Nghiên cứu thành phần loài và quan hệ di truyền của giống rắn khuyết lycodon (squamata colubridae) ở việt nam

VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAMVIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT NGUYỄN VĂN TÂN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN LOÀI VÀ QUAN HỆ DI TRUYỀN CỦA GIỐNG RẮN KHUYẾT LYCODON SQUAMATA: COL

VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM

VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT

NGUYỄN VĂN TÂN

NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN LOÀI VÀ QUAN HỆ

DI TRUYỀN CỦA GIỐNG RẮN KHUYẾT LYCODON

(SQUAMATA: COLUBRIDAE) Ở VIỆT NAM

LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC

Hà Nội – 2018

VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM

VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT

NGUYỄN VĂN TÂN

NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN LOÀI VÀ QUAN HỆ

DI TRUYỀN CỦA GIỐNG RẮN KHUYẾT LYCODON

(SQUAMATA: COLUBRIDAE) Ở VIỆT NAM

Chuyên ngành: Động vật học

Mã số: 8 42 01 03

LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC

Người hướng dẫn khoa học:

PGS.TS NGUYỄN QUẢNG TRƯỜNG

Hà Nội - 2018

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi Các kết quả nêutrong luận văn là trung thực, các số liệu tham khảo đều có nguồn trích dẫn rõ ràng.Luận văn này chưa từng được bảo vệ để nhận học vị trước bất kỳ hội đồng nàotrước đây

Tác giả

Nguyễn Văn Tân

LỜI CẢM ƠN

Tôi xin dành lời cảm ơn đặc biệt tới PGS TS Nguyễn Quảng Trường đã tận tìnhhướng dẫn và giúp đỡ tôi trong quá trình khảo sát thực địa, phân tích số liệu, công bốcông trình khoa học và hoàn thiện luận văn

Xin trân trọng cảm ơn TS Phạm Thế Cường, CN Phan Quang Tiến (Viện Sinhthái và Tài nguyên sinh vật), TS Nguyễn Thiên Tạo, ThS Ngô Ngọc Hải (Bảo tàngThiên nhiên Việt Nam), PGS TS Lê Đức Minh, CN Ngô Thị Hạnh (Trường Đại họcKhoa học tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội), TS Lưu Quang Vinh (Đại học Lâmnghiệp), TS Lê Trung Dũng (Trường Đại học Sư phạm Hà Nội), TS Phạm Văn Anh(Trường Đại học Tây Bắc), TS Hoàng Văn Ngọc (Trường Đại học Sư phạm, Đại họcThái Nguyên), TS Đỗ Trọng Đăng (Trường Đại học Phú Yên), TS Dương Đức Lợi(Trường Đại học Sư phạm, Đại học Huế), ThS Đỗ Văn Thoại (Trường Đại học Vinh),

GS TS Thomas Ziegler (Vườn thú Cologne, CHLB Đức), GS TS Wayne VanDevender và ThS Nguyễn Vũ Khôi (Tổ chức Bảo vệ Động vật hoang dã WAR), ôngMax Ryan (Australia), ông Nguyễn Ngọc Xuân Huy (Đồng Nai) cùng các đồng nghiệp

đã hỗ trợ trong quá trình khảo sát thực địa, cung cấp hình ảnh và số liệu của luận văn.Xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo Viện Sinh thái và Tài nguyên sinh vật,Phòng Động vật học có xương sống (Hà Nội) và Trung tâm Bảo tồn động vật hoang dãViệt Nam (SVW, Ninh Bình) đã tạo điều kiện thuận lợi cho tôi học tập và nghiên cứu.Tôi xin cảm ơn Ban lãnh đạo Chi cục Kiểm lâm các tỉnh Nghệ An, Thừa Thiên-Huế và Cà Mau, các Vườn quốc gia Pù Mát, Khu Bảo tồn thiên nhiên Sao La và HạtKiểm lâm huyện Ngọc Hiển cùng các cán bộ kiểm lâm đã cung cấp thông tin, tạo điềukiện thuận lợi cho tôi trong quá trình khảo sát thực địa

Xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình và những người thân đã hết lòng giúp đỡ,động viên tôi trong quá trình thực hiện đề tài và hoàn thành luận văn

Nghiên cứu này được tài trợ bởi Quỹ Phát triển khoa học và công nghệ Quốc gia(NAFOSTED) trong đề tài mã số 106.05-2017.329 Khảo sát thực địa nhận được hỗtrợ một phần của Đề tài nghiên cứu khoa học và công nghệ độc lập cấp quốcgia “Nghiên cứu xây dựng mô hình bảo tàng thiên nhiên-văn hóa mở khu dự trữ sinhquyển tây Nghệ An, mã số ĐTĐLXH.19/15 do Bộ Khoa học và Công nghệ tài trợ

Hà Nội, tháng 9 năm 2018

Nguyễn Văn Tân

Cộng sựAxit đêôxi ribônuclêicBảo tàng thực địa lịch sử tự nhiên, Chicago, Hoa KỳViện Sinh thái và Tài nguyên sinh vật

Tổ chức Bảo tồn Thiên nhiên Quốc tếKhu Bảo tồn thiên nhiên

Bảo tàng lịch sử tự nhiên, Đại học KansasĐại học La Sierra, Hoa Kỳ

Đại học bang Louisiana, Hoa KỳGiá trị lớn nhất

Giá trị nhỏ nhấtBảo tàng lịch sử tự nhiên Quốc gia, Paris, PhápBảo tàng lịch sử tự nhiên, Stockholm, Thụy Điển

Mã mẫu vật được thu thập bởi Peng Guo (Trung Quốc)Trường Đại học Phú Yên

Trường Đại học Tây BắcTrường Đại học Sư phạm Thái Nguyên, Đại học Thái NguyênTrường Đại học Lâm nghiệp

Bảo tàng Thiên nhiên Việt Nam Vườn Quốc gia

Trường Đại học VinhBảo tàng nghiên cứu động vật Alexander Koening, CHLB ĐứcCon đực

Con cái

MỤC LỤC

MỞ ĐẦU 1

1 Tính cấp thiết của đề tài 1

2 Mục tiêu 2

3 Nội dung nghiên cứu 3

4 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn 3

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4

1.1 Lược sử nghiên cứu về bò sát ở Việt Nam 4

1.2 Lược sử nghiên cứu về giống Lycodon 6

1.2.1 Trên thế giới 6

1.2.2 Ở Việt Nam 9

1.3 Khái quát về điều kiện tự nhiên ở Việt Nam 10

1.3.1 Địa hình 10

1.3.2 Khí hậu 11

1.3.3 Thủy văn 12

1.3.4 Thảm thực vật 12

CHƯƠNG 2 THỜI GIAN, ĐỊA ĐIỂM, PHƯƠNG PHÁP VÀ TƯ LIỆU NGHIÊN CỨU 13

2.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu 13

2.2 Phương pháp nghiên cứu 15

2.2.1 Khảo sát thực địa 15

2.2.2 Phân tích đặc điểm hình thái 15

2.2.3 Phân tích sinh học phân tử 19

2.3 Tư liệu nghiên cứu 20

CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 21

3.1 Thành phần loài của giống Lycodon ở Việt Nam 21

3.1.1 Danh sách các loài Lycodon ghi nhận ở Việt Nam 21

3.1.2 Đặc điểm hình thái các loài Lycodon ở Việt Nam 23

3.2 Quan hệ di truyền giữa các quần thể và các loài Lycodon 58

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 65

CÁC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN VĂN 66

TÀI LIỆU THAM KHẢO i PHỤ LỤC

DANH MỤC BẢNG

Bảng 1.1 Bảng số liệu sinh khí hậu một số tỉnh đa thu mẫu Lycodon ở Việt

Nam 11Bảng 2.1 Thời gian và địa điểm khảo sát thực địa 13Bảng 2.2 Các chỉ tiêu phân tích hình thái 17Bảng 2.3 Cặp mồi sử dụng trong nghiên cứu quan hệ di truyền của giống

Lycodon 19

Bảng 3.1 Danh sách các loài Lycodon ghi nhận ở Việt Nam 22

Bảng 3.2 Thông tin các trình tự gen sử dụng trong nghiên cứu 58

Bảng 3.3 Khoảng cách di truyền của một số loài Lycodon dùng trong nghiên

cứu 62

DANH MỤC HÌNH

Hình 2.1 Địa điểm thu thập mẫu vật các loài Lycodon ở Việt Nam 14

Hình 2.2 Vị trí các vảy trên đầu của rắn .16

Hình 2.3 Vị trí vảy mặt lưng và bụng của rắn 17

Hình 3.1 Lycodon capucinus - Rắn khuyết mũ .48

Hình 3.2 Lycodon cardamomensis - Rắn khuyết car da mom .48

Hình 3.3 Lycodon davisonii - Rắn dẻ 49

Hình 3.4 Lycodon fasciatus - Rắn khuyết đốm 49

Hình 3.5 Lycodon futsingensis - Rắn khuyết fut sing 50

Hình 3.6 Lycodon laoensis - Rắn khuyết lào 50

Hình 3.7 Lycodon meridionalis - Rắn lệch đầu kim tuyến .50

Hình 3.8 Lycodon paucifasciatus - Rắn khuyết ít đốm 51

Hình 3.9 Lycodon rosozonatus - Rắn lệch đầu hồng 51

Hình 3.10 Lycodon rufozonatus - Rắn lệch đầu hoa 51

Hình 3.11 Lycodon ruhstrati - Rắn khuyết đài loan 52

Hình 3.12 Lycodon septentrionalis - Rắn lệch đầu thẫm 52

Hình 3.13 Lycodon subcinctus - Rắn khuyết đai .52

Hình 3.14 Lycodon sp1 53

Hình 3.15 Lycodon sp2 53

Hình 3.16 Phân bố của các loài: a) Lycodon capucinus, b) L cardamomensis, c) L davisonii, d) L fasciatus ở Việt Nam 54

Hình 3.17 Phân bố của các loài: a) Lycodon futsingensis, b) L laoensis, c) L meridionalis, d) L paucifasciatus ở Việt Nam 55

Hình 3.18 Phân bố của các loài: a) Lycodon rosozonatus, b) L rufozonatus, c) L ruhstrati và d) L septentrionalis ở Việt Nam 56

Hình 3.19 Phân bố của các loài: a) L subcinctus, b) Lycodon sp1 và c) Lycodon sp2 ở Việt Nam 57

Hình 3.20 Cây quan hệ di truyền của các loài thuộc giống Lycodon bằng phương pháp Bayesian 60

Giống Rắn khuyết (Lycodon Fitzinger, 1826) thuộc phân họ Rắn nước

(Colubrinae), họ Rắn nước (Colubridae), phân bộ Rắn (Serpentes), bộ Có vảy

(Squamata), lớp Bò sát (Reptilia) Giống Lycodon là một trong những giống đa dạng

nhất của phân bộ Rắn với 58 loài, phân bố rộng từ phía đông Iran tới miền Nam TrungQuốc, Nhật Bản, quần đảo Phi-lip-pin và quần đảo Ấn-Úc [64], [72], [73] Giống

Lycodon đặc trưng bởi các đặc điểm sau: xương hàm trên hơi cong vào bên trong về

phía trước; răng hàm trên chia nhóm cách nhau bởi những khoảng trống: nhóm đầu từ3-6 răng kích thước lớn dần về phía sau, nhóm ở giữa 7-15 răng có kích thước nhỏ vànhóm sau cùng có 2-3 răng có kích thước lớn; mắt tròn, con ngươi hình bầu dục đứng;vảy thân từ 15-19 hàng, có gờ hoặc nhẵn, vảy giữa lưng không lớn; tấm hậu môn chia

đôi hoặc đơn [28], [30], [35], [58] Các loài trong giống Lycodon có đặc điểm hình thái

rất giống nhau và khó để định loại chính xác nên được coi là nhóm phức tạp về phânloại học Theo kết quả nghiên cứu về phát sinh chủng loại của Guo và cs (2013), Siler

và cs (2013), Pyron và cs (2013), Figueroa và cs (2016), Wostl và cs (2017) các loài

thuộc 4 giống: Cercaspis Wagler, 1830; Dinodon Bibron & Duméril, 1854;

Dryocalamus Günther, 1858; Lepturophis Boulenger, 1900 có mối quan hệ di truyền

gần gũi với các loài thuộc giống Lycodon và đã đề xuất chuyển tất cả các loài của 4 giống trên thuộc giống Lycodon [27], [30], [55], [57], [73] Trong số 58 loài Lycodon,

có 35 loài ghi nhận phân bố ở khu vực Đông Nam Á, 16 loài ghi nhận phân bố ở khuvực Đông Dương và 13 loài ghi nhận phân bố ở Việt Nam [43], [64], [72] Vogel và

cs (2009) mô tả mới loài Lycodon ophiophagus và phân loài L ruhstrati abitus của loài Lycodon ruhstrati (Fischer 1886), đồng thời công nhận Lycodon

futsingensis (Pope, 1928) là một loài có hiệu lực [67] Vogel & David (2010) mô tả

mới loài Lycodon synaptor ở Trung Quốc, đây là loài có đặc điểm hình thái với loài

Lycodon fasciatus [68] Vogel & Luo (2011) mô tả mới loài Lycodon gongshan ở

Trung Quốc, đây là loài có đặc điểm hình thái rất giống với loài Lycodon fasciatus [70] Vogel và cs (2012) mô tả mới loài Lycodon davidi ở Lào, đây là loài có đặc điểm hình thái rất giống với loài Lycodon ruhstrati [71] Wostl và cs (2017) mô tả mới loài Lycodon sidiki ở In-đô-nê-xi-a, đây là loài có đặc điểm hình thái rất giống với loài Lycodon subcinctus [73] Loài Lycodon paucifasciatus Rendahl trong Smith

(1943) được mô tả ở tỉnh Thừa Thiên-Huế, Việt Nam có 19 hàng vảy thân nhưng chođến nay chưa có mẫu vật nào được tìm lại tại địa điểm thu mẫu chuẩn và các mẫu vậtsau này đều ghi nhận chỉ có 17 hàng vảy thân hoặc 19 hàng vảy quanh cổ [58, 68] Ghi

nhận phân bố của 2 loài: Lycodon rosozonatus (Hu & Zhao, 1972) và L rufozonatus

Cantor, 1842 ở Việt Nam cũng chưa rõ ràng do vậy các ghi nhận phân bố trước đâycần phải được kiểm định lại trên mẫu vật [43], [87]

Như vậy cho đến thời điểm hiện tại ở Việt Nam, nghiên cứu phân loại và quan

hệ di truyền của các loài Lycodon còn rất hạn chế, vị trí phân loại, ghi nhận phân bố

của một số loài chưa rõ ràng Chính vì vậy học viên thực hiện đề tài “Nghiên cứu thành phần loài và quan hệ di truyền của giống Rắn khuyết Lycodon (Squamata: Colubridae) ở Việt Nam”.

2 Mục tiêu

- Xác định được thành phần loài Rắn khuyết Lycodon ghi nhận ở Việt Nam

- Đánh giá được mối quan hệ di truyền của các loài và giữa các quần thể Rắn

khuyết Lycodon dựa trên mẫu vật thu được ở Việt Nam.

3 Nội dung nghiên cứu

Nội dung 1: Đánh giá đa dạng loài

- Cập nhật danh lục và ghi nhận phân bố của các loài Rắn khuyết Lycodon ở

Việt Nam

- Phân tích, mô tả và so sánh đặc điểm hình thái của các loài Rắn khuyết

Lycodon dựa trên bộ mẫu vật mới thu thập ở Việt Nam.

Nội dung 2: Đánh giá quan hệ di truyền giữa một số loài Rắn khuyết Lycodon.

- So sánh sự sai khác về di truyền giữa các loài và quần thể của một số loài Rắn

khuyết Lycodon có vùng phân bố rộng thông qua phân tích trình tự đoạn gen ty thể

(Cyt-b)

- Xây dựng cây quan hệ di truyền giữa các loài và giữa các quần thể dựa trên

giải trình tự các mẫu vật Rắn khuyết Lycodon mới thu thập ở Việt Nam và các trình tự

đã công bố trên ngân hàng gen

4 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn

Ý nghĩa khoa học: Đề tài nghiên cứu đã cung cấp thông tin cập nhật, nhữngphát hiện mới và dữ liệu về đặc điểm hình thái, quan hệ di truyền của giống Rắn

khuyết Lycodon ở Việt Nam, bao gồm:

- Đã cập nhật thông tin về thành phần loài và đặc điểm phân bố của 15 loài Rắn

khuyết Lycodon ở Việt Nam, trong đó ghi nhận bổ sung địa điểm phân bố của 11 loài Rắn khuyết Lycodon ở Việt Nam.

- Đã cung cấp thông tin về đặc điểm hình thái và sinh thái với dữ liệu từ mẫuvật mới thu thập

- Đã đánh giá quan hệ di truyền của các loài Rắn khuyết Lycodon ở Việt Nam.

Ý nghĩa thực tiễn: Kết quả của đề tài cung cấp cơ sở khoa học cho việc quy

hoạch và quản lý bảo tồn đa dạng sinh học các loài Rắn khuyết Lycodon ở Việt Nam.

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Lược sử nghiên cứu về bò sát ở Việt Nam

Theo Nguyễn Văn Sáng và cs (2009), lịch sử nghiên cứu bò sát ở Việt Namchia ra 4 thời kỳ: trước năm 1954, từ năm 1954 đến năm 1974, từ năm 1975 đến năm

1986 và từ năm 1987 đến nay [8] Có hai hướng nghiên cứu chính là nghiên cứu vềkhu hệ (đa dạng thành phần loài của các khu vực, phát hiện loài mới, đặc điểm phân

bố của các loài) và nghiên cứu về đặc điểm sinh học, sinh thái của một số loài đặc hữu,quý hiếm hoặc có giá trị kinh tế phục vụ cho công tác bảo tồn và nhân nuôi [8]

Năm 2005, Nguyễn Văn Sáng và cs ghi nhận 258 loài bò sát, số lượng loài tănglên 368 loài vào năm 2009 và lên tới khoảng 430 loài vào năm 2018 [6], [43], [64].Chỉ tính riêng trong 5 năm trở lại đây có tới hơn 40 loài bò sát mới được công bố hoặcghi nhận mới tại Việt Nam [64] Số lượng loài tăng lên nhanh chóng và những pháthiện mới chứng tỏ khu hệ bò sát của Việt Nam khá đa dạng và cần tiếp tục nghiên cứu

kỹ lưỡng hơn

Về nghiên cứu và định loại phân bộ Rắn ở Châu Á trong đó có nhiều loài phân

bố ở Việt Nam có các tài liệu kinh điển như Günther (1864) về rắn của Ấn Độ [29];Pope (1935) về rắn của Trung Quốc [53]; Bourret (1936) về rắn ở Đông Dương [83];Smith (1943) về rắn Ấn Độ, Sri Lan-ka, Mi-an-ma và toàn bộ vùng Đông dương [43];Taylor (1965) về rắn của Thái Lan [62]; Deuve (1970) về rắn của Lào [84]; Das (2010)

về các loài bò sát của khu vực Đông Nam Á [21]; Chan-ard và cs (2015) về rắn củaThái Lan [17]

Ở Việt Nam có tài liệu của Campden-Main (1970) về rắn của khu vực miềnNam, nhưng không bao gồm các loài rắn biển [16] Nguyễn Văn Sáng (1981) mô tảrắn của khu vực miền Bắc, nhưng không bao gồm các loài rắn biển [8] Trần Kiên &Nguyễn Quốc Thắng (1995) cung cấp thông tin về các loài rắn độc Việt Nam [8].Nguyễn Văn Sáng (2007) mô tả và xây dựng khoá định loại cho 149 loài rắn ở ViệtNam, tuy nhiên một số họ, giống và loài có sự thay đổi về phân loại chưa được cậpnhật [7] Nguyen và cs (2016) cung cấp dữ liệu về các loài rắn biển ở Việt Nam [42].Như vậy, mặc dù đã có khá nhiều nghiên cứu về rắn ở Việt Nam nhưng nghiên cứu

chuyên sâu về các nhóm loài phức tạp còn rất hạn chế, đặc biệt là một số giống thuộc

họ Rắn nước (Colubridae) như Calamaria, Hebius, Lycodon, Oligodon, Opisthotropis.

Trong thời gian gần đây, việc kết hợp phân tích đặc điểm hình thái với kỹ thuậtsinh học phân tử đã giúp làm sáng tỏ vị trí phân loại của nhiều nhóm rắn, trong đó cónhững loài ghi nhận ở Việt Nam 3 phân họ Pareatinae, Homalopsinae, Lamprophiinae

đã được nâng hạng thành họ, họ Natricidae trở thành phân họ của họ Colubridae [55];

phân họ Ahaetuliinae của họ Colubridae được mô tả mới bao 3 giống: Ahaetulla,

Chrysopelea, Dendrelaphis, một số loài của giống Cyclophiops chuyển sang giống Ptyas [27] Bên cạnh đó các loài của giống: Ramphotyphlops chuyển sang giống Indotyphlops; các loài của giống Typholops chuyển sang giống Argyrophis; các loài

của giống Amphiesma (ngoại trừ loài A stolatum), Parahelicops, Pararhabdophis chuyển sang giống Hebius; các loài của giống Rhynchophis chuyển sang giống

Gonyosoma; các loài của giống Orthriophis chuyển sang giống Elaphe [18], [64].

Đáng chú ý từ năm 2005 trở lại đây có 1 giống, 14 loài và 1 phân loài mớithuộc họ Rắn nước (Colubridae) được mô tả với mẫu chuẩn thu tại Việt Nam là:

Calamaria thanhi Ziegler & Le, 2005; Oligodon deuvei David, Vogel & van Rooijen,

2008; Oligodon moricei David, Vogel & van Rooijen, 2008; Oligodon

saintgironsi David, Vogel & Pauwels, 2008; Opisthotropis tamdaoensis Ziegler, David

& Vu, 2008; Oligodon saintgironsi David, Vogel & Pauwels, 2008; Calamaria

gialaiensis Ziegler, Nguyen & Nguyen, 2009; Calamaria sangi Nguyen, Koch &

Ziegler, 2009; Colubroelaps nguyenvansangi Orlov, Kharin, Ananjeva, Nguyen & Nguyen, 2009; Lycodon ruhstrati abditus Vogel, David, Pauwels, Sumontha, Norval, Hendrix, Vu & Ziegler, 2009; Calamaria concolor Orlov, Nguyen, Nguyen, Ananjeva

& Ho, 2010; Opisthotropis cucae David, Pham, Nguyen & Ziegler, 2011; Oligodon

cattienensis Vassilieva, Geissler, Galoyan, Poyarkov, van Devender & Böhme, 2013; Oligodon nagao David, Nguyen, Nguyen, Jiang, Chen, Teynié & Ziegler, 2012; Oligodon arenarius Vassilieva, 2015; Oligodon condaoensis Nguyen, Nguyen, Le &

Murphy 2016; Oligodon culaochamensis Nguyen, Nguyen, Nguyen, Phan, Jiang & Murphy, 2017; Opisthotropis voquyi Ziegler, David, Ziegler, Pham, Nguyen & Le,

2018 và 2 loài lần đầu tiên ghi nhận ở Việt Nam: Sinonatrix yunnanensis Rao & Yang,

1998 và Opisthotropis maculosa Stuart & Chuaynkern, 2007 [64].

1.2 Tổng quan các nghiên cứu về giống

Lycodon

1.2.1 Trên thế giới

Giống Rắn khuyết (Lycodon Fitzinger, 1826) thuộc phân họ Rắn nước

(Colubrinae), họ Rắn nước (Colubridae), phân bộ Rắn (Serpentes), bộ Có vảy(Squamata), lớp Bò sát (Reptilia), ngành Có dây sống (Chordata), giới Động

vật (Animalia) Năm 1826, Boie trong Fitzinger mô tả giống Lycodon dựa trên loài chuẩn Coluber aulicus, một số tác giả khác công bố các giống mới nhưng sau đó được coi là tên đồng danh (Synomym) của giống Lycodon như: Ophites Wagle (1830) dựa trên loài chuẩn là Ophites subcinctus, Sphecodes Duméril & Dibron (1853) dựa trên loài chuẩn Sphecodes albofuscus, Tetragonasoma Gunther (1858) dựa trên loài chuẩn

Tetragonosoma effrene và Tytleria Theobald (1868) dựa trên loài chuẩn Tytleria hypsirhinoides [72] Theo kết quả nghiên cứu về phát sinh chủng loại của Guo và cs.

(2013) [30], Siler và cs (2013), Pyron và cs (2013) [55], Figueroa và cs (2016) [27],

Wostl và cs (2017) [73] các loài thuộc 4 giống: Cercaspis Wagler, 1830; Dinodon Bibron & Duméril, 1854; Dryocalamus Günther, 1858; Lepturophis Boulenger, 1900

có mối quan hệ di truyền gần gũi với các loài thuộc giống Lycodon và đề xuất chuyển các loài của 4 giống trên sang giống Lycodon.

Tính đến tháng 5 năm 2018, trên thế giới ghi nhận có 58 loài rắn thuộc giống

Lycodon (kể cả các loài thuộc các giống trước đây: Cercaspis, Dinodon, Dryocalamus, Lepturophis) [64] Trong 30 năm gần đây có 16 loài (chiếm 27% số loài) thuộc giống Lycodon được mô tả là loài mới, trong đó: 6 loài ở Phi-lip-pin: L alcalai Ota & Ross,

1994; L bibonius Ota & Ross, 1994; L chrysoprateros Ota & Ross, 1994; L solivagus Ota & Ross, 1994; L ferroni Lanza, 1999 và L fausti Gaulke, 2002; 1 loài ở In-đô-nê- xi-a: L sidiki Wostl, Hamidy, Kurniawan & Smith, 2017; 3 loài ở Trung Quốc: L.

synaptor Vogel & David, 2010; L gongshan Vogel & Luo, 2011 và L liuchengchaoi

Zhang, Jiang, Vogel & Rao, 2011; 2 loài ở Ấn Độ: L zawi Slowinski, Pawar, Win, Thin, Gyl, Oo & Tun, 2011 và L flavicollis Mukherjee & Bhupathy, 2007; 2 loài ở Cam-pu-chia: L cardamomensis Daltry & Wüster, 2002 và L zoosvictoriae Neang,

Hartmann, Hun, Souter & Furey, 2014; 1 loài ở Thái lan: L ophiophagus Vogel, David, Pauwels, Sumontha, Norval, Hendrix, Vu & Ziegler, 2009; 1 loài ở Lào: L.

davidi Vogel, Nguyen, Kingsada & Ziegler, 2012, Ngoài ra một phân loài mới được

mô tả là Lycodon ruhstrati abditus Vogel, David, Pauwels, Sumontha, Norval,

Hendrix, Vu & Ziegler, 2009 dựa trên mẫu chuẩn thu tại Quảng Bình, Việt Nam [64]

Ở các nước giáp ranh với Việt Nam, có một số công bố liên quan đến phân loại

các loài trong giống Lycodon như:

Ở Lào: Vogel và cs (2012) mô tả mới loài Lycodon davidi trên mẫu chuẩn tại tỉnh Viên Chăn, đồng thời xây dựng bảng so sánh giữa các loài thuộc nhóm L.

ruhstrati và ghi nhận có 5 loài phân bố tại Lào: L capucinus, L davidi, L fasciatus, L laoensis và L subcinctus [70] Luu và cs (2013) ghi nhận mới cho khu hệ rắn của Lào

2 loài: L futsingensis và L ruhstrati abditus trên mẫu thu tại tỉnh Khăm Muộn [38].

Ở Cam-pu-chia: Daltry và cs (2002) mô tả mới loài Lycodon cardamonensis

trên mẫu chuẩn tại núi Cardamon phía Tây Nam Cam-pu-chia [20] Neang và cs

(2014) mô tả mới loài Lycodon zoosvictoriae trên mẫu chuẩn thu tại tỉnh Pusat, phía tây Nam Cam-pu-chia và đồng thời lập bảng so sánh giữa một số loài Lycodon ở khu

vực Đông Nam Á [41]

Ở Thái Lan: Taylor (1965) mô tả và xây dựng khóa định loại cho 5 loài nhưng

tại thời điểm đó vẫn thuộc 2 giống trong đó 4 loài thuộc giống Lycodon (L subcinctus,

L laoensis, L capucinus, L fasciatus) và 1 loài thuộc giống Dinodon (L septentrionalis) [62] Nutphand (1986) mô tả mới loài Lycodon suratensis và theo kết

quả so sánh hình thái của Pauwels và cs (2006) thì loài L suratensis là một tên đồng danh của loài L subcinctus subcinctus [49] Pauwels và cs (2005) ghi nhận mới cho Thái Lan loài Lycodon cardamomensis dựa trên mẫu thu tại tỉnh Chanthaburi phía

Đông Nam Thái Lan và đồng thời xây dựng khóa định loại cho 7 loài ở Thái Lan [50]

Vogel và cs (2009) mô tả mới loài Lycodon ophiophagus trên mẫu chuẩn tại miền

Nam Thái Lan [68]

Ở Trung Quốc: Pope (1928) mô tả 2 loài mới là Lycodon flavozonatus và L.

futsingensis trên mẫu chuẩn đều thu tại tỉnh Phúc Kiến [52] Pope (1935) mô tả và xây

dựng khóa định loại cho 6 loài nhưng vẫn thuộc 2 giống trong đó 4 loài thuộc giống

Lycodon (L subcinctus, L aulicus, L fasciatus, L ruhsirati), 2 loài thuộc giống Dinodon (L rujozonatum, L flavozonatum) [53] Hu & Zhao (1972) mô tả mới loài Dinodon rosozonatum hiện nay là Lycodon rosozonatus trên mẫu chuẩn thu tại tỉnh

Quảng Đông [34] Vogel & David (2010) mô tả mới loài Lycodon synaptor trên mẫu chuẩn thu tại tỉnh Vân Nam và xây dựng khóa định loại cho các loài Lycodon ở Trung Quốc [67] Lu và cs (2010) nghiên cứu giống Dinodon tại Trung Quốc [87] Vogel & Luo (2011) mô tả mới loài Lycodon gongshan trên mẫu chuẩn thu tại tỉnh Vân Nam và chỉ định mẫu chuẩn mới của loài L fasciatus [70]; Zhang và cs (2011) mô tả mới loài

Lycodon liuchengchaoi trên mẫu chuẩn thu tại tỉnh Tứ Xuyên và xây dựng khóa định

loại cho các loài Lycodon ở Trung Quốc [74] Lei và cs (2014) dựa trên kết quả phân tích phân tử và đặc điểm hình thái đã chuyển L multizonatum trước đây ghi nhận thuộc giống Oligodon sang giống Lycodon [36] Guo và cs (2015) công bố trình tự gen của loài Lycodon gongshan hỗ trợ cho việc công nhận loài này là riêng biệt, bởi vì loài này có đặc điểm hình thái gần gũi với loài L fasciatus [30] Zhang và cs (2015) ghi nhận vùng phân bố mới của loài L liuchengchaoi tại tỉnh An Huy [75] Peng và cs (2017) ghi nhận vùng phân bố mới của loài L liuchengchaoi tại tỉnh Chiết Giang [90].

Các nghiên cứu về quan hệ di truyền giữa các loài Lycodon còn rất hạn chế Guo và cs (2013) đánh giá mối quan hệ di truyền của 7 loài Lycodon và 3 loài

Dinodon thông qua việc giải trình tự của 2 gen ty thể (Cyt-b, ND4) và 2 gen nhân

(C-mos, RAG 1) [30]; bên cạnh đó Siler và cs (2013) đánh giá mối quan hệ di truyền của

17 loài thuộc giống Lycodon trong đó có 2 loài chưa xác định được tên khoa học và 2 loài Dinodon thông qua việc giải trình tự gen ti thể (Cyt-b) [57]; cả hai nghiên cứu này cùng đề xuất chuyển các loài từ giống Dinodon sang giống Lycodon và coi Dinodon là tên đồng vật khách quan của Lycodon Pyron và cs (2013) đánh giá mối quan hệ di

truyền của các loài rắn ở Sri Lanka thông qua việc giải trình tự của 5 gen ty thể (12S,16S, Cyt-b, ND2, ND4) và 5 gen nhân (BDNF, C-mos, NT3, RAG-1, RAG-2), nghiên

cứu này đề xuất chuyển tất cả loài của giống Cercaspis Wagler, 1830 là thành viên của giống Lycodon [55] Grismer và cs (2014) đánh giá mối quan hệ di truyền giữa 14 loài

Lycodon thông qua giải trình tự gen ti thể Cyt-b [28] Guo và cs (2015) cung cấp dẫn

liệu công nhận loài Lycodon gongshan hợp lệ dựa trên phân tích quan hệ di truyền

giữa 24 loài Lycodon thông qua việc giải trình tự 2 gen ty thể (Cyt-b, ND4) và 2 gen

nhân (C-mos, RAG 1) [31] Figueroa và cs (2016) [27], Wostld và cs (2017) [73]

nghiên cứu mối quan hệ di truyền của 2 giống: Dryocalamus Günther, 1858 và

Lepturophis Boulenger, 1900 với giống Lycodon nhận thấy rằng chúng có mối quan hệ

di truyền rất gần gũi, đề xuất chuyển tất cả các loài của 2 giống: Dryocalamus và

Lepturophis là thành viên của giống Lycodon.

1.2.2 Ở Việt Nam

Ở Việt Nam, giống Lycodon được ghi nhận đầu tiên bởi Angel & Bourret

(1933) [81], Bourret (1935) [82], Smith (1943) [58], Orlov & Ryabov (2004) [47]

Angel & Bourret (1933) mô tả loài Dinodon septentrionale chapaense (hiện nay là loài

Lycodon septentrionalis) dựa trên mẫu chuẩn thu tại Sa Pa, tỉnh Lào Cai [81] Bourret

(1935) mô tả loài Dinodon rufozonatum meridionalis (hiện nay là loài Lycodon

meridionalis) dựa trên mẫu chuẩn thu tại Sa Pa, tỉnh Lào Cai [82] Rendahl trong

Smith (1943) mô tả loài Lycodon paucifasciatus dựa trên mẫu chuẩn thu tại huyện

Thừa Lưu, tỉnh Thừa Thiên-Huế [58, 67] Orlov & Ryabov (2004) công nhận loài

Lycodon meridionalis là một loài riêng, không phải là tên đồng danh của loài L flavozonatus [47] Nguyễn Văn Sáng và cs (2005) đã ghi nhận có 9 loài Lycodon

trong đó 6 loài thuộc phân giống Lycodon (L capucinus, L fasciatus, L laoensis, L.

paucifasciatus, L ruhstrati, L subcinctus); 3 loài thuộc phân giống Dinodon (L futsingensis, L rufozonatus, L septentrionalis) và 1 loài thuộc phân giống Dryocalamus (L davisonii) [7] Trong cuốn sách Động vật chí Việt Nam về phân bộ

Rắn, Nguyễn Văn Sáng (2007) mô tả và xây dựng khóa định loại cho 8 loài Lycodon trong đó 5 loài thuộc phân giống Lycodon (L capucinus, L fasciatus, L laoensis, L.

paucifasciatus, L ruhstrati, L subcinctus); 3 loài thuộc phân giống Dinodon (L futsingensis, L rufozonatus, L septentrionalis) và 1 loài thuộc phân giống Dryocalamus (L davisonii) [5] Ziegler và cs (2007) xây dựng khóa định loại cho 6

loài Lycodon trong đó có 1 loài chưa xác định được tên khoa học [76] Vogel & Brachtel (2008) nghiên cứu phân loại, sinh thái học và phân bố của loài Lycodon

ruhstrati ở Việt Nam và đồng thời so sánh với quần thể L ruhstrati ở những khu vực

khác [66] Vogel và cs (2009) nghiên cứu nhóm Lycodon ruhstrati phức tạp trong đó

có mô tả 1 phân loài mới là L ruhstrati abditus dựa trên mẫu chuẩn thu tại Quảng Bình, Việt Nam và đồng thời mô tả mở rộng loài L paucifasciatus dựa trên tài liệu của

Smith (1943) và 2 mẫu vật mới thu ở tỉnh Quảng Bình [68] Nguyen và cs (2009) ghi

nhận ở Việt Nam có 11 loài Lycodon trong đó 6 loài thuộc phân giống Lycodon (L.

capucinus, L fasciatus, L laoensis, L paucifasciatus, L ruhstrati, L subcinctus), 4

loài thuộc phân giống Dinodon (L meridionalis, L rosozonatus, L rufozonatus, L.

septentrionalis) và 1 loài thuộc phân giống Dryocalamus (L davisonii) [43] Do và cs.

(2017) lần đầu tiên ghi nhận loài L cardamomensis ở Việt Nam với mẫu vật thu thập

tại tỉnh Phú Yên [25] Ngoài ra còn một số nghiên cứu ghi nhận vùng phân bố mới củacác loài cho các tỉnh hoặc các VQG và KBTTN như Cáp & Trần (2013) [1], Phạm và

cs (2015) [2], Phan và cs (2014) [3], Nguyễn và cs (2018) [4], Nguyễn và cs (2010)[9], Phạm và cs (2015) [10], Do và cs 2016 [24], Hecht và cs (2013) [32], Nguyen và

cs (2011, 2014) [44, 45], Pham và cs (2017) [51]

Về sinh học phân tử hiện nay chưa có nghiên cứu nào đánh giá mối quan hệ di

truyền của các loài Lycodon ở Việt Nam.

Nhận xét: Với hàng loại loài mới cùng với ghi nhận mới ở Việt Nam và các

nước giáp ranh ở thời gian gần đây, cho thấy những hiểu biết về giống Lycondon ở

Việt Nam chưa thật sự đầy đủ và cần được tiếp tục khám phá Bên cạnh đó do thiếu

các nghiên cứu chuyên sâu về các loài Lycodon ở Việt Nam nên vị trí phân loại và

phân bố của một số loài còn chưa thực rõ ràng Do vậy việc nghiên cứu về phân loại

và quan hệ di truyền của các loài thuộc giống Lycodon ở Việt Nam là hết sức cần thiết.

1.3 Khái quát về điều kiện tự nhiên ở Việt Nam

1.3.1 Địa hình

Địa hình của Việt Nam nói chung bao gồm miền núi và vùng đất thấp MiềnBắc bao gồm vùng Đông Bắc, Tây Bắc và đồng bằng sông Hồng Vùng Đông Bắc trảidài từ thung lũng sông Hồng đến Vịnh Bắc bộ có nhiều diện tích miền núi nằm rải rác

ở độ cao từ 300-1600 m; trong đó Tây Côn Lĩnh là đỉnh cao nhất với độ cao 2341 m.Vùng Tây Bắc bao gồm các ngọn núi chạy từ phía bắc biên giới Trung Quốc về phíatây của tỉnh Thanh Hóa, trong đó Fansipan là đỉnh núi cao nhất với độ cao 3143 m.Miền Trung với dãy Trường Sơn kéo dài, có thể chia làm 3 vùng (thường được sử

dụng cách phân chia này để khoanh vùng phân bố của các loài động, thực vật) BắcTrường Sơn bắt đầu từ tỉnh Nghệ An đến khu vực Khe Sanh, vùng này khá thấp, ít cóđỉnh cao quá 1300 m; mặc dù về phía Tây sang đất Lào, núi có thể cao hơn 2800 m.Trung tâm dãy Trường Sơn bắt đầu từ bên dưới Khe Sanh gần đèo Hải Vân chạy vềphía Nam dọc theo biên giới Việt-Lào tới sông Ba-Đà Rằng Nam Trường Sơn baogồm khu vực từ sông Ba-Đà Rằng, dãy Trường Sơn kéo dài xuống phía Nam và baogồm các vùng núi còn lại của Việt Nam, là một loạt các cao nguyên bằng đá granit vàbazan có các đỉnh núi nằm rải rác và cô lập Miền Nam nổi tiếng với vùng đồng bằngsông Cửu Long, diện tích khoảng 40000 km2 với độ cao trung bình dưới 10 m [12],[60].

1.3.2 Khí hậu

Khí hậu Việt Nam có thể chia làm 7 kiểu: (1) Nhiệt đới gió mùa với mùa đônglạnh và mùa hè mưa; (2) Khí hậu nhiệt đới gió mùa với mùa đông lạnh và mưa mùathu; (3) Khí hậu nhiệt đới gió mùa với mùa đông ấm áp-mùa đông ấm áp-mùa đôngmưa; (4) Khí hậu nhiệt đới gió mùa với mùa đông ấm áp-mùa thu-mùa đông mưa; (5)Khí hậu nhiệt đới gió mùa với mùa đông ấm áp và mưa mùa hè; (6) Mưa phùn gió mùakhí hậu với những cơn mưa mùa hè; (7) Khí hậu nhiệt đới gió mùa kết hợp với núi[12]

Theo Nguyễn và cs (2000), nhiệt độ trung bình hàng năm của Việt Nam daođộng từ 18oC-26,8 oC; lượng mưa trung bình hàng năm thay đổi đáng kể từ 1324,4 mm(tỉnh Khánh Hòa) đến 3024,1 mm (tỉnh Kiên Giang) và độ ẩm trung bình hàng nămdao động trong khoảng 79-87% (Bảng 1.1) [11]

Bảng 1.1 Bảng số liệu sinh khí hậu một số tỉnh đã thu mẫu Lycodon ở Việt Nam

Trạm đo Độ Nhiệt độ không khí ( 0 C) Lượng mưa (mm) Độ ẩm

(m) Trung bình hàng năm Phạm vi

trung bình hàng tháng

Trung bình hàng năm

Phạm vi trung bình hàng tháng

không khí tương đối (%)

38

87

19

12

84

T

ha 5 2

3

17

17

25

85

N

gh 6 2

3

17

19

47

85

29

48

82

22

31

85

Bì

nh 5 2

6

23

16

21

79

15

19

81

K

há 5 2

6

23

13

17

80

23

7,

84

(Nguồn Nguyễn Khanh Vân và cs 2000)

1.3.3 Thủy văn

Việt Nam có một bộ phận lớn lưu vực các sông, suối nằm ngoài lãnh thổ nhưsông Hồng chiếm 57,3%, sông Mã là 38%, sông Cả là 34% và sông Cửu Long chiếmđến 91% Trong tổng lượng nước của Việt Nam là 839 tỉ m3/năm thì phần từ bên ngoàichảy vào lên tới 501 tỉ m3/năm chiếm 59,7%, riêng sông Cửu Long thì tỉ lệ này lên đến89% (451 tỉ m3/năm trong tổng lượng nước 507 tỉ m3/năm của sông) Diện tích sông, suối lớn góp phần tạo nên những vùng địa lý sinh vật đặc thù cho Việt Nam [60]

1.3.4 Thảm thực vật

Thảm thực vật Việt Nam thuộc vùng thực vật Đông Dương, bao gồm 6 khu vực:Sikang-Vân Nam, Nam Trung Quốc, Bắc khu vực Đông Dương, Trung tâm dãyTrường Sơn, Nam dãy Trường Sơn và Đông khu vực Đông Dương [12]

CHƯƠNG 2 THỜI GIAN, ĐỊA ĐIỂM, PHƯƠNG PHÁP VÀ TƯ LIỆU NGHIÊN CỨU 2.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu

Thời gian khảo sát thực địa bổ sung được tiến hành từ 01/2017 đến năm 05/2018với 05 đợt khảo sát và 42 ngày thực địa ở các tỉnh Nghệ An, Thừa Thiên Huế và CàMau (Bảng 2.1)

Bảng 2.1 Thời gian và địa điểm khảo sát thực địa bổ sung Đ

ổ Tham khảo mẫu vật lưu giữ tại các bảo tàng của Viện Sinh thái và Tài nguyên

sinh vật (IEBR), Bảo tàng thiên nhiên Việt Nam (VMNN), Bảo tàng Sinh vật, KhoaSinh học, Trường Đại học Sư phạm Hà Nội (HNUE); Bảo tàng Sinh vật, khoa Sinh -Hóa, Trường Đại học Tây Bắc (TBU); Khoa Sinh học, Trường Đại học Vinh (VU);Khoa Sinh học, Trường Đại học Sư phạm Huế (CLBH); Khoa Sinh học, Trường Đạihọc Phú Yên (PYU) và Bảo tàng động vật Alexander Koening (ZFMK), Bonn (CHLBĐức) Phân tích sinh học phân tử được thực hiện tại Trường Đại học Khoa học Tựnhiên (Đại học Quốc gia Hà Nội)

Như vậy, mẫu vật Lycodon đã sử dụng để phân tích trong nghiên cứu này được

thu thập ở 27 tỉnh gồm: Lai Châu, Lào Cai, Hà Giang, Cao Bằng, Lạng Sơn, QuảngNinh, Sơn La, Tuyên Quang, Bắc Giang, Vĩnh Phúc, Hòa Bình, Thanh Hóa, Nghệ An,

Hà Tĩnh, Quảng Bình, Thừa Thiên-Huế, Quảng Nam, Kon Tum, Quảng Ngãi, Gia Lai,Bình Định, Phú Yên, Khánh Hòa, Lâm Đồng, Ninh Thuận, Kiên Giang và Cà Mau(Hình 2.1)

Hình 2.1 Địa điểm thu thập mẫu vật các loài Lycodon ở Việt Nam

Ghi chú: 1) Lai Châu, 2) Lào Cai, 3) Hà Giang, 4) Cao Bằng, 5) Lạng Sơn, 6) Quảng Ninh, 7) Sơn La, 8) Tuyên Quang, 9) Bắc Giang, 10) Vĩnh Phúc, 11) Hòa Bình,12) Thanh Hóa, 13) Nghệ An, 14) Hà Tĩnh, 15) Quảng Bình, 16) Thừa Thiên-Huế, 17)Quảng Nam, 18) Kon Tum, 19) Quảng Ngãi, 20) Gia Lai, 21) Bình Định, 22) PhúYên, 23) Khánh Hòa, 24) Lâm Đồng, 25) Ninh Thuận, 26) Kiên Giang và 27) Cà Mau

2.2 Phương pháp nghiên cứu

2.2.1 Khảo sát thực địa

Dụng cụ nghiên cứu: Máy ảnh, gậy bắt rắn, kẹp, đèn pin, túi vải, lọ đựng mẫu,

ống nhựa lấy mẫu ADN, phiếu phỏng vấn, sổ ghi chép, bút, hóa chất bảo quản (cồn)

và các dồ dùng cá nhân cần thiết

Chọn địa điểm thu mẫu: Tập trung vào các khu vực ven suối, vũng nước, khu

vực đường mòn trong rừng, dưới gốc cây mục trong rừng, chúng tôi cũng tiến hànhkhảo sát ven các cửa hang và vách đá Tọa độ các điểm nghiên cứu được xác địnhbằng máy định vị vệ tinh GPS Garmin Dakota 20,

Thời gian thu mẫu: Hầu hết các loài rắn hoạt động vào ban đêm, do đó thường

thu mẫu và quan sát vào buổi tối từ 18:00 đến 24:00,

Phương pháp thu mẫu: Mẫu vật thu bằng tay hoặc gậy bắt rắn.

Xử lý mẫu vật: Mẫu vật thu được thường đựng trong các túi vải Sau khi chụp

ảnh, một số mẫu vật phổ biến được thả lại tự nhiên, một số mẫu đại diện được giữ lạilàm tiêu bản nghiên cứu

Làm tiêu bản:

Gây mê: Mẫu vật được gây mê bằng bông thấm etyl a-xe-tat trong lọ kín Mẫu

cơ dùng để phân tích sinh học phân tử (DNA) được cách ly formalin và lưu giữ trongcồn 95%

Ký hiệu mẫu: Sau khi gây mê, mẫu vật được đeo nhãn ký hiệu Nhãn và chỉ

buộc không thấm nước, chữ viết trên nhãn không bị tan trong cồn

Cố định mẫu: Sắp xếp mẫu vật theo hình dạng mong muốn, sau đó phủ giấy

thấm lên trên, ngâm trong cồn 80-90% trong vòng 8-10 tiếng Đối với mẫu có kíchthước lớn, tiêm cồn 80% vào bụng và cơ để tránh thối hỏng mẫu

Bảo quản mẫu vật: Để bảo quản lâu dài, sau khi cố định mẫu được chuyển sang

ngâm trong cồn 70%

2.2.2 Phân tích đặc điểm hình thái

Đo đếm các chỉ tiêu hình thái: các chỉ tiêu về kích thước ngoại trừ chiều dàithân và chiều dài đuôi đều được đo bằng thước kẹp điện tử với đơn vị đo nhỏ nhất là0,01 mm (Hình 2.2 & 2.3 và Bảng 2.2.)

Hình 2.2 Vị trí các vảy trên đầu của rắn (Mặt trên và bên đầu mẫu chuẩn loài

Lycodon cavernicolus theo Grismer và cs 2014) [28].

Chú thích: F= vảy trán; IF= vảy môi dưới; IN= vảy gian mũi; L= vảy má; LAT= vảydưới của tấm thái dương trước; LPT= vảy dưới của tấm thái dương sau; M= vảy cằm;MPT= vảy giữa của vảy thái dương sau; N= vảy mũi; P= vảy đỉnh; PF= vảy trước trán;PO= vảy sau mắt; PP= vảy sau vảy đỉnh; PrO= vảy trước mắt; R= vảy mõm; SL= vảymôi trên; SO= vảy trên mắt, UAT= vảy trên của vảy thái dương trước và UPT= vảytrên của vảy thái dương sau

Hình 2.3 Vị trí vảy mặt lưng và bụng của rắn

(Theo Manthey & Grossmann, 1997, có bổ sung) [80]

Chú thích: A Cách đếm vảy thân (1: đếm xiên; 2: đếm hình chữ V); B Vị trí vảybụng và vảy huyệt (VEN: vảy bụng; ANA: vảy huyệt; SC: vảy dưới đuôi)

Số tấm dưới đuôi không tính các tấm đầu và cuối Cách đếm vảy thân: vảy cổđếm phía sau đầu tại vị trí bằng một khoảng chiều dài đầu, vảy giữa thân đếm tại vị trímột nửa số lượng vảy bụng, vảy trước hậu môm tại vị trí trước hậu môm một khoảngchiều dài đầu Các khoanh trên thân và đuôi được đếm ở một bên Vòng gáy khôngđược tính là một khoanh, khoanh phía trên hậu môn cũng được tính vào số lượngkhoanh trên thân

Bảng 2.2 Các chỉ tiêu phân tích hình thái STT Kí hiệu Giải thích

6 KMSố

1

7 KPSố 1

8 Pr Số 1

9 VESố 2

0 SCSố 2

1 ANTấ2

2 L- Số 2

3 L- Số 2

4 L/ Vả2

5 L/ Vả2

6 SLSố 2

7 SLSố 2

8 SLSố 2

9 SLSố 3

0 SmVả3

1 SmVả3

2 LaVả3

3 LaVả3

4 IFSố 3

5 IFSố 3

6 IFSố 3

7 IFSố 3

8 SmVả3

9 SmVả4

0 LaVả4

1 LaVả4

2 Pr Số 4

3 Pr Số 4

4 POSố 4

5 POSố 4

6 UASố 4

7 UASố 4

8 UPSố 4

9 UPSố 5

0 PaSố

Hoa văn

5

1 BoMà5

2 BBSố 5

3 BTSố 5

4 TaMà5

5 BeMà5

6 BeCá5

7 Fi Số 5

8 Br Số 5

9 Br Số

Định loại mẫu vật: So sánh mẫu vật mới với các mẫu vật đã được định danh hiệnlưu giữ ở Viện Sinh thái và Tài nguyên sinh vật và Bảo tàng Thiên nhiên Việt Nam, HàNội Định loại tên loài theo các tài liệu của: Angel & Bourret (1933) [81]; Boulenger(1893, 1990) [13, 14]; Chan-ard và cs (2015) [17]; Daltry & Wüster (2002) [20]; Luu

và cs (2013) [38]; Manthey & Grossman (1997) [78]; Neang và cs (2014) [41]; Orlov

& Ryabov (2004) [47] ; Pauwels và cs (2005, 2006) [49, 60]; Peng và cs (2014, 2015,2017) [88, 89, 90]; Pope (1928, 1935) [52, 53]; Smith (1943) [58]; Vassilieva và

cs (2016) [65]; Vogel và cs (2009, 2010, 2011, 2012, 2013) [66, 67, 68, 69, 70, 71]; Yang

& Rao (2008) [91]; Zhang và cs (2011) [74]; Zhang và cs (2015) [75] Tên khoa học và

tên Việt Nam theo Nguyen và cs (2009) [43], Uetz và cs (2018) [64]

2.2.3 Phân tích sinh học phân tử

Phân tích sinh học phân tử được thực hiện với sự hỗ trợ kỹ thuật của CN NgôThị Hạnh dưới sự hướng dẫn của PGS TS Lê Đức Minh (Đại học Khoa học tự nhiên,Đại học Quốc gia Hà Nội)

Mẫu cơ của các loài rắn được thu thập trong các chuyến khảo sát thực địa đượcbảo quản trong cồn 70% (Merk, Đức) ở -4oC Tách chiết DNA tổng số sử dụng bộ kitDneasy Blood & Tissue (Qiagen, Đức) Quá trình tách chiết được tiến hành theohướng dẫn của nhà sản xuất Phản ứng PCR được tiến hành sử dụng HotStar TaqMastermix (Qiagen, Đức) với những mẫu có nồng độ DNA thấp và DreamTaqMastermix (ThermoFisher Scienctific, Lithuania) với những mẫu có nồng độ DNAcao Qua tham khảo các nghiên cứu trước đây Guo và cs (2013) [30], Siler và cs.(2013) [57], Grismer và cs (2014) [28], học viên chọn đoạn gen Cyt-b để giải trình tự

và so sánh với các trình tự đã công bố trên ngân hàng gen (Genbank) Mồi sử dụng chonghiên cứu này được tổng hợp theo Burbrink và cs (2000) [15]

Bảng 2.3 Cặp mồi sử dụng trong nghiên cứu quan hệ di truyền của giống Lycodon

Tên mồi Trình tự mồi

L14910 5’-GACCTGTGATMTGAAAACCAYCGTTGT-3’

H16064 5’-CTTTGGTTTACAAGAACAATGCTTTA-3’

(Nguồn Burbrink và cs 2000)

Tổng thể tích mỗi phản ứng PCR là 20-21µl, bao gồm 10µl mastermix, 5µlnước, 2µl mỗi chiều mồi, 1-2µl DNA khuôn, tùy thuộc vào nồng độ DNA Điều kiệnphản ứng PCR: 95C ở 15’ đối với HotStarTaq mastermix và 5’ đối với DreamTaqmastermix; 35 chu kỳ phản ứng ở 95oC trong 30s, 480C trong 45s, 72oC trong 60s;bước kéo dài cuối cùng ở 72oC trong 6 phút Đối chứng âm được sử dụng trong mỗilần tách chiết cũng như mỗi lần PCR Sản phẩm PCR thành công sau đó được tinhsạch sử dụng kit GeneJET PCR Purification (Thermo Fisher Scientific, Lithuania) vàgửi giải trình tự hai chiều ở FirstBase (Ma-lai-xi-a) Cuối cùng, kết quả giải trình tựđược xác thực bằng công cụ BLAST trên Ngân hàng gen.

Các trình tự thu nhận được từ nghiên cứu này cùng với các trình tự sẵn trênNgân hàng gen (Genbank) được gióng cột bằng phần mềm ClustalX (Thompson và cs.1997) với các lựa chọn mặc định cho chức năng sắp xếp hoàn chỉnh [63] Cây quan hệ

di truyền được xây dựng dựa trên phương pháp Baysian sử dụng phần mềm MrBayesv3.2 (Ronquist và cs 2012), mô hình tiến hóa tối ưu được xác định bằng phần mềmModeltest v3.7 (Posada và cs 1998) với các thông số khác được phần mềm MrBayesv3.2 xác định [54], [56] Các phân tích được thực hiện dựa trên cây ngẫu nhiên lúc banđầu và chạy trong 1×107 thế hệ, lấy mẫu sau 1000 thế hệ Giá trị của gốc nhánh đượccoi là đáng tin cậy khi xác suất hậu nghiệm ≥ 95% Việc ước tính khoảng cách ditruyền giữa các mẫu được thực hiện trên phần mềm PAUP v4.0b10 (Swofford &Sunderland 2001) [61]

2.3 Tư liệu nghiên cứu

Đã phân tích đặc điểm hình thái của 145 mẫu rắn thuộc giống Rắn khuyết

Lycodon ở Việt Nam.

Đã phân tích đặc điểm di truyền 13 mẫu rắn thuộc giống Rắn khuyết Lycodon ở

Việt Nam và Lào

CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN

3.1 Thành phần loài của giống Lycodon ở Việt Nam

3.1.1 Danh sách các loài Lycodon ghi nhận ở Việt Nam

Trên cơ sở phân tích mẫu vật và tham khảo tài liệu đã ghi nhận ở Việt Nam có

15 loài Lycodon trong đó có 2 loài chưa định danh (Bảng 3.1).

Các phát hiện mới

Lần đầu tiên ghi nhận và bổ sung dẫn liệu hình thái cá thể cái của loài Rắn

khuyết ít đốm L paucifasciatus, một loài đặc hữu và hiếm gặp ở Việt Nam.

Ghi nhận vùng phân bố mới của 11 loài: L capucinus ở tỉnh Phú Yên, Cà Mau;

L cardamomensis ở tỉnh Quảng Ngãi, Kiên Giang; L davisonii ở tỉnh Hòa Bình, Thừa

Thiên-Huế, Bình Định, Cà Mau; L fasciatus ở tỉnh Nghệ An, Quảng Nam, Thừa Thiên-Huế, Gia Lai, Lâm Đồng; L futsingensis ở tỉnh Cao Bằng, Tuyên Quang, Sơn

La, Hòa Bình, Nghệ An, Quảng Nam, Kon Tum, Lâm Đồng; L laoensis ở tỉnh Phú Yên, Khánh Hòa; L meridionalis ở tỉnh Lai Châu, Sơn La, Hòa Bình; L.

paucifasciatus ở tỉnh Hà Tĩnh; L ruhstrati ở tỉnh Quảng Ngãi, Kon Tum; L septentrionalis ở tỉnh Điện Biên, Sơn La, Lâm Đồng; L subcinctus ở tỉnh Nghệ An,

Phú Yên, Kiên Giang

Loài chưa định danh:

Các mẫu vật Lycodon sp1 thu ở tỉnh Quảng Nam và Kon Tum, Lycodon sp2.

thu ở tỉnh Khánh Hòa và có đặc điểm hình thái khác biệt với các loài Rắn khuyết

Lycodon đã được ghi nhận ở Việt Nam, thuộc nhóm Lycodon faciatus (xem phần Mô

tả đặc điểm hình thái) Tuy nhiên, Lycodon là một giống rất phức tạp cần được nghiên

cứu kỹ hơn về hình thái và quan hệ di truyền để xác định chính xác vị trí phân loại củacác loài chưa được định danh nói trên

Trong số 15 loài ghi nhận ở Việt Nam có 1 loài có tên trong Danh lục Đỏ IUCN(2017) ở bậc VU (Sẽ nguy cấp) và chỉ ghi nhận phân bố ở Việt Nam (đặc hữu)

Bảng 3.1 Danh sách các loài Lycodon ghi nhận ở Việt Nam

Đ ặ c

Ghi chú: *= Ghi nhận vùng phân bố mới; Nguồn: M = Mẫu vật, TL1 = Tài liệu của

Nguyen và cs 2009, TL2 = Tài liệu của Luo et al 2010; IUCN (2017): VU = sẽnguy cấp

3.1.2 Đặc điểm hình thái các loài Lycodon ghi nhận ở Việt Nam

Trong phần này, chúng tôi mô tả đặc điểm hình thái của 15 loài thuộc giống

Rắn khuyết Lycodon ghi nhận ở Việt Nam dựa trên các số liệu đo đếm trực tiếp của

mẫu vật mới thu thập được đồng thời so sánh sự sai khác với các công bố trước đây.Các dẫn liệu được cung cấp cho từng loài bao gồm: tên khoa học, tên tiếng Anh, tênViệt Nam, mẫu chuẩn, địa điểm thu mẫu chuẩn, đặc điểm nhận dạng chung của loài, sốlượng mẫu vật nghiên cứu, mô tả đặc điểm hình thái của các mẫu vật mới thu thậpđược, một số đặc điểm sinh thái học, phân bố tại Việt Nam và trên thế giới Đối với 2loài chưa định danh chúng tôi so sánh với các loài có đặc điểm hình thái gần gũi

3.1.2.1 Lycodon capucinus (Boie, 1827)

Tên tiếng Anh/ Tên Việt Nam: Common Wolf Snake/ Rắn khuyết mũ.

Mẫu chuẩn: Không rõ.

Địa điểm thu mẫu chuẩn: Quần đảo Ja-va, In-đô-nê-xi-a.

Đặc điểm nhận dạng chung: Loài L capucinus phân biệt với các loài khác bởi:

kích thước nhỏ, max TL: 760 mm; vảy má không tiếp xúc với ổ mắt, tiếp xúc với vảygian mũi; vảy quanh thân: 17-17-15 hàng, nhẵn; tấm bụng 183-197 ở con đực, 193-

206 ở con cái; tấm hậu môn chia đôi; tấm dưới đuôi 64-76 ở con đực, 60-74 ở con cái,chia đôi; mặt lưng màu nâu với các dải trắng mỏng nằm rải rác trên cơ thể; có mộtvòng gáy màu trắng hoặc vàng; mặt bụng màu vàng kem (định loại theo Taylor 1965[62], Campden-Main 1970 [16], Manthey & Grossman 1997 [78], Das 2010 [21],Vogel & Harikrishnan 2013 [69], Neang và cs 2014 [41], Chan-ard và cs 2015 [17],Vassilieva và cs 2016 [65], O’Shea và cs 2018 [48] và nghiên cứu này

Mẫu vật nghiên cứu (n=22): 03 mẫu cái (VNMN 4107-4108) thu ở tỉnh Quảng

Nam; 01 mẫu đực (PYU DTD 612) và 02 mẫu cái (PYU DTD 70, 652) thu ở tỉnh PhúYên; 01 mẫu đực (IEBR 4145) thu ở tỉnh Khánh Hòa; 08 mẫu đực (IEBR 4133-4140)

và 07 mẫu cái (IEBR 4209-4211, 4141-4144) thu ở tỉnh Cà Mau (Phụ lục 1)

Mô tả đặc điểm hình thái: Kích thước nhỏ (SVL 360,7-509,5 mm, TaL

89,3-115,3 mm, tỉ lệ TaL/TL 0,178-0,187, n=9 ở con đực; SVL 384,8-581,0 mm, TaL 136,7 mm, tỉ lệ TaL/TL 0,154-0,191, n=13 ở con cái); cơ thể hình trụ; đầu phân biệtvới cổ; mắt nhỏ; con ngươi hình bầu dục, dọc; vảy mõm hình tam giác, rộng hơn cao;

76,4-vảy gian mũi rộng bằng dài, dài gần một nửa 76,4-vảy trước trán; 76,4-vảy trước trán dài gầnbằng vảy trán; vảy trán hình lục giác; vảy đỉnh lớn; vảy lỗ mũi chia đôi phía dưới; 1vảy má, không tiếp xúc với ổ mắt, tiếp xúc với vảy trước trán; 1 vảy trước mắt; 2 vảysau mắt; 2 (hiếm khi 1) vảy thái dương trước; 3 (hiếm khi 2) vảy thái dương sau; 9(hiếm khi 8) vảy môi trên, vảy 1-2 tiếp xúc với lỗ mũi, vảy 2-3 tiếp xúc với vảy má,vảy 3-5 (hiếm khi 4-5) tiếp xúc ổ mắt, vảy 7 lớn nhất; 10 hoặc 11 (hiếm khi 9) vảy môidưới, cặp vảy đầu tiên tiếp xúc với nhau, vảy 1-4 hoặc 1-5 (hiếm khi 1-3) tiếp xúc vớivảy cằm đầu tiên, vảy 5-6 lớn nhất; vảy thân: 17-17-15 hàng, nhẵn; tấm bụng 191-197(+ 2-4 tấm họng) ở con đực, 194-206 (+ 1-3 tấm họng) ở con cái; tấm hậu môn chiađôi (hiếm khi đơn); tấm dưới đuôi 64-76 ở con đực, 50-74 ở con cái, chia đôi Màu sắckhi sống: mặt lưng có màu nâu nhạt đến nâu tối với các vệt trắng hoặc vàng nhạtkhông rõ ràng, nhiều hơn ở khu vực phía sau cơ thể; có vòng gáy màu trắng sữa hoặcvàng nhạt phía sau đầu; vảy môi trên có các đốm trắng nhạt màu; mặt bụng màu trắngsữa hoặc vàng nhạt, không có có đốm đen (Hình 3.1 và Phụ lục 2).

Một số đặc điểm sinh thái học Các mẫu vật được tìm thấy vào ban đêm từ

19h00 -23h00 trên thân cây, vách đá hoặc dưới mặt đất Sinh cảnh xung quanh là rừngcây gỗ vừa và nhỏ, xen lẫn nhiều cây bụi Loài này được ghi nhận phân bố ở độ cao từ

500 m trở lên [65] Trong nghiên cứu này, chúng tôi ghi nhận phân bố từ 20-60 m, nhưvậy 20 m là giới hạn phân bố thấp nhất của loài Thức ăn chủ yếu là các loài thằn lằn(các loài tắc kè và thằn lằn bóng), ếch nhái [21], [65] Hai mẫu cái (IEBR 4141-4211)

ghi nhận loài Tắc kè đuôi vàng (Cnemaspis psychedelica) trong dạ dày Loài này đẻ

trứng thai từ 3-11 trứng (đường kính: 20-30±10 mm), thời gian ấp nở 33-45 ngày [65].Mẫu cái IEBR 4141 ghi nhận có 5 trứng (chiều dài lớn nhất đạt: 22,7 mm, chiều chiềurộng lớn nhất đạt: 7,4 mm)

Phân bố: Ở Việt Nam, ghi nhận phân bố ở tỉnh Đà Nẵng vào đến tỉnh Kiên

Giang [3], [10], [43], [65] Trong nghiên cứu này, lần đầu tiên ghi nhận phân bố ởtỉnh Phú Yên (Đồng Xuân, Tuy An, Sông Cầu) và Cà Mau (Hòn Khoai) (Hình 3.16a).Trên thế giới, ghi nhận phân bố ở Ấn Độ, Man-đi-vơ, Trung Quốc, Mi-an-ma, Lào,Cam-pu-chia, Thái Lan, Ma-lai-xi-a, Xin-ga-po, In-đô-nê-xi-a, Phi-lip-pin, Úc và NiuGhi-nê [71]

Ghi chú: Loài L capucinus thuộc nhóm L aulicus-capucinus rất giống nhau về

hình thái bao gồm 3 loài L aulicus, L capucinus và L hypsirhinoides [71] Loài L.

capucinus khác biệt với L aulicus bởi có các vệt trắng hoặc vàng nhạt nhỏ, không rõ

ràng ở phía trên lưng phía trước cơ thể (so với có các khoanh trắng rộng, rõ ràng), con

đực max TL: 560 mm (so với 463 mm) [71]; khác biệt với L hypsirhinoides bởi có các

vệt trắng hoặc vàng nhạt nhỏ, không rõ ràng ở phía trên lưng phía trước cơ thể (so vớihoàn toàn không có), có vòng gáy màu trắng hoặc vàng nhạt (so với hoàn toàn khôngcó), con đực max TL: 560 mm (so với 717 mm) [71]

3.1.2.2 Lycodon cardamomensis Daltry & Wüster, 2002

Tên tiếng Anh/ Tên Việt Nam: Cardamom Wolf Snake/ Rắn khuyết car da mom Mẫu chuẩn: BMNH 2000,70,

Địa điểm thu mẫu chuẩn: Khu bảo tồn động vật hoang dã Phnom Samkos, tỉnh

Pursat, dãy núi Cardamom, Cam-pu-chia

Đặc điểm nhận dạng chung: Loài L cardamomensis phân biệt với các loài khác

bởi: kích thước lớn, max TL: 1187 mm; vảy má không tiếp xúc với mắt; vảy thân: 17-15 hàng, với 5-7 hàng có gờ; tấm bụng 215-216 ở con đực, 220-229 ở con cái; tấmhậu môn đơn; tấm dưới đuôi 87 ở con đực, 81-92 ở con cái, chia đôi; mặt lưng màuđen với 9-15 khoanh hồng cam ở thân, 4-7 khoanh ở đuôi; khoanh đầu tiên bắt đầu từtấm bụng 12-24; mặt bụng màu trắng sữa (định loại theo Daltry & Wüster 2002 [20],Pauwel và cs 2005 [50], Do và cs 2017 [25] và nghiên cứu này)

19-Mẫu vật nghiên cứu (n=5): 01 mẫu đực (IEBR 3283) và 03 mẫu cái (IEBR 3284,

3952, 4157) thu ở Quảng Ngãi; 01 mẫu cái (VNMN 4738) thu ở Kiên Giang (Phụ lục1)

Mô tả đặc điểm hình thái: Kích thước lớn (SVL 778,8 mm, TaL 34,5 mm (đuôi

gãy) ở con đực; SVL 669,0-941,0 mm, TaL 174,7-249,1 mm, tỉ lệ TaL/TL 0,210, n=4 ở con cái); cơ thể hình trụ; đầu phân biệt với cổ, hơi dẹp về phía trước; mắttrung bình; con ngươi hình bầu dục, dọc; vảy mõm hình tam giác, rộng hơn cao; vảygian mũi dài bằng rộng, dài gần bằng một nửa vảy trước trán; vảy trước trán ngắn hơnvảy trán; vảy trán hình lục giác; vảy đỉnh lớn; vảy lỗ mũi chia đôi phía dưới; 1 vảy má,không tiếp xúc với ổ mắt và vảy gian mũi; 1 vảy trước mắt; 2 vảy sau mắt; 2 vảy tháidương trước; 3 (hiếm khi 2) vảy thái dương sau; 8 vảy môi trên, vảy 1-2 tiếp xúc với

0,193-lỗ mũi, vảy 2-3 tiếp xúc với vảy má, vảy 3-5 tiếp xúc với ổ mắt, vảy 7 lớn nhất; 10(hiếm khi 9) vảy môi dưới, cặp vảy đầu tiên tiếp xúc với nhau, vảy 1-4 hoặc 1-5 tiếpxúc với vảy cằm đầu tiên, vảy 5-6 lớn nhất; vảy thân: 19 (hiếm khi 18)-17-15 hàng,trên thân có 5-7 hàng có gờ (không rõ ràng ở khu vực quanh cổ); tấm bụng 226 (+ 2tấm họng) ở con đực, 220-229 (+ 1-2 tấm họng) ở con cái; tấm hậu môm đơn; tấmdưới đuôi 87 ở con đực, 81-92 ở con cái, chia đôi Màu sắc khi sống: mặt lưng màuđen có khoanh màu hồng cam bao gồm: 9-15 khoanh ở thân, 4-7 khoanh ở đuôi; cáckhoanh mở rộng từ hàng vảy giữa lưng đến hàng vảy ngoài cùng; khoanh đầu tiên kéodài: 4-7 vảy của hàng vảy giữa lưng, 3-5 vảy của hàng vảy ngoài cùng, bắt đầu từ tấmbụng 12-24; mặt bụng màu trắng kem, có các đốm đen không rõ ràng ở phía sau thân

và đuôi (Hình 3.2 và Phụ lục 2)

Một số đặc điểm sinh thái: Các mẫu vật được tìm thấy vào ban đêm từ 19h00

-22h00 ở các suối đá vừa và nhỏ, có nước chảy Các mẫu vật đang bò trên thân cây, ởgần hốc cây hay ở mặt đất Sinh cảnh xung quanh là rừng thứ sinh với nhiều cây gỗvừa và nhỏ, xem lẫn cây bụi Loài này được ghi nhận phân bố ở độ cao gần 500 m[20] Trong nghiên cứu này, ghi nhận phân bố ở độ cao 700-800 m, như vậy độ caocao nhất của loài giới hạn ở 800 m Thức ăn chủ yếu là các loài thằn lằn (các loài tắc

kè và thằn lằn bóng), ếch nhái [50] Mẫu cái IEBR 3952 ghi nhận 11 quả trứng, chiềudài: 28,1-29,8 mm, chiều rộng: 10,5-11,4 mm

Phân bố: Ở Việt Nam, loài này ghi nhận phân bố ở tỉnh Phú Yên [25] Trong

nghiên cứu này, lần đầu tiên ghi nhận phân bố ở tỉnh Quảng Nam (Ba Tơ) và KiênGiang (Phú Quốc) (Hình 3.16b) Trên thế giới, ghi nhận phân bố ở Cam-pu-chia vàThái Lan [25]

3.1.2.3 Lycodon davisonii (Blanford, 1878)

Tên tiếng Anh/ Tên Việt Nam: Blanford's Bridal Snake/ Rắn dẻ.

Mẫu chuẩn: ZSI 3201 (trước đây là IMC 3201).

Địa điểm thu mẫu chuẩn: Vùng Tanintharyir, Mi-an-ma.

Đặc điểm nhận dạng chung: Loài L davisonii phân biệt với các loài khác bởi:

kích thước trung bình, max TL: 968 mm; không có vảy trước mắt; vảy má tiếp xúc với

mắt; vảy thân: 13-13-13 hàng, nhẵn; tấm bụng 251-255 ở con đực, 239-258 ở con cái;tấm hậu môn đơn; tấm dưới đuôi 94-97 ở con đực, 75-116 ở con cái, chia đôi; mặtlưng màu đen với 31-45 khoanh trắng sữa hoặc vàng nhạt ở thân, 17-35 khoanh ởđuôi; khoanh đầu tiên bắt đầu từ tấm bụng 7-9; có vòng gáy màu trắng; mặt bụng màutrắng (định loại theo Smith 1943 [58], Taylor 1965 [62], Campden-Main 1970 [16],Orlov và cs 2011 [46], Vassilieva và cs 2016 [65] và nghiên cứu này).

Mẫu vật nghiên cứu (n=14): 01 mẫu cái (IEBR 4058) thu ở tỉnh Hòa Bình; 01

mẫu đực (IEBR 4059) thu ở tỉnh Quảng Bình; 01 mẫu cái IEBR 3225 thu ở tỉnh ThừaThiên-Huế; 01 mẫu non (IEBR 4065) thu ở tỉnh Bình Định; 01 mẫu non (IEBRKH.2016,4) thu ở tỉnh Khánh Hòa; 02 mẫu non (IEBR NT.2016,87, NT.2016,112) thu

ở tỉnh Ninh Thuận; 01 mẫu non (IEBR KG.2014,63) thu ở tỉnh Kiên Giang; 04 mẫuđực (IEBR 4060-4063) và 02 mẫu cái (IEBR 4064, 4202) thu ở tỉnh Cà Mau (Phụ lục1)

Mô tả đặc điểm hình thái: Kích thước trung bình (SVL 432,1-662,0 mm, TaL

120,5-181,5 mm, tỉ lệ TaL/TL 0,215-0,222, n=4 ở con đực; SVL 587,4-673,0 mm,TaL 167,0-325,5 mm, tỉ lệ TaL/TL 0,198-0,336, n=5 ở con cái, SVL 213,4-370,0 mm,TaL 51,6-115,3 mm, tỉ lệ TaL/TL 0,195-0,239, n=5 ở con non); cơ thể hình trụ; đầuhơi phân biệt với cổ, hơi dẹp trên dưới; mắt trung bình; con ngươi hình bầu dục, dọc;vảy mũi hình tam giác, rộng hơn cao; vảy gian mũi rộng bằng dài, gần bằng một nửachiều dài của vảy trước trán; vảy trước trán ngắn hơn vảy trán; vảy trán hình lục giác;vảy đỉnh lớn; 1 vảy má, tiếp xúc với ổ mắt và không tiếp xúc với vảy gian mũi; 1 hoặc

2 vảy sau mắt; 2 hoặc 3 vảy thái dương trước; 2 vảy thái dương sau; 7 vảy môi trên,vảy 1-2 tiếp xúc với lỗ mũi, vảy 2-3 tiếp xúc với vảy má, vảy 3-4 tiếp xúc với ổ mắt,vảy 6 lớn nhất; 8 (hiếm khi 9) vảy môi dưới, cặp vảy đầu tiên tiếp xúc với nhau, vảy 1-

4 hoặc 1-5 tiếp xúc với vảy cằm đầu tiên; vảy thân: 13-13-13 hàng, nhẵn; tấm bụng251-255 ở con đực, 239-258 ở con cái, 238-249 ở con non; tấm hậu môn đơn; tấmdưới đuôi 94-97 ở con đực, 75-116 ở con cái, 91-110 ở con non, chia đôi Màu sắc khisống: mặt lưng màu nâu tối hoặc nâu nhạt với 31-45 khoang màu trắng sữa hoặc vàngnhạt ở thân, 17-35 khoanh ở đuôi, các khoanh ở thân mở rộng từ hàng vảy giữa lưngđến hàng ngoài cùng; khoanh đầu tiên kéo dài: 1-3 vảy của hàng vảy giữa lưng; mặtbụng màu trắng sữa (Hìn 3.3 và Phụ lục 2)

Một số đặc điểm sinh thái học: Các mẫu vật được tìm thấy vào ban đêm từ

19h00-23h30 trên mặt đất, trên cây hoặc trên vách đá cách mặt đất khoảng 0,5-3,0 m.Sinh cảnh xung quanh là rừng thứ sinh ít bị tác động có nhiều cây gỗ vừa và nhỏ, xenlẫn cây bụi Thức ăn chủ yếu của loài này là các loài thằn lằn và trứng, là loài đẻ trứngthai từ 3-4 trứng [65]

Phân bố: Ở Việt Nam, ghi nhận phân bố ở tỉnh Thanh Hóa vào đến tỉnh Kiên

Giang [3], [24], [43], [47], [65] Trong nghiên cứu này, lần đầu tiên ghi nhận phân bố

ở tỉnh Hòa Bình (KBTTN Ngọc Sơn-Ngổ Luông), Thừa Thiên-Huế (Nam Đông), BìnhĐịnh (Vân Canh) và Cà Mau (Ngọc Hiển) (Hình 3.16c) Trên thế giới, ghi nhận phân

bố ở Mi-an-ma, Thái Lan, Cam-pu-chia, Lào [65]

3.1.2.4 Lycodon fasciatus (Anderson, 1879)

Tên tiếng Anh/ Tên Việt Nam: Banded Wolf Snake/ Rắn khuyết đốm.

Mẫu chuẩn mới: BMHN 1901.4.26.1.

Địa điểm thu mẫu chuẩn: thành phố Mogok’, vùng Mandalay, Mi-an-ma.

Đặc điểm nhận dạng chung: Loài L fasciatus phân biệt với các loài khác bởi:

kích thước trung bình, max TL: 894 mm; vảy má tiếp xúc với mắt; vảy thân: 17-17-15hàng, với 7-13 hàng có gờ; tấm bụng 190-213 ở con đực, 182-219 ở con cái; tấm hậumôn đơn; tấm dưới đuôi 74-88 ở con đực, 69-88 ở con cái; mặt lưng màu đen với 19-

37 khoanh trắng hoặc nâu xám ở thân, 7-21 khoanh ở đuôi, khoanh đầu tiên bắt đầu từtấm bụng 9-19; mặt bụng màu trắng với các băng màu đen rõ ràng (định loại theoSmith 1943 [58], Taylor 1965 [62], Yang & Rao 2008 [91], Das 2010 [21], Vogel &Luo 2011 [70], Neang và cs 2014 [41] và nghiên cứu này)

Mẫu vật nghiên cứu (n=25): 04 mẫu cái (IEBR 4128-4129, VNMN 5880-5881)

thu ở tỉnh Cao Bằng; 01 mẫu cái (IEBR TQ.2017,116) thu ở tỉnh Tuyên Quang; 03mẫu đực (IEBR 4115-4117) và 04 mẫu cái (IEBR 4121-41224) thu ở tỉnh Vĩnh Phúc;

01 mẫu đực (IEBR 4120) thu ở tỉnh Nghệ An; 01 mẫu đực (IEBR 4119) thu ở tỉnhQuảng Bình; 03 mẫu cái (IEBR 4125, VNMN 5875-5876) thu ở tỉnh Quảng Nam; 05mẫu cái (IEBR 3967, 4127; VNMN 5877-5879) thu ở tỉnh Kon Tum; 01 mẫu đực(IEBR 4118) thu ở tỉnh Gia Lai; 01 mẫu cái (IEBR 4126) thu ở tỉnh Lâm Đồng; 01mẫu cái (chụp ảnh) ở tỉnh Thừa Thiên-Huế (Phụ lục 1)

Mô tả đặc điểm hình thái: Kích thước trung bình (SVL 446,8-515,2 mm, TaL

112,1-151,4 mm, tỉ lệ TaL/TL 0,196-0,231, n=6 ở con đực; SVL 244,5-587,3 mm,TaL 95,0-139,6 mm, tỉ lệ TaL/TL 0,168-0,228, n=18 ở con cái); cơ thể dài; đầu phânbiệt với cổ, hơi dẹp trên dưới; mắt trung bình; con ngươi hình bầu dục, dọc; vảy mõmhình tam giác, rộng bằng dài; vảy gian mũi hơi rộng hơn dài, gần bằng một nửa chiềudài của vảy trước trán; vảy trán hình lục giác; vảy đỉnh lớn, dài hơn rộng; vảy lỗ mũichia đôi phía dưới; 1 vảy má, không tiếp xúc với ổ mắt và vảy gian mũi; 1 vảy trướcmắt; 2 vảy sau mắt; 2 vảy thái dương trước; 2 vảy thái dương sau; 8 vảy môi trên, vảy1-2 tiếp xúc với lỗ mũi, vảy 2-3 tiếp xúc với vảy má, vảy 3-5 tiếp xúc với ổ mắt, vảy6-7 lớn nhất; 9 (hiếm khi 8 hoặc 10) vảy môi dưới, cặp vảy đầu tiên tiếp xúc nhau, vảy1-4 hoặc 1-5 tiếp xúc với vảy cằm đầu tiên, vảy 5-6 lớn nhất; vảy thân 17-17-15, với7-13 vảy có gờ (nhìn thấy rõ ở khu vực cổ); tấm bụng 201-203 (+ 1-4 tấm họng) ở conđực, 198-213 (+ 1-3 tấm họng) ở con cái; tấm hậu môn đơn; tấm dưới đuôi 79-88 ởcon đực, 69-90 ở con cái, chia đôi Màu sắc khi sống: mặt lưng của thân và đuôi màuđen hoặc nâu tối với 15-24 khoanh màu trắng với các đốm xám màu ở thân, 6-13khoanh ở đuôi; các khoanh ở thân mở rộng từ hàng vảy giữa lưng đến hàng ngoàicùng; khoanh đầu tiên kéo dài: 3-6 vảy của hàng vảy giữa lưng, 6-13 vảy của hàng vảyngoài cùng, bắt đầu từ tấm bụng 9-19; mặt bụng vàng kem với các băng đen nhiều dần

rõ ràng ở phía trước thân, mờ dần hoặc đôi khi nửa đen nửa trắng ở phía sau thân vàđuôi (Hình 3.4 và Phụ lục 2)

Một số đặc điểm sinh thái học: Các mẫu vật được tìm thấy vào ban đêm từ

19h00 -23h00, trên mặt đất hoặc trên các tảng đá, thân cây nhỏ cách mặt đất khoảng0,5-2 m Sinh cảnh xung quanh là rừng thứ sinh ít bị tác động với nhiều cây gỗ lớn vàtrung bình xen lẫn cây bụi Loài này được ghi nhận phân bố ở độ cao từ 600-2000 m[85] Trong nghiên cứu này, ghi nhận phân bố trong độ cao 199-1420 m, như vậy độcao thấp nhất ghi nhận loài này là 199 m Thức ăn chủ yếu là các loài rắn nhỏ hoặc cácloài thằn lằn (các loài tắc kè và thằn lằn bóng), là loài đẻ trứng từ 4-15 quả [21], [85]

Phân bố: Ở Việt Nam, ghi nhận phân bố ở tỉnh Lai Châu vào đến tỉnh Kon Tum

[43] Trong nghiên cứu này, lần đầu tiên ghi nhận phân bố ở tỉnh Nghệ An (Quỳ Hợp),Thừa Thiên-Huế (VQG Bạch Mã), Quảng Nam (Tây Giang, Nam Trà My), Gia Lai

(VQG Kon Ka Kinh) và Lâm Đồng (VQG Bi Doup-Núi Bà) (Hình 3.5d) Trên thế giới, ghi nhận phân bố ở Ấn Độ, Trung Quốc, Mi-an-ma, Lào và Thái Lan [70].

Ghi chú: Loài L fasciatus có đặc điểm hình thái giống với 3 loài: L gongshan,

L liuchengchaoi và L synaptor nhưng có các đặc điểm khác biệt về hình thái Khác

biệt với L gongshan bởi có ít hơn 90 tấm dưới đuôi ở cả con đực và cái (so với nhiều

hơn 90 tấm dưới đuôi ở cả con đực và cái), ít hơn số tấm bụng ở con đực: 190-121 (sovới 210-216), khoanh trắng đầu tiên bắt đầu từ tấm bụng 8-18 (so với bắt đầu từ tấm

bụng 4-7) [69] Khác biệt với L liuchengchaoi bởi tấm hậu môn đơn (so với kép), có

các khoanh trắng hoặc trắng kem trên cơ thể (so với khoanh vàng), ngọc hành chẻ đôi

ở đỉnh (so với không chẻ đôi) [74] Khác biệt với L synaptor bởi có vảy má tiếp xúc

với ổ mắt (so với không tiếp xúc), thường xuyên có 9-10 vảy môi dưới (so với có 8vảy môi dưới), 70-78 tấm dưới đuôi (so với 68-69 tấm dưới đuôi) [68] Trong nghiêncứu này, các quần thể phía Bắc (khoanh sáng màu trên thân số lượng nhiều, kích cỡhẹp hơn, các khoanh có các đốm đen bẩn ở giữa) có sự sai khác với quần thể ở miềnTrung (khoanh sáng màu trên thân có số lượng nhiều, kích cỡ lớn hơn, trắng hoàn

toàn) Loài L fasciatus là loài có phân bố rộng và có những sai khác nhất định về đặc

điểm hình thái giữa các quần thể, cần có những nghiên cứu tiếp theo so sánh về quan

hệ di truyền của loài này

3.1.2.5 Lycodon futsingensis (Pope, 1928)

Tên tiếng Anh/ Tên Việt Nam: Futsing Wolf Snake/ Rắn khuyết fut sing.

Mẫu chuẩn: AMNH 34106.

Địa điểm thu mẫu chuẩn: tỉnh Phúc Kiến, Trung Quốc.

Đặc điểm nhận dạng chung: Loài L futsingensis phân biệt với các loài khác

bởi: kích thước trung bình, max TL: 850 mm; vảy má không tiếp xúc với mắt; vảythân: 17-17-15 hàng, nhẵn; tấm bụng 193-214 ở con đực, 197-213 ở con cái; tấm hậumôn đơn; tấm dưới đuôi 71-86 ở con đực, 65-85 ở con cái, chia đôi; mặt lưng màu đenvới 14-34 khoanh trắng hoặc hồng nhạt ở thân, 8-18 khoanh ở đuôi; khoanh đầu tiênbắt đầu từ tấm bụng 13-24; có vòng gáy màu trắng; mặt bụng màu trắng với các đốmđen nhiều dần về phía sau (định loại theo Pope 1928 [52], Vogel và cs 2009 [68],

Zhang và cs 2011 [74], Luu và cs 2013 [38], Peng và cs 2015 [88], Nguyen và cs.

2014 [44], Pham và cs 2017 [51] và nghiên cứu này)

Mẫu vật nghiên cứu (n=17): 02 mẫu đực (IEBR 4165-4166) và 01 mẫu cái

(IEBR 4170) thu ở tỉnh Cao Bằng; 01 mẫu đực (IEBR A.2013,87) và 02 mẫu cái(IEBR LS.21, 4169) thu ở tỉnh Bắc Giang; 02 mẫu cái (VNMN 5871-5872) thu ở tỉnhTuyên Quang; 04 mẫu đực (IEBR 1350, 4163-4164; VNMN 5869) và 01 mẫu cái(IEBR 4167) thu ở tỉnh Vĩnh Phúc; 01 mẫu đực (TBU MD.2015,32) thu ở tỉnh Sơn La;

01 mẫu đực (VNMN 5868) và 01 mẫu cái (VNMN 5873) thu ở tỉnh Quảng Nam; 01mẫu cái (chụp ảnh) ở tỉnh Nghệ An (Phụ lục 1)

Mô tả đặc điểm hình thái: Kích thước trung bình (SVL 500,0-692,3 mm, TaL

112,2-165,6 mm, tỉ lệ TaL/TL 0,172-0,226, n=9 ở con đực; SVL 434,0-569,3 mm,TaL 100,0-144,9 mm, tỉ lệ TaL/TL 0,183-0,220, n=7 ở con cái); cơ thể dài; đầu phânbiệt với cổ, hơi dẹp trên dưới; mắt trung bình; con ngươi hình bầu dục, dọc; vảy mũihình tam giác, rộng hơn cao; vảy gian mũi rộng bằng dài, gần bằng một nửa chiều dàicủa vảy trước trán; vảy trước trán ngắn hơn vảy trán; vảy trán hình lục giác; vảy đỉnhlớn, dài hơn rộng; 1 tấm má, không tiếp xúc với ổ mắt và vảy gian mũi; 1 vảy trướcmắt; 2 vảy sau mắt; 2 vảy thái dương trước; 3 (2) vảy thái dương sau; 8 vảy môi trên,vảy 1-2 tiếp xúc với lỗ mũi, vảy 2-3 tiếp xúc với vảy má, vảy 3-5 tiếp xúc với ổ mắt,vảy 6-7 lớn nhất; 10 (hiếm khi 11 hoặc 9) vảy môi dưới, cặp vảy đầu tiên tiếp xúc vớinhau, vảy 1-4 hoặc 1-5 tiếp xúc với vảy cằm đầu tiên, vảy 5-6 lớn nhất; vảy thân: 17-17-15 hàng, nhẵn; tấm bụng 198-213 (+1-3 tấm họng) ở con đực, 169-209 (+1-2 tấmhọng) ở con cái; tấm hậu môn đơn; tấm dưới đuôi 71-68 ở con đực, 65-79 ở con cái,chia đôi Màu sắc khi sống: mặt trên lưng màu nâu tối hoặc đen xám có các khoangmàu nâu hồng hoặc trắng bao gồm: 14-34 khoanh ở thân, 8-15 khoanh ở đuôi, cáckhoanh ở thân mở rộng từ hàng vảy giữa thân đến hàng ngoài cùng; khoanh đầu tiênkéo dài: 1-3 vảy của hàng vảy giữa lưng, 5-10 vảy của hàng vảy ngoài cùng, bắt đầu từtấm bụng 13-24; mặt bụng màu trắng sữa với các đốm đen nằm dải rác, nhiều hơn ởphía sau thân và đuôi; có vòng gáy màu trắng rõ ràng ở con non (Hình 3.5 và Phụlục

2)

Một số đặc điểm sinh thái học: Các mẫu vật được tìm thấy vào ban đêm từ

19h00-23h00 trên mặt đất, trên vách đá hoặc trên cây, cách mặt đất khoảng 0,5-2m,gần các suối nhỏ Sinh cảnh xung quanh là rừng thứ sinh ít bị tác động có nhiều cây gỗvừa và nhỏ, xen lẫn cây bụi và tre nứa, đôi khi được tìm thấy ở các khu vực núi đá vôi.Loài được ghi nhận phân bố ở độ cao từ 160-450 m [67] Trong nghiên cứu này, ghinhận loài phân bố ở độ cao từ 350-996 m, như vậy giới hạn độ cao lớn nhất của loàiđược biết đến hiện nay là 996 m Thức ăn chủ yếu là rắn nhỏ, thằn lằn (các loài tắc kè,thằn lằn bóng) [67] Là loài đẻ trứng thai từ 4-7 trứng (chiều dài từ 25-36 mm, chiềurộng từ 10-12 mm) [67] Mẫu cái IEBR 4170 ghi nhận có 6 trứng màu vàng nhạt

Phân bố: Ở Việt Nam, ghi nhận phân bố ở tỉnh Điện Biên và đến Quảng Bình

[9], [51], [67] Trong nghiên cứu này, lần đầu tiên ghi nhận phân bố ở tỉnh Hòa Bình(KBTTN Hang Kia-Pà Cò), Cao Bằng (Hạ Lang, Trùng Khánh), Tuyên Quang(KBTTN Cham Chu), Nghệ An (VQG Pù Mát) và Quảng Nam (Nam Trà My) (Hình3.17a) Trên thế giới, ghi nhận phân bố ở Trung Quốc, Lào [38]

3.1.2.6 Lycodon laoensis Günther, 1864

Tên tiếng Anh/ Tên Việt Nam: Laotian Wolf Snake/ Rắn khuyết lào.

Mẫu chuẩn mới: BMNH 1946.1.13,64-65, BMNH 1946.1.13,76

Điạ điểm thu mẫu chuẩn: Lào.

Đặc điểm nhận dạng chung: Loài L laoensis phân biệt với các loài khác bởi:

kích thước nhỏ, max TL: 565 mm; vảy má không tiếp xúc với mắt; vảy thân: 17-17-15hàng, nhẵn; tấm bụng 163-212 ở con đực, 169-195 ở con cái; tấm hậu môn đơn; tấmdưới đuôi 64-85 ở con đực, 62-73 ở con cái, chia đôi; mặt lưng màu đen với 12-36khoanh vàng nhạt ở thân, 9-23 khoanh ở đuôi, khoanh đầu tiên bắt đầu từ tấm bụng13-24; có vòng gáy màu trắng; mặt bụng màu trắng với các đốm đen nhiều dần về phíasau (định loại theo Boulenger 1893, Smith 1943, Taylor 1965, Campden-Main 1970,Manthey & Grossman 1997, Yang & Rao 2008, Das 2010, Vassilieva và cs 2016 vànghiên cứu này)

Mẫu vật nghiên cứu (n=5): 01 con cái (CLBH 14335) thu ở tỉnh Bình Định; 01

con cái (PYU DTD.755) thu ở tỉnh Phú Yên; 01 con cái (IEBR 4162) thu ở tỉnh Khánh