Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 7098:2002 qui định phương pháp xác định alkaloit trong phần ngưng tụ khói của thuốc lá điếu bằng phương pháp đo phổ. Hút các điếu thuốc và thu lấy luồng khói chính theo TCVN 6680 : 2000 (ISO 4387 : 1991). Tuy nhiên, phương pháp này cũng có thể dùng để xác định nicotin trong phần ngưng tụ khói thuốc thu được khi việc hút không theo tiêu chuẩn.
TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 7098 : 2002 ISO 3400 : 1997 THUỐC LÁ ĐIẾU - XÁC ĐỊNH ALKALOIT TRONG PHẦN NGƯNG TỤ KHÓI - PHƯƠNG PHÁP ĐO PHỔ Cigarettes - Determination of alkaloids in smokecondensates - Spectrometric method Lời nói đầu TCVN 7098 : 2002 hồn tồn tương đương với ISO 3400 : 1997 TCVN 7098 : 2002 Ban kỹ thuật tiêu chuẩn TCVN/TC126 Thuốc sản phẩm thuốc biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng đề nghị, Bộ Khoa học Công nghệ ban hành Tiêu chuẩn chuyển đổi năm 2008 từ Tiêu chuẩn Việt Nam số hiệu thành Tiêu chuẩn Quốc gia theo quy định khoản Điều 69 Luật Tiêu chuẩn Quy chuẩn kỹ thuật điểm a khoản Điều Nghị định số 127/2007/NĐ-CP ngày 1/8/2007 Chính phủ quy định chi tiết thi hành số điều Luật Tiêu chuẩn Quy chuẩn kỹ thuật THUỐC LÁ ĐIẾU - XÁC ĐỊNH CÁC ALKALOIT TRONG PHẦN NGƯNG TỤ KHÓI - PHƯƠNG PHÁP ĐO PHỔ Cigarettes - Determination of alkaloids in smoke condensates - Spectrometric method Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn qui định phương pháp xác định alkaloit phần ngưng tụ khói thuốc điếu phương pháp đo phổ Hút điếu thuốc thu lấy luồng khói theo TCVN 6680 : 2000 (ISO 4387 : 1991) Tuy nhiên, phương pháp dùng để xác định nicotin phần ngưng tụ khói thuốc thu việc hút không theo tiêu chuẩn Chú thích – TCVN 6680 : 2000 (ISO 4387 : 1991) qui định phép đo sắc ký khí để xác định nicotin dung dịch phần ngưng tụ khói (xem thêm TCVN 6679 : 2000 (ISO 10315)] số quốc gia không sử dụng phương pháp sắc ký khí việc xác định nicotin phần ngưng tụ khói nên thực phương pháp qui định tiêu chuẩn biểu thị kết nên có phần thích thích hơp Tiêu chuẩn xác định alkaloit tổng số, TCVN 6679 : 2000 (ISO 10315) xác định nicotin tách sắc ký khí Đơi xẩy chênh lệch lượng nhỏ alkaloit nicotin có số loại thuốc Tiêu chuẩn viện dẫn TCVN 4851-89 (ISO 3696 : 1987) Nước dùng để phân tích phòng thí nghiệm – u cầu kỹ thuật phương pháp thử TCVN 6680 : 2000 (ISO 4387 : 1991) Thuốc điếu - Xác định chất ngưng tụ khô tổng số chất ngưng tụ khô không chứa nicotin sử dụng máy hút thuốc phân tích thơng thường TCVN 6681 : 2000 (ISO 13276 : 1997) Thuốc sản phẩm thuốc - Xác định độ tinh khiết nicotin - Phương pháp khối lượng sử dụng axit tungstosilixic Nguyên tắc Hoà tan phần ngưng tụ khói thu từ luồng khói dung mơi Chưng cất nước dung dịch hai giai đoạn Trước hết axit hoá dung dịch axit vô chưng cất để loại bỏ chất trung tính axit theo nước, sau kiềm hố mạnh dung dịch nồi chưng cất để thu alkaloit Đo phổ độ hấp thụ dung dịch cất kiềm tính hàm lượng alkaloit theo nicotin 4 Thuốc thử Chỉ sử dụng thuốc thử loại tinh khiết phân tích nước cất nước loại theo TCVN 4851-89 (ISO 3696 : 1987) 4.1 Propan-2-ol [(CH3)2CHOH], dung môi chiết 4.2 Dung dịch natri hidroxit, c(NaOH) = mol/l 4.3 Dung dịch axit sunfuric, c(H2SO4) = mol/l 4.4 Dung dịch axit sunfuric, c(H2SO4) = 0,025 mol/l 4.5 Nicotin, có độ tinh khiết tối thiểu 98% Bảo quản oC đến + oC tránh ánh sáng Thử nghiệm độ tinh khiết nicotin theo TCVN 6681 : 2000 (ISO 13276 : 1997) Chú thích – Có thể sử dụng nicotin hidro tartrat có độ tinh khiết tối thiểu 98% Thiết bị, dụng cụ Sử dụng dụng cụ thử nghiệm thông thường loại sau: 5.1 Thiết bị chưng cất hơi, gồm phần liệt kê từ 5.1.1 đến 5.1.4 Phải kiểm tra thường xuyên tính thiết bị chưng cất Chuẩn bị dung dịch nicotin tinh khiết sử dụng dung môi chiết (4.1) cho 10 ml dung dịch chứa lượng nicotin xác biết trước mức khoảng mg Sử dụng dung dịch làm phần mẫu thử (6.2) đảm bảo độ thu hồi lớn 98% Nếu khơng đạt, phải tối ưu hố cách điều chỉnh lại tốc độ chưng cất Chú thích – Các sơ đồ thiết bị sử dụng đưa làm thí dụ (xem phụ lục A từ hình A.1 đến hình A.3) Có thể sử dụng thiết bị khác với điều kiện cho kết tương tự 5.1.1 Bình chưng cất Bình chưng cất hình trụ treo theo phương thẳng đứng, có dung tích từ 50 ml đến 100 ml có đường dẫn nước từ đáy Bình chưng cất gia nhiệt để trì mức chất lỏng ổn định trình chưng cất 5.1.2 Đầu phun chưng cất 5.1.3 Sinh hàn xoắn, có khớp nối hình cầu đầu phun chưng cất (5.1.2) 5.1.4 Phễu dạng nút, hệ thống khác để bổ sung dung dịch natri hidroxit Điều quan trọng suốt trình bổ sung dung dịch natri hidroxit (4.2) nước khơng qua vòi nắp đậy 5.2 Phổ kế, bao trùm dải bước sóng từ 230 nm đến 290 nm (Xem thêm thích 7) 5.3 Cuvet thạch anh, có chiều dài đường quang cm Có thể sử dụng cuvet thạch anh lớn nồng độ nicotin thấp 5.4 Bình định mức, dung tích 250 ml có nút mài 5.5 Pipet vạch, dung tích ml, 10 ml 25 ml 5.6 Phễu thuỷ tinh, đường kính khoảng 55 mm 5.7 Giấy lọc, loại lọc nhanh có đường kính thích hợp với phễu thuỷ tinh (5.6) Cách tiến hành 6.1 Chuẩn bị mẫu thử Chuẩn bị mẫu thử cách hồ tan phần ngưng tụ khói thu từ lượng thuốc điếu hút máy hút Đối với đĩa đường kính 44 mm sử dụng 25 ml dung mơi (4.1); đĩa có đường kính 92 mm sử dụng 50 ml dung mơi Tiến hành phân tích sớm tốt phải bảo quản để mẫu nhiệt độ từ oC đến + oC tránh ánh sáng Đối với việc hút tiêu chuẩn việc hoà tan phần ngưng tụ, xem TCVN 6680 : 2000 (ISO 4387 : 1991) 6.2 Phần mẫu thử Lấy phần thể tích (V1) dung dịch phần ngưng tụ khói tương ứng với khoảng mg đến mg alkaloit làm phần mẫu thử Chú thích – Qui định khơng phù hợp với thuốc điếu có hàm lượng nicotin thấp 6.3 Chưng cất Cảnh báo - Phải thận trọng trình chưng cất bổ sung natri hidroxit phải đeo thiết bị bảo vệ an tồn Chú thích - Các lượng qui định điều liên quan đến loại thiết bị qui định 5.1 Nếu sử dụng thiết bị khác lượng phải thay đổi với điều kiện cho kết tương tự Cho phần mẫu thử (6.2) vào buồng chưng cất thiết bị chưng cất (5.1) Thêm 10 ml dung dịch axit sunfuric (4.3) bắt đầu chưng cất Thu lấy khoảng 100 ml dịch chưng cất vào cốc Lấy cốc loại bỏ dịch cất chưng cất Lồng ống phân phối vào bình định mức 250 ml (5.4) có chứa 10 ml dung dịch axit sunfuric (4.3) Đảm bảo đầu cuối ống ngập axit Cẩn thận cho thêm từ từ ml dung dịch natri hidroxit (4.2), đóng phễu giọt cuối qua Thu lấy từ 220 ml đến 230 ml dịch chưng cất Lấy bình tráng ống phân phối nước Kết thúc chưng cất tráng chưng cất Đảm bảo bình định mức đạt nhiệt độ phòng, pha lỗng dịch chưng cất nước đến vạch (V 2) Lắc sử dụng dung dịch để xác định alkaloit phần ngưng tụ khói phép đo phổ Lọc, dung dịch khơng Chú thích – Nếu cần phải lọc, loại bỏ 150 ml dịch lọc trước sử dụng, giấy lọc nên rửa lượng nước vừa đủ sấy khô 6.4 Xác định alkaloit dịch chưng cất Dùng phổ kế (5.2) để đo độ hấp thụ dịch chưng cất bước sóng 236 nm, 259 nm 282 nm so sánh với dung dịch đối chứng 10 ml dung dịch axit sunfuric (4.3) pha loãng nước đến 250 ml Nếu độ hấp thụ bước sóng 259 nm vượt q 0,8, pha loãng phần mẫu thử (V 3) dịch chưng cất đến thể tích thích hợp (V4) dung dịch axit sunfuric (4.4) đo độ hấp thụ dung dịch cách Dung dịch đối chứng pha loãng dung dịch axit sunfuric (4.4) đến thể tích thích hợp (V4) giống phần dung dịch (V3) Nếu độ hấp thụ thu bước sóng 259 nm nhỏ 0,2 sử dụng cuvet rộng (5.3) Tiến hành hai phép xác định mẫu thử điều kiện giống hệt Tính biểu thị kết Hàm lượng alkaloit Hnic phần ngưng tụ khói mẻ hút, biểu thị theo nicotin, tính miligam điếu, theo công thức : Hnic = AV0V2V4 (1) alV1V3n a độ hấp thụ (hệ số tắt) nicotin axit sunfuric 0,025 mol/l (4.4) (nghĩa 34,3 hấp thụ tối đa bước sóng 259 nm), tính ml/mg.cm; A độ hấp thụ hiệu chỉnh (hệ số tắt) tính từ độ hấp thụ đo bước sóng 236 nm, 259 nm 282 nm : A = 1,059 (A259 - A236 A282 ) (2) l chiều dài đường quang cuvet, tính xentimet; V0 thể tích dung dịch propan-2-ol phần ngưng tụ khói thơ, tính mililit; V1 phần thể tích V0 sử dụng để chưng cất, tính mililit; V2 thể tích dịch chưng cất từ chưng cất kiềm, tính mililit; V3 phần thể tích dịch chưng cất V2 sử dụng để pha lỗng tiếp theo, tính mililit; V4 thể tích V3 pha lỗng, tính mililit; n số lượng điếu thuốc hút bẫy hút Chú thích – Kinh nghiệm cho thấy, số hệ số tắt nicotin, tức 34,3 thừa số 1,059 cơng thức tính độ hấp thụ hiệu chỉnh thiết lập [2] (phụ lục B) không áp dụng cho tất loại phổ kế Do đó, loại phổ kế nên kiểm tra để đảm bảo thừa số có giá trị, cách sử dụng dãy dung dịch nicotin tiêu chuẩn nằm dải làm việc Biểu thị kết thử nghiệm sau : a) hàm lượng alkaloit kênh hút biểu thị theo nicotin, tính miligam điếu, xác đến 0,01 mg; b) hàm lượng alkaloit, tính trung bình điếu, biểu thị theo nicotin, xác đến 0,1 mg; Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải nêu rõ hàm lượng nicotin điếu thuốc hút phương pháp sử dụng, tất điều kiện ảnh hưởng đến kết (áp suất khơng khí q trình phân tích) Báo cáo thử nghiệm đưa chi tiết cần thiết để nhận biết điếu thuốc hút Phụ lục A (tham khảo) Sơ đồ thiết bị sử dụng Kích thước tính milimét Chú thích 1) Tất dụng cụ thuỷ tinh có thành bosilicat 2) Van: lỗ PTFE mm Hình A.1 - Thí dụ thiết bị sử dụng Kích thước tính milimét Hình A.2 - Thí dụ thiết bị sử dụng Kích thước tính milimet Hình A.3 - Thí dụ thiết bị sử dụng THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] TCVN 6679 : 2000 (ISO 10315) Thuốc điếu - Xác định nicotin khói thuốc ngưng tụ Phương pháp sắc ký khí [2] Wilets C.O., Swain M.L., Connelly J.A., Brice B A Analytical Chemistry, 22, No March 1950, pp 430-433 [3] TCVN ISO/IEC 17025 : 2001 (ISO/IEC 17025:1999) Yêu cầu chung lực phòng thử nghiệm hiệu chuẩn ... thử Chỉ sử dụng thuốc thử loại tinh khiết phân tích nước cất nước loại theo TCVN 485 1-8 9 (ISO 3696 : 1987) 4.1 Propan-2-ol [(CH3)2CHOH], dung môi chiết 4.2 Dung dịch natri hidroxit, c(NaOH) = mol/l... quản để mẫu nhiệt độ từ oC đến + oC tránh ánh sáng Đối với việc hút tiêu chuẩn việc hoà tan phần ngưng tụ, xem TCVN 6680 : 2000 (ISO 4387 : 1991) 6.2 Phần mẫu thử Lấy phần thể tích (V1) dung dịch... Hình A.1 - Thí dụ thiết bị sử dụng Kích thước tính milimét Hình A.2 - Thí dụ thiết bị sử dụng Kích thước tính milimet Hình A.3 - Thí dụ thiết bị sử dụng THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] TCVN 6679