Nghiên cứu ảnh hưởng của dung môi tách chiết đến hoạt tính kháng khuẩn của cây elephantopus sp

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA DUNG MÔI TÁCH CHIẾT ĐẾN HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA CÂY ELEPHANTOPUS SP Ngành: CƠNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : ThS Phạm Minh Nhựt TS Lương Tấn Trung Sinh viên thực MSSV: 1151110379 : Dương Minh Trí Lớp: 11DSH04 TP Hồ Chí Minh, 2015 Đồ án tốt nghiệp NHẬN XÉT CỦA GIÁO VIÊN ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… i Đồ án tốt nghiệp LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đồ án nghiên cứu riêng thực sở lý thuyết, tiến hành nghiên cứu thực tiễn hướng dẫn ThS Phạm Minh Nhựt Các số liệu, kết nêu đồ án trung thực chưa công bố cơng trình nghiên cứu khác Tơi xin chịu trách nhiệm lời cam đoan Tp Hồ Chí Minh, ngày 20 tháng năm 2015 Sinh viên Dương Minh Trí ii Đồ án tốt nghiệp LỜI CẢM ƠN Trước hết, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Ban Giám Hiệu Trường Đại học Công Nghệ Tp Hồ Chí Minh, q thầy giảng dạy Khoa Công nghệ Sinh học - Thực phẩm - Môi trường tất thầy cô truyền dạy kiến thức quý báu cho em suốt năm học vừa qua Qua em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến thầy Phạm Minh Nhựt, người định hướng nghiên cứu, quan tâm, tận tình hướng dẫn giúp đỡ em suốt thời gian làm khố luận tốt nghiệp Bên cạnh em xin cảm ơn thầy Phòng Thí nghiệm Khoa Công nghệ sinh học - Thực phẩm - Môi trường anh chị, bạn bè nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để em hồn thành tốt đề tài Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn đến gia đình ln bên cạnh, động viên lúc khó khăn, nản lòng suốt thời gian học tập, nghiên cứu sống Tp Hồ Chí Minh, ngày 20 tháng năm 2015 Sinh viên Dương Minh Trí Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC TRANG BÌA LỜI CAM ĐOAN ii LỜI CẢM ƠN iii MỤC LỤC iv DANH SÁCH CHỮ VIẾT TẮT viii DANH SÁCH CÁC BẢNG ix DANH SÁCH CÁC HÌNH x MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu nghiên cứu Nội dung nghiên cứu Phạm vi nghiên cứu CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu Elephantopus sp 1.1.1 Nguồn gốc Elephantopus sp 1.1.2 Phân loại 1.1.3 Đặc điểm thực vật học 1.1.4 Một số thành phần hóa học Elephantopus sp 1.1.5 Tính chất dược lý 1.2 Tổng quan hợp chất kháng khuẩn từ thực vật 1.2.1 Khái niệm phân loại Đồ án tốt nghiệp 1.2.2 Cơ chế kháng khuẩn hợp chất từ thực vật 1.2.3 Một số hợp chất kháng khuẩn thực vật 1.2.4 Tình hình nghiên cứu hợp chất kháng khuẩn từ thực vật giới Việt Nam 16 1.3 Phương pháp tách chiết hợp chất kháng khuẩn 18 1.3.1 Nguyên lý trình tách chiết 18 1.3.2 Cơ sở trình tách chiết 18 1.3.3 Các phương pháp tách chiết số hợp chất kháng khuẩn 18 1.4 Giới thiệu số nhóm vi sinh vật gây bệnh 22 1.4.1 Nhóm vi sinh vật gây bệnh tiêu chảy 22 1.4.2 Nhóm vi sinh vật gây bệnh hội da 26 1.5 Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) 30 1.5.1 Khái niệm 30 1.5.2 Ý nghĩa 30 1.5.3 Cách xác định số MIC 31 CHƯƠNG 2: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 32 2.1 Địa điểm thời gian nghiên cứu 32 2.1.1 Địa điểm 32 2.1.2 Thời gian nghiên cứu 32 2.2 Vật liệu 32 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu 32 2.2.2 Vật liệu nghiên cứu 32 2.2.3 Mơi trường ni cấy hóa chất 33 Đồ án tốt nghiệp 2.2.4 Dụng cụ thiết bị 33 2.3 Phương pháp nghiên cứu 34 2.3.1 Phương pháp tách chiết hợp chất từ thực vật 34 2.3.2 Phương pháp tăng sinh 34 2.3.3 Phương pháp bảo quản giữ giống vi sinh vật 35 2.3.4 Phương pháp xác định mật độ tế bào 36 2.3.5 Phương pháp pha loãng mẫu 36 2.3.6 Phương pháp xác định hoạt tính kháng khuẩn cao chiết 36 2.3.7 Phương pháp xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) 37 2.3.8 Phương pháp xác định thành phần hóa học 37 2.3.9 Phương pháp xử lý số liệu 38 2.4 Bố trí thí nghiệm 38 2.4.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng dung môi tách chiết đến hiệu suất thu hồi cao từ Elephantopus sp 39 2.4.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng dung mơi tách chiết đến hoạt tính kháng khuẩn cao chiết Elephantopus sp 43 2.4.3 Thí nghiệm 3: Xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) cao chiết ethanol 70% từ Elephantopus sp 44 2.4.4 Thí nghiệm 4: Định tính số thành phần hóa học loại cao chiết từ Elephantopus sp 45 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 53 3.1 Kết khảo sát ảnh hưởng dung môi tách chiết đến hiệu suất thu hồi cao từ Elephantopus sp 53 Đồ án tốt nghiệp 3.2 Kết khảo sát ảnh hưởng dung mơi tách chiết đến hoạt tính kháng khuẩn cao chiết từ Elephantopus sp 54 3.2.1 Kết đánh giá hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết nhóm vi khuẩn Escherichia coli 55 3.2.2 Kết đánh giá hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết nhóm vi khuẩn Salmonella spp 56 3.2.3 Kết đánh giá hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết nhóm vi khuẩn Shigella spp 58 3.2.4 Kết đánh giá hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết nhóm vi khuẩn Vibrio spp 60 3.2.5 Kết đánh giá hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết nhóm vi sinh vật lại 63 3.3 Kết xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) cao chiết ethanol 70% từ Elephantopus sp 68 3.4 Kết định tính số thành phần hóa học loại cao chiết từ Elephantopus sp 69 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 70 4.1 Kết luận 70 4.2 Đề nghị 70 TÀI LIỆU THAM KHẢO 73 PHỤ LỤC vii Đồ án tốt nghiệp DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT TSB: Trypton Soya Broth TSA: Trypticase Soya Agar DMSO: Dimethyl Sulfoxide MIC: Minimum Inhibitory Concentration Đồ án tốt nghiệp DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng 3.1 Hiệu suất thu hồi cao từ loại dung môi khác 53 Bảng 3.2 Kết hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết khác từ Elephantopus sp 20 chủng vi sinh vật thị 64 Bảng 3.3 Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) cao chiết từ dung môi ethanol 70% chủng vi sinh vật đối kháng 66 Bảng 3.4 Kết định tính số thành phần hóa học Elephantopus sp 68 Naveed Ahmad et al, 2011 Antioxidant and antimicrobial attributes of different solvent extracts from leaves and flowers of Calotropis procera (Ait.) Ait F Journal of Medicinal Plants Research Vol 5(19), pp 4879-4887 Lin CC, Tsai CC, Yen MH, 1995 The evaluation of hepatoprotective effects of Taiwan folk medicine 'Teng-Khia-U' Journal of Ethnopharmacology, 45(2):113123 Lorenzi H, 1982 Weeds of Brazil, terrestrial and aquatic, parasitic, poisonous and medicinal (Plantas daninhas de Brasil, terrestres, aquaticas, parasitas, toxicas e medicinais.) Nova Odessa, Brazil: H Lorenzi, 425 pp Missouri Botanical Garden, 2013 Tropicos database St Louis, USA: Missouri Botanical Garden http://www.tropicos.org/ Ngueguim FT, Khan MP, Donfack JH, Siddiqui JA, Tewari D, Nagar GK, Tiwari SC, Theophile D, Rakesh Maurya, Chattopadhyay N, 2012 Evaluation of Cameroonian plants towards experimental bone regeneration Journal of Ethnopharmacology, 141(1):331-337 Nicholls DF, Plucknett DL, 1972 Control of Elephantopus in Hawaii's pastures Hawaii Farm Science, 21(1):3-5 Ooi KhengLeong, Tengku Sifzizul TM, Tan MeiLan, Shaida Fariza Sulaiman, 2011 Cytotoxic, apoptotic and anti-alpha-glucosidase activities of 3,4-di-Ocaffeoyl quinic acid, an antioxidant isolated from the polyphenolic-rich extract of Elephantopus mollis Kunth Journal of Ethnopharmacology, 135(3):685-695 O O Igbinosa et al, 2009 Antimicrobial activity and phytochemical screening of stem bark extracts from Jatropha curcas (Linn) African Journal of Pharmacy and Pharmacology Vol 3(2) pp 058-062 Queensland Government, 2013 Tobacco weed (Elephantopus mollis) Queensland, Australia: Queensland Government, Department of Agriculture, Fisheries and Forestry 76 Radulovíc ctv (2013) “Antimicrobial Plant Metabolites: Structural Diversity and Mechanism of Action” Current Medicinal Chemistry, 20, 932-952 Rayes A A.H (2012), Screening of some natural and cultivated plants in sudia arabia fight infections and inhibit growth of pathogenic bacteria, Faculty of Applied Sciences, Umm A1 – Qura University Makkah Saudi Arabia Study on the chemical constituents of Elephantopus mollis / Liang N1, Yang XX, Wang GC, Wu X, Yang YT, Luo HJ, Li YL / Zhong Yao Cai 2012 Nov;35(11):1775-8 Tabopda TK, Ngoupayo J, Liu JiaWei, Ali MS, K han SN, Ngadjui BT, Luu B, 2008 Further cytotoxic sesquiterpene lactones from Elephantopus mollis Kunth Chemical & Pharmaceutical Bulletin, 56(2):231-233 Topoclimate Australia, 2013 Elephantopus (Elephantopus mollis) Coffs Harbour, New South Wales, Australia: Topoclimate Australia Inhibitory Effect of Elephantopus mollis H.B and K Extract on Melanogenesis in B16 Murine Melanoma Cells by Downregulating Microphthalmia-Associated Transcription Factor Expression / Kiyotaka Hasegawa, Rikako Furuya et al / Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry, Vol 74 (2010) , No pp.1908-1912 Chemoprevention Bioactivity of Elephantopus mollis / David Sheng Yang Wang, Hsing-Ning Chang et al, 2007/ Poster / American Society of Plant Biologists Wendakoon C., Calderon P., Gagnon D (2012), Evaluation of selected medicinal plants extracted in different ethanol concentrations for antibacterial activity against human pathogens, Journal of Medicinally Active Plants 77 PHỤ LỤC A: KẾT QUẢ KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA DUNG MÔI TÁCH CHIẾT ĐẾN HIỆU SUẤT THU HỒI CAO TỪ CÂY ELEPHANTOPUS SP A.1 Kết khảo sát ảnh hưởng dung môi tách chiết đến hiệu suất thu hồi cao từ Elephantopus sp N Et Et Et Dung môi tách chiết L 11 1 1 17 17 17 71 71 81 3 Hiệu suất thu hồi cao (%) A.2 Kết hiệu suất thu hồi loại cao tất lần lặp lại xử lý thống kê Bảng One – Way ANOVA So Su Df ur Be m 34 tw Wi 50 0.6 thi To 82 35 11 tal 18 M F- Pea 11 Ra 13 Va 0.0 50 0.0 4.8 00 85 Bảng Multiple Range Tests Method: 95.0 percent Tukey HSD D C M Ho un X Et ou ea 13 mo 15 74 X Nu oc 17 15 X Et 17 45 X Et 89 PHỤ LỤC B: KẾT QUẢ KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA DUNG MƠI TÁCH CHIẾT ĐẾN HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA CAO CHIẾT TỪ CÂY ELEPHANTOPUS SP B.1 Kết hoạt tính kháng khuẩn cao chiết nước (100 mg/ml) từ Elephantopus sp đối chủng vi sinh vật thị S T1 01 12 31 41 15 16 71 81 29 E sE s E sE nL i L Si aS Sa Sa aS hS Sh hV iV i V i V iP sS t E n L 11 2- L L 1 2 B.2 Kết hoạt tính kháng khuẩn cao chiết ethanol 50% (100 mg/ml) từ Elephantopus sp đối chủng vi sinh vật thị S T1 01 12 13 41 15 16 71 81 29 E sE s E sE nL i L Si aS aS Sa aS hS Sh h V iV i V i V iP sS t E n L L L 1 2 1 4 1 0 1 1 1 B.3 Kết hoạt tính kháng khuẩn cao chiết ethanol 70% (100 mg/ml) từ Elephantopus sp đối chủng vi sinh vật thị S T1 01 12 13 41 15 16 71 81 29 E sE s E sE nL i L Si aS aS Sa aS hS Sh h V iV i V i V iP sS t E n L 11 L 21 1 L 31 2 1 31 16 71 31 12 16 71 1 31 12 15 71 B.4 Kết hoạt tính kháng khuẩn cao chiết ethanol 90% (100 mg/ml) từ Elephantopus sp đối chủng vi sinh vật thị S T1 01 12 13 41 15 16 71 81 29 E sE s E sE nL i L Si aS aS Sa aS hS Sh h V iV i V i V iP sS t E n L 11 61 1- L L 1 1 2 B.5 KẾT QUẢ KHÁNG KHUẨN CỦA ĐỐI CHỨNG CIPROFLOXACIN ĐỐI VỚI CÁC CHỦNG VI SINH VẬT CHỈ THỊ Ciprofloxacin S T 1E sE sE s 4E n E 5T 6E L Sis aS aS Sa 01 aS hS 12 Sh h 13 V 41 iV 51 iV i 16 V 71 iP 81 sS t 29 E 0n LµgL L 10 0 0 0 0 0 15 61 13 17 10 0 50 L0 LL 20 30 11 0 13 0 21 0 33 0 0 11 0 12 0 12 0 31 0 13 0 10 0 1 33 415.1 33 61 61 24 3114 23 188.1 22 10 10 18 0 21 0 12 2113 31.5 12 21.5 13 331 1.5 112 21.5 12 12.51 112 31.5 12 12.51 10 113 332 3.53 42 42 2333 2328 81.5 12 1.5 12 1212 1.5 PHỤ LỤC C: XỬ LÝ THỐNG KÊ KẾT QUẢ HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA CÁC LOẠI CAO CHIẾT TỪ CÂY ELEPHANTOPUS SP C.1 Xử lý thống kê kết hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết từ Elephantopus sp nhóm Escherichia coli C.1.1 Xử lý thống kê kết hoạt tính kháng khuẩn chủng E coli O157:H7 ANOVA Table for DK vong KK by Dung moi So Su Df M F- Pur Be m 16 ea 41 Ra 49 Va 0.0 tw 6.0 51 8.2 00 Wi 0.8 10 0.0 thi To 33 16 14 83 tal 6.9 Multiple Range Tests for DK vong KK by Dung moi Method: 95.0 percent Tukey HSD D Co M Ho un 3un 6.0 ea X mo Et 6.0 X Nu oc 6.0 X Et 12 X Et Ci 16 13 X pr 33 C.1.2 Xử lý thống kê kết hoạt tính kháng khuẩn chủng E coli ANOVA Table for dkinh by dung moi So Su Df M F- Pur 18 m 45 ea 98 Ra 0.0 Va Be tw 4.6 3.7 10 0.4 94 45 00 Wi thi 66 To 18 14 66 tal 8.4 Multiple Range Tests for dkinh by dung moi Method: 95.0 percent Tukey HSD du Co M Ho ng 3un 6.0 ea X mo eth an nu 6.0 X oc eth 12 X an cip 513 X ro eth 33 13 X an C.1.3 Xử lý thống kê kết hoạt tính kháng khuẩn chủng Lis Innocua ANOVA Table for duong kinh kk by Dung moi So Su Df M F- Pur Be m 13 ea 33 Ra 25 Va 0.0 tw 3.6 0.5 00 Wi 1.3 10 0.1 thi To 33 13 14 33 tal 4.9 Multiple Range Tests for duong kinh kk by Dung moi Method: 95.0 percent Tukey HSD D Co M Ho un 3un 6.0 ea X mo eth an 6.0 X nu oc 6.0 X eth an 11 X eth an 12 83 X cip ro 33 C.1.4 Xử lý thống kê kết hoạt tính kháng khuẩn chủng Pseudomonas ANOVA Table for dkkk by Dung moi So Su Df M F- Pur Be m 13 ea 33 Ra 11 Va 0.0 tw 3.7 43 1.4 00 Wi 3.0 10 0.3 thi To 13 14 tal 6.7 Multiple Range Tests for dkkk by Dung moi Method: 95.0 percent Tukey HSD D Co M Ho un 3un 6.0 ea X mo Et 6.0 X Nu oc 11 X Et Et 66 11 X Ci 83 12 X pr 66 C.1.5 Xử lý thống kê kết hoạt tính kháng khuẩn chủng S dublin ANOVA Table for dkkk by dung moi So Su Df M F- Pur Be m 24 ea 61 Ra 33 Va 0.0 tw 7.0 76 6.9 00 Wi 1.8 10 0.1 thi To 33 24 14 83 tal 8.9 Multiple Range Tests for dkkk by dung moi Method: 95.0 percent Tukey HSD du Co M Ho ng 3un 6.0 ea X mo Nu oc 6.0 X Et 12 X Ci pr Et 33 14 X Et 015 X 66 C.1.6 Xử lý thống kê kết hoạt tính kháng khuẩn chủng Shi flexneri ANOVA Table for Dkkk by Dung moi So Su Df M F- Pur m ea Ra Va ce of Be 29 n72 tio 48 lue 0.0 tw 0.7 68 4.5 00 Wi 1.5 10 0.1 thi To 29 14 tal 2.2 Multiple Range Tests for Dkkk by Dung moi Method: 95.0 percent Tukey HSD D Co M Ho un 3un 6.0 ea X mo Et 6.0 X Et 12 X Nu oc 13 16 X Ci pr 33 Et 17 X 33 C.1.7 Xử lý thống kê kết hoạt tính kháng khuẩn chủng V alginolyticus ANOVA Table for dkkk by Dung moi So Su Df M F- Pur 16 m 41 ea 27 Ra 0.0 Va Be tw 1.5 66 10 0.1 6.6 77 00 Wi thi 16 14 To tal 68 Multiple Range Tests for dkkk by Dung moi Method: 95.0 percent Tukey HSD D C M Ho un X Et ou ea 6.0 mo Nu 6.0 X oc Et 10 X Et 33 13 X 34 16 X Ci pr 33 10 C.1.8 Xử lý thống kê kết hoạt tính kháng khuẩn chủng V cholerae ANOVA Table for Dkkk by Dung moi So Su Df M F- Pur 63 m 15 ea 11 Ra 0.0 Va Be tw 1.3 0.4 10 0.1 7.6 82 00 Wi thi 63 33 14 33 To tal 1.7 Multiple Range Tests for Dkkk by Dung moi Method: 95.0 percent Tukey HSD D C M Ho un X Et ou ea 6.0 mo Nu 6.0 X oc Et 6.0 X Et 11 X 22 66 X Ci pr 66 C.1.9 Xử lý thống kê kết hoạt tính kháng khuẩn chủng V harveyi ANOVA Table for dkkk by Dung moi So Su Df M F- Pur 15 m 38 ea 19 Ra 0.0 Va Be tw 2.0 25 10 0.2 1.4 07 00 Wi thi 15 14 To tal 27 Multiple Range Tests for dkkk by Dung moi Method: 95.0 percent Tukey HSD D Co M Ho un mo Et un ea 6.0 X 6.0 X Nu oc 11 X Et 15 66 X Et 33 66 X Ci pr 33 11 C.1.10 Xử lý thống kê kết hoạt tính kháng khuẩn chủng V parahaemolyticus ANOVA Table for dkkk by Dung moi So Su Df M F- Pur Be m 12 ea 30 Ra 36 Va 0.0 tw 01 0.4 04 00 Wi 0.8 10 0.0 thi 12 33 14 83 To tal 02 Multiple Range Tests for dkkk by Dung moi Method: 95.0 percent Tukey HSD D C M Ho un 3ou 6.0 ea X mo Et 6.0 X Nu oc 6.0 X Et 17 X Et 28 33 X Ci pr 33 12 PHỤ LỤC D: CÁC THUỐC THỬ DÙNG TRONG ĐỊNH TÍNH THÀNH PHẦN HĨA HỌC CÁC LOẠI CAO CHIẾT TỪ CÂY ELEPHANTOPUS SP D.1 Các thuốc thử dùng định tính thành phần carbohydrate - Thuốc thử Molisch: hòa tan 5g α- napthol vào ethanol 95% pha lỗng thành 100 ml - Fehling A: hòa tan 34,6 g CuSO4.5H2O vào 500ml nước cất - Fehling B: hòa tan 125g KOH 173g Kali Natri tartrate.7H2O vào 500 ml nước cất - Barfoed: cho 10 ml acid acetic glacial vào 1000ml nước cất, thêm 66,5 g Copper (II) acetate monohydrate, đun khuấy đến tan hoàn tồn D.2 Các thuốc thử dùng định tính thành phần alkaloid - Mayer: hòa tan 1,358g HgCl2 60ml nước, sau đổ vào dung dịch g KI pha 10ml nước, định mức lên 100 ml - Dragendoff: gồm dung dịch: dung dịch A: hòa tan 0,5 g Bismuth nitrate (Bi(NO3)3.5H2O) 20 ml acid acetic 20%; dung dịch B: dung dịch KI 40% pha nước Khi sử dụng, trộn 20 ml dung dịch A với ml dung dịch B 70ml nước - Hager: hòa tan g acid picric vào 100ml nước cất - Wagner: hòa tan 2g iodine 6g KI vào 100ml nước cất D.3 Thử nghiệm định tính thành phần amino acid Thử nghiệm Ninhydrin: 0,5 g bổ sung 10 ml n- butanol Gia nhiệt 70 – 800C, khuấy cá từ tan hoàn toàn Định mức n – butanol lên 100 ml 13 ... tài: Nghiên cứu ảnh hưởng dung mơi tách chiết đến hoạt tính kháng khuẩn Elephantopus sp ” Mục tiêu nghiên cứu - Khảo sát ảnh hưởng dung môi tách chiết đến hoạt tính kháng khuẩn Elephatopus sp -... sát ảnh hưởng dung môi tách chiết đến hiệu suất thu hồi cao từ Elephantopus sp 39 2.4.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng dung mơi tách chiết đến hoạt tính kháng khuẩn cao chiết Elephantopus. .. cao chiết từ Elephantopus sp Nội dung nghiên cứu - Khảo sát ảnh hưởng loại dung môi tách chiết đến hoạt tính kháng khuẩn Elephantopus sp - Xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) cao chiết Elephantopus