Nghiên cứu sự giải phóng thuốc của vật liệu cellulose nạp diclofenac natri tạo ra từ gluconacetobacter xylinus nuôi cấy trong môi trường chuẩn

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN ===  === NGUYỄN THỊ HƯƠNG NGHIÊN CỨU SỰ GIẢI PHÓNG THUỐC CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE NẠP DICLOFENAC NATRI TẠO RA TỪ GLUCONACETOBACTER XYLINUS NUÔI CẤY TRONG MÔI TRƯỜNG CHUẨN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Sinh lý học người động vật HÀ NỘI - 2019 TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN ===  === NGUYỄN THỊ HƯƠNG NGHIÊN CỨU SỰ GIẢI PHÓNG THUỐC CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE NẠP DICLOFENAC NATRI TẠO RA TỪ GLUCONACETOBACTER XYLINUS NUÔI CẤY TRONG MƠI TRƯỜNG CHUẨN KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chun ngành: Sinh lý học người động vật Người hướng dẫn khoa học: Th.S Phạm Thị Kim Dung HÀ NỘI - 2019 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến ThS Phạm Thị Kim Dung hướng dẫn, bảo tận tình suốt thời gian thực nghiên cứu Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy cô khoa Sinh KTNN, đặc biệt thầy cô Viện Nghiên cứu Khoa học Ứng dụng trường Đại học Sư Phạm Hà Nội giúp đỡ tơi làm khóa luận Nhân dịp tơi xin cảm ơn bạn bè, gia đình bên, giúp đỡ suốt thời gian vừa qua Một lần xin chân thành cảm ơn gửi lời chúc tốt đẹp Hà Nội, ngày 20 tháng 05 năm 2019 Sinh viên Nguyễn Thị Hương LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan viết khóa luận thật Tất số liệu thu thập xử lí thống kê Viện Nghiên cứu Khoa học Ứng dụng trường Đại học Sư phạm Hà Nội 2, hoàn toàn khơng có chép trùng lặp với tài liệu Hà Nội, ngày 20 tháng 05 năm 2019 Sinh viên Nguyễn Thị Hương MỤC LỤC PHẦN MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu Nội dung nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn .3 PHẦN NỘI DUNG CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1.Màng VLC tạo từ Gluconacetobacter xylinus 1.1.1 Vi khuẩn Gluconacetobacter xylinus .4 1.1.1.1.Cây phân loại vi khuẩn Gluconacetobacter xylinus 1.1.1.2 Đặc điểm sinh học Gluconacetobacter xylinus 1.1.2 Cellulose vi khuẩn ( CVK ) .4 1.1.3 Môi trường nuôi cấy G xylinus 1.2 Thuốc Dicofenac natri 1.2.1.Công thức phân tử: C14H10Cl2NNaO2 1.2.2 Tính chất 1.2.3 Tác dụng dược lí chế tác dụng .6 1.2.4 Dược động học thuốc 1.2.5 Phân bố - chuyển hoá 1.2.6 Thải trừ 1.2.7 Chỉ định chống định 1.3 Lịch sử nghiên cứu vấn đề CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG, PHẠM VI VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu 2.1.1 Chủng vi khuẩn 2.1.2 Nguyên liệu hóa chất 2.1.3 Thiết bị dụng cụ 2.1.4 Môi trường lên men thu vật liệu CVK 10 2.1.5 Môi trường pH dùng để xác định lượng thuốc giải phóng thơng qua hệ thống thiết kế 12 2.2 Phương pháp nghiên cứu 12 2.2.1 Phương pháp dựng đường chuẩn thuốc Diclofenac natri .13 2.2.2 Tạo vật liệu BC nạp thuốc .14 2.2.3 Nghiên cứu giải phóng thuốc từ vật liệu CVK nạp thuốc 15 2.2.4 Phương pháp thống kê xử lý kết 16 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 17 3.1 Kết thu màng CVK 17 3.1.1 Màng CVK lên men từ môi trường chuẩn .17 3.1.2 Màng CVK nạp thuốc Diclofenac natri 18 3.2 Xác định lượng thuốc Diclofenac giải phóng khỏi màng CVK 18 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 28 TÀI LIỆU THAM KHẢO .29 DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Môi trường lên men tạo vật liệu CVK 10 Bảng 2.2 Bảng xây dựng đường chuẩn .13 Bảng 3.1 Khối lượng thuốc hấp thụ vào màng 18 Bảng 3.2 Giá trị OD thu thời điểm khảo sát tiến hành màng giữ nguyên với loại mơi trường giải phóng thuốc Diclofenac 20 Bảng 3.3 Giá trị OD thu thời điểm khảo sát tiến hành màng ép 50 % với loại mơi trường giải phóng thuốc Diclofenac 21 Bảng 3.4 Tỉ lệ giải phóng thuốc (%) màng chưa ép môi trường pH khác khoảng thời gian khác (n = 3) 24 Bảng 3.5 Tỉ lệ giải phóng thuốc (%) màng ép 50% môi trường pH khác khoảng thời gian khác (n = 3) 25 DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Quy trình tinh chế màng CVK .11 Hình 2.2 Phương trình đường chuẩn Diclofenac OD278 nm 14 Hình 3.1 Màng CVK thu ni cấy MTC sau ngày 17 Hình 3.2 Màng cho vào dung dịch đệm dùng máy khuấy từ gia nhiệt 19 Hình 3.3 Mẫu rút để đo OD sau khoảng thời gian 19 Hình 3.4 Biểu đồ thể khác mật độ quang lượng thuốc giải phóng loại màng nguyên khác môi trường khảo sát 23 Hình 3.5 Biểu đồ thể khác mật độ quang lượng thuốc giải phóng loại màng ép 50% khác môi trường khảo sát 23 PHẦN MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Một bệnh gây nhức nhối, đau đớn cho người bệnh không kể đến bệnh viêm khớp Căn bệnh xảy không người già mà xuất người trẻ tuổi Nguyên nhân gây bệnh người lớn tuổi thường thối hóa khớp, hệ trẻ tuổi nguyên nhân chủ yếu viêm đa khớp dạng thấp bệnh khớp tự miễn khác Vậy vấn đề đặt chữa trị bệnh này, liệu phương pháp có điều trị dứt điểm bệnh hay khơng Hiện nay, chưa có biện pháp chữa trị triệt để bệnh này, dừng mức giảm đau, cố gắng giúp hoạt động khớp trở lại gần giống mức bình thường, hạn chế bệnh tái hát nguy hiểm biến dạng khớp Mặt khớp xương có lớp sụn trơn, bóng đàn hồi, có tác dụng làm giảm cọ xát hai đầu xương Đây đối tượng để viêm xương khớp tác động, làm lớp sụn mòn đi, di chuyển hai đầu xương cọ sát vào gây đau đớn cho người bị mắc bệnh Nếu không điều trị kị thời dẫn đến việc sụn bị há hủy, hai đầu xương trực tiếp ma sát với gây khớp bị biến dạng xương bị dịch chuyển khỏi vị trí ban đầu Các vị trí thường hay bị viêm xương khớp đầu gối, bàn tay, đặc biệt xương cột sống Đối tượng cần ý dễ bị viêm khớp tuổi trung niên, người phải lao động nặng nhọc người có đặc điểm nghề nghiệp ngồi im chỗ, di chuyển[10] Do để lại hậu vô nghiêm trọng ảnh hưởng trực tiếp đến sinh hoạt thường ngày nên mắc chứng viêm khớp cần điều trị sớm tốt Một thuốc để điều trị viêm xương khớp phổ biến Diclofenac natri Thuốc Diclofenac biệt dược thuộc dẫn chất acid phenylacetic có khả chống viêm khơng steroid với công dụng hiệu chống viêm, giảm đau giảm sốt mạnh Thuốc Dicofenac sau sử dụng dung nạp dễ dàng thông qua đường tiêu hóa hấp thụ cách nhanh chóng sử dụng thuốc vào lúc đói Trong huyết tương nồng độ đạt mức tối đa sau tiếng hấp thu, nồng độ dịch bao hoạt dịch sau sử dụng thuốc từ đến tiếng đạt mức cao nhất[] Màng cellulose vi khuẩn (CVK) tạo từ vi khuẩn Gluconacerobacter xylinus có cấu trúc hóa học gần giống với cellulose thực vật có số tính chất ưu việt [1] khơng có kết hợp hợp chất cao phân tử ligin, hemicellulose, peptin sáp nến,… mà cấu thành từ sợi microfibrin, từ tạo nên bó sợi song song cấu thành mạng lưới cellulose với vượt bậc cellulose thực vật Ngồi CVK bền, sức căng lớn mạng lưới polymer sinh học dẻo dai, có khả giữ nước lớn đặc biệt màng kháng khuẩn[2] Nhờ ưu điểm mà màng CVK nhà khoa học quan tâm coi nguồn nguyên liệu nhiều lĩnh vực khác màng bọc thực phẩm, mặt nạ dưỡng da, màng phân tách q trình xử lí nước, lĩnh vực y học, màng CVK nghiên cứu ứng dụng trình điều trị bỏng, loét da,…[3] đáng ý hệ thống kiểm soát vận chuyển thuốc, kết cho thấy màng CVK giúp thuốc giải phóng cách kéo dài làm tăng hiệu sử dụng thuốc Với mục đích nghiên cứu để bổ sung dẫn chứng khả giải phóng thuốc Diclofenac natri vật liệu CVK, chọn đề tài: “Nghiên cứu giải phóng thuốc vật liệu cellulose nạp diclofenac natri tạo từ Gluconacetobacter xylinus nuôi cấy mơi trường chuẩn” Mục đích nghiên cứu Khảo sát Diclofenac natri giải phóng tốt điều kiện từ loại vật liệu CVK tạo từ Gluconacetobacter xylinus nuôi cấy môi trường chuẩn Đối tượng nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu: khả giải phóng thuốc Diclofenac natri màng Celluluse vi khuẩn lên men từ môi trường chuẩn Phạm vi nghiên cứu: thí nghiệm tiến hành phòng thí nghiệm R% = × 1+∑ =1 = −1 × ×100% (3) Trong đó: R : Tỉ lệ giải phóng thuốc (%) Ct: Nồng độ Diclofenac dung dịch thời điểm t V1: Thể tích dung dịch đệm giá trị pH khác n: Số lượng mẫu lấy từ dịch giải phóng V2: Thể tích dung dịch đệm thêm vào 2.2.4 Phương pháp thống kê xử lý kết Sử dụng hần mềm Excel 2010, số liệu nghiên cứu biểu diễn dạng số trung bình ± độ lệch chuẩn Số trung bình cộng giá trị trung bình lần thí nghiệm làm lặp lại Những khác biệt coi có ý nghĩa thống kê giá trị p < 0,05 16 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết thu màng CVK 3.1.1 Màng CVK lên men từ môi trường chuẩn Khi nuôi cấy G xylinus môi trường nuôi cấy, chúng sử dụng chất dinh dưỡng để sinh trưởng phát triển Sau khoảng thời gian, tùy vào mục đích sử dụng thí nghiệm mà ta thu màng CVK có độ dày mỏng khác Thường sau tuần màng có độ dày 0,5 cm sau tuần độ dày màng cm Hình 3.1 Màng CVK thu nuôi cấy MTC sau ngày 17 3.1.2 Màng CVK nạp thuốc Diclofenac natri Màng CVK sau làm sấy nhiệt độ yêu cầu 4h để loại bỏ nước sau cho vào bình tam giác chứa 100 ml dung dịch Diclofenac 5%, đặt bình cho vừa bể rung siêu âm, 37 độ C Sau khoảng thời gian 0,5h, 1h, 1,5h, 2h lấy dung dịch tiến hành đo OD nhờ máy đo quang phổ UV 245 để xác định có mg thuốc Diclofenac màng hấp thụ Theo số liệu thu ta thấy giá trị OD trung bình dung dịch thuốc có xu hướng giảm dần sau khoảng thời gian khảo sát độ dày màng tiến hành khảo sát gần khơng đổi sau nói lượng thuốc Diclofenac hấp thụ vào màng tăng dần qua khoảng thời gian đạt cực đại Khối lượng thuốc hấp thụ vào màng với độ dày khác thể bảng sau: Bảng 3.1 Khối lượng thuốc hấp thụ vào màng Khối lượng thuốc hấp thụ (mg) Màng chuẩn Màng giữ nguyên nước Màng ép 50% nước 22,7 ± 0,0018 22,9 ± 0,0026 22,4 ± 0,0025 22,5 ± 0,0027 3.2 Xác định lượng thuốc Diclofenac giải phóng khỏi màng CVK Sử dụng đệm pha trên, bình chứa 900ml đung dịch đệm, sau cho màng sau hấp thụ thuốc vào bình Dùng máy khuấy từ gia nhiệt, tốc độ khuấy 50 vòng/phút, nhiệt độ 37 độ C Sau khoảng thời gian 0,5h, 1h, 2h, 4h, 6h, 8h, 1h, 12h, 24h rút mẫu 5ml đo quang phổ, đồng thời bổ sung 5ml dung dịch đệm tương tự 18 Hình 3.2 Màng cho vào dung dịch đệm dùng máy khuấy từ gia nhiệt Hình 3.3 Mẫu rút để đo OD sau khoảng thời gian Kết mật độ quang thu thể bảng 3.2; 3.3 hình 3.4; 3.5 19 Bảng 3.2 Gía trị OD thu thời điểm khảo sát tiến hành màng giữ ngun với loại mơi trường giải phóng thuốc Diclofenac pH Thời gian(h) Độ Gía trị OD theo thời gian 0,5 10 12 24 0,068 ± 0,074 ± 0,103 ± 0,134 ± 0,159 ± 0,335 ± 0,476 0,582 ± ± 0,67 ± 0,005 0,001 0,007 0,008 0,008 0,018 0,022 0,01 0,035 0,096 ± 0,124 ± 0,177 ± 0,232 ± 0,279 ± 0,444 ± 0,57 ± 0,763 ± 0,989 ± 0,006 0,057 0,004 0,03 0,014 0,024 0,029 0,003 0,048 0,046 ± 0,077 ± 0,136 ± 0.148 ± 0,214 ± 0,556 ± 0,604 0,076 ± ± 0,048 ± 0,003 0,06 0,019 0,028 0,021 0,046 0,016 0,018 0,016 0,162 0,178 0,413 0,729 0,816 0,987 ± ± 0,315 ± ± ± 0,018 0,025 0,023 0,013 0,011 0,029 0,082 ± 0,143 ± 0,182 ± 0,304 ± 0,455 ± 0,716 ± 0,728 0,805 ± ± 0,908 ± 0,025 0,016 0,027 0,022 0,036 0,027 0,038 0,047 0,032 0,104 0,186 0,201 0,348 0,907 0,971 1,072 1,150 1,180 dày màng (cm) 0,5 0,5 4,5 0,075 ± 0,031 0,5 6,8 0,011 20 ± ± 1,032 ± 0,027 0,5 7,4 ± 0,028 ± 0,022 ± 0,016 ± 0029 ± 0,028 ± 0,009 ± 0,016 ± 0,014 ± 0,029 0,095 ± 0,145 ± 0,193 ± 0,306 ± 0,474 ± 0,737 ± 0,825 ± 0,904 ± 0,978 ± 0,016 0,023 0,029 0,044 0,045 0,011 0,022 0,036 0,018 0,103 ± 0,103 ± 0,184 ± 0,201 ± 0,365 ± 0,904 ± 0,986 ± 1,082 ± 1,150 ± 0,035 0,031 0,034 0,016 0,038 0,031 0,035 0,011 0,023 Bảng 3.3 Gía trị OD thu thời điểm khảo sát tiến hành màng ép 50 % với loại môi trường giải phóng thuốc Diclofenac Thời pH Gía trị OD theo thời gian gian (h) Độ dày màng (cm) 0,5 0,5 0,064 ± 0,5 4,5 1 0,084 0,104 ± 0,132 0,157 0,325 ± ± ± ± ± 0,022 0,01 0,035 ± 10 12 24 0,426 0,532 0,667 ± 0,005 0,001 0,007 0,008 0,008 0,018 0,086 ± 0,114 ± 0,157 ± 0,202 ± 0,249 ± 0,435 ± 0,57 ± 0,753 ± 0,988 ± 0,006 0,057 0,004 0,03 0,014 0,024 0,029 0,003 0,048 0,076 ± 0,097 ± 0,146 ± 0.158 ± 0,254 ± 0,586 ± 0,704 ± 0,075 ± 0,078 ± 0,003 0,06 0,019 0,028 0,021 0,046 0,016 0,018 0,016 0,095 0,152 0,178 0,317 0,433 0,739 0,817 0,997 1,052 21 0, 6,8 0,5 7,4 ± 0,031 ± 0,018 ± 0,025 ± 0,011 ± 0,023 ± 0,013 ± 0,011 ± 0,029 ± 0,027 0,092 ± 0,144 ± 0,192 ± 0,306 ± 0,475 ± 0,736 ± 0,828 ± 0,905 ± 0,938 ± 0,025 0,016 0,027 0,022 0,036 0,027 0,038 0,047 0,032 0,106 ± 0,188 ± 0,203 ± 0,368 ± 0,907 ± 0,981 ± 1,082 ± 1,152 ± 1,179 ± 0,028 0,022 0,016 0029 0,028 0,009 0,016 0,014 0,029 0,095 ± 0,145 ± 0,193 ± 0,306 ± 0,474 ± 0,737 ± 0,825 ± 0,904 ± 0,987 ± 0,016 0,023 0,029 0,044 0,045 0,011 0,022 0,036 0,018 0,107 ± 0,106 ± 0,186 ± 0,201 ± 0,365 ± 0,906 ± 0,986 ± 1,082 ± 1,156 ± 0,035 0,031 0,034 0,016 0,038 0,031 0,035 0,011 0,023 22 1.2 pH= 0,5cm 0.8 pH= 1cm 0.6 pH= 4,5 0,5cm pH=4,5 1cm 0.4 pH= 6,8 0,5cm pH= 6,8 1cm 0.2 pH= 7,4 0,5cm pH= 7,4 1cm 0.5 10 12 24 Hình 3.4 Biểu đồ thể khác mật độ quang lượng thuốc giải phóng loại màng giữ nguyên khác môi trường khảo sát 1.4 1.2 pH= 0,5cm pH= 1cm 0.8 pH= 4,5 0,5cm pH=4,5 1cm 0.6 pH= 6,8 0,5cm 0.4 pH= 6,8 1cm 0.2 pH= 7,4 0,5cm pH= 7,4 1cm 0.5 10 12 24 Hình 3.5 Biểu đồ thể khác mật độ quang lượng thuốc giải phóng loại màng ép 50% khác môi trường khảo sát Từ giá trị OD (y) trung bình bảng 3.2 3.3 thuốc Diclofenac tiến hành giải phóng từ màng CVK – Diclofenac, thay vào phương trình (1) (2) tính nồng độ Diclofenac tương ứng với khoảng thời gian Thay giá trị nồng độ Diclofenac vừa tính vào cơng thức (3) ta xác định tỉ lệ giải phóng thuốc Diclofenac màng CVK – Diclofenac độ dày, thời gian môi trường pH khác bảng 3.4 3.5 23 Bảng 3.4: Tỉ lệ giải phóng thuốc (%) màng giữ nguyên môi trường pH khác khoảng thời gian khác (n = 3) Tỷ lệ giải phóng thuốc theo thời gian pH Thời gian(h) Độ 0,5 10 12 24 10,24 ± 12,71 ± 13,82 ± 13,96 ± 14,73 ± 15,64 ± 16,55 17,60 17,98 ± ± ± 0,0082 0,0098 0,036 0,041 0,022 0,014 0,045 0,024 0,046 10,89 ± 13,27 ± 13,59 ± 14,60 ± 15,22 ± 16,61 ± 17,70 18,19 18,33 ± ± ± 0,0023 0,016 0,024 0,035 0,031 0,022 0,061 0,035 0,034 11,13 ± 12,35 ± 12,78 ± 13,67 ± 14,09 ± 15,33 ± 15,49 16,82 17,98 ± ± ± 0,0061 0,043 0,041 0,029 0,008 0,036 0,037 11,36 ± 13,81 ± 14,53 ± 14,94 ± 16,00 ± 16,48 ± 17,57 18,13 18,81 ± ± ± 0,045 0,019 0,025 0,024 0,011 0,017 0,044 0,034 0,042 12,54 ± 13,26 ± 13,82 ± 15,26 ± 16,22 ± 17,11 ± 17,47 17,71 19,58 ± ± ± 0,018 0,024 0,031 0,031 0,014 0,028 0,022 0,026 0,011 12,81 ± 16,00 ± 16,71 ± 17,03 ± 17,74 ± 18,34 ± 18,71 19,43 19,78 ± ± ± 0,036 0,025 0,039 0,011 0,021 0,009 0,036 0,022 0,041 dày màng (cm) 0,5 0,5 4,5 0,5 6,8 24 0,02 0,026 0,5 7,4 11,28 ± 13,26 ± 13,61 ± 13,83 ± 15,63 ± 16,19 ± 16,35 16,78 18,87 ± ± ± 0,044 0,019 0,022 0,017 0,015 0,035 0,012 0,036 0,029 11,81 ± 14,87 ± 15,30 ± 16,86 ± 16,95 ± 17,03 ± 17,65 18,01 19,02 ± ± ± 0,014 0,022 0,016 0,023 0,024 0,046 0,044 0,028 0,037 Bảng 3.5 Tỉ lệ giải phóng thuốc (%) màng ép 50% môi trường pH khác khoảng thời gian khác (n = 3) pH Thời gian (h) Độ dày Tỷ lệ giải phóng thuốc theo thời gian 0,5 10 12 24 10,26 ± 12,34 ± 12,78 ± 13,21 ± 13,62 ± 14,23 ± 15,97 ± 16,24 ± 16,98 ± 0,035 0,034 0,034 0,018 0,022 0,027 0,034 0,021 0,041 11,24 ± 12,47 ± 12,97 ± 13,79 ± 14,69 ± 15,92 ± 16,88 ± 17,08 ± 17,81 ± 0,01 0,015 0,042 0,37 0,046 0,022 0,047 0,043 0,024 11,03 ± 11,20 ± 11,77 ± 12,7 ± 13,53 ± 14,54 ± 15,41 ± 16,92 ± 17,69 ± 0,016 0,022 0,019 0,028 0,021 0,046 0,016 0,018 0,016 12,22 ± 13,18 ± 13,91 ± 14,56 ± 16,14 ± 16,51 ± 17,39 ± 18,49 ± 18,64 ± 0,031 0,018 0,025 0,011 0,023 0,013 0,011 0,029 0,027 màng (cm) 0,5 0,5 4,5 25 0,5 6,8 0,5 7,4 11,37 ± 12,53 ± 13,41 ± 14,24 ± 15,07 ± 15,39 ± 16,25 ± 17,98 ± 18,02 ± 0,025 0,016 0,027 0,022 0,036 0,027 0,038 0,047 0,032 12,09 ± 13,31 ± 14,85 ± 16,33 ± 17,35 ± 18,5 ± 18,30 ± 18,52 ± 19,31 ± 0,028 0,022 0,016 0029 0,028 0,009 0,016 0,014 0,029 10,81 ± 12,21 ± 12,72 ± 13,04 ± 14,68 ± 15,96 ± 17,22 ± 17,27 ± 17,31 ± 0,016 0,023 0,029 0,044 0,045 0,011 0,022 0,036 0,018 11,64 ± 13,91 ± 14,70 ± 15,47 ± 16,08 ± 16,55 ± 17,26 ± 17,64 ± 18,77 ± 0,35 0,031 0,034 0,016 0,038 0,031 0,035 0,011 0,023 Từ số liệu bảng 3.4 3.5 cho thấy khả giải phóng thuốc loại màng loại môi trường khoảng thời gian khác Dễ nhận thấy tỉ lệ giải phóng thuốc có xu hướng tăng dần, theo kết thu môi trường đệm pH = 2; 4,5 7,4 màng có khả giải phóng thuốc khơng tốt màng pH = 6,8 Ở pH = 2, thuốc Diclofenac giải phóng khỏi màng CVK dày 0,5cm đạt lớn 24 h, lên tới 17,98% màng không ép, 16,98% màng ép 50% màng dày 1cm đạt lớn 24 h, lên tới 18,33% màng không ép, 17,81% màng ép 50% Vậy pH = 2, màng không ép có tỉ lệ giải phóng cao hơn, thuốc màng CVK 1cm giải phóng nhiều màng 0,5cm Ở pH = 4,5, thuốc Diclofenac giải phóng khỏi màng CVK dày 0,5cm đạt lớn 24 h, lên tới 17,98% màng không ép, 17,69% màng ép 50% màng dày 1cm đạt cực đại 24 h, đạt 18,81% màng không ép, lên tới 18,64% màng ép 50% Vậy pH = 4,5 màng khơng ép có tỉ lệ giải phóng cao hơn, CVK 1cm có khả giải phóng thuốc tốt màng 0,5cm 26 Ở pH = 6,8 tỷ lệ giải phóng thuốc màng CVK dày 0,5cm đạt lớn 24 h, đạt 19,58% màng không ép, 18,02% màng ép 50% màng dày 1cm đạt cực đại 24 h, đạt 19,78% màng không ép, 19,31% màng ép 50% Vậy pH = 6,8 màng không ép có tỉ lệ giải phóng cao hơn, CVK 1cm có khả giải phóng thuốc tốt màng 0,5cm Tương tự pH = 7,4 màng khơng ép có tỉ lệ giải phóng cao hơn, màng CVK 1cm có khả giải phóng thuốc tốt màng 0,5cm So sánh giá trị tỉ lệ trung bình cơng cụ Data analysis với mức ý nghĩa α = 0.05, thu kết P < 0.05 có nghĩa sai khác tỉ lệ giải phóng thuốc sau 24 h loại màng có ý nghĩa thống kê Vậy pH = 6,8 màng CVK 1cm có khả giải phóng thuốc tốt màng CVK 0,5cm Tại pH = 6,8, tỉ lệ thuốc Diclofenac giải phóng từ màng CVK cao Nếu khơng có màng CVK làm hệ thống vận tải thuốc Diclofenac thuốc dễ tan dày có mơi trường axit dịch dày tiết ra, sinh khả dụng thuốc Diclofenac thể 50 – 60% nửa đời thải trừ thuốc 3-6 Như ta dùng màng BC làm hệ thống giải phóng thuốc Diclofenac qua đường uống, giúp thuốc giải phóng kéo dài, tăng hiệu sử dụng thuốc 27 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Từ kết đạt nghiên cứu, rút kết luận sau: Lượng thuốc giải phóng khỏi màng CVK có xu hướng tăng dần đạt mức tối đa sau 24 Trong mơi trường pH khảo sát pH 6,8 thuốc giải phóng khỏi màng nhiều Ở độ dày màng thuốc giải phóng tốt cm Giữa màng nguyên màng chuẩn ép 50% ta nhận thấy thuốc màng nguyên giải phóng nhiều so sới loại màng lại Kiến nghị Tiến hành thực nghiệm đối tượng động vật Nghiên cứu ứng dụng khác màng CVK 28 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Đặng Thị Hồng, Phân lập, tuyển chọn nghiên cứu số đặc tính sinh học vi khuẩn Acetobacter xylinum chế tạp màng sinh học (BC) Luận văn thạc sỹ Sinh học ĐHSP Hà Nội, 2007 Nguyễn Thị Nguyệt, Nghiên cứu vi khuẩn Acetobacter xylinum cho màng Bacterial Cellulose làm mặt nạ dưỡng da Luận án thạc sỹ Sinh học Đại học Sư phạm Hà Nội, 2008 Nguyễn Văn Thanh, Đề tài cấp (2006), “Nghiên cứu chế tạo màng cellulose trị bỏng từ Acetobacter xylinum”, Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh Đinh Thị Kim Nhung Nghiên cứu số đặc điểm sinh học vi khuẩn Acetobacter ứng dụng chúng lên men axetic theo phương pháp chìm Luận án phó tiến sỹ khoa học sinh học, 1996 Huỳnh Thị Ngọc Lan, Nguyễn Văn Thanh, Nghiên cứu đặc tính màng cellulose vi khuẩn từ Acetobacter xylinum sử dụng làm màng trị bỏng Tạp chí Dược học số 361/2006, trang 18 - 20 banthuoc.com.vn tailieu.vn 10 www.egiadinh.com 11 medjoint.com.vn 12.https://www.google.com.vn/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=4 &cad=rja&uact=8&ved=2ahUKEwjoudzo8KniAhVLPHAKHVbsC30QFjADeg QIARAB&url=https%3A%2F%2Fhellobacsi.com%2Fthuoc%2Fdiclofenac%2F &usg=AOvVaw0PXJxQE9rqWezepqsWEv7P 29 13 Cao đẳng Dược T Hồ Chí Minh, Tác dụng thuốc Diclofenac natri (2008) 14 Dược điển Việt Nam (2009), xuất lần IV, trang 20 (205) Tài liệu tiếng Anh Brown E Bacterial cellulose Themoplastic polymer nanocomposites Master of sience in chemical engineering Washington state university, 2007 Pinto R.J et al (2009), “Antibacterial activity of nanocomposites of silver and bacterial or vegetable cellulosic fibers”, Acta Biomater, 5, 2279–2289 30 ... tài: Nghiên cứu giải phóng thuốc vật liệu cellulose nạp diclofenac natri tạo từ Gluconacetobacter xylinus nuôi cấy mơi trường chuẩn Mục đích nghiên cứu Khảo sát Diclofenac natri giải phóng. .. phóng tốt điều kiện từ loại vật liệu CVK tạo từ Gluconacetobacter xylinus nuôi cấy môi trường chuẩn Đối tượng nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu: khả giải phóng thuốc Diclofenac natri màng Celluluse...TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN ===  === NGUYỄN THỊ HƯƠNG NGHIÊN CỨU SỰ GIẢI PHÓNG THUỐC CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE NẠP DICLOFENAC NATRI TẠO RA TỪ GLUCONACETOBACTER XYLINUS NUÔI