Nghiên cứu khả năng kháng khuẩn của một số loài thuộc chi nấm GanodermaNghiên cứu khả năng kháng khuẩn của một số loài thuộc chi nấm GanodermaNghiên cứu khả năng kháng khuẩn của một số loài thuộc chi nấm GanodermaNghiên cứu khả năng kháng khuẩn của một số loài thuộc chi nấm GanodermaNghiên cứu khả năng kháng khuẩn của một số loài thuộc chi nấm GanodermaNghiên cứu khả năng kháng khuẩn của một số loài thuộc chi nấm GanodermaNghiên cứu khả năng kháng khuẩn của một số loài thuộc chi nấm GanodermaNghiên cứu khả năng kháng khuẩn của một số loài thuộc chi nấm GanodermaNghiên cứu khả năng kháng khuẩn của một số loài thuộc chi nấm GanodermaNghiên cứu khả năng kháng khuẩn của một số loài thuộc chi nấm GanodermaNghiên cứu khả năng kháng khuẩn của một số loài thuộc chi nấm Ganoderma
BỘ TÀI NGUYÊN VÀ MÔI TRƯỜNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC TÀI NGUYÊN VÀ MÔI TRƢỜNG HÀ NỘI LUẬN VĂN THẠC SĨ NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA MỘT SỐ LOÀI THUỘC CHI NẤM GANODERMA CHUYÊN NGÀNH: KHOA HỌC MÔI TRƢỜNG PHẠM THẢO LINH HÀ NỘI, NĂM 2019 BỘ TÀI NGUYÊN VÀ MÔI TRƯỜNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC TÀI NGUYÊN VÀ MÔI TRƢỜNG HÀ NỘI LUẬN VĂN THẠC SĨ NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA MỘT SỐ LOÀI THUỘC CHI NẤM GANODERMA CHUYÊN NGÀNH: KHOA HỌC MÔI TRƢỜNG MÃ SỐ: 8440301 PHẠM THẢO LINH NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS PHAN DUỆ THANH TS LÊ THANH HUYỀN HÀ NỘI, NĂM 2019 CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HỒN THÀNH TẠI TRƢỜNG ĐẠI HỌC TÀI NGUYÊN VÀ MÔI TRƢỜNG HÀ NỘI Cán hướng dẫn 1: TS Phan Duệ Thanh (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị) Cán hướng dẫn 2: TS Lê Thanh Huyền (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị) Cán chấm phản biện 1: (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị) Cán chấm phản biện 2: (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị) Luận văn thạc sĩ bảo vệ tại: HỘI ĐỒNG CHẤM LUẬN VĂN THẠC SĨ TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÀI NGUYÊN VÀ MÔI TRƯỜNG HÀ NỘI Ngày 16 tháng 01 năm 2019 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu khoa học độc lập riêng Kết nghiên cứu luận văn trung thực thực sở nghiên cứu lý thuyết khảo sát tình hình thực tiễn Vườn quốc gia Tam Đảo, Vườn quốc gia Xuân Sơn, Trạm đa dạng sinh học Mê Linh, nghiên cứu phòng thí nghiệm Khoa Mơi trường – Trường Đại học Tài nguyên Môi trường Hà Nội, Bộ môn Công nghệ Sinh học – Trường Đại học Sư Phạm Hà Nội hướng dẫn khoa học TS Phan Duệ Thanh TS Lê Thanh Huyền Nội dung luận văn có sử dụng tài liệu tham khảo liệt kê rõ ràng đầy đủ theo danh mục tài liệu tham khảo Tôi xin cam đoan kết chưa công bố nghiên cứu khác Hà Nội, ngày 16 tháng 01 năm 2019 TÁC GIẢ LUẬN VĂN (Ký ghi rõ họ tên) Phạm Thảo Linh `ii LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu tồn thể q thầy, giáo khoa Môi trường, Trường Đại học Tài nguyên Môi trường Hà Nội, Bộ môn Công nghệ Sinh học – Vi sinh, Khoa Sinh, Trường Đại học Sư Phạm Hà Nội truyền đạt giúp đỡ suốt trình học tập rèn luyện, tạo điều kiện cho tơi thực thí nghiệm phòng thí nghiệm Khoa Tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến hai Cô giáo TS Phan Duệ Thanh TS Lê Thanh Huyền hết l ng giúp đỡ, dạy ảo, động viên tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình nghiên cứu hoàn thành luận văn Đồng thời, xin cảm ơn Ban quản lý Vườn quốc gia Tam Đảo, Vườn quốc gia Xuân Sơn, Trạm đa dạng sinh học Mê Linh tạo điều kiện cho nghiên cứu tiến hành khảo sát thực địa Cảm ơn bạn hai trường đồng hành suốt thời gian dài làm nghiên cứu Cuối xin gửi lời cảm ơn chân thành tới gia đình ạn è, ln tạo điều kiện, quan tâm, giúp đỡ động viên suốt q trình nghiên cứu hồn thành nghiên cứu Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 16 tháng 01 năm 2019 TÁC GIẢ LUẬN VĂN Phạm Thảo Linh `iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN iii LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG vii DANH MỤC CÁC HÌNH viii MỞ ĐẦU 10 CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU 1.1 Lịch sử nghiên cứu nấm Ganoderma 1.1.1 Tình hình nghiên cứu nấm Ganoderma giới 1.1.2 Tình hình nghiên cứu nấm Ganoderma Việt Nam 1.2 Đặc điểm sinh học nấm Ganoderma 10 1.2.1 Khái quát chung chi nấm Ganoderma 10 1.2.2 Đặc điểm sinh học chi tiết chi nấm Ganoderma 15 1.2.3 Giá trị, ý nghĩa, vai trò chi nấm Ganoderma 18 1.3 Một vài đặc điểm khu vực nghiên cứu 20 1.3.1 Vườn quốc gia Tam Đảo 20 1.3.2 Vườn quốc gia Xuân Sơn 23 1.3.3 Trạm đa dạng sinh học Mê Linh 26 CHƢƠNG 30 ĐỐI TƢỢNG, PHẠM VI VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1 Đối tượng nghiên cứu 30 2.2 Địa điểm nghiên cứu 30 2.2.1 Địa điểm thu mẫu 30 2.2.2 Phạm vi nghiên cứu 30 2.3 Thiết bị nghiên cứu 30 `iv 2.4 Môi trường nghiên cứu 31 2.5 Phương pháp nghiên cứu 32 2.5.1 Phương pháp thu mẫu bảo quản 32 2.5.2 Phương pháp thu thập tài liệu 34 2.5.3 Phương pháp phân tích 35 2.5.4 Phương pháp đánh giá hoạt tính sinh học 37 2.5.5 Phương pháp sấy đến khối lượng không đổi 38 2.5.6 Phương pháp thu dịch 39 2.5.7 Phương pháp thống kê xử lý số liệu 39 CHƢƠNG 40 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 40 3.1 Phân loại mẫu nghiên cứu 40 3.2 Kết phân lập khiết chủng nấm thuộc chi nấm Ganoderma khu vực nghiên cứu 48 3.2.1 Kết phân lập lần thứ 48 3.2.2 Kết phân lập lần thứ hai 50 3.2.3 Kết phân lập lần thứ ba 51 3.2.4 Cấy chuyển lưu giữ chủng nấm ống thạch nghiêng 53 3.2.5 Thu dịch nuôi cấy nấm 54 3.3.Đánh giá khả kháng khuẩn chủng nấm nghiên cứu 56 3.4 Đề xuất giải pháp bảo tồn loài thuộc chi nấm Ganoderma khu vực nghiên cứu 64 3.4.1 Các giải pháp bảo tồn nguyên vị 64 3.4.2 Các giải pháp bảo tồn chuyển vị 65 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 66 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC `v TÓM TẮT LUẬN VĂN Họ tên học viên : Phạm Thảo Linh Lớp : CH3AMT Cán hướng dẫn 1: TS Phan Duệ Thanh Cán hướng dẫn 2: TS Lê Thanh Huyền Tên đề tài: Nghiên cứu khả kháng khuẩn số loài thuộc chi nấm Ganoderma Tóm tắt: Luận văn trình ày kết nghiên cứu gồm thu 39 mẫu khu vực nghiên cứu, phân loại, phân lập hệ sợi môi trường thạch, môi trường dịch lỏng xác định khả kháng khuẩn mẫu (Ganoderma aff brownii, Ganoderma sp.1, Ganoderma aff philippi, Ganoderma aff lucidum, Ganoderma sinense, Ganoderma aff neo-japnicum Imaz) thuộc chi nấm Ganoderma vi khuẩn Escherichia coli, Bacillus subtilis, Vibrio parahaemolyticus, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa Từ khóa: Đa dạng sinh học, kháng khuẩn, nấm lớn, Ganoderma, VQG Tam Đảo, VQG Xuân Sơn, Trạm ĐDSH Mê Linh Summary: The thesis presents results of sampling 39 samples from the research area, species classification, hyphae mycelium isolation in agar environment, pure fungi in liquid environment and determining antibacterial possibilities of samples that belong to the Ganoderma fungi line (Ganoderma aff brownii, Ganoderma sp.1, Ganoderma aff philippi, Ganoderma aff lucidum, Ganoderma sinense, Ganoderma aff neo-japnicum Imaz) with Escherichia coli, Bacillus subtilis, Vibrio parahaemolyticus, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa bacteria Key words: Biodiversity, antibacterial, large fungi, Ganoderma, Tam Dao National Park, Xuan Son National Park, MeLinh Station for Biodiversity `vi DANH MỤC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Giải thích VQG Vườn quốc gia KVNC Khu vực nghiên cứu VSV Vi sinh vật KHM Ký hiệu mẫu ĐDSH Đa dạng sinh học ADN Acid deoxyribonucleotide MT Môi trường PDA Potato Dextrose Agar MPA Malt Pepton Agar sp.1 Species aff affinis E.coli Escherichia coli `vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Phân loại chi nấm Ganoderma 10 Bảng 1.2: Các yếu tố sinh thái 13 Bảng 1.3: Đặc điểm số loại nấm Linh chi Đài Loan 17 Bảng 3.1: Đường kính hệ sợi nấm sau ngày nuôi cấy lần thứ 49 Bảng 3.2: Đường kính hệ sợi nấm sau ngày nuôi cấy lần thứ hai 51 Bảng 3.3: Đường kính hệ sợi nấm sau ngày cấy lần thứ ba 52 Bảng 3.4: Khối lượng sinh khối tươi thu từ dịch nuôi lắc hệ sợi sau ngày 55 Bảng 3.5: Khối lượng sinh khối thu từ dịch nuôi lắc hệ sợi sau ngày sấy khô 40oC 57 Bảng 3.6: Khả kháng khuẩn dịch chiết nấm vi khuẩn kiểm định Escherichia coli 59 Bảng 3.7: Khả kháng khuẩn dịch chiết nấm vi khuẩn kiểm định Vibrio parahaemolyticus 60 Bảng 3.8: Khả kháng khuẩn dịch chiết nấm vi khuẩn kiểm định Bacillus subtilis 61 Bảng 3.9: Khả kháng khuẩn dịch chiết nấm vi khuẩn kiểm định Staphylococcus aureus 61 Bảng 3.10: Khả kháng khuẩn dịch chiết nấm vi khuẩn kiểm định Pseudomonas aeruginosa 62 ... TÀI NGUYÊN VÀ MÔI TRƢỜNG HÀ NỘI LUẬN VĂN THẠC SĨ NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA MỘT SỐ LOÀI THUỘC CHI NẤM GANODERMA CHUYÊN NGÀNH: KHOA HỌC MÔI TRƢỜNG MÃ SỐ: 8440301 PHẠM THẢO LINH NGƢỜI HƢỚNG... LIỆU NGHIÊN CỨU 1.1 Lịch sử nghiên cứu nấm Ganoderma 1.1.1 Tình hình nghiên cứu nấm Ganoderma giới 1.1.2 Tình hình nghiên cứu nấm Ganoderma Việt Nam 1.2 Đặc điểm sinh học nấm. .. 3.2.5 Thu dịch nuôi cấy nấm 54 3.3.Đánh giá khả kháng khuẩn chủng nấm nghiên cứu 56 3.4 Đề xuất giải pháp bảo tồn loài thuộc chi nấm Ganoderma khu vực nghiên cứu 64 3.4.1