Nghiên cứu phân tích cấu trúc và hàm lượng một số hợp chất có trong nấm hương (Lentinula edodes) bằng các phương pháp phân tích hiện đại (Luận văn thạc sĩ)

Nghiên cứu phân tích cấu trúc và hàm lượng một số hợp chất có trong nấm hương (Lentinula edodes) bằng các phương pháp phân tích hiện đại (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu phân tích cấu trúc và hàm lượng một số hợp chất có trong nấm hương (Lentinula edodes) bằng các phương pháp phân tích hiện đại (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu phân tích cấu trúc và hàm lượng một số hợp chất có trong nấm hương (Lentinula edodes) bằng các phương pháp phân tích hiện đại (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu phân tích cấu trúc và hàm lượng một số hợp chất có trong nấm hương (Lentinula edodes) bằng các phương pháp phân tích hiện đại (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu phân tích cấu trúc và hàm lượng một số hợp chất có trong nấm hương (Lentinula edodes) bằng các phương pháp phân tích hiện đại (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu phân tích cấu trúc và hàm lượng một số hợp chất có trong nấm hương (Lentinula edodes) bằng các phương pháp phân tích hiện đại (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu phân tích cấu trúc và hàm lượng một số hợp chất có trong nấm hương (Lentinula edodes) bằng các phương pháp phân tích hiện đại (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu phân tích cấu trúc và hàm lượng một số hợp chất có trong nấm hương (Lentinula edodes) bằng các phương pháp phân tích hiện đại (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu phân tích cấu trúc và hàm lượng một số hợp chất có trong nấm hương (Lentinula edodes) bằng các phương pháp phân tích hiện đại (Luận văn thạc sĩ)

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC DƯƠNG THÚY QUỲNH NGHIÊN CỨU PHÂN TÍCH CẤU TRÚC VÀ HÀM LƯỢNG MỘT SỐ HỢP CHẤT CÓ TRONG NẤM HƯƠNG (LENTINULA EDODES) BẰNG CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH HIỆN ĐẠI LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC THÁI NGUYÊN - 2019 Số hóa Trung tâm Học liệu Cơng nghệ thơng tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC DƯƠNG THÚY QUỲNH NGHIÊN CỨU PHÂN TÍCH CẤU TRÚC VÀ HÀM LƯỢNG MỘT SỐ HỢP CHẤT CÓ TRONG NẤM HƯƠNG (LENTINULA EDODES) BẰNG CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH HIỆN ĐẠI Chun ngành: Hóa phân tích Mã số: 8.44.01.18 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC TS Nguyễn Hữu Tùng PGS.TS Dương Nghĩa Bang THÁI NGUYÊN - 2019 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn LỜI CẢM ƠN Trong trình nghiên cứu đề tài “Nghiên cứu phân tích cấu trúc hàm lượng số hợp chất có nấm hương (Lentinula edodes) phương pháp phân tích đại”, em nhận giúp đỡ, bảo nhiệt tình thầy giáo, gia đình bạn bè đồng nghiệp Em xin bày tỏ biết ơn đặc biệt đến TS Nguyễn Hữu Tùng - Trưởng nhóm nghiên cứu Hóa dược Hoạt chất sinh học, Trường Đại học Phenikaa PGS TS Dương Nghĩa Bang - Trưởng phòng Hành - Tổ chức, Trường ĐH Khoa Học - ĐH Thái Nguyên TS Lê Đăng Quang - Giám đốc trung tâm nghiên cứu triển khai hoạt chất sinh học, Viện Hóa học Cơng nghiệp Việt Nam; hướng dẫn em tận tình, chu đáo suốt trình làm luận văn, giúp em hoàn thành luận văn Em xin chân thành cảm ơn PGS.TS Phạm Thế Chính - Trưởng Khoa Hóa học thầy, khoa Hóa học trường ĐH Khoa học - ĐH Thái N bạn lớp cao học K11 tạo điều kiện giúp đỡ em suốt q trình hồn thành luận văn Em xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu toàn thể cán giáo viên Trường THPT Hàm Long - Bắc Ninh tạo điều kiện thuận lợi thời gian công việc để em hoàn thành luận văn Em xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè đồng nghiệp động viên, cổ vũ, khích lệ tinh thần suốt thời gian qua Mặc dù có nhiều cố gắng trình thực đề tài, song khơng thể tránh hạn chế thiếu sót Em mong nhận ý kiến đóng góp thầy giáo bạn bè đồng nghiệp Tác giả luận văn Dương Thúy Quỳnh Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn MỤC LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT a DANH MỤC HÌNH ẢNH b DANH MỤC BẢNG BIỂU d MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan phương pháp xác định cấu trúc 1.1.1 Phương pháp phổ hồng ngoại (IR) 1.1.2 Phương pháp phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H-NMR 13C-NMR 1.1.3 Phương pháp phổ khối lượng (MS) 1.1.4 Phân tích hàm lượng chất HPLC 1.2 Giới thiệu nấm hương (Lentinula edodes) 10 1.3 Lentinan 11 1.3.1 Đặc điểm cấu tạo 11 1.3.2 Hoạt tính ứng dụng Lentinan 13 1.4 Phương pháp chiết tách Lentinan 16 1.4.1 Một số phương pháp chiết tách phổ biến 16 1.4.2 Định hướng lựa chọn phương pháp chiết tách Lentinan 18 CHƯƠNG 2: THỰC NGHIỆM 19 2.1 Đối tượng, hóa chất thiết bị nghiên cứu 19 2.1.1 Đối tượng 19 2.1.2 Hóa chất 19 2.1.3 Thiết bị 19 2.2 Thực nghiệm 20 2.2.1 Phân tích hàm lượng Lentinan 20 2.2.2 Phương pháp tạo mẫu phân tích Lentinan 22 2.2.3 Phân tích xác định cấu trúc Lentinan 22 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn 2.2.4 Xác định hàm lượng tổng Phenolic .25 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 25 3.1 Xây dựng đường chuẩn β-glucan 25 3.2 Kết nghiên cứu trình tạo mẫu Lentinan 25 3.2.1 Nghiên cứu lựa chọn dung dịch đệm cho trình tạo mẫu Lentinan giai đoạn 26 3.2.2 Nghiên cứu lựa chọn pH dung dịch đệm cho trình tạo mẫu Lentinan giai đoạn 27 3.2.3 Qui trình tạo mẫu Lentinan 29 3.3 Phân tích xác định cấu trúc Lentinan 33 3.3.1 Đặc điểm mẫu M2 sở phương pháp phổ hồng ngoại IR 33 3.3.2 Phân tích chất M2 sở phương pháp ESI-MS/MS 34 3.3.3 Phân tích liệu thu sở phương pháp NMR 36 3.3.4 Phân tích khối lượng phân tử Lentinan (M2) phương pháp sắc ký thẩm thấu gel (Gel Permeation Chromatography) 40 3.3.5 Tổng hợp liệu phổ Lentinan (M2) 42 3.4 Phân tích xác định hàm lượng tổng Phenolic 42 KẾT LUẬN 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO 44 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn DANH MỤC CHỮ VIẾT TĂT 13 C- NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân carbon-13 (13C Nuclear Magnetic Resonance) DMSO Dimethyl sulfoxide Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton (1H Nuclear Magnetic H- NMR Resonance) IR Phổ hồng ngoại (Infrared Spectroscopy) MS Phổ khối lượng (Mass Spectrometry) NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (Nuclear Magnetic Resonance) ESI-MS Phổ khối lượng Ion hóa (Electrospray Ionization Mass Spectrometry) HSQC Phổ NMR chiều HSQC (Heteronuclear Single Quantum Coherence) HMBC Phổ NMR chiều HMBC (Heteronuclear Multiple Bond Correlation) Số hóa Trung tâm Học liệu Cơng nghệ thơng tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Phổ hồng ngoại - hidroxy - 4- metylcoumarin Hình 1.2 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân benzyl axetat Hình 1.3 Sơ đồ thiết bị phân tích HPLC Hình 1.4 Sơ đồ cấu trúc Lentinan [13] 12 Hình 1.5 Ảnh chụp kính hiển vi điện tử AFM ( Atomic force microscope) ảnh Lentinan dung dịch 250C [32] 12 Hình 1.6 Mơ hình phân tử xoắn kép ba theo chiều phải β-glucan (Lentinan) [29] 12 Hình 1.7 Liên kết β-1,3 glicozit β-1,6 glicozit [24] 13 Hình 1.8 Cơ chế kháng u Lentinan [32] 14 Hình 2.1 Đường chuẩn biểu diễn phụ thuộc mật độ quang vào nồng độ D-glucose 21 Hình 3.1 Đường chuẩn biểu diễn phụ thuộc mật độ quang vào nồng độ D-glucose 25 Hình 3.2 Qui trình tạo mẫu Lentinan (giai đoạn 1) 30 Hình 3.3 Qui trình tạo mẫu Lentinan (giai đoạn 2) 31 Hình 3.4 Qui trình tạo mẫu Lentinan 32 Hình 3.5 Phổ IR mẫu M2 34 Hình 3.6 Phổ ESI-MS (negative-mode) mẫu M2 chế độ MS/MS 34 Hình 3.7 Phổ LCMS-QTOF mẫu Lentinan tiêu chuẩn từ nấm hương [37] 35 Hình 3.8 Phân tử Lentinan dạng β-D-glucan polysaccharide với mảnh m/z 1151 tương ứng mắt xích C42H72O36 35 Hình 3.9 (A) Mảnh phân nhánh với liên kết β-D-1→6 glucosic liên kết β-D-1→3 glycosidic chuỗi lentinan Tương tác HMBC [ ] liên kết chuỗi (B) Cấu trúc Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn chuỗi xoắn helix tạo thành từ chuỗi đơn single lentinan dung môi nước DMSO [41] 37 Hình 3.10 Phổ 1H-NMR M2 ghi D2O tần số 500 MHz ghi máy Bruker AM 500 FT-NMR 38 Hình 3.11 Phổ 13C-NMR tín hiệu carbon thuộc mẫu M2 Mẫu ghi dung môi D2O tần số 125 MHz máy cộng hưởng từ hạt nhân Bruker AM 500 FT-NMR 38 Hình 3.12 Phổ C-NMR mẫu M2 phần giãn rộng từ δ 72-75.5 13 ppm 39 Hình 3.13 Phổ HSQC tín hiệu cross-peak mẫu M2 39 Hình 3.14 Phổ HMBC tín hiệu cross-peak thuộc mẫu M2 40 Hình 3.15 Khối lượng phân tử ước tính M2.1 (B) 40 Hình 3.16 Đường chuẩn định lượng biểu diễn phụ thuộc mật độ quang vào nồng độ acid gallic 42 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1.1 Một số loại β-glucan[10] 13 Bảng 3.1 Kết lựa chọn dung dịch đệm cho trình tạo mẫu Lentinan giai đoạn 26 Bảng 3.2 Kết lựa chọn pH dung dịch đệm photphat trình tạo mẫu Lentinan giai đoạn 28 Bảng 3.3 Tín hiệu 1H-NMR 13 C-NMR chất M2 ghi dung môi D2O 38 Bảng 3.4 Tổng hợp liệu phổ Lentinan (M2) .41 Số hóa Trung tâm Học liệu Cơng nghệ thơng tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn MỞ ĐẦU Hiện nay, phương pháp phổ không ứng dụng phạm vi ngành hóa học mà cịn nhiều ngành khác hóa sinh, y dược, nơng nghiệp, dầu khí, vật liệu, môi trường Sự phát triển mạnh mẽ phương pháp phổ giúp cho việc nghiên cứu ngành khoa học đặc biệt hóa học hợp chất thiên nhiên trở nên dễ dàng hơn, phát triển nhanh Trước đây, để chứng minh cấu tạo chất nhiều thời gianthậm chí có kéo dài nhiều năm thực sau vài giờ, làm nhờ hỗ trợ phương pháp vật lý đại Để phân tích cấu trúc hợp chất hữu sử dụng phương pháp phổ phổ hồng ngoại, phổ tử ngoại khả kiến, phổ cộng hưởng từ hạt nhân, phổ khối lượng Mỗi phương pháp cho phép xác định số thông tin khác cấu trúc phân tử hỗ trợ lẫn việc xác định cấu trúc hợp chất hữu Bên cạnh đó, với phát triển ngày cao khoa học kĩ thuật kinh tế xã hội, đời sống tinh thần vật chất người ngày nâng cao khơng ngừng cải thiện Theo đó, vấn đề đảm bảo tính “Sạch - An tồn - Tốt cho sức khỏe” sản phẩm sử dụng sống ngày trọng Các loại sản phẩm cung cấp đầy đủ chất dinh dưỡng đa lượng, vi lượng thiết yếu cho thể, bên cạnh chúng phải có tính phịng chữa bệnh Nấm ăn số loại thực phẩm đáp ứng mục tiêu Từ hàng ngàn năm nay, nấm loại thực phẩm ưa chuộng từ lâu đời xếp vào nguồn cung cấp thực phẩm chức nhiều quốc gia giới Trong số đó, nấm hương (Lentinula edodes) loại thực phẩm xem “Thịt - Rau sạch” có giá trị dinh dưỡng cao Nấm hương chứa nhiều nguyên tố đa lượng, vi lượng, khoáng acid amin Lentinula β-glucan từ nấm hương, polysacarit mang hoạt tính sinh học chất tăng cường miễn dịch phổ biến Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn KẾT LUẬN Sau thời gian thực đề tài hoàn thành nội dung nghiên cứu theo mục tiêu nghiên cứu đặt với kết sau: Từ nấm hương khô thu mua Lào Cai, phương pháp tách chiết tinh chế thu mẫu M2 dự đoán Lentinan: - Qui trình chiết xuất tinh chế qui mơ phịng thí nghiệm bao gồm bước chiết xuất nước có pH phù hợp; tách thơ, loại tạp tủa etanol tinh chế sắc ký cột trao đổi ion Phương pháp chiết tách sử dụng dụng cụ đơn giản; hóa chất dễ kiếm, khơng độc dễ dàng phát triển thành qui mô pilot công nghiệp - Xây dựng phương pháp định lượng Lentinan β-glucan phương pháp quang phổ UV-VIS áp dụng để phân tích mẫu Lentinan tinh chế hiệu suất chiết Mẫu Lentinan tinh chế có độ tinh khiết cao (>80%), phương pháp chiết xuất có hiệu suất cao (>90%) Phân tích mẫu M2 thu phương pháp phổ 1H NMR, phổ 13 C NMR, IR MS.Từ kết thu được, đưa kết luận độ tinh khiết cấu trúc mẫu thu Lentinan Đây nghiên cứu xác định cấu trúc Lentinan Việt Nam liệu phổ Lentinan đóng góp vào sở liệu hợp chất tự nhiên nấm hương nước ta, làm sở cho đánh giá chất lượng, xây dựng tiêu chuẩn sản phẩm chứa Lentinan nấm hương Xây dựng phương pháp định lượng phenolic tổng số phương pháp quang phổ UV-VIS kết cho thấy tổng phenolic mẫu nấm hương nghiên cứu 8,2 ± 1.3 % (khối lượng) Đây nghiên cứu phân tích phenolic tổng số nấm hương Việt Nam Đề tài luận văn hoàn thành với tài trợ đề tài "Nghiên cứu quy trình cơng nghệ chiết tách Lentinan từ nấm hương (Lentinula edodes) làm nguyên liệu sản xuất thực phẩm chức năng"; mã số: CNHD.ĐT.073/16-18 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Nguyễn Hữu Đĩnh, Trần Thị Đà (1999), Ứng dụng số phương pháp phổ nghiên cứu cấu trúc phân tử, NXB Giáo dục Việt Nam, Hà Nội Nguyễn Đình Triệu (2007), Các phương pháp phổ hóa học hữu hóa sinh, NXB Đại học Quốc gia Hà Nội, Hà Nội Nguyễn Đình Triệu (2006), Các phương pháp vật lý ứng dụng hóa học, NXB Đại học Quốc gia Hà Nội, Hà Nội Nguyễn Đình Thành (2011), Cơ sở phương pháp phổ ứng dụng hoá học, NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội Phạm Văn Nhiêu, Một số phương pháp phổ ứng dụng hóa học, Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội, năm 2011 Phạm Luận, Phương pháp phân tích sắc ký chiết tách, NXb BK HN 2014 Gia Bình, 2015, Nơng nghiệp cơng nghệ cao - Kỳ 5: Trồng nấm hương tiêu chuẩn VietGAP http://Thanh niên.vn Phạm Việt Cường cs, 2005 “Nghiên cứu xây dựng công nghệ sản xuất beta glucan từ thành nấm men dùng trongcông nghiệp thực phẩm, dược phẩm, mỹ phẩm”, Đề tài nghiên cứu, Viện Công nghệ sinh học, Hà Nội Huỳnh Trường Giang cs, 2011, “Sử dụng chiết suất β-Glucan từ rong biển để tăng sức đề kháng Tôm biển”, Kỷ yếu Hội nghị Khoa học thủy sản lần 4,Trường Đại học Cần Thơ, Cần Thơ : 103-113 10 Nguyễn Văn Mùi, 2001, Thực hành hóa sinh học, Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội 11 Lê Xuân Thám, Võ Thị Phương Khanh, Nguyễn Anh Dũng, 2000, “Bổ sung vào nhóm nấm chống ung thư Việt Nam: Nấm Hương (Nấm Donko, nấm shiitake)”, Tạp chí dược học, số 1/2000 12 Lê Duy Thắng, 2001, Kỹ thuật trồng nấm, NXB Nông nghiệp Hà Nội Số hóa Trung tâm Học liệu Cơng nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn 13 Ngô Vân Thu, Trần Hùng, 2011 “Carbohydrat dược liệu chứa carbohydrat”, Dược Liệu Học, Nhà xuất Y học, Hà Nội, Tập 1:104-106 14 Trần Thị Hồng Hà cộng sự, 2013, Đánh giá hoạt tính sinh học polysacarit hợp chất tách chiết từ nấm hương (Lentinus edodes), Tạp chí sinh học, 35(4): 445-453 TÀI LIỆU TIẾNG ANH 15 Alice W Chen, 2005 What is Shiitake.Shiitake cultivation Mushroom Growers Handbook 2: 1-17 16 Bożena Waszkiewicz-Robak, 2013 “Spent Brewer’s Yeast and BetaGlucans Isolated from Them as Diet Components Modifying Blood Lipid Metabolism Disturbed by an Atherogenic Diet”, InTech: 265 17 Bernadette Hozova cộng sự, 2004 “Application of β-D-Glucans Isolated from Mushrooms Pleurotusostreatus(Pleuran) and Lentinusedodes(Lentinan) for Increasing the Bioactivity of Yoghurts”, Czech J Food Sci., Tập 22, số 6: 204-214 18 Clark D, Adams M, 2007 “Using commercial nutraceutical mixes as immune stimulants: an in vitro proliferation study using Metabolic CellSupport on non-stimulated human lymphocytes”, Austr J Med Herbal, 19: 108-111 19 Daba A.S and Ezeronye O.U., 2003.“Anti-cancer effect of polysaccharides isolated from higher basidiomycetes mushrooms”, African Journal of Biotechnology (12): 672-678 20 Hazama S, Watanabe S, Ohashi M, et al, 2009 “Efficacy of orally administered superfine dispersersedlentinan (beta-1,3-glucan) for the treatment of advanced colorectal cancer”, Anticancer Res, 29(7): 2611-2617 21 Hyunjong Kwon (Miji)and Christopher Hobbs, 2005 Nutritional and medicinal values of shiitake Institute for Natural Products Research, The U.S Shiitake Cultivation Mush room Growers’Handbook 2, page 12 Số hóa Trung tâm Học liệu Cơng nghệ thơng tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn 22 Kataoka H, Shimura T, Mizoshita T, et al, 2009 "Lentinan with S-1 and paclitaxel for gastric cancer chemotherapy improve patient quality of life", Hepatogastroenterology, 56 (90): 547-450 23 Kuphahl C et al, 2006 “ Lentinan has a stimulatory effect on innate and adaptive immunity against murine Listeria monocytogenes infections”,Internationonalimmunopharmacology,6:686-696 24 Kitzberger C et al, 2007 “Antioxidant and antimicrobial activities of shiitake (Lentinulaedodes) extracts obtained by organic solvents and supercritical fluids”,Journal of food engineering,80: 631-638 25 Mah Lee Ng, 2001 “An Improved Method for the Isolation of Lentinan from the Edible and Medicinal Shiitake Mushroom, Lentinusedodes (Berk.)” International Journal of Medicinal Mushrooms, 3(1): 20 26 Mantovani et al, 2008 “β-Glucans in promoting health: Prevention against mutation and cancer”, Mutation Research, 658, pp.154-161 27 Megazyme International Ireland Ltd, 2008 “Mushroom and Yeast betaglucan” 28 Oba K, Kobayashi M, et al, 2009 “ Individual patient base meta-analysis of lentinan for unresetable/current gastric cancer”, Anticancer Research 29(7): 2739-45 29 Sia GM, Candlish JK, 1999 "Effects of shiitake (Lentinusedodes) extract on human neutrophils and the U937 monocytic cell line.", Phytother Res 13 (2): 133-7 30 Smith, Rowan and Sullivan, 2002 “Their therapeutic properties and current medical usage wint special emphasis on cancer treaments”, Medicinal Mushrooms, UK, 80-142 31 Surenjav U et al, 2006 “ Effects of molecular structure on antitumor activities of (1→3) -ßD-glucans from different LentinusEdodes”,Carbohydrate Polymers 63: 97-104 Số hóa Trung tâm Học liệu Cơng nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn 32 United States Patent 7138519 “Process for extracting of glucan from cereals and products abtainedthereform” 33 Taylor PR et al, 2002 “The beta-glucan receptor, dectin-1, is predominantly expressed on the surface of cells of the monocyte/macrophage and neutrophil lineages”, J Immunol, 169 (7):38763882 34 Zhang Y et al, 2011 “Advances in lentinan: Isolation, structure chain conformation and bioactivities”, Food Hydrocolloids 25:196-206 35 Zhang R et al, 2005 “Characterization and immunomodulating activities of polysaccharide from Lentinusedodes”, InternationImmunopharmacology 5: 811-820 36 Mohd Jami, N.A., 2014 Liquid Chromatography MS/MS Responses on Lentinan for Structure Characterization of Mushroom Polysaccharide β-DGlucan Journal of Chromatography & Separation Techniques 06 https://doi.org/10.4172/2157-7064.1000260 37 Mohd Jamil, N.A., Rahmad, N., Mohd Nor Rashid, N., Mohd Yusoff, M.H.Y., Shaharuddin, N.S., Mohd Saleh, N., 2013 LCMS-QTOF Determination of Lentinan-Like β-D-Glucan Content Isolated by Hot Water and Alkaline Solution from Tiger’s Milk Mushroom, Termite Mushroom, and Selected Local Market Mushrooms [WWW Document] Journal of Mycology https://doi.org/10.1155/2013/718963 38 Ren, G., Xu, L., Lu, T., Yin, J., 2018 Structural characterization and antiviral activity of lentinan from Lentinus edodes mycelia against infectious hematopoietic necrosis virus International Journal of Biological Macromolecules 115, 1202-1210 https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2018.04.132 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn 39 Wang, K., Wang, J., Li, Q., Zhang, Q., You, R., Cheng, Y., Luo, L., Zhang, Y., 2014 Structural differences and conformational characterization of five bioactive polysaccharides from Lentinus edodes Food Research International 62, 223-232 https://doi.org/10.1016/j.foodres.2014.02.047 40 Wang, X., Xu, X., Zhang, L., 2008 Thermally induced conformation transition of triple-helical lentinan in NaCl aqueous solution J Phys Chem B 112, 10343-10351 https://doi.org/10.1021/jp802174v 41 Zhang, L., Li, X., Zhou, Q., Zhang, X., Chen, R., 2002 Transition from Triple Helix to Coil of Lentinan in Solution Measured by SEC, Viscometry, and 13 C NMR Polymer Journal 34, 443-449 https://doi.org/10.1295/polymj.34.443 42 Zhang, P., Zhang, L., Cheng, S., 1999 Chemical Structure and Molecular Weights of α-(1→3)-D-Glucan from Lentinus edodes Bioscience, Biotechnology and Biochemistry 63, 1197-1202 https://doi.org/10.1271/bbb.63.1197 43 Zhu, H., Tian, L., Zhang, L., Bi, J., Song, Q., Yang, H., Qiao, J., 2018 Preparation, characterization and antioxidant activity of polysaccharide from spent Lentinus edodes substrate International Journal of Biological Macromolecules 112, 976-984 https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2018.01.196 44 Ren-You Gan, Xiang-Rong Xu, Feng-Lin Song, Lei Kuang and Hua-Bin Li (2010) Antioxidant acitivity and total phenolic content of medicinal plants associated with prevention and treatment of cardiovascular and cerebrovascular diseases Journal of Medicinal Plants Research, Vol 4, No 22, pp 2438-2444 45.Vadakkemuriyil Divya Nair, Rajaram Panneerselvam, Ragupathi Gopi (2012) Studies on methanolic extract of Rauvolfia species from Southern Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn Western Ghats of India – In vitro antioxidant properties, characterisation of nutrients and phytochemicals Industrial Crops and Products, Vol 39, pp 17-25 46 Marinova D., Ribarova F., Atanassova M (2005) Total phenolics and total flavonoids in Bulgarian fruits and vegetables Journal of the University of Chemical Technology and Metallurgy, Vol 40, No 3, pp 255-260 47 Seo SY, Jang YS, Ryoo R, Ka KH Antioxidant properties of water extracts from Lentinula edodes cultivars grown on oak log The Korean Journal of Mycology, 46(1), 51-56, 2018 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn PHỤ LỤC Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn Phổ 1H NMR (D2O, 500 MHz) Lentinan M2 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn Phổ 13C NMR (D2O, 125 MHz) Lentinan M2 Số hóa Trung tâm Học liệu Cơng nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn Phổ H-H COSY (D2O, 500 MHz) Lentinan M2 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn Phổ HSQC (D2O) Lentinan M2 Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu Cơng nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn Phổ HMBC (D2O) Lentinan M2 Số hóa Trung tâm Học liệu Cơng nghệ thơng tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu Công nghệ thông tin – ĐHTN http://lrc.tnu.edu.vn ... ? ?Nghiên cứu phân tích cấu trúc hàm lượng, số hợp chất có nấm hương (Lentinula edodes) phương pháp phân tích đại? ?? nhằm tách chiết, tinh chế phân tích cấu trúc hợp chất thiên nhiên có nấm hương, ...ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC DƯƠNG THÚY QUỲNH NGHIÊN CỨU PHÂN TÍCH CẤU TRÚC VÀ HÀM LƯỢNG MỘT SỐ HỢP CHẤT CÓ TRONG NẤM HƯƠNG (LENTINULA EDODES) BẰNG CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH HIỆN... http://lrc.tnu.edu.vn LỜI CẢM ƠN Trong trình nghiên cứu đề tài ? ?Nghiên cứu phân tích cấu trúc hàm lượng số hợp chất có nấm hương (Lentinula edodes) phương pháp phân tích đại? ??, em nhận giúp đỡ, bảo