Nghiên cứu xác định tên khoa học, quy trình nhân giống in vitro và hoạt tính sinh học của tinh dầu cây gừng bản địa ở bắc kạn (gừng đá)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM VŨ XUÂN DƢƠNG NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC, QUY TRÌNH NHÂN GỐNG IN VITRO VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA TINH DẦU CÂY GỪNG BẢN ĐỊA Ở BẮC KẠN (GỪNG ĐÁ) LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI – 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM VŨ XUÂN DƢƠNG NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC, QUY TRÌNH NHÂN GỐNG IN VITRO VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA TINH DẦU CÂY GỪNG BẢN ĐỊA Ở BẮC KẠN (GỪNG ĐÁ) Chuyên ngành : Công nghệ sinh học Mã số : 9.42.02.01 LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG NGHIỆP Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS Đặng Trọng Lƣơng TS Đỗ Tuấn Khiêm HÀ NỘI - 2019 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam Ďoan Ďây cơng trình nghiên cứu tơi thực Các số liệu, kết luận án trung thực chưa Ďược cơng bố cơng trình khác Tác giả Vũ Xuân Dƣơng i LỜI CẢM ƠN Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban Giám Ďốc Viện Khoa học nông nghiệp Việt Nam, thầy cô giáo Ban Ďào tạo sau Ďại học Ďã tạo Ďiều kiện giúp Ďỡ tơi suốt q trình học tập hồn thiện luận án Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc tới Phó Giáo sư, Tiến sĩ Đặng Trọng Lương Tiến sĩ Đỗ Tuấn Khiêm Ďã tận tình hướng dẫn, Ďộng viên khích lệ, dành nhiều thời gian trao Ďổi Ďịnh hướng cho tơi q trình thực luận án Tôi xin bày tỏ lời cảm ơn chân thành tới tập thể cán bộ, nghiên cứu viên Bộ môn Kĩ thuật di truyền - Viện Di truyền nông nghiệp; Bảo tàng thiên nhiên Việt Nam; Viện Hóa học hợp chất thiên nhiên; Viện Công nghệ sinh học – Viện Hàn lâm khoa học cơng nghệ Việt Nam; Phòng thí nghiệm trọng Ďiểm bảo tồn sử dụng tài ngun thực vật, Phòng thí nghiệm trọng Ďiểm thực vật số tỉnh Quảng Đông, Vườn thực vật Nam Trung Quốc, Viện Hàn lâm khoa học Trung Quốc, Quảng Châu, Trung Quốc; Trung tâm Công nghệ sinh học – Trường Đại học Hùng Vương, Ďã tạo Ďiều kiện giúp Ďỡ tiến hành nghiên cứu chia sẻ kinh nghiệm Ďể hoàn thành luận án Cuối cùng, tơi xin gửi lời cảm ơn tới gia Ďình, bạn bè, Ďồng nghiệp Ďã Ďộng viên truyền nhiệt huyết Ďể tơi hồn thành luận án Xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày… tháng… năm 2019 Nghiên cứu sinh Vũ Xuân Dƣơng ii MỤC LỤC Lời cam Ďoan i Lời cảm ơn ii Danh mục chữ viết tắt vi Danh mục bảng viii Danh mục hình x MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết Ďề tài Mục tiêu luận án Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn Ďề tài Những Ďóng góp luận án CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU .4 1.1 Khái quát chung họ Gừng (Zingiberaceae Lindl.) 1.1.1 Vị trí phân loại 1.1.2 Đặc Ďiểm hình thái Họ Gừng 1.2 Giới thiệu gừng Bắc Kạn 11 1.3 Tình hình nghiên cứu đa dạng sinh học phân loại họ Gừng 13 1.3.1 Trên giới 13 1.3.2 Ở Việt Nam 15 1.4 Nghiên cứu phân loại thực vật dựa trình tự gen 17 1.4.1 Giới thiệu vùng ITS-rDNA (Internal transcribed spacer) 17 1.4.2 Giới thiệu vùng matK (maturaseK) 18 1.4.3 Một số nghiên cứu phân loại thực vật dựa trình tự gen 18 1.5 Tình hình nghiên cứu nhân giống in vitro họ Gừng 25 1.5.1 Trên giới 25 1.5.2 Ở Việt Nam 29 1.6 Một số nghiên cứu tinh dầu họ Gừng 33 iii 1.6.1 Trên giới 33 1.6.2 Ở Việt Nam 34 CHƢƠNG VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 36 2.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu .36 2.2 Vật liệu nghiên cứu .36 2.3 Nội dung nghiên cứu 37 2.4 Phương pháp nghiên cứu .38 2.4.1 Phương pháp phân loại dựa vào Ďặc Ďiểm hình thái .38 2.4.2 Phương pháp phân loại thực vật dựa trình tự gen 38 2.4.3 Phương pháp nuôi cấy mô .43 2.4.4 Đặc Ďiểm sinh trưởng phát triển có nguồn gốc in vitro 49 2.4.5 Phương pháp phân tích sinh hóa 50 2.4.6 Phương pháp phân tích hoạt tính kháng vi sinh vật 52 2.5 Địa điểm thời gian nghiên cứu 54 CHƢƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 55 3.1 Vị trí phân loại gừng Bắc Kạn 55 3.1.1 Đặc Ďiểm sinh học gừng Bắc Kạn .55 3.1.2 Phân loại dựa vào Ďặc Ďiểm hình thái 57 3.1.3 Phân loại gừng Bắc Kạn dựa trình tự gen ITS gen matK 62 3.2 Nhân giống gừng Bắc Kạn công nghệ nuôi cấy lớp mỏng .72 3.2.1 Tạo mẫu in vitro 72 3.2.2 Tạo callus từ lát cắt chồi 75 3.2.3 Tái sinh chồi từ callus .76 3.2.4 Nhân chồi in vitro 78 3.2.5 Tái sinh rễ tạo hoàn chỉnh in vitro 83 3.2.6 Giai Ďoạn 86 3.2.7 Quy trình nhân nhanh gừng Bắc Kạn kỹ thuật nuôi cấy lớp mỏng 94 iv 3.3 Đặc điểm nông sinh học gừng Bắc Kạn nuôi cấy mô 98 3.3.1 Động thái tăng trưởng chiều cao 98 3.3.2 Động thái .100 3.3.3 Động thái Ďẻ nhánh 101 3.3.4 Một số yếu tố cấu thành suất giống gừng Bắc Kạn nuôi cấy mô 102 3.4 Thành phần hóa học tinh dầu gừng Bắc Kạn 106 3.4.1 Kết tách chiết tinh dầu 106 3.4.2 Thành phần hóa học tinh dầu 107 3.5 Khả kháng vi sinh vật tinh dầu chiết xuất từ gừng Bắc Kạn 111 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 115 DANH MỤC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ CĨ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN 117 TÀI LIỆU THAM KHẢO 118 PHỤ LỤC 133 v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT 2,4D 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid ABI Applied biosystems incorporated AFLP Amplified fragment length polymorphism BAP 6-Benzylaminopurin BLAST Basic local alignment search tool bp Base pair cpDNA Chloroplast DNA CTAB Cetyltrimethyl ammoium bromide CT Công thức DNA Deoxyribonucleic acid DNAse Deoxyribonuclease dNTP Deoxyribounucleotide triphosphate ddNTP Dideoxyribonucleotide triphosphate ĐHST Điều hòa sinh trưởng EDTA Ethylenediamine tetraacetate GC-MS Gas chromatography mass spectometry (Phương pháp sắc ký ghép khối phổ) GĐ Gừng Ďá IAA Indole-3-acetic acid IBA Indole butyric acid ITS Internal transcribed spacer Kin Kinetin matK Maturase K ML Maximum Likehood MS Murashige and Skoog (Môi trường MS, 1962) vi µM Micromol (nồng Ďộ phần triệu mol/l) NAA 1-Naphthaleneacetic acid (Axit 1-Naphthaleneaxetic) NCBI National center for biotechnology information Nu Nucleotide ND Nước dừa ORF Open reading frame (khung Ďọc mở) PCR Polymerase chain reaction RAPD Random amplified polymorphic DNA rbcL Ribulose-bisphosphate carboxylase RFLP Restriction fragment length polymorphism RNA Riboucleic acid RNAse Ribonuclease SSR Simple Sequence Repeates Taq Thermus aquaticus TBE Tris/Borate/EDTA TDZ Thidiazuzon vii Anova: Single Factor Số chồi/callus SUMMARY Groups Count DC CT12 CT13 CT14 CT15 CT16 3 3 3 ANOVA Source of Variation SS Between Groups Within Groups Total Sum 14.55 17.76282 22.20956 29.12138 21.26901 16.97778 Average 4.85 5.92094 7.403186 9.707126 7.089669 5.659259 Variance 0.0175 0.005931 0.026821 0.032236 0.006578 0.020535 df MS F 44.31255 0.2192 44.53175 8.86251 12 0.018267 17 485.1733 P-value F crit 2.07E13 3.105875 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TILE FILE TSCHOI 6/ 3/19 0: :PAGE Ti le tai sinh choi tu callus VARIATE V005 TILE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 7590.12 1518.02 351.31 0.000 NLAI 1.23457 617284 0.14 0.869 * RESIDUAL 10 43.2098 4.32098 * TOTAL (CORRECTED) 17 7634.57 449.092 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TILEC FILE TSCHOI 6/ 3/19 0: :PAGE Ti le tai sinh choi tu callus VARIATE V007 TILEC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 44.3126 8.86251 532.08 0.000 NLAI 526325E-01 263163E-01 1.58 0.253 * RESIDUAL 10 166563 166563E-01 * TOTAL (CORRECTED) 17 44.5317 2.61951 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TSCHOI 6/ 3/19 0: :PAGE Ti le tai sinh choi tu callus MEANS FOR EFFECT CT$ - CT$ DC CT12 CT13 NOS 3 TILE 15.5556 41.1111 55.5556 TILEC 4.85000 5.92094 7.40319 156 CT14 CT15 CT16 SE(N= 5%LSD 3 78.8889 61.1111 32.2222 3) 10DF 1.20014 3.78167 9.70713 7.08967 5.65926 0.745124E-01 0.234791 - MEANS FOR EFFECT NLAI - NLAI SE(N= 6) 5%LSD NOS 6 TILE 47.2222 47.2222 47.7778 0.848624 10DF TILEC 6.84692 6.74602 6.72215 0.526883E-01 2.67405 0.166023 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TSCHOI 6/ 3/19 0: :PAGE Ti le tai sinh choi tu callus F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TILE TILEC GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 47.407 18 6.7717 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 21.192 2.0787 4.4 0.0000 1.6185 0.12906 1.9 0.0000 |NLAI | | | 0.8686 0.2530 | | | | Ảnh hƣởng BAP Kin nhân chồi gừng Bắc Kạn Anova: Single Factor Hệ số nhân chồi SUMMARY Groups CT17 CT18 CT19 CT20 CT21 Count 3 3 Sum 15.2 16.8 17.93333 17.3 15.13333 Average 5.066667 5.6 5.977778 5.766667 5.044444 Variance 0.017778 0.004444 0.004815 0.001111 0.004815 df MS F ANOVA Source of Variation SS Between Groups Within Groups Total 2.112889 0.065926 2.178815 0.528222 10 0.006593 14 157 80.1236 P-value 1.48E07 F crit 3.47805 Anova: Single Factor Chiều cao chồi SUMMARY Groups Count Sum 15 16.1 18.2 16.4 13.8 CT17 CT18 CT19 CT20 CT21 Average Variance 0.04 5.366667 0.013333 6.066667 0.023333 5.466667 0.013333 4.6 0.03 ANOVA Source of Variation SS Between Groups Within Groups Total 3.6 0.24 3.84 df MS 10 14 F 0.9 0.024 37.5 P-value F crit 5.42E06 3.47805 Anova: Single Factor Số lá/chồi SUMMARY Groups CT17 CT18 CT19 CT20 CT21 Count Sum 13 14 14 13 12 Average 4.333333 4.666667 4.666667 4.333333 Variance 0.333333 0.333333 0.333333 0.333333 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total SS 0.933333 2.666667 3.6 BALANCED ANOVA FOR VARIATE df 10 14 HSNC MS 0.233333 0.266667 FILE BAP-KI F P-value 0.875 0.512105 F crit 3.47805 4/10/18 16:30 :PAGE Ket qua phoi hop BAP Ki nhan choi gung ban dia Bac Kan VARIATE V005 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 2.11289 528222 68.90 0.000 NLAI 459261E-02 229630E-02 0.30 0.752 * RESIDUAL 613332E-01 766665E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.17882 155630 - 158 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE BAP-KI 4/10/18 16:30 :PAGE Ket qua phoi hop BAP Ki nhan choi gung ban dia Bac Kan VARIATE V006 CHIEUCAO LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 3.60000 900000 62.07 0.000 NLAI 124000 619999E-01 4.28 0.054 * RESIDUAL 116000 145000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 3.84000 274286 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA FILE BAP-KI 4/10/18 16:30 :PAGE Ket qua phoi hop BAP Ki nhan choi gung ban dia Bac Kan VARIATE V007 SOLA LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 933333 233333 0.82 0.547 NLAI 400000 200000 0.71 0.525 * RESIDUAL 2.26667 283333 * TOTAL (CORRECTED) 14 3.60000 257143 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BAP-KI 4/10/18 16:30 :PAGE Ket qua phoi hop BAP Ki nhan choi gung ban dia Bac Kan MEANS FOR EFFECT CT$ - CT$ CT17 CT18 CT19 CT20 CT21 SE(N= 3) 5%LSD 8DF NOS 3 3 HSNC CHIEUCAO SOLA 5.06667 5.00000 4.33333 5.60000 5.36667 4.66667 5.97778 6.06667 4.66667 5.76667 5.46667 4.33333 5.04444 4.60000 4.00000 0.505525E-01 0.695222E-01 0.307318 0.164846 0.226705 1.00213 - MEANS FOR EFFECT NLAI - NLAI SE(N= 5%LSD NOS 5 HSNC 5.50667 5.50000 5.46667 5) 8DF CHIEUCAO 5.40000 5.32000 5.18000 SOLA 4.40000 4.60000 4.20000 0.391578E-01 0.538516E-01 0.238048 0.127689 0.175605 0.776249 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BAP-KI 4/10/18 16:30 :PAGE Ket qua phoi hop BAP Ki nhan choi gung ban dia Bac Kan F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSNC CHIEUCAO SOLA GRAND MEAN (N= NO OBS 15 15 15 STANDARD DEVIATION 15) C OF V |CT$ |NLAI SD/MEAN | | BASED ON BASED ON % | | TOTAL SS RESID SS | | 5.4911 0.39450 0.87559E-01 1.6 0.0000 0.7516 5.3000 0.52372 0.12042 2.3 0.0000 0.0542 4.4000 0.50709 0.53229 12.1 0.5467 0.5254 159 | | | | Ảnh hƣởng nƣớc dừa đến hiệu nhân chồi Anova: Single Factor Số lá/chồi SUMMARY Groups CT22 CT23 CT24 CT25 CT26 Count Sum 14 15 13 11 10 Average 4.666667 4.333333 3.666667 3.333333 SS 5.733333 2.666667 8.4 df MS 1.433333 0.266667 Count Sum 17.6 17.7 17.3 15.8 14 Average 5.866667 5.9 5.766667 5.266667 4.666667 Variance 0.043333 0.07 0.043333 0.013333 0.003333 df MS F 3 3 Variance 0.333333 0.333333 0.333333 0.333333 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total 10 14 F P-value 5.375 0.014228 F crit 3.47805 Anova: Single Factor Chiều cao chồi SUMMARY Groups CT22 CT23 CT24 CT25 CT26 3 3 ANOVA Source of Variation SS Between Groups Within Groups Total 3.342667 0.346667 3.689333 10 14 0.835667 24.10577 0.034667 160 P-value 4.05E05 F crit 3.47805 Anova: Single Factor Hệ số nhân chồi SUMMARY Groups CT22 CT23 CT24 CT25 CT26 Count 3 3 Sum 17.73333 18.96667 17.06667 14.13333 11.13333 Average 5.911111 6.322222 5.688889 4.711111 3.711111 Variance 0.002593 0.004815 0.004815 0.013704 0.018148 MS F ANOVA Source of Variation SS Between Groups Within Groups Total 13.30844 0.088148 13.39659 df BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3.327111 10 0.008815 14 HSNC FILE NUOC DUA 377.4454 P-value F crit 7.36E11 3.47805 7/10/18 22:21 VARIATE V005 HSNC LN SOURCE OF VARIATION :PAGE Anh huong cua nuoc dua den hieu qua nhan choi DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 13.3084 3.32711 611.09 0.000 NLAI 445926E-01 222963E-01 4.10 0.059 * RESIDUAL 435565E-01 544456E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 13.3966 956900 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE NUOC DUA 7/10/18 22:21 :PAGE Anh huong cua nuoc dua den hieu qua nhan choi VARIATE V006 CHIEUCAO LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 3.34267 835667 20.80 0.000 NLAI 253334E-01 126667E-01 0.32 0.741 * RESIDUAL 321333 401667E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 3.68933 263524 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA FILE NUOC DUA 7/10/18 22:21 :PAGE Anh huong cua nuoc dua den hieu qua nhan choi VARIATE V007 SOLA LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= 161 CT$ 5.73333 1.43333 7.82 0.008 NLAI 1.20000 600000 3.27 0.091 * RESIDUAL 1.46667 183333 * TOTAL (CORRECTED) 14 8.40000 600000 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NUOC DUA 7/10/18 22:21 :PAGE Anh huong cua nuoc dua den hieu qua nhan choi MEANS FOR EFFECT CT$ - CT$ CT22 CT23 CT24 CT25 CT26 SE(N= 5%LSD NOS 3 3 3) 8DF HSNC 5.91111 6.32222 5.68889 4.71111 3.71111 CHIEUCAO 5.86667 5.90000 5.76667 5.26667 4.66667 SOLA 4.66667 5.00000 4.33333 3.66667 3.33333 0.426011E-01 0.115710 0.138918 0.377320 0.247207 0.806116 - MEANS FOR EFFECT NLAI - NLAI SE(N= 5%LSD NOS 5 5) 8DF HSNC 5.27333 5.33333 5.20000 CHIEUCAO 5.44000 5.50000 5.54000 SOLA 4.40000 3.80000 4.40000 0.329987E-01 0.896289E-01 0.191485 0.107605 0.292271 0.624414 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NUOC DUA 7/10/18 22:21 :PAGE Anh huong cua nuoc dua den hieu qua nhan choi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE |NLAI | | | | | | | HSNC CHIEUCAO SOLA GRAND MEAN STANDARD (N= 15) -NO BASED ON OBS TOTAL SS 15 5.2689 0.97821 15 5.4933 0.51335 15 4.2000 0.77460 DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON % | RESID SS | 0.73787E-01 1.4 0.0000 0.20042 3.6 0.0004 0.42817 10.2 0.0076 Tạo hoàn chỉnh in vitro Anova: Single Factor Số rễ trung bình SUMMARY Groups Count Sum Average CT27 7.433333 2.477778 CT28 8.7 2.9 CT29 11.06667 3.688889 CT30 13.46667 4.488889 CT31 14.8 4.933333 162 Variance 0.018148 0.007778 0.007037 0.01037 0.017778 0.0592 0.7409 0.0908 CT32 CT33 CT34 CT35 CT36 CT37 3 3 3 12.4 11.33333 13.6 16.53333 14.83333 12.16667 4.133333 3.777778 4.533333 5.511111 4.944444 4.055556 0.007778 0.01037 0.007778 0.01037 0.013704 0.01037 df MS F ANOVA Source of Variation SS Between Groups Within Groups Total 24.22357 0.242963 24.46653 10 2.422357 22 0.011044 32 219.3415 P-value F crit 1.22E19 2.296696 Anova: Single Factor Chiều dài rễ TB SUMMARY Groups CT27 CT28 CT29 CT30 CT31 CT32 CT33 CT34 CT35 CT36 CT37 Count 3 3 3 3 3 Sum 6.9 9.3 10.1 10.9 12.5 12.1 9.4 11 13.3 12.7 12 Average 2.3 3.1 3.366667 3.633333 4.166667 4.033333 3.133333 3.666667 4.433333 4.233333 Variance 0.04 0.01 0.023333 0.003333 0.013333 0.043333 0.023333 0.013333 0.023333 0.023333 0.04 df MS F ANOVA Source of Variation SS Between Groups Within Groups Total 11.88727 0.513333 12.40061 10 22 32 1.188727 50.94545 0.023333 163 P-value F crit 7.15E13 2.296696 Anova: Single Factor Chiều cao TB/cây SUMMARY Groups CT27 CT28 CT29 CT30 CT31 CT32 CT33 CT34 CT35 CT36 CT37 Count 3 3 3 3 3 Sum 20.1 22.4 25.4 27.8 27.8 26.1 24.9 26.6 28.9 25.9 25.6 Average 6.7 7.466667 8.466667 9.266667 9.266667 8.7 8.3 8.866667 9.633333 8.633333 8.533333 Variance 0.07 0.043333 0.023333 0.003333 0.013333 0.01 0.04 0.043333 0.023333 0.013333 0.023333 df MS F ANOVA Source of Variation SS Between Groups Within Groups Total 20.97636 0.613333 21.5897 10 22 32 Anova: Single Factor Số TB/cây SUMMARY Groups Count Sum CT27 CT28 10 CT29 11 CT30 12 CT31 13 CT32 11 CT33 10 CT34 14 CT35 16 CT36 14 CT37 13 2.097636 0.027879 75.2413 Average 2.666667 3.333333 3.666667 4.333333 3.666667 3.333333 4.666667 5.333333 4.666667 4.333333 Variance 0.333333 0.333333 0.333333 0.333333 0.333333 0.333333 0.333333 0.333333 0.333333 0.333333 164 P-value F crit 1.19E14 2.296696 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total SS 17.33333 6.666667 24 df MS 10 1.733333 22 0.30303 32 F P-value F crit 5.72 0.000322 2.296696 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SO RE/CH FILE TAO RE 15/10/18 15:26 :PAGE Ket qua nghien cuu moi truong tao cay hoan chinh VARIATE V005 SO RE/CH LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 10 24.2236 2.42236 209.20 0.000 NLAI 113804E-01 569022E-02 0.49 0.624 * RESIDUAL 20 231584 115792E-01 * TOTAL (CORRECTED) 32 24.4665 764579 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEU DA FILE TAO RE 15/10/18 15:26 :PAGE Ket qua nghien cuu moi truong tao cay hoan chinh VARIATE V006 CHIEU DA LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 10 11.8873 1.18873 59.98 0.000 NLAI 116970 584848E-01 2.95 0.074 * RESIDUAL 20 396364 198182E-01 * TOTAL (CORRECTED) 32 12.4006 387519 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEU CA FILE TAO RE 15/10/18 15:26 :PAGE Ket qua nghien cuu moi truong tao cay hoan chinh VARIATE V007 CHIEU CA LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 10 20.9764 2.09764 83.30 0.000 NLAI 109697 548485E-01 2.18 0.138 * RESIDUAL 20 503637 251818E-01 * TOTAL (CORRECTED) 32 21.5897 674678 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SO LA FILE TAO RE 15/10/18 15:26 :PAGE Ket qua nghien cuu moi truong tao cay hoan chinh VARIATE V008 SO LA LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 10 17.3333 1.73333 5.84 0.000 NLAI 727273 363636 1.22 0.315 * RESIDUAL 20 5.93939 296970 165 * TOTAL (CORRECTED) 32 24.0000 750000 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TAO RE 15/10/18 15:26 :PAGE Ket qua nghien cuu moi truong tao cay hoan chinh MEANS FOR EFFECT CT$ - CT$ CT27 CT28 CT29 CT30 CT31 CT32 CT33 CT34 CT35 CT36 CT37 SE(N= 3) 5%LSD 20DF NOS 3 3 3 3 3 SO RE/CH CHIEU DA CHIEU CA SO LA 2.47778 2.30000 6.70000 2.66667 2.90000 3.10000 7.46667 3.33333 3.68889 3.36667 8.46667 3.66667 4.48889 3.63333 9.26667 4.00000 4.93333 4.16667 9.26667 4.33333 4.13333 4.03333 8.70000 3.66667 3.77778 3.13333 8.30000 3.33333 4.53333 3.66667 8.86667 4.66667 5.51111 4.43333 9.63333 5.33333 4.94444 4.23333 8.63333 4.66667 4.05556 4.00000 8.53333 4.33333 0.621268E-01 0.812778E-01 0.916185E-01 0.314627 0.183272 0.239767 0.270272 0.928138 - MEANS FOR EFFECT NLAI - NLAI SE(N= 5%LSD NOS 11 11 11 SO RE/CH 4.13030 4.10909 4.15455 11) 20DF CHIEU DA 3.63636 3.57273 3.71818 CHIEU CA 8.47273 8.50909 8.60909 SO LA 3.81818 4.00000 4.18182 0.324446E-01 0.424459E-01 0.478462E-01 0.164308 0.957107E-01 0.125214 0.141145 0.484704 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TAO RE 15/10/18 15:26 :PAGE Ket qua nghien cuu moi truong tao cay hoan chinh F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SO RE/CH CHIEU DA CHIEU CA SO LA GRAND MEAN (N= NO OBS 33 33 33 33 33) 4.1313 3.6424 8.5303 4.0000 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ |NLAI SD/MEAN | | BASED ON BASED ON % | | TOTAL SS RESID SS | | 0.87440 0.10761 2.6 0.0000 0.6240 0.62251 0.14078 3.9 0.0000 0.0740 0.82139 0.15869 1.9 0.0000 0.1377 0.86603 0.54495 13.6 0.0004 0.3155 Giai đoạn Anova: Single Factor Tỉ lệ sống SUMMARY Groups Count Sum Average Variance CT38 286.6667 95.55556 3.703704 CT39 246.6667 82.22222 3.703704 CT40 220 73.33333 11.11111 CT41 240 80 11.11111 166 | | | | ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total SS 781.4815 59.25926 840.7407 df Anova: Single Factor Chiều cao trung bình SUMMARY Groups Count Sum CT38 29 CT39 28.3 CT40 28.2 CT41 28.1 MS 260.4938 7.407407 11 F P-value 35.16667 5.9E-05 F crit 4.066181 Average Variance 9.666667 0.023333 9.433333 0.003333 9.4 0.01 9.366667 0.003333 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total SS 0.166667 0.08 0.246667 df 11 MS F P-value 0.055556 5.555556 0.023417 0.01 Anova: Single Factor Số trung bình/cây SUMMARY Groups Count Sum Average CT38 17 5.666667 CT39 17 5.666667 CT40 16 5.333333 CT41 17 5.666667 F crit 4.066181 Variance 0.333333 0.333333 0.333333 0.333333 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total SS 0.25 2.666667 2.916667 df MS 0.083333 0.333333 11 167 F P-value F crit 0.25 0.859204 4.066181 Anova: Single Factor Số rễ trung bình/cây SUMMARY Groups CT38 CT39 CT40 CT41 Count 3 3 Sum Average Variance 18 17 5.666667 0.333333 16 5.333333 0.333333 17 5.666667 0.333333 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total SS 0.666667 2.666667 df MS F P-value F crit 0.222222 0.888889 0.487183 4.066181 0.25 11 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TI LE 15 FILE RA NGOI 21/10/18 23: :PAGE Ket qua nghien cuu gia the giai doan ngoi VARIATE V005 TI LE 15 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 432.407 144.136 20.30 0.002 NLAI 1.85185 925926 0.13 0.880 * RESIDUAL 42.5926 7.09877 * TOTAL (CORRECTED) 11 476.852 43.3502 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEU CA FILE RA NGOI 21/10/18 23: :PAGE Ket qua nghien cuu gia the giai doan ngoi VARIATE V006 CHIEU CA LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 691665E-01 230555E-01 10.37 0.009 NLAI 666672E-02 333336E-02 1.50 0.297 * RESIDUAL 133334E-01 222224E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 891666E-01 810606E-02 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SO LA 15 FILE RA NGOI 21/10/18 23: :PAGE Ket qua nghien cuu gia the giai doan ngoi VARIATE V007 SO LA 15 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 250000 833333E-01 1.00 0.456 NLAI 1.50000 750000 9.00 0.016 * RESIDUAL 500000 833333E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 2.25000 204545 168 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SO RE 15 FILE RA NGOI 21/10/18 23: :PAGE Ket qua nghien cuu gia the giai doan ngoi VARIATE V008 SO RE 15 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 250000 833333E-01 1.00 0.456 NLAI 1.50000 750000 9.00 0.016 * RESIDUAL 500000 833333E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 2.25000 204545 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TI LE 30 FILE RA NGOI 21/10/18 23: :PAGE Ket qua nghien cuu gia the giai doan ngoi VARIATE V010 TI LE 30 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 781.481 260.494 27.23 0.001 NLAI 1.85185 925927 0.10 0.909 * RESIDUAL 57.4074 9.56791 * TOTAL (CORRECTED) 11 840.741 76.4310 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEU CA FILE RA NGOI 21/10/18 23: :PAGE Ket qua nghien cuu gia the giai doan ngoi VARIATE V011 CHIEU CA LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 166667 555556E-01 10.00 0.010 NLAI 466667E-01 233334E-01 4.20 0.072 * RESIDUAL 333332E-01 555554E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 246667 224243E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SO LA 30 FILE RA NGOI 21/10/18 23: :PAGE Ket qua nghien cuu gia the giai doan ngoi VARIATE V012 SO LA 30 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 250000 833333E-01 0.25 0.859 NLAI 666667 333333 1.00 0.424 * RESIDUAL 2.00000 333333 * TOTAL (CORRECTED) 11 2.91667 265152 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SO RE 30 FILE RA NGOI 21/10/18 23: :PAGE Ket qua nghien cuu gia the giai doan ngoi VARIATE V013 SO RE 30 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 666667 222222 0.73 0.574 NLAI 166667 833333E-01 0.27 0.772 * RESIDUAL 1.83333 305556 - 169 * TOTAL (CORRECTED) 11 2.66667 242424 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE RA NGOI 21/10/18 23: :PAGE Ket qua nghien cuu gia the giai doan ngoi MEANS FOR EFFECT CT$ - CT1 CT2 CT3 CT4 SE(N= 5%LSD CT$ NOS 3 3 3) 6DF CT$ CT1 CT2 CT3 CT4 SE(N= 3) 5%LSD 6DF NOS 3 3 TI LE 15 97.7778 88.8889 81.1111 86.6667 1.53826 CHIEU CA SO LA 15 9.43333 5.33333 9.30000 5.33333 9.26667 5.00000 9.23333 5.33333 0.272167E-01 0.166667 SO RE 15 5.33333 5.33333 5.00000 5.33333 0.166667 5.32110 TI LE 30 0.941468E-01 0.576527 CHIEU CA SO LA 30 0.576527 SO RE 30 95.5555 82.2222 73.3333 80.0000 1.78586 6.17758 9.66667 9.43333 9.40000 9.36667 0.430331E-01 0.148858 5.66667 5.66667 5.33333 5.66667 0.333333 6.00000 5.66667 5.33333 5.66667 0.319142 1.15305 1.10396 - MEANS FOR EFFECT NLAI - NLAI SE(N= 4) 5%LSD 6DF NLAI NOS 4 NOS 4 TI LE 15 88.3333 88.3333 89.1667 1.33218 CHIEU CA SO LA 15 9.27500 5.00000 9.32500 5.00000 9.32500 5.75000 0.235703E-01 0.144338 SO RE 15 5.00000 5.00000 5.75000 0.144338 4.60821 TI LE 30 0.815335E-01 0.499287 CHIEU CA SO LA 30 0.499287 SO RE 30 SE(N= 4) 82.5000 82.5000 83.3333 1.54660 5%LSD 6DF 5.34994 9.55000 9.45000 9.40000 0.372677E-01 0.128915 5.25000 5.75000 5.75000 0.288675 5.75000 5.50000 5.75000 0.276385 0.998573 0.956061 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE RA NGOI 21/10/18 23: :PAGE 10 Ket qua nghien cuu gia the giai doan ngoi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TI LE CHIEU SO LA SO RE TI LE CHIEU SO LA SO RE 15 CA 15 15 30 CA 30 30 GRAND MEAN (N= NO OBS 12 12 12 12 12 12 12 12 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ |NLAI | 12) -SD/MEAN | | | BASED ON BASED ON % | | | TOTAL SS RESID SS | | | 88.611 6.5841 2.6644 3.0 0.0020 0.8797 9.3083 0.90034E-010.47141E-01 0.5 0.0095 0.2966 5.2500 0.45227 0.28868 5.5 0.4558 0.0162 5.2500 0.45227 0.28868 5.5 0.4558 0.0162 82.778 8.7425 3.0932 3.7 0.0010 0.9086 9.4667 0.14975 0.74535E-01 0.8 0.0103 0.0722 5.5833 0.51493 0.57735 10.3 0.8590 0.4237 5.6667 0.49237 0.55277 9.8 0.5737 0.7719 170 ... dụng vào việc tạo nguồn giống bệnh cung cấp cho người dân, lựa chọn Ďề tài: Nghiên cứu xác định tên khoa học, quy trình nhân giống in vitro hoạt tính sinh học tinh dầu gừng địa Bắc Kạn (Gừng đá). .. VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM VŨ XUÂN DƢƠNG NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC, QUY TRÌNH NHÂN GỐNG IN VITRO VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA TINH DẦU CÂY GỪNG BẢN... gen gừng Ďịa Bắc Kạn Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn đề tài 3.1 Ý nghĩa khoa học Cung cấp dẫn liệu khoa học Ďặc Ďiểm hình thái, tên khoa học, thành phần hóa học hoạt tính sinh học tinh dầu