15.4 XÁC ĐỊNH TÍNH AN TỒN VẮCXIN DTwP HẤP PHỤ An tồn đặc hiệu Tính an tồn đặc hiệu vắc xin bạch hầu – uốn ván – ho gà toàn tế bào kiểm tra mẫu bán thành phẩm cuối hay vắc xin thành phẩm cần thiết tiến hành sau: An toàn đặc hiệu thành phần bạch hầu uốn ván Chọn chuột lang khoẻ mạnh, giới (nếu khác giới phải nhốt riêng lồng), có trọng lượng 250g - 350 g, chưa sử dụng vào thử nghiệm trước đó; tiêm da cho chuột lang liều đơn vắc xin cho người (liều vắc xin ghi nhãn) Theo dõi chuột hàng ngày cân trọng lượng chuột hàng tuần tuần (đối với thành phần uốn ván) tuần (đối với thành phần bạch hầu) Nếu có chuột chết phải mổ để kiểm tra phủ tạng dấu hiệu nhiễm độc bạch hầu (tuyến thượng thận đỏ) Nếu có chuột lang chết thử nghiệm lần 1, phải nhắc lại thử nghiệm; lần thử nghiệm nhắc lại khơng có chuột có biểu nhiễm độc độc tố bạch hầu hay uốn ván có 2/3 số chuột thử nghiệm sống sót sau khoảng thời gian theo dõi quy định (3 tuần vắc xin uốn ván tuần vắc xin bạch hầu) loạt vắc xin DTwP đạt u cầu an tồn đặc hiệu thành phần bạch hầu uốn ván -Nếu có chuột lang bị chết nguyên nhân khơng đặc hiệu thử nghiệm khơng có giá trị (invalid test), phải nhắc lại thử nghiệm với số lượng động vật thí nghiệm mẫu thử lần 1; có chuột lang chết lần thử nghiệm thứ loạt vắc xin khơng đạt an toàn đặc hiệu thành phần bạch hầu uốn ván, phải huỷ bỏ - Nếu thử nghiệm lần không đạt yêu cầu thử nghiệm có giá trị (valid test), phải nhắc lại thử nghiệm với số lượng mẫu thử số lượng chuột lang gấp đơi Nếu thử nghiệm nhắc lại có q 1/3 số chuột chết lý loạt vắc xin DTwP phải huỷ bỏ Tiêu chuẩn chấp thuận Vắc xin đạt yêu cầu khơng có chuột lang dấu hiệu liệt uốn ván triệu chứng nhiễm độc bạch hầu 80% chuột sống sót, khoẻ mạnh lên cân thời gian tuần (đối với thành phần bạch hầu) tuần (đối với thành phần uốn ván) An toàn đặc hiệu thành phần ho gà toàn tế bào (wP) Dùng 20 chuột nhắt trắng có trọng lượng 14 -16 g, giới (nếu có giới, cần phân chia nhóm) cho mẫu vắc xin thử cho nhóm chứng Chuột ăn uống đầy đủ trước tiêm suốt thời gian thí nghiệm Tổng trọng lượng nhóm chuột xác định trước lúc tiêm Mỗi chuột tiêm vào ổ bụng 0,5 ml dung dịch chứa tối thiểu nửa liều đơn vắc xin cho người Nhóm chứng tiêm 0,5 ml nước muối sinh lý (tốt chứa hàm lượng chất bảo quản có dung dịch tiêm cho nhóm thí nghiệm) Tổng trọng lượng nhóm chuột xác định lại vào 72 ngày sau tiêm Tiêu chuẩn chấp thuận: Loạt vắc xin đạt yêu cầu đạt tiêu chuẩn sau: - Sau 72 tổng trọng lượng chuột nhóm khơng trước tiêm - Sau ngày trọng lượng trung bình chuột khơng 60% so với nhóm chứng - Chuột chết khơng q 5% Nếu thử nghiệm lần không đạt tiêu chuẩn nêu phải nhắc lại thử nghiệm: - Nếu thử nghiệm lần khơng có giá trị (invalid test): Chỉ cần nhắc lại thử nghiệm với số lượng chuột số lượng mẫu lần - Nếu thử nghiệm lần có giá trị (valid test): Phải nhắc lại thử nghiệm với số lượng chuột nhắt trắng số lượng mẫu gấp đôi so với lần Kết lần kiểm tra nhắc lại, đạt yêu cầu tiêu chuẩn nêu giá trị trung bình lần thử nghiệm (về % tăng trọng chuột nhóm vắc xin thử nghiệm so với nhóm chứng sau ngày theo dõi) đạt yêu cầu loạt vắc xin coi đạt yêu cầu an toàn đặc hiệu ho gà Nếu lần kiểm tra nhắc lại khơng đạt u cầu loạt vắc xin khơng đạt u cầu an tồn đặc hiệu thành phần ho gà phải bị huỷ bỏ An tồn khơng đặc hiệu ( Độc tính bất thường) Thử nghiệm tiến hành chuột nhắt trắng chuột lang khoẻ mạnh khơng tiêm trước thử nghiệm Tiêm vào ổ bụng cho chuột nhắt trắng có trọng lượng 17 - 22g/con, nửa liều tiêm cho người; chuột lang có trọng lượng 250 - 350 g/con, liều tiêm cho người không ml/con Theo dõi tình trạng sức khoẻ cân trọng lượng chuột hàng ngày Tiêu chuẩn chấp thuận: Vắc xin coi khơng có độc tính bất thường tất động vật thí nghiệm sống khoẻ mạnh lên cân thời gian ngày khơng có dấu hiệu nhiễm độc Nếu thử nghiệm lần không đạt yêu cầu nêu trên, phải nhắc lại thử nghiệm Thử nghiệm nhắc lại đạt yêu cầu loạt vắc xin coi đạt an tồn khơng đặc hiệu; khơng đạt u cầu loạt vắc xin bị coi khơng đạt an tồn khơng đặc hiệu phải huỷ bỏ Đối với thử nghiệm nhắc lại: - Nếu thử nghiệm lần không đạt yêu cầu thử nghiệm có giá trị (valid test): phải nhắc lại thử nghiệm với số lượng mẫu số lượng chuột gấp đôi lần - Nếu thử nghiệm lần không đạt yêu cầu thử nghiệm khơng có giá trị (invalid test): cần nhắc lại thử nghiệm với số lượng mẫu số lượng chuột lần .. .An tồn khơng đặc hiệu ( Độc tính bất thường) Thử nghiệm tiến hành chuột nhắt trắng chuột lang khoẻ mạnh khơng tiêm trước thử nghiệm Tiêm vào... lên cân thời gian ngày khơng có dấu hiệu nhiễm độc Nếu thử nghiệm lần không đạt yêu cầu nêu trên, phải nhắc lại thử nghiệm Thử nghiệm nhắc lại đạt yêu cầu loạt vắc xin coi đạt an tồn khơng đặc... Tiêm vào ổ bụng cho chuột nhắt trắng có trọng lượng 17 - 22g/con, nửa liều tiêm cho người; chuột lang có trọng lượng 250 - 350 g/con, liều tiêm cho người không ml/con Theo dõi tình trạng sức khoẻ