Bacillus thuringiensis

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SHƯD BÁO CÁO VI KHUẨN Chủ đề: ỨNG DỤNG VI KHUẨN Bacillus Thuringiensis TRONG PHỊNG TRỪ SINH HỌC CƠN TRÙNG GVHD: Nhóm thực hiện: Ts Nguyễn Thị Thu Nga Trương Huỳnh Bá 3083842 Nguyễn Phương Thái 3083882 Đinh Văn Nhi 3083872 Nguyễn Ánh Vân 3087780 Lâm Hoàng Dũng 3083789 Nội dung I Đặc điểm vi khuẩn Bacillus thuringiensis (Bt) II Cơ chế gây bệnh vi khuẩn Bt côn trùng III Đối tượng tác động vi khuẩn Bt IV Phương pháp sản xuất dạng chế phẩm Bt thị trường V Ưu khuyết điểm thuốc sinh học Bt VI Kết luận I ĐẶC ĐIỂM VI KHUẨN Bacillus thuringiensis Theo khoá phân loại Bergey (1984) Vi khuẩn Bacillus thuringiensis thuộc: Giới: Procaryotae Ngành: Firmicutes Họ: Bacillacaeae Chi: Bacillus Loài: thuringiensis I ĐẶC ĐIỂM CỦA VI KHUẨN Bacillus Thuringiensis (Bt) A Đặc điểm hình thái : Quá trình sống vi khuẩn Bt chia thành giai đoạn: Thể dinh dưỡng: - Vi khuẩn có hình que, tựa lạp xưởng, kích thước 1.2 x 3-5µm Chúng thường tồn cá thể cá thể liền kề Sinh sản cách phân đôi, thời kỳ sinh sản có 2,4,8… cá thể liền kề tạo thành chuỗi - Lông roi mọc xung quanh, động không động - Là vi khuẩn gram dương Nang bào tử  - Khi thể vi khuẩn già, đầu tế bào vi khuẩn hình thành bào mầm hình bầu dục đầu hình thành tinh thể hình thoi  giai đoạn nang bào tử - Nang bào tử hình trứng, dài thể dinh dưỡng - Khi nhuộm với thuốc fusin carboxin màu đỏ thể dinh dưỡng màu đỏ, tinh thể màu đỏ sẫm, bào tử mầm không màu Bào mầm tinh thể  Khi nang bào tử phát triển đến giai đoạn , chúng nứt  phóng bào mầm tinh thể a) Bào mầm  - Kích thước 0,8-0,9 x µm - Bào mầm dạng ngủ nghỉ có khả chống chịu cao với điều kiện bất lợi môi trường Các giai đoạn trình tạo bào tử - Quá trình hình thành bào tử :  Sợi trục hình thành nhiễm sắc thể  Phát sinh màng tế bào, hình thành vách tiền bào tử  Tiền bào tử tách khỏi tế bào mẹ  Xung quanh bào tử hình thành vỏ bào tử, màng ngồi bào tử hình thành II Cơ chế gây bệnh vi khuẩn Bt Chất độc vi khuẩn tiết hình thức gây chết chủ yếu cho trùng Có loại độc tố: 2.1 Ngoại độc tố : sản phẩm trao đổi chất tiết q trình sinh dưỡng, có loại : - Ngoại độc tố α-exotoxin : + Là protein dễ bị phá hủy 1200C 20 phút + Chúng sinh trước hình thành bào mầm tinh thể - Ngoại độc tố β-exotoxin : + Là chất độc chịu nhiệt + Khả gây tác động lên thể côn trùng: gây di tật miệng, co thắt, râu môi dưới, đỉnh lưỡi dài ra, thành trùng có cánh khơng đầy đủ…., + Ngăn cản q trình phát triển trùng + Ngồi ra, kìm hãm sinh tổng hợp RNA, protein, acid nucleic - Ngoại độc tố γ-exotoxin : loại enzym chưa xác định 2.2 Nội độc tố δ-endotoxin  - Là tinh thể chất độc Cơ chế : - Khi tinh thể hòa tan ruột trùng, phút làm cho côn trùng tê liệt - Vách ruột côn trùng bị vỡ, - Các tế bào thượng bì bị rụng, để lộ màng đáy mỏng, - Tạo điều kiện thuận lợi cho bào mầm nảy mầm, - Tế bào dinh dưỡng chui vào màng thực quản xâm nhập vào thượng bì, - Làm cho ruột bị phá hoại, sâu non chết Tinh thể độc Bt var.israelensis (Bti) kính hiển vi điện tử Cơ chế tác động tinh thể độc III Đối tượng tác động vi khuẩn Bt Chúng tác động diệt nhiều loài ấu trùng thuộc : cánh vảy hai cánh cánh cứng - Bacillus thuringiensis Berliner subsp aizawai (B.t.a): trừ sâu non cánh vảy ( theo Nguyễn Trần Oánh, 2007) Sâu tơ hại cải Sâu xanh da láng Sâu nhỏ Bacillus thuringiensis Berliner subsp Japonensis : trừ giống Plutella cánh Phấn ( theo Nguyễn Trần Oánh, 2007) Bacillus thuringiensis Berliner subsp tenebrionis : khuyến cáo trừ sâu non cánh Cứng ( bọ cánh cứng hại khoai tây nhiều loại cánh cứng khác hại cà chua, cà,cây cảnh…), ( theo Nguyễn Trần Oánh, 2007) IV Phương pháp sản xuất chế phẩm Bt Có phương pháp Phương pháp lên men tầng sâu thể lỏng Ưu điểm phương pháp sản xuất số lượng nhiều, chất lượng cao, ổn định đòi hỏi phải đầu tư thiết bị phức tạp Phương pháp lên men nửa thể rắn Ưu điểm phương pháp đơn giản dễ làm, không cần thiết bị khử trùng nghiêm ngặt, không sản xuất sinh khối cao Ở Việt Nam có khoảng 10 chủng Bacillus thurigensis phân lập để sản xuất thuốc trừ sâu sinh học Các chủng giống Bt sau cấy vào bình lên men, điều kiện nhiệt độ thích hợp (28-30oC) Sau khoảng 52-54h thu hoạch dịch thể chứa tinh thể protein độc tố sâu hại Sơ đồ tổng quát qui trình tạo thuốc trừ sâu Bt Chủng Bt Nhân giống cấp Nhân giống cấp Kích thích lên men Lọc ly tâm Thu sinh khối Các chế phẩm Bt bán thị trường - Delfin WG (32BIU) Thuricide H.P hãng SDS Biotech Nhật - V.K 16 WP 32 WP công ty bảo vệ thực vật I - Bacterin B.T WP Trung tâm nghiên cứu công nghệ sinh học TP.HCM V Ưu khuyết điểm thuốc sinh học Bt Ưu điểm:  Không gây ô nhiễm môi trường  Bt có hiệu lực cao sâu kháng loại thuốc gốc lân, carbamat,…  Tinh thể độc Bt tạo khơng thể hồ tan dịch dày người nên thuốc trừ sâu sinh học Bt hồn tồn vơ hại người, sinh vật khác  Không độc với cá, ong mật loài thiên địch  Thời gian cách ly ngắn Khuyết điểm  Chỉ diệt sâu non chúng ăn lá, không diệt trứng, nhộng bướm  Dễ bị phân huỷ tia cực tím có ánh mặt trời  Có tác động vị độc, không nội hấp, không tiếp xúc  Hạn chế lớn thuốc trừ sâu Bt phát tán chậm, 48 tiếng sau ăn độc tố sâu chết VI Kết luận - Mặc dù có nhược điểm khơng thể tránh khỏi hiệu thuốc trừ sâu sinh học từ vi khuẩn Bacillus thuringiensis phủ nhận - Với đặc tính khơng gây hại cho mơi trường sinh vật có lợi chế phẩm sinh học nên sử dụng rộng rãi để thay sản phẩm hóa học ... ĐIỂM VI KHUẨN Bacillus thuringiensis Theo khoá phân loại Bergey (1984) Vi khuẩn Bacillus thuringiensis thuộc: Giới: Procaryotae Ngành: Firmicutes Họ: Bacillacaeae Chi: Bacillus Loài: thuringiensis. .. cánh cánh cứng - Bacillus thuringiensis Berliner subsp aizawai (B.t.a): trừ sâu non cánh vảy ( theo Nguyễn Trần Oánh, 2007) Sâu tơ hại cải Sâu xanh da láng Sâu nhỏ Bacillus thuringiensis Berliner... Ngành: Firmicutes Họ: Bacillacaeae Chi: Bacillus Loài: thuringiensis I ĐẶC ĐIỂM CỦA VI KHUẨN Bacillus Thuringiensis (Bt) A Đặc điểm hình thái : Quá trình sống vi khuẩn Bt chia thành giai đoạn: