Ảnh hưởng của hóa chất xử lý đến sự xâm nhập của nấm Peronosclerospora maydis gây bệnh sọc trắng lá trên bắp được tiến hành trong điều kiện phòng thí nghiệm, nhà lưới. Bắp được xử lý phun lên lá ở giai đoạn có ba lá thật bằng: acibenzolar-S-methyl (100 ppm), CaCl2 (100 mM), K2HPO4 (100 mM) hoặc salicylic acid (7,5 mM).
An Giang University Journal of Science – 2017, Vol 17 (5), – ĐÁNH GIÁ ẢNH HƯỞNG CỦA BỐN HÓA CHẤT XỬ LÝ ĐẾN SỰ XÂM NHẬP CỦA NẤM Peronosclerospora maydis GÂY BỆNH SỌC TRẮNG LÁ TRÊN BẮP Võ Thị Hướng Dương1 Trường Đại học An Giang Thông tin chung: Ngày nhận bài: 02/06/2017 Ngày nhận kết bình duyệt: 16/09/2017 Ngày chấp nhận đăng: 10/2017 Title: An evaluate on the effect of four chemicals on the infection of Peronosclerospora maydis causing downy mildew of maize Keywords: Peronosclerospora maydis, infection, acibenzolar-S-methyl, CaCl2, K2HPO4, salicylic acid Từ khóa: Peronosclerospora maydis, xâm nhập, acibenzolar-Smethyl, CaCl2, K2HPO4, salicylic acid ABSTRACT Studies on effects of chemical treatment into the infection of Peronosclerospora maydis causing downy mildew on maize plants were conducted under screenhouse and laboratory conditions Maize plants were treated by foliar spraying with either acibenzolar-S-methyl (100 ppm), CaCl2 (100 mM); K2HPO4 (100 mM) or Salicylic acid (7,5 mM) at the third leaf stage The results showed that CaCl2 (100 mM) had good effect on inhibiting of conidial germination and appressoria formation until 24 H.A.I and longer germtube at 12 H.A.I Whereas, acibenzolar-S-methyl (100 ppm) had inhibited conidial germination until 12 hours after inoculation (H.A.I) and high number of conidia with branched germtube at 12 and 24 H.A.I K2HPO4 (100 mM) had high number of conidia with germtube fomation, longer and branched germtube Salicylic acid (7,5 mM) had only shown high number of conidia forming germtube at 12 H.A.I TÓM TẮT Ảnh hưởng hóa chất xử lý đến xâm nhập nấm Peronosclerospora maydis gây bệnh sọc trắng bắp tiến hành điều kiện phòng thí nghiệm, nhà lưới Bắp xử lý phun lên giai đoạn có ba thật bằng: acibenzolar-S-methyl (100 ppm), CaCl2 (100 mM), K2HPO4 (100 mM) salicylic acid (7,5 mM) Kết cho thấy, CaCl2 (100 mM) ức chế bào tử nấm tốt thông qua ức chế nảy mầm, hình thành đĩa áp buộc nấm phải mọc ống mầm dài Acibenzolar-S-methyl (100 ppm) ức chế nảy mầm, buộc bào tử phân nhánh nhiều K2HPO4 (100 mM) ức chế nấm xâm nhập bào tử tạo ống mầm, phân nhánh nhiều chiều dài ống mầm lớn; salicylic acid (7,5mM) ức chế xâm nhập nấm qua tỉ lệ bào tử tạo nhiều ống mầm cao diện rộng gây nhiều tác hại nhiều tỉnh Nghệ An, Kom Tum, Tiền Giang, An Giang, Đồng Tháp, Vĩnh Long… (Ngọc Lâm cs., 2006) Tuy nhiên, thực tiễn nước ta chưa có biện pháp khống chế bệnh hữu hiệu Nghiên cứu trước cho thấy hố chất có khả kích thích tính kháng giảm bệnh bắp (Shericca cs , 1998) Tuy nhiên, chế GIỚI THIỆU Cây bắp đứng thứ III giới diện tích trồng chiếm khoảng ¼ tổng sản lượng mễ cốc giới (Dương Minh, 1999) Bắp trồng diện rộng nhiều vùng nước, mang lại giá trị kinh tế cao Tuy nhiên, năm gần bệnh sọc trắng bắp nấm Peronosclerospora maydis gây hại An Giang University Journal of Science – 2017, Vol 17 (5), – kích kháng nào, việc xử lý hoá chất ảnh hưởng đến xâm nhiễm nấm dẫn đến bệnh giảm chưa nghiên cứu Đó lý đề tài thực nhằm mục tiêu: Đánh giá ảnh hưởng bốn hóa chất xử lý đến xâm nhập nấm Peronosclerospora maydis gây bệnh sọc trắng bắp cs., 2006; Lê Thanh Toàn, 2005; Morris cs., 1998) * Cách tiến hành thí nghiệm - VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu - Thí nghiệm tiến hành giống bắp nếp nù (giống nhiễm bệnh sọc lá); Nguồn nấm gây bệnh sọc trắng bắp (Peronosclerospora maydis) thu thập ruộng bắp bệnh huyện Chợ Mới, tỉnh An Giang Các hóa chất thí nghiệm: acibenzolar-S-methyl (50 WG) (Bion WG ASM); dipotassium hydrogen phosphate (K2HPO4); salicylic acid; calcium chloride (CaCl2),… Xử lý kích kháng: Xử lý chất kích kháng cách phun bắp có thật với hóa chất nồng độ nêu Nghiệm thức đối chứng xử lý nước cất trùng Phun nấm lây nhiễm bệnh: Khi bắp có hoàn chỉnh, chọn thứ nở hoàn toàn, trải lên bề mặt bảng nhựa dùng dây cotton cố định bắp theo phương pháp Jǿrgensen cs (1998) Bào tử nấm thu trực tiếp từ bệnh, thực theo phương pháp Carwell cs (1997) phun huyền phù nấm với mật số 10 x 104 bào tử/ml máy phun tay * Cách thu mẫu xử lý mẫu Thí nghiệm thực điều kiện nhà lưới phòng thí nghiệm; bố trí theo thể thức hồn toàn ngẫu nhiên; gồm nghiệm thức lần lặp lại Các nghiệm thức gồm có: (1) Xử lý acibenzolar-S-metyl (100 ppm), (2) Xử lý K2HPO4 (100 mM), (3) Xử lý salicylic acid (7,5 mM), (4) Xử lý CaCl2 (100 mM) (5) Xử lý nước cất trùng (đối chứng) (Chaluvaraju cs., 2004; Trần Lê Trần Thị Kim Thúy, 2006; Trần Thị Thu Thủy Thu mẫu vào thời điểm 12 24 sau phun nấm lây nhiễm (GSP) Lá bắp thứ cắt cho vào đĩa petri có lót giấy thấm chứa ml dung dịch ethanol – acid acetic (tỉ lệ : 1) để tẩy diệp lục tố (Neergaard, 1997) Thay giấy thấm dung dịch ethanol – acid acetic ngày mẫu khơng màu xanh diệp lục tố Sau chuyển sang nước cất Cuối giữ mẫu dung dịch lactoglycerol (acid lactic + glycerol + nước cất với tỉ lệ : : 1) quan sát (Tran Thi Thu Thuy, 2002) A B 2.2 Phương pháp nghiên cứu Hình Mẫu trước tẩy diệp lục tố (A) sau tẩy diệp lục tố (B) An Giang University Journal of Science – 2017, Vol 17 (5), – * Cách quan sát ghi nhận tiêu - - Cách quan sát: quan sát cách nhuộm với dung dịch aniline blue (0,01%) xem kính hiển vi quang học - Số bào tử nảy mầm Tỉ lệ bào tử nảy mầm = Các tiêu ghi nhận: số lượng bào tử nảy mầm; số lượng bào tử có nhiều ống mầm; số lượng bào tử có ống mầm phân nhánh; chiều dài ống mầm; số lượng bào tử tạo đĩa áp Các thơng số cần tính: x 100 Số bào tử quan sát Tỉ lệ bào tử tạo nhiều ống mầm = Số bào tử tạo ống mầm Số bào tử tạo ống mầm phân nhánh Tỉ lệ bào tử tạo ống mầm phân nhánh = Tỉ lệ bào tử tạo đĩa áp = x 100 Số bào tử nảy mầm Số lượng bào tử nảy mầm Số bào tử tạo đĩa áp x 100 x 100 Số bào tử quan sát Số liệu tiêu theo dõi quản lý phần mềm Excel xử lý thống kê theo phần mềm SPSS 13 3.1 Ảnh hưởng việc xử lý kích kháng hóa chất đến nảy mầm bào tử nấm Peronosclerospora maydis KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN Quá trình quan sát nảy mầm bào tử nấm cho thấy, nấm Peronosclerospora maydis có khả nảy mầm nhiều vị trí khác (Hình 2) A B C Hình Các dạng nảy mầm bào tử nấm Peronosclerospora maydis (A: nảy mầm bào tử; B: nảy mầm đầu bào tử; C: nảy mầm đầu bào tử) An Giang University Journal of Science – 2017, Vol 17 (5), – Kết thí nghiệm ghi nhận Bảng cho thấy, thời điểm 12 sau phun nấm lây nhiễm (GSP), tỉ lệ nảy mầm bào tử nấm Peronosclerospora maydis thấp nghiệm thức xử lý CaCl2 (100 mM) ASM (100 ppm), thấp cách có ý nghĩa thống kê so với nghiệm thức đối chứng không xử lý Điều chứng tỏ rằng, CaCl2 (100 mM) acibenzolar-Smethyl (100 ppm) xử lý lên có khả ức chế nảy mầm bào tử nấm Peronosclerospora maydis thời điểm 12 GSP Ở thời điểm 24 GSP, nghiệm thức xử lý CaCl2 (100 mM) có tỉ lệ bào tử nảy mầm thấp cách có ý nghĩa so với nghiệm thức đối chứng Điều chứng tỏ rằng, CaCl2 (100 mM) xử lý lên có khả ức chế nảy mầm nấm Peronosclerospora maydis đến thời điểm 24 GSP Bảng Tỉ lệ (%) bào tử nấm Peronosclerospora maydis nảy mầm hai thời điểm Nghiệm thức Tỉ lệ bào tử nấm nảy mầm thời điểm (%) 12 GSP 24 GSP ASM (100 ppm) 56,7 b 61,3 ab CaCl2 (100 mM) 51,1 b 55,1 b K2HPO4 (100 mM) 62,7 ab 59,3 ab Salicylic acid (7,5 mM) 65,5 ab 55,0 ab Đối chứng 70,7 a 68,5 a * * 10,79 12,13 Mức ý nghĩa CV (%) Ghi chú: Trong cột, trung bình có mẫu tự theo sau không khác biệt mức ý nghĩa 5% qua phép thử Duncan ns: Không khác biệt; *: Khác biệt mức ý nghĩa 5% 3.2 Ảnh hưởng việc xử lý hóa chất đến số lượng ống mầm, phân nhánh ống mầm chiều dài trung bình ống mầm bào tử nấm Peronosclerospora maydis K2HPO4 (100 mM) acibenzolar-S-methyl (100 ppm) có tỉ lệ bào tử tạo ống mầm phân nhánh cao nghiệm thức không xử lý Ở thời điểm 24 GSP, nghiệm thức xử lý kích kháng acibenzolar-S-methyl (100 ppm) có tỉ lệ bào tử tạo ống mầm phân nhánh cao nghiệm thức đối chứng Kết tương tự với kết nghiên cứu Tran Thi Thu Thuy (2002) nấm Bipolaris oryzae lúa cho thấy rằng, tương tác bất tương hợp, phân nhánh ống mầm nấm thể mạnh tương tác tương hợp Nghiên cứu khác lúa mạch Jǿrgensen cs (1998) cho rằng, phần trăm bào tử nấm Drechslera teres có ống mầm phân nhánh nghiệm thức có xử lý kích kháng cao so với nghiệm thức khơng xử lý kích kháng Kết thí nghiệm ghi nhận Bảng cho thấy, nghiệm thức có xử lý K2HPO4 (100 mM) salicylic acid (7,5 mM) có tỉ lệ bào tử tạo nhiều ống mầm cao nghiệm thức đối chứng Kết ghi nhận tương tự nghiên cứu Jǿrgensen cs (1998) lúa mạch cho nghiệm thức có xử lý kích kháng, số lượng ống mầm trung bình bào tử nấm Drechslera teres cao so với nghiệm thức không xử lý kích kháng Xét phân nhánh ống mầm, kết Bảng cho thấy, 12 GSP nghiệm thức xử lý An Giang University Journal of Science – 2017, Vol 17 (5), – A B Hình Sự phân nhánh ống mầm bào tử nấm Peronosclerospora maydis A: Nghiệm thức có xử lý kích kháng acibenzolar-S-methyl; B: Nghiệm thức đối chứng Ghi nhận chiều dài trung bình ống mầm Bảng cho thấy, thời điểm 12 GSP, nghiệm thức xử lý CaCl2 (100 mM) có chiều dài trung bình ống mầm dài so với nghiệm thức đối chứng Ở thời điểm 24 GSP, nghiệm thức xử lý K2HPO4 (100 mM) có chiều dài trung bình ống mầm dài so với nghiệm thức đối chứng Kết nghiên cứu tương tự kết nghiên cứu Jǿrgensen cs (1998) lúa mạch cho rằng, nghiệm thức có xử lý kích kháng, chiều dài ống mầm trung bình bào tử nấm Drechslera teres dài so với nghiệm thức khơng xử lý kích kháng Các tượng giải thích nghiệm thức có kích kháng hay tương tác bất tương hợp, trồng có phản ứng làm bào tử nấm khó xâm nhiễm vào mơ nên ống mầm nấm phải phân nhánh thật nhiều tạo nhiều ống mầm phát triển dài để tìm đường công, xâm nhiễm vào Hơn nữa, bào tử nấm tạo nhiều ống mầm hay ống mầm phân nhánh dài làm giảm sức xâm nhiễm vào nấm lượng bị phân tán nhiều Bảng Tỉ lệ bào tử nấm Peronosclerospora maydis có nhiều ống mầm, tạo ống mầm phân nhánh chiều dài ống mầm bào tử hai thời điểm 12 24 GSP Nghiệm thức Tỉ lệ bào tử có nhiều ống mầm (%) Tỉ lệ bào tử nấm tạo ống mầm phân nhánh (%) Chiều dài trung bình ống mầm (µm) 12 GSP 24 GSP 12 GSP 24 GSP 12 GSP 24 GSP ASM (100 ppm) 5,7 ab 5,8 19,3 a 26,0 a 43,3 ab 58,1 ab CaCl2 (100 mM) 3,9 ab 3,8 14,3 ab 13,3 ab 59,3 a 54,3 ab K2HPO4 (100 mM) 6,7 a 4,7 20,0 a 19,3 ab 45,1 ab 80,6 a Salicylic acid (7,5 mM) 6,9 a 6,1 16,8 ab 15,3 ab 28,3 b 33,4 b Đối chứng 1,6 b 3,5 4,9 b 7,4 b 31,6 b 36,1 b * ns * * * * Mức ý nghĩa An Giang University Journal of Science – 2017, Vol 17 (5), – Nghiệm thức CV (%) Tỉ lệ bào tử nấm tạo ống mầm phân nhánh (%) Tỉ lệ bào tử có nhiều ống mầm (%) Chiều dài trung bình ống mầm (µm) 12 GSP 24 GSP 12 GSP 24 GSP 12 GSP 24 GSP 26,28 49,54 26,37 21,57 33,61 10,67 Ghi chú: Trong cột, trung bình có mẫu tự theo sau không khác biệt mức ý nghĩa 5% qua phép thử Duncan ns: Khơng khác biệt; *: Có khác biệt mức ý nghĩa thống kê α = 0,05 3.3 Ảnh hưởng việc xử lý kích kháng hóa chất đến tạo đĩa áp bào tử nấm Peronosclerospora maydis blue nhuộm; tạo nhiều vị trí khác (cuối ống mầm dọc theo ống mầm) Kết quan sát tương tự kết ghi nhận Mauch-Mani (1989) quan sát giai đoạn tiền xâm nhiễm nấm Peronosclerospora sorghi bề mặt bo bo Kết quan sát cho thấy, đĩa áp tạo có hình dạng tương đối khác (Hình 4) Đĩa áp tạo không màu, bắt màu xanh dung dịch anilin A B C Hình Sự tạo thành đĩa áp nấm Peronosclerospora maydis A; B: Đĩa áp hình thành dọc theo ống mầm, C: Đĩa áp hình thành cuối ống mầm (1998) cho rằng, phần trăm ống mầm tạo đĩa áp nghiệm thức đối chứng (không xử lý) cao so với nghiệm thức có xử lý kích kháng Kết chứng tỏ CaCl2 (100 mM) có khả ức chế tạo đĩa áp nấm Peronosclerospora maydis đến thời điểm 24 GSP Ở thời điểm 24 GSP, kết ghi nhận Bảng cho thấy, nghiệm thức xử lý kích kháng CaCl2 (100 mM) có tỉ lệ tạo đĩa áp thấp nghiệm thức đối chứng cách có ý nghĩa thống kê Kết tương tự nấm Drechslera teres gây hại lúa mạch ghi nhận nghiên cứu Jǿrgensen cs Bảng Tỉ lệ (%) bào tử nấm Peronosclerospora maydis tạo đĩa áp hai thời điểm 12 24 GSP Nghiệm thức Tỉ lệ bào tử nấm tạo đĩa áp (%) 12 GSP 24 GSP ASM (100 ppm) 1,5 2,7 ab CaCl2 (100 mM) 1,6 1,8 b K2HPO4 (100 mM) 3,3 4,7 a Salicylic acid (7,5 mM) 2,3 2,3 ab Đối chứng 3,7 5,0 a Mức ý nghĩa ns * An Giang University Journal of Science – 2017, Vol 17 (5), – Nghiệm thức CV (%) Tỉ lệ bào tử nấm tạo đĩa áp (%) 12 GSP 24 GSP 26,39 30,94 Ghi chú: Trong cột, trung bình có mẫu tự theo sau không khác biệt mức ý nghĩa 5% qua phép thử Duncan ns: Không khác biệt; *: Khác biệt mức ý nghĩa 5% Bên cạnh đó, kết ghi nhận Bảng cho thấy, đến thời điểm 12 GSP, bào tử nấm có tạo đĩa áp tất nghiệm thức Tuy nhiên, tỉ lệ tạo đĩa áp quan sát 24 GSP thấp nhiều so với loại nấm khác Ví dụ nấm Bipolaris oryza có tỉ lệ bào tử nấm tạo đĩa áp 12 sau phun 15,5% (ở tương tác tương hợp), 82,5% (ở tương tác bất tương hợp) 24 sau phun 45,4% (ở tương tác tương hợp), 76,0% (ở tương tác bất tương hợp) (Tran Thi Thu Thuy, 2002) Bào tử tạo đĩa áp ít, nhiên tỉ lệ diện tích nhiễm bệnh cao Điều chứng tỏ rằng, hình thức xâm nhiễm nấm Peronosclerospora maydis xảy nhiều hình thức khác nhau, xâm nhiễm đĩa áp khơng phải hình thức xâm nhiễm Điều phù hợp với kết nghiên cứu Mauch-Mani cs (1989) cho rằng, nấm Peronosclerospora xâm nhập vào trực tiếp qua lớp vách tế bào biểu bì có nếp lồi; hay nấm xâm nhập trực tiếp qua khí (khơng cần hình thành đĩa áp vòi xâm nhiễm) - - - 4.2 Đề nghị Tiếp tục khảo sát chế kích kháng acibenzolar-S-methyl (100 ppm), CaCl2 (100 mM), K2HPO4 (100 mM) salicylic acid (7,5 mM) khía cạnh mơ học sinh hóa hóa chất nồng độ có khả hạn chế bệnh sọc trắng bắp TÀI LIỆU THAM KHẢO Carwell, K F., J G Kling & C Bock (1997) Method for screening maize against downy mildew Peronosclerospora soghi Plant Breeding, 116, 221 – 226 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 Kết luận Chaluvaraju G., Basavaraju P., Shetty N P., S.Adeepak, Amruthesh K N., Shetty H S (2004) Effect of some phosphorous-based compounds on control of pearl millet downy mildew disease Crop Protection, 23(7), 595600 Việc phun chất acibenzolar-S-methyl (100 ppm), CaCl2 (100 mM), K2HPO4 (100 mM) salicylic acid (7,5 mM) có ảnh hưởng đến xâm nhập nấm Peronosclerospora maydis giai đoạn đầu Ảnh hưởng thể nảy mầm bào tử, phân nhánh, chiều dài ống mầm hình thành đĩa áp - CaCl2 (100 mM) có khả ức chế nảy mầm bào tử hai thời điểm, hình thành đĩa áp thời điểm 24 GSP chiều dài ống mầm dài 12 GSP Dipotassium hydrogen phosphate (100 mM) có khả cho bào tử có nhiều ống mầm, ống mầm phân nhánh nhiều 12 GSP chiều dài ống mầm dài 24 GSP Salicylic acid (7,5 mM) có khả cho bào tử có nhiều ống mầm 12 GSP Dương Minh (1999) Giáo trình Hoa Màu Đại học Cần Thơ Jǿrgensen H J L., P S Lǜbeck, H ThordalChristensen, E de Neergaard & V Smedegaard-Petersen (1998) Mechanisms of induced resistance in barley against Drechslera teres Phytopathology, 88 (7), 698 - 707 Acibenzolar-S-methyl (100 ppm) có khả ức chế nảy mầm bào tử 12 GSP tỉ lệ bào tử có ống mầm phân nhánh nhiều hai thời điểm quan sát An Giang University Journal of Science – 2017, Vol 17 (5), – Lê Thanh Toàn (2005) Khảo sát khả kích kháng số hoá chất bệnh thán thư nấm Colletotrichum lagenarium dưa leo Luận văn tốt nghiệp đại học Trường Đại học Cần Thơ Molecular Plant-Microbe Interactions, 11(7), 643 – 658 Trần Lê Trần Thị Kim Thúy (2006) Khảo sát số hóa chất có khả kích thích tính kháng bệnh thán thư nấm Colletotrichum sp cà chua (Licopersicon esculentum Mill.) Luận văn tốt nghiệp kỹ sư Nông Học Khoa Nông nghiệp & Sinh học Ứng dụng, Đại học Cần Thơ Mauch-Mani B., F J Schwinn & R Guggenheim (1989) Early infection stages of downy mildew fungi Sclerospora graminicola and Peronosclerospora sorghi in plants and cell cultures Mycological Reseach, 92(4), 445 452 Tran Thi Thu Thuy (2002) Infection biology of Bipolaris oryzae in rice and its pathogenic variation in the Mekong Delta, Vietnam Ph.D Thesis, Deparment of Plant Biology, Plant Pathology section, The Royal Veterinary and Agriculture University, Copenhagen, Denmark Morris W S., B Vernooij, S Titatarn, M Starrett, S Thomas, C C Wiltse, R A Frederiksen, A Bhandhufalck, S Hulbert and S Ukness (1998) Induced resistance responses in maize Molecular Plant-Microbe Interactions, 7: 643 - 658 Trần Thị Thu Thủy, Huỳnh Minh Châu, Trần Lê Trần Thị Kim Thúy (2006) Tuyển chọn hóa chất có khả kích kháng bệnh thán thư cà chua Hội thảo Kết nghiên cứu ứng dụng nguyên lý kích kháng quản lý bệnh hại trồng, Hội thảo dự án DANIDA-ENRECA, Trường Đại học Cần Thơ Neergaard E D (1997) Methods in Botanical Histopathology Danish Government Institute of Seed Pathology for Developing Countries Ngọc Lâm, Sơn Định & Minh Sáng (2006) Bắp không hạt - đâu nên nỗi Tạp chí Nơng Nghiệp Việt Nam, 154, 2479 Shericca W M., Bernard V., Somkiat T., Mark S., Steve T., Curtis C W., …Scott U (1998) ... xử lý hoá chất ảnh hưởng đến xâm nhiễm nấm dẫn đến bệnh giảm chưa nghiên cứu Đó lý đề tài thực nhằm mục tiêu: Đánh giá ảnh hưởng bốn hóa chất xử lý đến xâm nhập nấm Peronosclerospora maydis gây. .. giống bắp nếp nù (giống nhiễm bệnh sọc lá) ; Nguồn nấm gây bệnh sọc trắng bắp (Peronosclerospora maydis) thu thập ruộng bắp bệnh huyện Chợ Mới, tỉnh An Giang Các hóa chất thí nghiệm: acibenzolar-S-methyl... chloride (CaCl2),… Xử lý kích kháng: Xử lý chất kích kháng cách phun bắp có thật với hóa chất nồng độ nêu Nghiệm thức đối chứng xử lý nước cất trùng Phun nấm lây nhiễm bệnh: Khi bắp có hồn chỉnh,