỗn hợp có nhiệt độ gần (22 ± 2) °C nhiệt độ khơng thay đổi đáng kể q trình thử Chọn vòng 180 tùy ý Đối với chất hòa tan nước, nên để thời gian đủ để xảy tiếp xúc hiệu Thông thường, bùn hoạt hóa hơ hấp nhiều nước thải tổng hợp sau thời gian Nếu không, phải lặp lại phép thử sử dụng môi trường làm giàu với thể tích lớn Cũng kéo dài trình ủ tới 27 h Chi tiết xem Tài liệu viện dẫn [13] 8.12 Đo tốc độ tiêu thụ oxy Sau 30 từ bắt đầu ủ hỗn hợp đầu tiên, chuyển mẫu từ bình sục khí sang bình thử (6.1) đo ngay, tốc độ giảm nồng độ oxy hòa tan, sử dụng đầu đo oxy (6.2) Lặp lại quy trình với mẫu hỗn hợp, sau thời gian sục khí khoảng 30 và, cần, 180 Cần khuấy để đảm bảo tín hiệu phản hồi đầu đo có độ trễ nhỏ tới thay đổi nồng độ oxy, đảm bảo phép đo oxy tái lập thường xun bình đo Ví dụ, đặt mẫu vào ngăn đo hình trụ dung tích khoảng 20 mL phù hợp với điện cực oxy khuấy từ Trong trường hợp này, thể tích hỗn hợp bị giảm xuống khoảng 200 mL (từ 500 mL, Bảng D.1) Trước bắt đầu phép đo mới, làm ngăn nước vòi Ví dụ thiết bị đo, xem Hình A.2 Phụ lục A Cách khác, sử dụng mẫu để làm đầy bình BOD phù hợp với khuấy từ (6.3) Đưa đầu đo oxy có chỉnh lưu ngồi vào cổ bình bắt đầu khuấy từ (ví dụ, xem Hình A.1) Đo liên tục ghi lại nồng độ oxy hòa tan khoảng đến 10 min, nồng độ oxy giảm xuống mg/L Sau lấy điện cực ra, đưa hỗn hợp trở lại bình sục khí tiếp tục sục khí khuấy Lặp lại quy trình với mẫu bình thử cách để thu dãy số đọc thực sau 30 cho tất hỗn hợp thử Nếu cần có thêm thơng tin sau thời gian tiếp xúc kéo dài, lặp lại quy trình sau bắt đầu ủ 180 Tính tốn biểu thị kết 9.1 Tính tốc độ tiêu thụ oxy Tính tốc độ tiêu thụ oxy hỗn hợp thử từ giá trị đo được, ví dụ, từ phần tuyến tính đồ thị nồng độ oxy theo thời gian, giới hạn tính tốn lý tưởng nồng độ oxy từ 2,0 mg/L đến 7,0 mg/L nồng độ cao thấp ảnh hưởng lên tốc độ tiêu thụ oxy hỗn hợp Sự chệch dải nồng độ bên bên giá trị khơng thể tránh cần thiết, ví dụ, hơ hấp bị ngăn cản mạnh xảy chậm, bùn hoạt hóa hơ hấp q nhanh Điều chấp nhận được, phần mở rộng đồ thị tiêu thụ thẳng gradien đồ thị không thay đổi chúng qua nồng độ O2 2,0 mg/L 7,0 mg/L Những đoạn cong đồ thị cho thấy hệ thống đo ổn định tốc độ tiêu thụ thay đổi sử dụng để tính tốn tốc độ hơ hấp Tốc độ tiêu thụ oxy tính theo miligam lít giờ, miligam gam Tốc độ tiêu thụ oxy, R, tính theo miligam lít giờ, tính nội suy từ phần tuyến tính đồ thị giảm oxy ghi lại theo Công thức (1): R = [( - )/ t] x 60 (1) đó: nồng độ oxy thời điểm bắt đầu đoạn đồ thị tuyến tính chọn, tính miligam lít (mg/L); nồng độ oxy thời điểm kết thúc đoạn đồ thị tuyến tính chọn, tính miligam lít (mg/L); t khoảng thời gian hai phép đo, tính phút (min) Tốc độ hô hấp đặc trưng (RS) biểu thị lượng oxy tiêu thụ khối lượng khô bùn theo Công thức (2): RS = R / , ss (2) đó: ss nồng độ chắt rắn lơ lửng hỗn hợp thử, tính gam lít (g/L) Giá trị 20 mg/(g.h) lấy làm chuẩn tính đắn (xem Điều 10) Chỉ số khác R, kết hợp, giải thích sau: S tốc độ đặc trưng T tốc độ hô hấp tổng N tốc độ hơ hấp từ natrat hóa H tốc độ đo hơ hấp dị dưỡng A tốc độ q trình phi sinh vật B tốc độ dựa thử mẫu trắng 9.2 Tính tốc độ q trình nitrat hóa Sự liên kết q trình hơ hấp tổng, hơ hấp nitrat hóa hơ hấp dị dưỡng nêu Công thức (3): RN = RT - RH (3) RN tốc độ tiêu thụ oxy nitrat hóa, tính miligam lít (mg/L.h); RT tốc độ tiêu thụ oxy đo mẫu trắng kiểm tra (khơng có ATU) (F B), tính miligam lít (mg/L.h); RH tốc độ tiêu thụ oxy đo mẫu trắng kiểm tra có thêm ATU (F N), tính miligam lít (mg/L.h) Liên kết hợp lệ giá trị mẫu trắng (RNB, RTB, RHB), thử phi sinh vật (RNA RTA, RHA) mẫu thử với chất thử (RNS, RTS, RHS) (mg/g.h), tính theo Công thức (4) đến Công thức (6): RNS = RN / SS (4) RTS = RT / SS (5) RHS = RH / SS (6) Nếu RN không đáng kể (ví dụ < % RT mẫu trắng kiểm tra) giả định tốc độ tiêu thụ oxy dị dưỡng tiêu thụ tổng, khơng xảy nitrat hóa Do đó, bình thử (8.10.2) cần tiến hành cho phép thử thức Nếu RN đáng kể (ví dụ > % RT mẫu trắng kiểm tra), hai bình thử cần tiến hành (8.10.3) để đo ức chế tổng, tốc độ tiêu thụ oxy dị dưỡng tiêu thụ oxy nitrat hóa Trong cách tương tự, xác định tiêu thụ oxy với nồng độ chất thử khác 9.3 Tính phần trăm ức chế Phần trăm ức chế, I, tiêu thụ oxy tổng nồng độ chất thử tính Cơng thức (7): I = [1 - (RT - RTA) / RTB] x 100% (7) Tương tự, phần trăm ức chế tiêu thụ oxy dị dưỡng, IH, nồng độ tính Cơng thức (8): IH = [1 - (RH - RHA) / RHB] x 100% (8) Cuối cùng, phần trăm ức chế tiêu thụ oxy nitrat hóa, IN, nồng độ tính theo Cơng thức (9) IN = [1 - (RT - RH) / (RTB - RHB] x 100% (9) Vẽ đường biểu diễn phần trăm ức chế khả tiêu thụ oxy theo logarit nồng độ chất thử (xem ví dụ đường cong ức chế Phụ lục E) Đường cong ức chế vẽ cho khoảng thời gian sục khí, ví dụ sau 30 180 Từ đồ thị, tính nội suy nồng độ chất thử gây ức chế 50 % khả tiêu thụ oxy (EC 50) Nếu số liệu phù hợp có sẵn, giới hạn tin cậy 95 % EC 50, độ dốc đường cong giá trị thích hợp để đánh dấu thời điểm bắt đầu (ví dụ EC 10 EC20) kết thúc khoảng ức chế (ví dụ EC80 EC90) tính nội suy Do khả biến đổi thường quan sát kết quả, nên nhiều trường hợp thể kết theo thứ tự độ lớn, ví dụ: EC50 < mg/L EC50 mg/L đến 10 mg/L EC50 10 mg/L đến 100 mg/L EC50 > 100 mg/L 9.4 Biểu thị kết Khi sử dụng bùn nitrat hóa, gây phức tạp đơi độ nhạy vi sinh vật nitrat hóa khác Vì vậy, ví dụ, đường cong hơ hấp có hai pha, giá trị EC 50 thấp đáng kể đường biểu diễn nồng độ-ức chế bị méo Thêm vào đó, xảy thay đổi hoạt động tập hợp nitrat hóa mẫu bùn từ đánh giá sơ điều tra thức tiếp theo, thay đổi làm tăng mâu thuẫn ngẫu nhiên hai dãy kết phép thử Có thể phân loại cản trở cách đo tốc độ tiêu thụ oxy, trường hợp có khơng có chất ức chế nitrat hóa đặc trưng hỗn hợp thử Sự phân loại đưa đến số thuận lợi diễn giải kết Thứ nhất, khẳng định xem có hay khơng có nitrat hóa mẫu bùn Thứ hai, định lượng đóng góp nitrat hóa (nếu có) tới tiêu thụ oxy tổng thể, thứ ba, tạo điều kiện thuận lợi cho việc đánh giá tính độc oxy tự dưỡng oxy dị dưỡng phép thử Kết chất bay diễn giải thận trọng có khả đánh giá khơng mức ảnh hưởng ức chế khó trì nồng độ ban đầu Kết chất khơng hòa tan tương tự xử lý thận trọng định lượng dễ dàng; ngược lại, ảnh hưởng ức chế ước lượng sai nồng độ hợp chất dung dịch thay đổi lý Dựa xem xét trình lắng đọng giai đoạn lắng sơ tồn q trình xử lý phù hợp với chất thử khơng hòa tan ức chế q trình tạo khí bùn kị khí (xem ISO 13641-1[10]) Các kết từ phép thử xem hướng dẫn khả gây độc chất thử, bùn nguồn khác có thành phần nồng độ vi khuẩn khác Hơn nữa, phép thử phòng thí nghiệm khơng thể mơ thực điều kiện mơi trường Ví dụ, khơng tính đến thích ứng dài hạn vi sinh vật bùn hoạt hóa với chất thử, chất mà hấp phụ lên bùn dựa nồng độ độc qua khoảng thời gian dài thời gian cho phép phép thử[14] Với mục đích này, thời gian ủ kéo dài hơn, ví dụ tới 27 h[13]) Những yếu tố nghiên cứu áp dụng phép thử mô thích hợp Tồn phép thử phân hủy sinh học tiêu chuẩn nêu ISO/TR 15462 [11] Thông tin chung thử sinh học, xem ISO 5667-16 10 Tính đắn kết Khi có thể, kiểm tra độ nhạy bùn hoạt hóa chất đối chứng Trong phép thử liên phòng thí nghiệm tiến hành vào tháng bảy năm 2004 sử dụng bùn hoạt hóa lấy từ nước thải sinh hoạt, số liệu độ (Bảng 1) khoảng hợp lý (Bảng 2) thu với chất đối chứng 3,5-diclorophenol N-metylanilin (chỉ dùng cho ức chế nitrat hóa) Bảng - Số liệu độ 3,5-diclorophenol N-metylanilin Thông số Giá trị trung bình Độ lệch chuẩn Khoảng tin cậy 95 % Số phép thử giá trị trung bình thực mg/L mg/L mg/L 3,5-Diclorophenol, thời gian ủ 30 Sự hô hấp tổng EC50 9,8 6,5 7,1 đến 12,6 24 Sự hô hấp dị dưỡng EC50 20,3 8,6 16,3 đến 24,3 20 Sự hô hấp nitrat hóa EC50 4,6 4,7 2,3 đến 6,9 19 3,5-Diclorophenol, thời gian ủ 180 Sự hô hấp tổng EC50 9,3 3,7 7,2 đến 11,3 15 Sự hô hấp dị dưỡng EC50 19,3 7,7 14,1 đến 24,4 11 Sự hô hấp nitrat hóa EC50 4,3 2,6 2,3 đến 6,3 0,44 1,13 đến 1,87 2,24 1,87 đến 5,61 N-metylanilin, thời gian ủ 30 Sự hô hấp nitrat hóa EC50 1,50 N-metylanilin, thời gian ủ 180 Sự hơ hấp nitrat hóa EC50 3,74 Bảng - Khoảng hợp lý dự kiến cho giá trị EC50 Chất đối chứng Khoảng thời gian thử Thông số Khoảng hợp lý dự kiến mg/L 3,5-Dichlorophenol 30 Hô hấp tổng đến 25 3,5-Dichlorophenol 180 Hô hấp tổng đến 25 3,5-Dichlorophenol 30 Hô hấp dị dưỡng đến 40 3,5-Dichlorophenol 180 Hô hấp dị dưỡng đến 40 3,5-Dichlorophenol 30 Hô hấp nitrat hóa 0,1 đến 10 3,5-Dichlorophenol 180 Hơ hấp nitrat hóa 0,1 đến 10 N-metylanilin 30 Hơ hấp nitrat hóa 0,1 đến N-metylanilin 180 Hơ hấp nitrat hóa 0,1 đến Nếu EC50 chất đối chứng không nằm khoảng dự kiến, lặp lại phép thử với bùn hoạt hóa từ nguồn khác Khi tốc độ tiêu thụ oxy tổng mẫu trắng kiểm tra nhỏ 20 mg/g khối lượng khô thu được, kết giả Trong trường hợp giá trị thấp vậy, lặp lại phép thử với bùn hoạt hóa rửa trước sử dụng (8.3) sử dụng bùn từ nguồn khác 11 Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải bao gồm thơng tin sau: a) Viện dẫn tiêu chuẩn TCVN 6226:2012 (ISO 8192:2007); b) Tên, đặc tính chất chất thử; c) Nguồn, nồng độ, cách xử lý sơ trì bùn hoạt hóa; d) Nhiệt độ thử; e) Tên chất đối chứng kết phép đo ức chế với chất (EC 50), bắt đầu ức chế tổng, ức chế dị dưỡng và/hoặc ức chế nitrat hóa; f) Kiểm tra hóa lý tốc độ tiêu thụ oxy phi sinh vật (nếu cần); g) Kết thử, đặc biệt EC50 có thể, số liệu thống kê khác (xem Điều 10), bắt đầu ức chế tổng, ức chế dị dưỡng và/hoặc ức chế nitrat hóa; h) Tất số liệu đo đường cong ức chế (xem Điều 10 Phụ lục E); i) Tất tượng quan sát sai khác so với quy trình chuẩn ảnh hưởng đến kết PHỤ LỤC A (Tham khảo) Ví dụ thiết bị đo CHÚ DẪN Bình thử Điện cực oxy Thiết bị đo oxy Hình A.1 - Thiết bị để đo nồng độ oxy với bình BOD bình thử CHÚ DẪN Bùn hoạt hóa Mơi trường tổng hợp Chất thử Khơng khí Bình trộn Máy khuấy từ Ngăn đo oxy Điện cực oxy Thiết bị đo oxy 10 Bộ ghi Hình A.2 - Sơ đồ thiết bị đo nồng độ oxy PHỤ LỤC B (Tham khảo) Thiết bị, dụng cụ để nuôi cấy bùn hoạt hóa nitrat hóa B.1 Khái qt Vì nitrat hóa trở nên phổ biến trạm xử lý nước thải Quy chế Cộng đồng Châu Âu trở nên có hiệu lực, nên dễ dàng để tìm bùn nitrat hóa Nếu khơng tìm bùn hoạt hóa, Phụ lục mơ tả ví dụ hệ thống (thiết bị Husmann có hai lắng thứ cấp) mà dùng để tạo thành bùn hoạt hóa nitrat hóa phòng thí nghiệm, để cung cấp nguồn vi sinh vật nuôi cấy cho phép thử ức chế Thiết bị Husmann vận hành cách đơn giản, trực tiếp với lắng thứ cấp (bể lắng) B.2 Nguyên tắc Thiết bị nuôi cấy bao gồm Husmann mở rộng Husmann bổ sung (xem TCVN 6826 (ISO 11733)[8]) gồm bể sục khí hai lắng thứ cấp nối với Sức chứa hệ thống phải đủ để cung cấp lượng bùn hoạt hóa vừa đủ để sử dụng cho phép thử ức chế Dòng nước thải định lượng cách bơm trực tiếp vào bể hoạt tính nơi mà Nước thải bùn hoạt hóa khuấy sục khí liên tục Sử dụng ống khuếch tán để tạo bọt khí Hỗn hợp bùn hoạt hóa/nước thải qua để lắng thứ nơi mà phần lớn bùn hoạt hóa tách từ nước thải xử lý Sau tiếp tục tách để lắng thứ hai Bùn hoạt hóa lắng xuống bể lắng hồn lưu lại bể sục khí bùn hồn lưu, cách sử dụng khí nâng bơm nhu động Dòng nước thải thị tốt nên pha lỗng với nước vòi, cần, để hòa tan nồng độ cacbon hữu (DOC) khoảng 50 mg/L bổ sung muối khoáng và, cần bổ sung dung dịch men chiết Cần bổ sung muối khoáng để phòng ngừa thiếu chất dinh dưỡng đơn lẻ Cung cấp NH4Cl đảm bảo đủ nồng độ amoni không đổi cho vi khuẩn nitrat hóa, K2HPO4, cần chất đệm để giữ pH khoảng tối ưu NaHCO3, sử dụng nguồn cacbon vi khuẩn nitrat hóa tự dưỡng, để thiết lập đầy đủ hoạt tính nitrat hóa B.3 u cầu kỹ thuật Thể tích chất lỏng bể sục khí: 20 L; Thể tích chất lỏng lắng sơ cấp: 10 L; Thể tích chất lỏng lắng thứ cấp: L; Tốc độ hoàn lưu bùn: xấp xỉ 99 % tốc độ dòng; Nhiệt độ vận hành: 15 °C đến 25 °C; Ánh sáng: điều kiện xung quanh phòng thí nghiệm B.4 Dung dịch gốc dinh dưỡng NH4Cl 178,3 g K2HPO4 29,7 g NaHCO3 485 g Được hòa tan L nước uống B.5 Dung dịch men chiết (tùy chọn) Men chiết 100 g Được hòa tan L nước uống B.6 Thành phần nước thải Để chuẩn bị lượng nước thải hàng ngày, thêm 500 mL dung dịch gốc dinh dưỡng (B.4) 60 mL dung dịch men chiết (B.5) tùy chọn vào 30 L nước thải đô thị Nếu nồng độ DOC nước thải không xấp xỉ 50 mg/L, pha lỗng với nước uống cho thêm dung dịch men chiết Thêm 24 L ngày vào bể sục khí Thời gian lưu nước trung bình (HRT) khoảng 1,4 ngày hệ thống thử, 0,83 ngày bể sục khí B.7 Tách bỏ bùn thời gian lưu bùn (SRT) Nồng độ bùn hoạt hóa thường khoảng 2,5 g/L chất rắn lơ lửng Bùn nitrat hóa lấy từ hệ thống để thực phép thử ức chế nitrat hóa, ví dụ 10,0 L tuần, tương ứng với lượng hao hụt tổng trung bình khoảng 24 g chất khơ SRT khoảng 25 ngày SRT giảm xuống 10 ngày mà không làm hoạt tính nitrat hóa B.8 Kiểm sốt bảo quản Tính đầy đủ trạm xử lý nước thải phòng thí nghiệm phải kiểm tra thường xun cách đo nồng độ DOC dòng nước thải chưa xử lý nước thải xử lý tính mức độ (%) đào thải DOC Hoạt tính nitrat hóa bùn phải kiểm tra thường xuyên Việc kiểm tra thực đo nồng độ amoni (NH 4+-N) nước thải chưa xử lý nước thải xử lý tính mức độ (%) loại bỏ amoni, phép thử hoạt tính nitrat hóa (xem Điều 9) Bùn hoạt hóa nitrat hóa tạo điều kiện bảo quản tủ lạnh nhiệt độ °C tới tuần mà không làm đáng kể hoạt tính bùn Bùn khơng phải sục khí bình chứa phải nạp đầy tới 75 % dung tích bình Theo cách này, bùn hoạt hóa bảo quản phải thích nghi với nhiệt độ thử ức chế nitrat hóa (1 h đến h) trước sử dụng PHỤ LỤC C (Tham khảo) Miêu tả khái quát quy trình thử Hình C.1 PHỤ LỤC D (Tham khảo) Hỗn hợp cho phép thử sơ Bảng D.1 - Ví dụ hỗn hợp cho phép thử sơ Nồng độ ban đầu thuốc thử Dung dịch gốc chất thử (5.7) g/L Dung dịch gốc môi trường tổng hợp (5.6) Xem 5.6 Bùn hoạt hóa (5.8) g chất rắn lơ lửng lít Bình Thành phần hỗn hợp FT1 FT2 FT3 FB FA Dung dịch gốc chất thử (5.7) (mL) 0,5 50 50 Dung dịch gốc môi trường tổng hợp (5.6) (mL) 16 16 16 16 16 Bùn hoạt hóa (5.8) (mL) 250 250 250 250 233,5 229 184 234 434 500 500 500 500 500 10 100 100 500 500 500 500 Nước (5.1) (mL) Thể tích tổng hỗn hợp (mL) Nồng độ hỗn hợp Chất thử (5.7) (mL) Bùn hoạt hóa (5.8) (mg chất rắn lơ lửng lít) a Thực quy trình chất đối chứng, FR1, FR2 PHỤ LỤC E (Tham khảo) Ví dụ đường cong ức chế CHÚ DẪN X Nồng độ 3,5-diclorophenol (mg/L) Y Ức chế (%) Ức chế hô hấp dị dưỡng Ức chế nitrat hóa Ức chế hơ hấp tổng Hình E.1 - Đường cong ức chế hơ hấp dị dưỡng, nitrat hóa hơ hấp tổng THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] ISO 5667-16, Water quality - Sampling - Part 16: Guidance on biotesting of samples [2] TCVN 7325 (ISO 5814), Chất lượng nước - Xác định oxy hòa tan - Phương pháp đầu đo điện hóa [3] TCVN 8184-1 (ISO 6107-1), Chất lượng nước - Thuật ngữ - Phần [4] ISO 9509, Water quality - Toxicity test for assessing the inhibition of nitrification of activated sludge microorganisms [5] ISO 9887, Water quality - Evaluation of the aerobic biodegradability of organic compounds in an aqueous medium - Semi-continuous activated sludge method (SCAS) [6] TCVN 6917 (ISO 9888), Chất lượng nước - Đánh giá phân hủy sinh học ưa khí cuối hợp chất hữu môi trường nước - Phép thử tĩnh (phương pháp zahn-wellens) [7] TCVN 6918 (ISO 10634), Chất lượng nước - Hướng dẫn chuẩn bị xử lý hợp chất hữu tan nước để đánh giá phân hủy sinh học môi trường nước [8] TCVN 6826 (ISO 11733), Chất lượng nước - Xác định đào thải phân hủy sinh học chất hữu môi trường nước - Phép thử mơ bùn hoạt hóa [9] TCVN 6625 (ISO 11923), Chất lượng nước - Xác định chất rắn lơ lửng cách lọc qua lọc sợi thủy tinh [10] ISO 13641-1, Water quality - Determination of inhibition of gas production of anaerobic bacteria - Part 1: General test [11] ISO/TR 15462, Water quality - Selection of tests for biodegradability [12] BROWN D., HITZ H.R and SCHAFER L (1981) The assessment of the possible inhibitory effect of dye-stuffs on aerobic waste-water bacteria Experience with a screening test Chemosphere 10 (3), pp 245-261 [13] GENDIG C., DOMOGALA G., AGNOLI F., PAGGA U and STROTMANN U.J (2003) Evaluation and further development of the activated sludge respiration test Chemosphere 52 (1), pp 143-149 [14] KING E.F and PAINTER H.A (1986) Inhibition of respiration of activated sludge: variability and reproducibility of results Toxicity Assessment (1), pp 27-39 [15] PAINTER H.A (1986) Nitrification in the treatment of sewage and waste-waters In: Nitrification Special Publications of the Society for General Microbiology, Vol 20 Ed: J.l Prosser IRL Press, Oxford, UK ... thể xác định ức chế ba tiêu thụ oxy khác nhau, cụ thể là, ức chế tiêu thụ oxy tổng, ức chế tiêu thụ oxy dị dưỡng, ức chế tiêu thụ oxy nitrat hóa Đối với tiêu thụ tổng số, chuẩn bị hỗn hợp phản... trường hợp vậy, cần thử phi sinh vật để phân biệt tiêu thụ oxy chất thử tiêu thụ oxy hô hấp vi khuẩn Phép đối chứng tiêu thụ oxy phi sinh vật chuẩn bị cách không cho vi sinh vật nuôi cấy vào hỗn... h Sự kéo dài thời gian thử phải ghi rõ báo cáo thử CHÚ THÍCH: Thơng thường, thời gian ủ khoảng 30 đủ Có thể phải ủ thời gian dài hơn, ví dụ, yêu cầu chất hòa tan nước Thời gian ủ kéo dài làm