PNT GPB Y3 CÁC KỸ THUẬT MÔ BỆNH HỌC CĂN BẢN

Liệt kê các khâu trong quy trình làm tiêu bản giải phẫu bệnh và nêu ý nghĩa của từng khâu. —Liệt kê các bước của khâu xử lý mô. —Liệt kê các bước của khâu nhuộm. Nêu sự khác biệt giữa nhuộm thường quy và nhuộm đặc biệt Kỹ thuật mô bệnh học là kỹ thuật mô học —sử dụng nhằm mục tiêu chẩn đoán bệnh —Cố định —Giữ nguyên hình thái tế bào – mô —Bảo tồn cấu trúc phân tử của tế bào – mô (đặc biệt là protein) —Giúp chẩn đoán đúng bệnh lý —Thực hiện thành công kỹ thuật hóa mô miễn dịch về sau khi cần thiết è QUAN TRỌNG trong toàn bộ quy trình

Mục tiêu — Liệt kê khâu quy trình làm tiêu giải phẫu bệnh nêu ý nghĩa khâu — Liệt kê bước khâu xử lý mô — Liệt kê bước khâu nhuộm Nêu khác biệt nhuộm thường quy nhuộm đặc biệt Kỹ thuật mô bệnh học — kỹ thuật mô học — sử dụng nhằm mục tiêu chẩn đốn bệnh Quy trình Cắt lọc bệnh phẩm Cố định (khử canxi cần) Xử lý mô Cắt mỏng Nhuộm Dán lamen Cắt lọc cố định bệnh phẩm — Bệnh phẩm: — Mẫu mô — Cơ quan Cắt lọc cố định bệnh phẩm — Cố định — Giữ nguyên hình thái tế bào – mô — Bảo tồn cấu trúc phân tử tế bào – mô (đặc biệt protein) — Giúp chẩn đốn bệnh lý — Thực thành cơng kỹ thuật hóa mơ miễn dịch sau cần thiết è QUAN TRỌNG tồn quy trình Cắt lọc cố định bệnh phẩm — Phương pháp cố định — Vật lý — Hóa học Cắt lọc cố định bệnh phẩm — Dung dịch formol trung tính 10% (pH # 6.8) — Formaldehyde 40% (HCHO) 100ml — nước cất 900ml — sodium phosphat monobasic (NaH2PO4) 4g — sodium phosphat dibasic (Na2HPO4) 6,5g Cắt lọc cố định bệnh phẩm — Dung dịch formol trung tính 10% (pH # 6.8) — Rẻ tiền — Tính ổn định — Làm cứng mơ, gây co rút — Phù hợp với hầu hết phương pháp nhuộm đặc biệt sau 8.1 Nhuộm thường quy 8.2 Nhuộm đặc biệt 8.2 Nhuộm đặc biệt Dán lamen — Các phiến kính độ dày 0.15 – 0.25 mm — Dung dịch keo — tự nhiên (Baume Canada) — tổng hợp (Eukit, Permount, Entellan, …) — Độ chiết xuất tương tự thủy tinh, suốt, khô cứng nhanh — Giữ màu nhuộm khơng bị phai oxy hóa khơng khí Dán lamen — Khử nước ethanol nồng độ tăng dần — Khử ethanol xylen làm mẫu mô nhuộm — Nhỏ giọt dung dịch keo lên lát cắt lamen — Áp lại với nhau, đẩy hết bọt khí — Để khơ tự nhiên khơng khí tủ ấm Dán lamen Kỹ thuật hóa mơ miễn dịch — Phản ứng kết hợp đặc hiệu — Kháng nguyên — Kháng thể — Phát protein tế bào mô — Hiển thị kính hiển vi quang học theo cách — Hoạt động enzyme làm màu # hóa mơ miễn dịch men — phẩm nhuộm huỳnh quang # miễn dịch huỳnh quang Hóa mơ miễn dịch men Hóa mơ miễn dịch men — Ưu điểm : — thực lát cắt bệnh phẩm cố định formol vùi paraffin — Kết tủa màu mâu bảo tồn nhiều năm — Ứng dụng : — Phân biệt nguồn gốc xuất phát — Giúp đánh giá tiên lượng đáp ứng điều trị — Giúp phân biệt u lành u ác biệt hóa cao Miễn dịch huỳnh quang — Kháng thể gắn với phẩm nhuộm huỳnh quang — Khi có phản ứng kết hợp kháng nguyên – kháng thể àphát huỳnh quang kích thích ánh sáng đơn sắc quan sát kính hiển vi huỳnh quang — Trực tiếp gián tiếp Miễn dịch huỳnh quang — Chẩn đoán bệnh lý cầu thận, số bệnh lý da — Nhược điểm : — Thực lát cắt từ mô tươi — Khả phát tia huỳnh quang kéo dài tuần — Cần kính hiển vi huỳnh quang để quan sát ... không đạt yêu cầu 2 Khử canxi — Khi bệnh phẩm có chứa muối canxi — Xương — Sụn — Răng — Một số loại u khác — Giúp cho trình cắt mỏng dễ dàng Khử canxi — Các dung dịch khử canxi — acid nitric 5%... chlohydric 4-8% (HCl) —… Khử canxi — Lấy hết canxi — Không làm hư mẫu mô — Không ảnh hưởng đến chất lượng khâu tiếp sau Khử canxi — Cắt lọc bệnh phẩm mảnh dày – mm — Cố định formol 10% — Lọ chứa dung... Hóa học Cắt lọc cố định bệnh phẩm — Dung dịch formol trung tính 10% (pH # 6.8) — Formaldehyde 40% (HCHO) 100ml — nước cất 900ml — sodium phosphat monobasic (NaH2PO4) 4g — sodium phosphat dibasic