Nghiên cứu khả năng giải phóng thuốc omeprazole của màng cellulose vi khuẩn lên men từ môi trường chuẩn

LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến thầy Nguyễn Xuân Thành, người hướng dẫn giúp đỡ em q trình nghiên cứu hồn thành khóa luận tốt nghiệp Em xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu Trường ĐHSP Hà Nội 2; thầy, cô giáo khoa Sinh - KTNN tồn thể thầy Viện Nghiên cứu Khoa học Ứng dụng tạo điều kiện thuận lợi cho em suốt trình làm thực nghiệm hồn thành khóa luận Vì chưa có nhiều hội tham gia nghiên cứu khoa học nên em nhiều bỡ ngỡ kinh nghiệm em nhều hạn chế khơng tránh khỏi thiếu sót Em mong nhận góp ý, xây dựng thầy bạn sinh viên để khóa luận tốt nghiệp em hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, Ngày 10 tháng 05 năm 2018 Sinh viên Nguyễn Thị Thanh Thủy LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài tơi thực hướng dẫn TS Nguyễn Xuân Thành Các số liệu kết nghiên cứu khóa luận hồn tồn trung thực không trùng lặp với kết công bố Nếu sai tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm! Hà Nội, Ngày 10 tháng năm 2018 Sinh viên Nguyễn Thị Thanh Thủy DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT CVK Cellulose vi khuẩn A xylinum Acetobacter xylinum HS Hestrin - Schramm MT1 Môi trường MT2 Môi trường MT3 Môi trường MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lí chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Phạm vi nghiên cứu Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn NỘI DUNG Chương 1: TỒNG QUAN TÀI LIỆU 1.1.Cellulose vi khuẩn (CVK) sinh vật tổng hợp cellulose 1.1.1 Cellulose vi khuẩn (CVK) 1.1.1.1 Đặc điểm Cellulose vi khuẩn (CVK) 1.1.1.2 Cấu trúc kết tinh cellulose vi khuẩn 1.1.1.3 Tính chất cellulose vi khuẩn 1.1.1.4 Đặc tính màng CVK 1.1.1.5 Ứng dụng CVK 1.1.2 Phân loại đặc điểm hình thái A xylinum 1.1.3 Đặc điểm sinh lý, sinh hóa A xylinum 1.1.4 Môi trường nuôi cấy A xylinum 1.2 Thuốc omeprazole 1.2.1 Cấu trúc 1.2.2 Tính chất vật lí hóa học 1.2.3 Dược lý chế tác dụng 1.2.4 Chỉ định chống định 10 1.2.5 Liều dùng cách dùng: 10 1.3 Tình hình nghiên cứu giới Việt Nam 11 1.3.1 Trên giới 11 1.3.1.1 Màng CVK 11 1.3.1.2 Omeprazole 11 1.3.2 Ở Việt Nam 13 1.3.2.1 Màng CV 13 1.3.2.2 Omeprazole 13 Chương 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1 Vật liệu nghiên cứu 15 2.1.1 Hóa chất dung mơi sử dụng nghiên cứu 15 2.1.2 Thiết bị sử dụng nghiên cứu 15 2.1.3 Vật liệu làm môi trường nuôi cấy vi sinh vật tạo màng CVK 15 2.2 Phương pháp nghiên cứu 15 2.2.1 Tạo màng CVK 15 2.2.2 Xử lý màng CVK trước hấp thụ thuốc, đánh giá độ tinh khiết màng CVK 16 2.2.2.1 Xử lý màng CVK trước hấp thụ thuốc 16 2.2.2.2 Đánh giá độ tinh khiết màng CVK 17 2.2.3 Xây dựng đường chuẩn Omeprazole 18 2.2.4 Xác định lượng thuốc hấp thụ vào màng CVK 19 2.2.5 Môi trường pH dùng để xác định lượng thuốc giải phóng thơng qua hệ thống thiết kế 20 2.2.6 Nghiên cứu giải phóng thuốc từ hệ CVK nạp thuốc với loại màng CVK có kích thước khác điều kiện mơi trường khác 20 2.2.7 Đánh giá động học giải phóng thuốc từ màng CVK nạp thuốc 21 2.2.8 Xử lý thống kê 22 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 23 3.1 Tạo màng CVK 23 3.1.1 Thu màng CVK từ môi trường HS 23 3.1.2 Xử lý màng CVK trước hấp thụ thuốc 23 3.1.3 Kiểm tra độ tinh khiết màng CVK sau xử lý 24 3.1.3.1 Xác định diện glucose màng CVK tinh chế 24 3.1.3.2 Xác định diện protein màng CVK tinh chế 24 3.2 Kết quét phổ xây dựng phương trình đường chuẩn Omeprazole 24 3.3 Xác định lượng thuốc hấp thụ vào màng CVK 29 3.4 Lượng thuốc giải phóng từ màng CVK vào môi trường pH khác 29 3.4.1 Mật độ quang Omeprazole tiến hành giải phóng thuốc thời điểm khác môi trường pH khác 29 3.4.2 Tỉ lệ giải phóng dược chất màng môi trường pH khác khoảng thời gian khác 32 3.5 Đánh giá động học giải phóng thuốc từ màng CVK nạp thuốc 35 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO 40 DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1: Thành phần môi trường chuẩn tạo màng CVK 16 Bảng 3.1 Mật độ quang (OD) dung dịch Omeprazole nồng độ 24 Bảng 3.2 Mật độ quang (OD) dung dịch Omeprazole nồng độ pH = 26 Bảng 3.3 Mật độ quang (OD) dung dịch Omeprazole nồng độ pH = 4,5 27 Bảng 3.4 Mật độ quang (OD) dung dịch Omeprazole nồng độ pH = 6,8 28 Bảng 3.5 Lượng thuốc hấp thụ vào màng 29 Bảng 3.6 Mật độ quang tiến hành giải phóng thuốc thời điểm khác môi trường pH khác 31 Bảng 3.7 Tỉ lệ giải phóng thuốc Omeprazole từ màng CVK độ dày, thời gian môi trường pH khác (n=3) 33 Bảng 3.8 Hệ số tương quan (R ), tốc độ giải phóng thuốc (k) trị số mũ giải phóng (n) mơi trường pH khác 36 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cấu trúc hóa học cellulose vi khuẩn Hình 1.2 Công thức cấu tạo omeprazole Hình 3.1 Màng CVK thơ lên mên từ môi trường HS 23 Hình 3.2 Màng CVK tinh khiết 23 Hình 3.3 Phương trình đường chuẩn Omeprazole dung mơi NaOH 0,1M 25 Hình 3.4 Phương trình đường chuẩn Omeprazole dung mơi NaOH 0,1M pH = 26 Hình 3.5 Phương trình đường chuẩn Omeprazole dung môi NaOH 0,1M pH = 4,5 27 Hình 3.6 Phương trình đường chuẩn Omeprazole dung môi NaOH 0,1M pH = 6,8…………………………………………………………………… 28 Hình 3.7 Hiệu chỉnh pH 30 Hình 3.8 Dùng máy khuấy từ gia nhiệt, tốc độ khuấy 50 vòng/phút, nhiệt độ 0 37 C ± 0,5 C 30 Hình 3.9 Đồ thị biểu diễn OD giải phóng thuốc Omeprazole màng CVK 32 Hình 3.10 Đồ thị tỉ lệ giải phóng thuốc Omeprazole màng CVK 34 MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài Cellulose vi khuẩn (viết tắt CVK) sản phẩm loài vi khuẩn, đặc biệt chủng Acetobacter xylinum (A xylinum) Màng sinh học (CVK) có cấu trúc đặc tính giống với cellulose thực vật (gồm phân tử glucose liên kết với liên kết β-1,4 glucozit) [3] Ngày nay, màng CVK ứng dụng rộng rãi nhiều lĩnh vực như: dùng màng CVK làm mơi trường phân tách cho q trình xử lí nước, làm chất mang đặc biệt cho pin lượng cho tế bào, làm môi trường chất sinh học, thực phẩm hay thay thực phẩm, dùng để thiết kế hệ thống vận tải phân phối thuốc nhiều ứng dụng khác [17] Trong lĩnh vực y học, màng CVK ứng dụng làm da tạm thời để thay da điều trị bỏng, loét da, làm mạch máu nhân tạo, làm mặt nạ dưỡng da,… [7,17] Theo nghiên cứu cho thấy màng CVK có khả giữ thuốc giải phóng thuốc chậm lại, làm tăng hiệu sử dụng thuốc [9,10,13] Ở nước ta việc nghiên cứu ứng dụng màng CVK mẻ đạt số thành tựu ban đầu Đề tài Nguyễn Văn Thanh – Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh 2006 [5] “ Nghiên cứu chế tạo màng cellulose trị bỏng từ Acetobacter xylinum” Kết cho thấy màng CVK tạo nên từ nguyên liệu có giá thành rẻ, dễ kiếm, sản xuất quy mơ lớn Về mặt tính chất, CVK có độ tinh lớn nhiều so với loại cellulose khác, phân hủy sinh học, tái chế hay phục hồi hoàn toàn Ngoài CVK có độ bền tinh thể cao, sức căng lớn, trọng lượng thấp, khả thấm hút lớn, đường kính sợi nhỏ, chứa nhiều dưỡng chất [12] Đồng thời hàng rào cản oxy sinh vật khác, ngăn cản phân hủy chất tế bào ngăn cản tác động UV, ổn định kích thước, màng CVK có ý nghĩa giữ thuốc giải phóng thuốc kéo dài [13,19], có tiềm cao cho ứng dụng hệ thống vận chuyển thuốc, cho thấm qua da, qua đường miệng,… Omeprazole chất ức chế đặc hiệu tác dụng cách khóa hệ thống enzyme Hydrogen-potassium Adenodine Triphosphatase Omeprazole thuộc nhóm thuốc gọi chất ức chế bơm proton Omeprazole có khả làm giảm lượng acid sản xuất dày Omeprazole sử dụng để điều trị triệu chứng bệnh trào ngược dày thực quản (GERD) bệnh khác gây acid dày dư thừa,…Tuy nhiên, omeprazole có số nhược điểm khơng bền môi trường acid, dễ bị sinh biến đổi gan q trình dùng thuốc, người bệnh gặp tác dụng phụ nhẹ thuốc như: sốt, hắt hơi, đau dày, ợ nóng, buồn nơn,… Với mục đích nghiên cứu khả giải phóng thuốc màng CVK nhằm làm chậm q trình giải phóng thuốc điều trị bệnh, chọn đề tài: “Nghiên cứu khả giải phóng thuốc omeprazole màng cellulose vi khuẩn lên men từ môi trường chuẩn” Mục đích nghiên cứu - Tạo màng CVK từ môi trường chuẩn Hestrin – Schramm (HS) - Nghiên cứu khả giải phóng thuốc Omeprazole màng CVK lên men từ mơi trường chuẩn nhằm tìm hệ thống giải phóng thuốc kéo dài - Thiết kế hệ thống giải phóng thuốc Omeprazole nhờ màng CVK số trường hợp khác kích thước, độ dày màng, pH Đánh giá khả giải phóng thuốc trường hợp Phạm vi nghiên cứu Nghiên cứu thực quy mơ phòng thí nghiệm Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn 4.1 Ý nghĩa khoa học - Tiếp tục nghiên cứu tiềm màng CVK việc giải phóng Bảng 3.4 Mật độ quang (OD) dung dịch Omeprazole nồng độ pH = 6,8 C% (mg/ml) OD275nm 15% 20% 25% 30% 40% 50% 0,111 ± 0,139 ± 0,167 ± 0,196 ± 0,251 ± 0,304 ± 0,0016 0,00132 0,0024 0,0013 0,0027 0,0032 Phương trình đường chuẩn thuốc Omeprazole pH = 6,8 trình bày hình 3.6 OD 275 nm y = 0.5529x + 0.0288 R² = 0.9998 0.35 Mật độ quang OD 0.3 0.25 0.2 giá trị OD 0.15 Linear (giá trị OD) 0.1 0.05 0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% Nồng độ % Omeprazole (mg/ml) Hình 3.6 Phương trình đường chuẩn Omeprazole dung mơi NaOH 0,1M pH = 6,8 Phương trình đường chuẩn thuốc Omeprazole pH = 6,8 là: y = 0,5529x + 0,0288 ( R = 0,9998) Trong đó: y: Giá trị OD tương ứng với nồng độ x x: Nồng độ % Omeprazole (mg/ml) R : Hệ số tương quan bình phương 3.3 Xác định lượng thuốc hấp thụ vào màng CVK Khối lượng thuốc hấp thụ vào màng CVK tính theo cơng thức nghiên cứu TS Nguyễn Xuân Thành cộng [21] Sử dụng máy đo quang phổ UV - 2450 ta tính giá trị OD trung bình dung dịch Omeprazole Các giá trị OD275nm thuốc giảm dần sau 2h khơng đổi hai độ dày màng Chứng tỏ lượng thuốc hấp thụ vào màng đạt cực đại Tơi tính lượng thuốc Omeprazole hấp thụ vào màng nhờ phương trình đường chuẩn Kết thể bảng 3.5 Bảng 3.5 Lượng thuốc hấp thụ vào màng Độ dày Qt màng (cm) (mg) 0,5 30 30 y Qd (mg) EE (%) mht (mg) 0,57 4,81 25,18 83,95 ± 0,01 ± 0,0038 ± 0,0057 ± 0,0051 0,62 8,34 20,86 72,17 ± 0,01 ± 0,0039 ± 0,0058 ± 0,0017 Như vậy, ta thấy màng có độ dày 0,5cm hấp thụ thuốc tốt màng có độ dày 1cm Kết tương tự kết nghiên cứu khả hấp thụ thuốc famotidin curcumin màng CVK lên men từ mơi trường chuẩn: màng CVK có độ dày 0,5cm hấp thụ tốt màng có độ dày 1cm 3.4 Lượng thuốc giải phóng từ màng CVK vào môi trường pH khác 3.4.1 Mật độ quang Omeprazole tiến hành giải phóng thuốc thời điểm khác môi trường pH khác Màng CVK sau hấp thụ xong cho vào bình dung dịch đệm pH = 2, pH = 4,5 pH = 6,8, thể tích bình 900 ml Hình 3.7 Hiệu chỉnh pH Dùng máy khuấy từ gia nhiệt, tốc độ khuấy 50 vòng/phút, nhiệt độ 37 C ± 0,5 C Sau khoảng thời gian 0,5h; 1h; 2h; 4h; 6h; 8h;12h; 24h, tiến hành rút mẫu để đo mật độ quang phổ mẫu Số lượng mẫu rút sau khoảng thời gian 5ml bổ sung lại 5ml dung dịch đệm tương ứng Hình 3.8 Dùng máy khuấy từ gia nhiệt, tốc độ khuấy 50 vòng/phút, nhiệt 0 độ 37 C ± 0,5 C Lặp lại thí nghiệm lần tiến hành đo ta giá trị OD (y) trung bình bảng 3.6 Bảng 3.6 Mật độ quang tiến hành giải phóng thuốc thời điểm khác môi trường pH khác Độ Thời gian giải phóng thuốc dày màng (giờ) pH CVK (cm) 0,5 pH = 1,0 0,5 12 0,167 0,174 0,214 0,287 0,324 0,378 0,354 ± ± ± ± ± ± ± 24 0,349 ± 0,0012 0,0017 0,0026 0,0013 0,0037 0,0015 0,0011 0,0017 0,131 0,139 0,162 0,211 0,263 0,302 0,293 0,291 ± ± ± ± ± ± ± ± 0,0023 0,0018 0,0012 0,0012 0,0031 0,0014 0,0017 0,0008 0,5 0,071 0,103 0,121 0,157 0,192 0,186 0,183 ± ± ± ± ± ± ± ± pH = 0,001 0,0014 0,0019 0,0012 0,0015 0,0021 0,0003 0,0014 4,5 0,043 0,048 0,063 0,098 0,117 0,143 0,137 0,133 ± ± ± ± ± ± ± ± 1,0 0,5 ph = 6,8 1,0 0,068 0,0021 0,0017 0,0008 0,0023 0,0012 0,001 0,0018 0,0011 0,021 0,023 0,031 0,042 0,067 0,098 0,086 0,082 ± ± ± ± ± ± ± ± 0,0009 0,0015 0,0012 0,0017 0,001 0,0021 0,0014 0,001 0,011 0,013 0,021 0,032 0,049 0,078 0,067 0,064 ± ± ± ± ± ± ± ± 0,0018 0,0011 0,0038 0,0027 0,0031 0,0014 0,0021 0,0013 Dựa vào giá trị mật độ quang phổ thu bảng 3.6, sử dụng phần mềm Excel 2010 để vẽ đồ thị biểu diễn OD giải phóng thuốc màng CVK Đồ thị giải phóng thuốc Omeprazole mơ tả hình 3.9 0.4 Mật độ quang (OD) 0.35 0.3 pH=2 (0.5cm) 0.25 pH=2(1cm) 0.2 pH=4.5 (0.5cm) 0.15 pH=4.5 (1cm) 0.1 pH=6.8 (0.5cm) 0.05 pH=6.8 (1cm) 0.5h 1h 2h 4h 6h 8h 12h 24h Thời gian (giờ) Hình 3.9 Đồ thị biểu diễn OD giải phóng thuốc Omeprazole màng CVK Dựa vào bảng 3.6 hình 3.9 thấy giá trị OD tăng dần theo thời gian đến thời điểm định giá trị OD khơng tăng nữa, điều chứng tỏ tốc độ giải phóng thuốc tăng đến đạt cực đại thời điểm định chậm dần Mỗi mơi trường pH khác OD đạt cực đại thời điểm khác nhau, chủ yếu khoảng từ - 3.4.2 Tỉ lệ giải phóng dược chất màng môi trường pH khác khoảng thời gian khác Từ giá trị OD (y) trung bình bảng 3.6 thuốc Omeprazole tiến hành giải phóng từ màng CVK, thay vào phương trình đường chuẩn tính nồng độ Omeprazole tương ứng với khoảng thời gian Thay giá trị nồng độ Omeprazole vừa tính vào cơng thức (4) ta xác định tỉ lệ giải phóng thuốc Omeprazole màng CVK độ dày, thời gian môi trường pH khác bảng 3.7 Bảng 3.7 Tỉ lệ giải phóng thuốc Omeprazole từ màng CVK độ dày, thời gian môi trường pH khác (n=3) Thời gian (h) Độ dày 0,5h 1h 2h 4h 6h 0,5 48,281 51,287 59,673 62,548 69,451 87,521 81,964 79,806 Cm ± ± ± ± ± ± ± 0,0034 0,0021 0,0036 0,0053 0,0011 0,0027 0,0013 0,0024 45,217 47,356 53,975 58,067 64,899 74,523 71,392 70,809 ± ± ± ± ± ± ± ± 0,0020 0,0013 0,0091 0,0039 0,016 0,087 0,0038 0,0061 0,5 37,942 41,086 46,295 49,281 51,162 73,249 70,959 68,815 Cm ± ± ± ± ± ± ± ± 0,016 0,0057 0,013 0,056 0,021 0,013 0,0068 0,0053 35,617 39,013 43,205 47,985 57,095 68,561 65,684 63,766 ± ± ± ± ± ± ± 0,0024 0,0048 0,019 0,0086 0,0036 0,0017 0,0031 0,0052 0,5 31,562 34,758 39,544 45,121 51,079 57,428 52,445 49,053 cm ± ± ± ± ± ± ± ± 0,0037 0,0079 0,0045 0,0075 0,0058 0,0027 0,0091 0,0083 27,956 31,221 35,280 40,327 46,988 49,328 42,371 40,474 ± ± ± ± ± ± ± ± 0,0051 0,0031 0,0058 0,012 0,0102 0,0065 0,011 8h 12h 24h g 1cm 4,5 1cm 6,8 1cm ± ± 0,0056 Dựa vào kết tính bảng 3.7, sử dụng phần mềm Excel 2010 để vẽ đồ thị tỉ lệ thuốc omeprazole giải phóng thời điểm lấy mẫu, tỉ lệ thuốc omeprazole giải phóng biểu diễn hình 3.10 100 Tỉ lệ thuốc giải phóng (%) 90 80 70 pH=2 (0.5cm) 60 pH=2 (1cm) 50 pH=4.5 (0.5cm) 40 pH=4.5 (1cm) 30 pH=6.8 (0.5cm) 20 pH=6.8 (1cm) 10 0.5h 1h 2h 4h 6h 8h 12h 24h Thời gian (giờ) Hình 3.10 Đồ thị tỉ lệ giải phóng thuốc Omeprazole màng CVK Dựa vào bảng 3.7 hình 3.10 ta thấy: Trong khoảng đến đầu tỉ lệ giải phóng thuốc tăng nhanh, sau lượng thuốc giải phóng khơng tăng Trong mơi trường khảo sát mơi trường đệm pH = màng có khả giải phóng thuốc tốt pH = 4,5 pH=6,8 Ở pH = tỉ lệ giải phóng thuốc màng CVK 0,5cm 1cm đạt cực đại giờ: màng 0,5cm đạt tỉ lệ 87,521%, màng 1cm đạt tỉ lệ 74,523% So sánh giá trị tỉ lệ trung bình cơng cụ Data analysis với mức ý nghĩa α = 0,05, thu kết P < 0,05, khác tỉ lệ giải phóng thuốc sau màng có ý nghĩa thống kê Vậy pH = màng CVK 0,5cm có khả giải phóng thuốc tốt màng 1cm Ở pH = 4,5 tỉ lệ giải phóng thuốc màng CVK 0,5cm 1cm đạt cực đại giải phóng thuốc: màng CVK 0,5cm đạt tỉ lệ 73,249%, màng CVK 1cm đạt tỉ lệ 68,561% Qua kiểm định thống kê thu P < 0,05 có nghĩa sai khác tỉ lệ giải phóng thuốc màng có ý nghĩa thống kê Ở pH = 6,8 tỉ lệ giải phóng thuốc màng CVK 0,5cm 1cm đạt cực đại giải phóng thuốc: màng CVK 0,5cm đạt tỉ lệ 57,428%, màng CVK 1cm đạt tỉ lệ 49,328% Qua kiểm định thống kê thu P < 0,05 có nghĩa sai khác tỉ lệ giải phóng thuốc màng có ý nghĩa thống kê Như vậy, tỉ lệ giải phóng thuốc màng CVK pH = cao đồng thời ta nhận thấy khả giải phóng màng CVK dày 0,5cm tốt so với màng CVK dày 1cm Kết tương tự với kết nghiên cứu khả giải phóng thuốc famotidin màng CVK lên men từ mơi trường chuẩn 3.5 Đánh giá động học giải phóng thuốc từ màng CVK nạp thuốc Theo nghiên cứu trước đây, mơ hình First order đại diện cho tỉ lệ giải phóng thuốc phụ thuộc vào nồng độ thuốc Mơ hình Higuchi giả định việc giải phóng thuốc chế khuếch tán Mơ hình Krosmeyer Peppas đưa nhìn tồn diện tỉ lệ giải phóng thuốc tỉ lệ với trương nở vật liệu mang thuốc, độ trương nở vật liệu cao tốc độ giải phóng thuốc cao ngược lại Với số liệu tính bảng 3.7, sử dụng phần mềm DDSlover với mô hình cụ thể First order, Higuchi, Hixson - Crowel Korsmeyer - Peppas làm mơ hình động học để phân tích dược động học giải phóng Omeprazole màng CVK ta thu kết bảng 3.8 Bảng 3.8 Hệ số tương quan (R ), tốc độ giải phóng thuốc (k) trị số mũ giải phóng (n) môi trường pH khác pH Độ dày màng First – k1 Order R kH Higuchi R Hixson- kHC Crowwel R Korsmeyer kkP - Peppas R n 4,5 6,8 0,5cm 1cm 0,5cm 1cm 0,5cm 1cm 0,9351± 0,758± 0,492± 0,381± 0,173± 0,082± 0,0016 0,0031 0,0023 0,0017 0,0025 0,0014 -5,231± -7,185± -9,201± -13,359 -17,211 -19,538 0,0013 0,0017 0,0034 ±0,0063 ± 0,0011 ± 0,0028 18,716 ± 16,452± 12,342 ± 9,659± 8,714 ± 7,396± 0,0012 0,0035 0,0032 0,0011 0,0027 0,0071 -5,326± -8,563± -9,561± -11,459 -13,671 -19,458 0,001 0,0024 0,0056 ± 0,0034 ± 0,0012 ± 0,0053 0,076±0, 0,065 0,057± 0,041 0,025± 0,016± 01 ±0,0034 0,0011 ±0,0026 0,0017 0,0006 -9,459 -13,451 -17,956 -19,241 -21,541 -23,045 ±0,0015 ± 0,0097 ± 0,0021 ± 0,0045 ±0,001 ±0,0042 45,673 ± 30,477 ± 34,673± 23,687± 32,056 ± 17,095± 0,0027 0,0045 0,001 0,0034 0,0012 0,0017 0,731± 0,684± 0,612± 0,537± 0,498± 0,387± 0,0085 0,0052 0,0019 0,0034 0,0038 0,0011 0,182 ± 0,113 ± 0,085 ± 0,067 ± 0,046 ± 0,021 ± 0,0016 0,0067 0,0021 0,0028 0,0032 0,0018 Khi thuốc Omeprazole giải phóng dung dịch đệm pH = 2, pH = 4,5 pH=6,8 phù hợp với mơ hình Korsmeyer - Peppas Những kết cho thấy khả ứng dụng mơ hình Korsmeyer - Peppas cho trương nở sợi cellulose màng CVK Trong hệ thống khuếch tán Fickian, n < 0,43 xảy giải phóng thuốc theo chế khuếch tán qua vật liệu, 0,43 < n < 0,85 khơng có giải phóng thuốc xảy ra, n > 0,85 thuốc giải phóng ăn mòn vật liệu Theo bảng 3.8 giá trị n thu < 0,43 chứng tỏ có giải phóng thuốc theo chế khuếch tán, khơng có ăn mòn CVK q trình giải phóng thuốc (do màng CVK cấu tạo polimer cao phân tử bền nên khơng có ăn mòn xảy q trình giải phóng thuốc) Việc giải phóng thuốc pH = lớn giải thích trương nở màng CVK môi trường khác khác nhau, môi trường pH = màng CVK trương nở nhiều tạo nhiều khoảng trống làm màng trở nên lỏng lẻo hơn, tạo điều kiện cho Omeprazole khuếch tán qua lớp sợi cellulose nhiều => Như tỉ lệ giải phóng thuốc Omeprazole phụ thuộc vào mơi trường đệm pH khác trương nở màng CVK 38 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận - Thu màng CVK tinh khiết với độ dày 0,5cm 1cm - Màng CVK tinh khiết với độ dày 0,5cm 1cm sau hấp thụ thuốc điều kiện tối ưu màng CVK có độ dày 0,5cm có khả giải phóng thuốc tốt màng CVK có độ dày 1cm giải phóng tốt điều kiện pH=2 - Cơ chế giải phóng thuốc phù hợp với mơ hình Korsmeyer – Peppas, thuốc giải phóng theo chế khuếch tán Kiến nghị - Cần tiếp tục khảo sát thêm khả giải phóng thuốc omeprazole màng CVK tạo chủng A xylinum từ môi trường chuẩn - Tiếp tục nghiên cứu khả giải phóng loại thuốc khác màng CVK nhằm tăng tác dụng loại thuốc 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Bộ Y tế(2002), Dược thư quốc gia Việt Nam, Nhà xuất Y học, Hà Nội Bộ Y tế(2009), Dược điển Việt Nam IV, Nhà xuất Y học, Hà Nội Đặng Thị Hồng(2007), “Phân lập, tuyển chọn nghiên cứu số đặctính sinh học vi khuẩn Acetobacter xylinum chế tạo màng sinh học (CVK),Luận văn thạc sĩ Sinh học ĐHSP Hà Nội Đỗ Tất Lợi(1999), “Những thuốc vị thuốc Việt Nam”, Nhà xuất bảnY học, Hà Nội Huỳnh Thị Ngọc Lan, Nguyễn Văn Thanh, 2006, “Nghiên cứu đặc tínhmàng cellulose vi khuẩn từ Acetobacter xylinum sử dụng làm màng trị bỏng”, Tạp chí Dược học số 361/2006, tr.18-20 Nguyễn Đức Lượng (2000), Công nghệ vi sinh vật tập – – 3, Nhà xuất Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh Nguyễn Thị Nguyệt (2008), “Nghiên cứu vi khuẩn Acetobacter xylinumcho màng Bacterial Cellulose làm mặt nạ dưỡng da” Nguyễn Văn Thanh, “Nghiên cứu chế tạo màng cellulose trị bỏng từ Acetobacter xylinum”, đề tài cấp Bộ, Bộ Y tế Phan Thị Huyền Vy, Bùi Minh Thy, Phùng Thị Kim Huệ, Nguyễn XuânThành, Triệu Nguyên Trung, 2018, “Thẩm định phương pháp phân tích định lượng Famotidin huyết tương thỏ”, Tạp chí Y học thựchành1066(1), tr.46-50 10.Phan Thị Huyền Vy, Bùi Minh Thy, Phùng Thị Kim Huệ, Nguyễn XuânThành, Triệu Nguyên Trung, 2018, “Tối ưu hóa hiệu suất nạp thuốcFamotidin vật liệu cellulose vi khuẩn lên men từ dịch tràxanh theo phương pháp đáp ứng bề mặt mơ hình Box – Behnken”, Tạp chí Dược học, 501(1), tr.3-6 11.Trường Đại học Dược Hà Nội (2003), Bộ mơn Hóa dược, Hóa dược tập 2, trang 30 – 31 12.Viện dược liệu (2004), “Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam”, tập I, tập II, Nhà xuất khoa học kỹ thuật Tài liệu tiếng Anh 13.Almeida, I.F., et al, 2013, Bacterial cellulose membranes as drug deliverysystems: An in vivo skin compatibility study, Eur J Pharm Biopharm,in press 14.Crafa W K., Young D J., Kawechi, M & Brown Jr, R M, 2007, The future prospects of microbial cellulose in biomedical appliciantions, Biomacromolecules, (1), p.1-12 15.Duvauchelle T., Millerioux L., 1998, Comparative bioavailability study of two oral omeprazole formulations after single and repeated administrations in healthy volunteers, Clinical Drug investigation, 16(2), p.141-149 16.Elkoshi Z., Behr D…, 2002, Multi-dose study can be a more sensitive assement for bioequivalence than single – dose studies: the case with omeprazole, Clinical drug investigation, 22(9), p.585-592 17.Hai-Peng Cheng, Pei-Ming-Wang, Jeck-Wei and Wen-Teng-Wu, 2002, Cultivation of Acetobacter xylinum for bacterial cellulose production in a modifided airlift reactor, Biotechnol Biochem, 35, p.125-132 18.Jonas R and Farad L F.,1998, Production and appliciation of microbial cellulose, Polym Gegrad Stab., 59, p.101-106 19.Lina Fu, Yue Zhang, Chao Li, Zhihong Wu, Qi Zhuo, Xia Huang, Guixing Qui, Ping Zhou and Guang Yang (2012), Skin tissue repair materials from bacterial cellulose by a multilayer fermentation method 20.Mostafavi S.A., Tavakoli N., Iran (2004) Relative Bioavailability of Omeprazole capsules after oral dosing Daru Volume 12, No.4, 2004,p.146 Faculty of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran 21.Nguyen T.X et al., 2014, Chitosan-coated nano-liposomes for the oral delivery of berberine hydrochloride, J Mater Chem B, 2, p.7149 – 7159 22.The Merch index, thirteenth edition, 2001, p.6913 23.Wan, Y Z., Lou, H., He, F., Liang, H., Huang, Y., & Li, X L 2009 “Mechanical, moisture absorption, and biodegradation bihaviours of bacterial cellulose fibre – reinforced starch biocomposites”, Composites Science and Technology 69 (7 – 8), 1212 – 1217 ... đích nghiên cứu khả giải phóng thuốc màng CVK nhằm làm chậm q trình giải phóng thuốc điều trị bệnh, chọn đề tài: Nghiên cứu khả giải phóng thuốc omeprazole màng cellulose vi khuẩn lên men từ mơi... men từ mơi trường chuẩn Mục đích nghiên cứu - Tạo màng CVK từ môi trường chuẩn Hestrin – Schramm (HS) - Nghiên cứu khả giải phóng thuốc Omeprazole màng CVK lên men từ môi trường chuẩn nhằm tìm... thống giải phóng thuốc kéo dài - Thiết kế hệ thống giải phóng thuốc Omeprazole nhờ màng CVK số trường hợp khác kích thước, độ dày màng, pH Đánh giá khả giải phóng thuốc trường hợp Phạm vi nghiên cứu