Ảnh hưởng của nước dừa, agar và saccarozơ đến sinh trưởng của cây cẩm chướng in vitro (2018)

TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH – KTNN ====== TRỊNH THU TRANG ẢNH HƢỞNG CỦA NƢỚC DỪA, AGAR VÀ SACCAROZƠ ĐẾN SINH TRƢỞNG CỦA CÂY CẨM CHƢỚNG IN VITRO (Dianthus caryophyllus L.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Sinh lý học thực vật HÀ NỘI - 2018 TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH – KTNN ====== TRỊNH THU TRANG ẢNH HƢỞNG CỦA NƢỚC DỪA, AGAR VÀ SACCAROZƠ ĐẾN SINH TRƢỞNG CỦA CÂY CẨM CHƢỚNG IN VITRO (Dianthus caryophyllus L.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Sinh lý học thực vật Ngƣời hƣớng dẫn khoa học PGS TS NGUYỄN VĂN ĐÍNH HÀ NỘI - 2018 LỜI CẢM ƠN Trƣớc hết tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc đến PGS TS Nguyễn Văn Đính tận tình hƣớng dẫn, bảo tạo điều kiện giúp đỡ tơi suốt q trình thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu trƣờng Đại học Sƣ phạm Hà Nội 2, Ban Chủ nhiệm khoa Sinh - KTNN, Phòng thí nghiệm Sinh lý học thực vật, khoa Sinh - KTNN, Trƣờng Đại học Sƣ phạm Hà Nội giúp đỡ tạo điều kiện suốt q trình tơi thực đề tài Trong thời gian thực đề tài tơi nhận đƣợc giúp đỡ tận tình thầy La Việt Hồng cô Mai Thị Hồng - Phòng thí nghiệm Sinh lý học thực vật giúp đỡ, đóng góp ý kiến để tơi hồn thành khóa luận này, nhân xin chân thành cảm ơn Cuối tơi xin cảm ơn gia đình bạn bè động viên, giúp đỡ suốt thời gian tơi học tập nhƣ hồn thành khóa luận Hà Nội, tháng 05 năm 2018 Sinh viên thực Trịnh Thu Trang LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan kết nghiên cứu đề tài: “Ảnh hƣởng nƣớc dừa, agar saccarozơ đến sinh trƣởng Cẩm chƣớng in vitro” kết nghiên cứu riêng tơi PGS TS Nguyễn Văn Đính hƣớng dẫn Các số liệu, kết nghiên cứu trung thực không trùng lặp với kết nghiên cứu ngƣời khác Hà Nội, tháng 05 năm 2018 Sinh viên thực Trịnh Thu Trang DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ĐC Đỏ chùm ĐN Đỏ nhung HCS Hồng cánh sen MS Murashige Skoog Nxb Nhà xuất bán TVĐ Trắng viền đỏ VC Vàng chanh DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Các cơng thức thí nghiệm ảnh hƣởng nƣớc dừa đến sinh trƣởng Cẩm chƣớng in vitro 13 Bảng 2.2 Các cơng thức thí nghiệm ảnh hƣởng agar đến sinh trƣởng Cẩm chƣớng in vitro 14 Bảng 2.3 Các cơng thức thí nghiệm ảnh hƣởng saccarozơ đến sinh trƣởng Cẩm chƣớng in vitro 14 Bảng 3.1 Ảnh hƣởng nƣớc dừa đến đến sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng in vitro 18 Bảng 3.2 Ảnh hƣởng agar đến sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng in vitro 22 Bảng 3.3 Ảnh hƣởng saccarozơ đến sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng in vitro 26 DANH MỤC HÌNH Hình 3.1 Ảnh hƣởng nƣớc dừa đến sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng in vitro 20 Hình 3.2 Ảnh hƣởng agar đến sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng in vitro 25 Hình 3.3 Ảnh hƣởng saccarozơ đến sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng in vitro .29 MỤC LỤC MỞ ĐẦU .1 Lý chọn đề tài .1 Mục đích nghiên cứu Nhiệm vụ nghiên cứu Phạm vi nghiên cứu Ý nghĩa lý luận thực tiễn .3 NỘI DUNG Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu họ Cẩm chƣớng (Caryophyllaceae) .4 1.1.1.Nguồn gốc, phân loại phân bố .4 1.1.2 Đặc điểm sinh học 1.1.3 Tính thẩm mỹ giá trị kinh tế 1.1.4 Tình hình nghiên cứu nƣớc 1.1.5 Tình hình nghiên cứu ngồi nƣớc Chƣơng 2: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 2.1 Vật liệu nghiên cứu 12 2.2 Dụng cụ thiết bị thí nghiệm 12 2.2.1 Dụng cụ .12 2.2.2 Thiết bị .12 2.3 Môi trƣờng nuôi cấy 12 2.4 Điều kiện nuôi cấy .12 2.5 Phƣơng pháp nghiên cứu .13 Chƣơng 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 16 3.1 Nghiên cứu ảnh hƣởng nƣớc dừa đến sinh trƣởng Cẩm chƣớng in vitro .16 3.2 Nghiên cứu ảnh hƣởng agar đến sinh trƣởng Cẩm chƣớng in vitro 21 3.3 Nghiên cứu ảnh hƣởng saccarozơ đến sinh trƣởng Cẩm chƣớng in vitro .25 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 30 TÀI LIỆU THAM KHẢO 31 MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Hoa Cẩm chƣớng (Dianthus caryophyllus L.) có nguồn gốc từ Địa Trung Hải Tên Carnation có nguồn gốc từ chữ Latin 'carnatio', Caryophyllus có nghĩa màu hồng [24] Đây loài hoa cắt đƣợc trồng phổ biến giới với đặc điểm: đa dạng màu sắc, màu sắc đẹp, chịu đƣợc vận chuyển đƣờng dài [17] Châu Âu, Châu Mỹ Latinh Israel nhà xuất Cẩm chƣớng lớn giới Các nƣớc Nhật Bản, Ấn Độ Pakistan tập trung vào việc tiêu dùng hoa Cẩm chƣớng [22] Ở nƣớc, giống Cẩm chƣớng đa số nhập từ Trung Quốc, Hà Lan,…[7] Ở Việt Nam việc nhân giống loài hoa thƣờng đƣợc làm theo phƣơng pháp truyền thống nhƣ gieo hạt, giâm hom, cắt cành Tuy nhiên cách làm có nhƣợc điểm sau thời gian giống bị thối hố làm cho suất chất lƣợng hoa giảm đáng kể Nhờ phát triển nhanh chóng khoa học kỹ thuật, để khắc phục nhƣợc điểm phƣơng pháp truyền thống ngƣời ta áp dụng kỹ thuật nuôi cấy in vitro nhân giống hoa Cẩm chƣớng Với đặc điểm vƣợt trội so với phƣơng pháp truyền thống tạo với số lƣợng lớn, có kiểu hình đồng nhất, suất chất lƣợng cao, bệnh, không phụ thuộc vào điều kiện ngoại cảnh đặc biệt có thời gian sinh trƣởng phát triển ngắn thêm [3] Để sinh trƣởng phát triển tốt điều kiện nuôi cấy in vitro mơi trƣờng ni cấy vơ quan trọng Tùy vào phận nuôi cấy có mơi trƣờng dinh dƣỡng ni cấy khác Mặt khác để tăng hệ số nhân giống cần phải điều chỉnh điều kiện nuôi cấy (ánh sáng, nhiệt độ, độ ẩm…) thích hợp kết hợp bổ sung thêm vào môi trƣờng nuôi cấy chất e f g h Hình 3.1 Ảnh hƣởng nƣớc dừa đến sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng in vitro 20 a) ĐN nuôi cấy môi trường nước dừa 0% (Đối chứng); (b, c, d, e) giống ĐC, HCS, TVĐ ĐN nuôi cấy môi trường nước dừa 5%; (f, g) giống VC HCS nuôi cấy môi trường nước dừa 10%; h) TVĐ nuôi cấy môi trường nước dừa 15% 3.2 Nghiên cứu ảnh hƣởng agar đến sinh trƣởng Cẩm chƣớng in vitro Trong nuôi cấy mô thực vật: môi trƣờng agar đƣợc bổ sung với loại khoáng vi lƣợng, đa lƣợng, vitamins, kháng sinh giúp tạo điều kiện tối ƣu hóa cho mơ, [35] Nồng độ tính quán chất tạo gel có tác động quan trọng đến tái sinh mô thực vật Nếu nồng độ agar vƣợt nồng độ tới hạn đƣợc chứng minh gây ức chế sinh trƣởng phát triển thực vật mơi trƣờng có nồng độ agar cao giảm khả cung cấp nƣớc cho mơ thực vật Ngƣợc lại, mơi trƣờng có nồng độ agar thấp giúp tăng khả trao đổi nƣớc khống chất từ giúp thực vật sinh trƣởng phát triển mạnh [21] Trong nghiên cứu tiến hành bổ sung agar vào môi trƣờng ni cấy với khối lƣợng khác sau quan sát sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng thu đƣợc kết bảng 3.2 21 Bảng 3.2 Ảnh hƣởng agar đến sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng in vitro Agar (g/l) TVĐ HCS VC ĐN ĐC (ĐC) 3,75a 2,50b 3,00a 3,25a 2,50a Số chồi/ 1,75b 3,75a 1,50b 1,50b 2,25ab mẫu 3,25a 2,00b 2,00b 2,00b 1,50b LSD.05 1,33 1,032 0,92 1,03 0,88 (ĐC) 6,25a 6,75a 5,25a 3,00a 8,00a Chiều cao 4,50b 3,50b 4,75a 2,00b 4,75b chồi (cm) 3,75b 4,00b 4,00b 2,25b 3,25c LSD.05 0,84 1,03 0,65 0,46 1,46 (ĐC) 13,50a 10,25a 10,00a 8,75a 10,50a Số lá/ 11,00b 7,00b 9,75a 7,25b 6,50b chồi 10,50b 7,75b 9,50a 8,00ab 7,75ab LSD.05 1,51 2,47 2,81 1,25 3,31 Tỷ lệ (ĐC) 8,0% 4,5% 5,0% 6,0% 3,0% thủy tinh 10% 6,25% 5,56% 13,33% 21,43% hóa (%) 0% 0% 0% 10% 16,67% Chỉ tiêu bổ sung Trong cột, kí tự theo sau khác a, b, c… thể sai khác có ý nghĩa thống kê với α = 0,05 Nhóm cơng thức bổ sung agar khối lƣợng khác thu đƣợc kết tốt, số chồi dao động từ 1,5 - 3,75 chồi/mẫu, chiều cao chồi từ 2,00 8,00 cm Cụ thể: Môi trƣờng nuôi cấy có bổ sung agar g/l có tỉ lệ thủy tinh hóa cao giống TVĐ: 10%; HCS: 6,25%; VC: 5,56%; ĐN: 13,33% ĐC: 21,43% Ở mơi trƣờng số chồi/mẫu giống: TVĐ 1,75 chồi/mẫu; 22 VC 1,5 chồi/mẫu; ĐN: 1,5 chồi/mẫu Chiều cao chồi đạt từ 2,00 – 4,75 cm chiều cao chồi thấp giống ĐN khoảng 2cm chiều cao chồi cao giống VC, ĐC Môi trƣờng nuôi cấy bổ sung agar g/l số chồi/mẫu thu đƣợc từ 2,50 3,75 chồi/mẫu, số chồi/mẫu cao giống TVĐ: 3,75 chồi/mẫu thấp giống ĐC, HCS khoảng 2,5 chồi/mẫu Chiều cao chồi đạt từ 3,00 8,00 cm; chiều cao chồi tốt giống ĐC (8,00 cm) thấp ĐN (3,00 cm) Hai giống ĐN ĐC có tỉ lệ chồi thủy tinh giảm 6% 3% Cơng thức có bổ sung agar g/l ba giống TVĐ, HCS VC có tỉ lệ chồi thủy tinh giảm tối đa 0% Số chồi/mẫu nhiều, đạt cao giống TVĐ với khoảng 3,75 chồi/mẫu tƣơng đối thấp giống lại cụ thể: giống HCS, VC, ĐN đạt 2,00 chồi/mẫu giống ĐC thu đƣợc 1,50 chồi/mẫu Chiều cao chồi thu đƣợc khoảng 2,25 - 4,00 cm cao giống HCS ĐC khoảng cm Khi tăng giảm lƣợng agar chiều cao, số chồi, số có xu hƣớng biến đổi nhiều, có tƣợng thủy tinh hóa xuất có màu xanh nhạt Trong cơng thức thí nghiệm tiến hành cơng thức bổ sung 30g saccarozơ phù hợp cho sinh trƣởng Cẩm chƣớng in vitro 23 a b c d 24 e Hình 3.2 Ảnh hƣởng agar đến sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng in vitro (a, b) giống ĐC TVĐ nuôi cấy môi trường agar 6g/l; c) VC nuôi cấy môi trường agar 7g/l; (d, e) giiống ĐC VC nuôi cấy môi trường agar 8g/l 3.3 Nghiên cứu ảnh hƣởng saccarozơ đến sinh trƣởng Cẩm chƣớng in vitro Ánh sáng đƣờng yếu tố trao đổi chất thực vật có vai trò quan trọng đến tình trạng ni cấy in vitro [12] Đƣờng ảnh hƣởng đến hoạt động quang hợp, hô hấp trao đổi chất [26] Hoạt động tăng trƣởng đƣợc điều chỉnh ánh sáng đƣờng [28] Môi trƣờng với nồng độ đƣờng cao làm giảm khả quang hợp Mơi trƣờng có đƣờng kết hợp cƣờng độ ánh sáng thấp làm tăng trƣởng chậm đƣờng nguyên nhân làm tăng tỷ lệ nhiễm nấm khuẩn [31] 25 Trong thí nghiệm saccarozơ đƣợc bổ sung vào môi trƣờng với khối lƣợng khác nhằm quan sát sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng kết thu đƣợc bảng 3.3 Bảng 3.3 Ảnh hƣởng saccarozơ đến sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng in vitro Saccarozơ TVĐ HCS VC ĐN ĐC 30 (ĐC) 3,75a 2,50b 3,00a 3,25 a 3,50a Số chồi/ 25 2,00b 3,00ab 2,25a 2,25ab 3,25a mẫu 35 3,00a 3,75a 1,75a 1,75b 2,50a LSD.05 0,88 1,03 1,25 1,33 1,16 30 (ĐC) 6,25a 6,75a 5,25a 3,00a 8,00a 25 4,25b 4,50b 4,00b 2,00b 5,50b 35 4,00b 4,25b 5,00a 1,50b 5,75b LSD.05 0,65 1,13 0,46 0,53 1,48 30 (ĐC) 13,50a 10,25a 10,00a 8,75a 10,5a Số lá/ 25 11,00b 7,50b 9,50a 6,75b 10,25a chồi 35 9,50b 7,25b 9,25a 8,50a 9,00a LSD.05 2,13 1,73 3,61 1,55 2,81 Tỷ lệ 30 (ĐC) 7,14% 0% 9,09% 0% 10% thủy tinh 25 30% 6,67% 25% 0% 14,29% hóa (%) 35 0% 0% 0% 0% 10% Chỉ tiêu Chiều cao chồi (g/l) Trong cột, kí tự theo sau khác a, b, c…thể sai khác có ý nghĩa thống kê với α=0,05 Ở cơng thức đối chứng có số chồi/mẫu chiều cao chồi tốt, tƣợng thủy tinh hóa xuất giống: TVĐ, VC, ĐC với tỷ lệ tƣơng đối thấp lần lƣợt 7,14%; 9,09%; 10% Giống TVĐ có số chồi cao 3,75 26 chồi/mẫu giống VC có số chồi thấp khoảng 3,00 chồi/mẫu Chiều cao chồi cao giống ĐC 8,00 cm, thấp giống ĐN 3,00 cm Môi trƣờng bổ sung 25g saccarozơ tỷ lệ thủy tinh hóa tăng giống HCS, ĐC, VC, TVĐ lần luợt 6,67%; 14,25%; 25%; 30% Số chồi/mẫu thu đƣợc từ 2,00 - 3,25 chồi Số chồi/mẫu cao giống HCS, ĐC với 3,00 - 3,25 chồi/mẫu Chồi có chiều cao thấp giống ĐN (2,00 cm) cao giống ĐC (5,50 cm) Môi trƣờng chứa saccarozơ 35g khơng thấy xuất thủy tinh hóa giống TVĐ, HCS, VC, ĐN Riêng giống ĐC tỷ lê thủy tinh hóa 10% Đồng thời thu đƣợc số lƣợng chồi tất giống Chiều cao chồi thu đƣợc từ 1,50 (giống ĐN) - 5,75 cm (giống ĐC) Số lá/chồi thu đƣợc từ 7,25 9,50 chồi Số chồi/mẫu cao giống HCS (khoảng 3,75 chồi) thấp giống VC, ĐN (khoảng 1,75 chồi) Khi tăng hay giảm hàm lƣợng saccarozơ làm giảm số chồi giống TVĐ, ĐN Riêng với giống HCS tăng hay giảm hàm lƣợng saccarozơ lại làm tăng số chồi/ mẫu từ 2,5 - 3,75 Đối với hai giống VC ĐC khơng thấy có khác biệt nhiều Trong thí nghiệm này, mơi trƣờng bổ sung 30g saccarozơ phù hợp cho sinh trƣởng Cẩm chƣớng in vitro 27 a b c d 28 e Hình 3.3 Ảnh hƣởng saccarozơ đến sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng in vitro (a, b) giống HCS ĐN nuôi cấy môi trường saccarozơ 25g/l; (c, d, e) ĐC, HCS VC nuôi cấy môi trường saccarozơ 35g/l 29 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Dựa vào kết thu đƣợc từ thí nghiệm trên, rút số kết luận sau: Mơi trƣờng MS, 30g/l saccarozơ 7g/l agar có bổ sung nƣớc dừa với nồng độ 5% 10% thích hợp cho sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng in vitro: trắng viền đỏ - TVĐ, hồng cánh sen - HCS, vàng chanh VC, đỏ nhung - ĐN đỏ chùm - ĐC với kết thu đƣợc số chồi/mẫu nhiều tỷ lệ tinh hóa thấp Mơi trƣờng MS, 30g/l saccarozơ với khối lƣợng agar 7g thích hợp với trình sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng in vitro: trắng viền đỏ TVĐ, hồng cánh sen - HCS, vàng chanh - VC, đỏ nhung - ĐN đỏ chùm ĐC Môi trƣờng MS, 7g/l agar saccarozơ khối lƣợng 30g phù hợp với trình sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng in vitro: trắng viền đỏ TVĐ, hồng cánh sen - HCS, vàng chanh - VC, đỏ nhung - ĐN đỏ chùm ĐC Với số chồi/mẫu nhiều khoảng 3,75 chồi giống TVĐ tỷ lệ thủy tinh hóa thấp khoảng từ - 10% tất giống Kiến nghị Hồn thiện quy trình sản xuất thử nghiệm để cung cấp số lƣợng lớn Cẩm chƣớng in vitro cho thị trƣờng nƣớc 30 TÀI LIỆU THAM KHẢO A Tài liệu nƣớc Nguyễn Tiến Bân (2005), Danh lục loài thực vật Việt Nam, tập III, Nxb Nông nghiệp Hà Nội Đặng Văn Đông, Đinh Thế Lộc (2005), Công nghệ trồng hoa cho thu nhập cao, Tập 5, Nxb Lao động - Xã hội, Hà Nội Lê Huy Hàm, Nguyễn Thị Kim Lý, Lê Đức Thảo, Dadlani N.K, Nguyễn Xuân Linh, Phạm Thị Lý Thu, Trịnh Xuân Hoạt (2012), Kĩ thuật sản xuất số loại hoa, Nxb Nông nghiệp, Việt Nam Nguyễn Thị Thu Hằng (2013), “Nghiên cứu nhân giống hoa Cẩm chƣớng kỹ thuật nuôi cấy in vitro”, Tạp chí Khoa học cơng nghệ lâm nghiệp 1:3-7 Phạm Hoàng Hộ (2003), Cây cỏ Việt Nam (An Illustratred flora of Vietnam), Nxb Trẻ La Việt Hồng, La Thị Hạnh, Ngô Tuyết Dung, Bùi Văn Thắng (2017), “Kết nghiên cứu hoàn thiện quy trình nhân giống, trồng chăm sóc số giống hoa Cẩm chƣớng (Dianthus Caryophyllus L.) huyện Bắc Hà, Lào Cai”, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam, 6:85-90 Nguyễn Xuân Linh, Nguyễn Thị Kim Lý (2005), Ứng dụng Công nghệ sản xuất Hoa, Nxb Lao động, Hà Nội Nguyễn Văn Mã, La Việt Hồng, Ong Xuân Phong (2013), Phương pháp nghiên cứu sinh lý học thực vật, Nxb Đại học Quốc gia Hà Nội Nguyễn Thanh Phƣơng, Nguyễn Thị Lý Anh, Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Hồng Thắm (2014), “Ảnh hƣởng số loại đèn chiếu sáng bình ni cấy đến sinh trƣởng, phát triển giống Cẩm 31 chƣớng Hồng hạc cấy mơ”, Tạp chí Khoa học Phát triển, 17(7):10151022 10 Hoàng Thị Sản (2003), Phân loại thực vật, Nxb Giáo dục 11 Nguyễn Thị Thanh, Lê Thị Phƣơng Quyên, Nguyễn Phƣơng Thảo (2012), “Nghiên cứu chuyển gen IPT tạo cytokinin nhằm làm tăng tuổi thọ hoa Cẩm chƣớng (Dianthus caryophyllus L.) nhờ vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens”, Tạp chí Sinh học, 34(2):227-233 B Tài liệu nƣớc 12 Eckstein A., Zieba P., Gabrys H (2012), “Sugar and Light Effects on the Condition of the Photosynthetic Apparatus of Arabidopsis thaliana Cultured in vitro”, Journal of Plant Growth Regulation, 31(1):90-101 13 Arditti J (2008), Micropropagation of Orchids, vol II., second ed Blackwell Publishing, Oxford, UK, UK 14 Winarto B., Aziz M.A., Rashid A.A, Ismail M.R (2013), “Effect of permeable vessel closure and gelling agent on reduction of hyperhydricity in in vitro culture of carnation”, Indo J Agri Sci., 5(1):11-19 15 Hamidimoghadam E., Rabiei V., Nabigol A., Farrokhi J (2014), “Postharvest Quality Improvement of Carnation (Dianthus caryophyllus L.) Cut Flowers by Gibberellic Acid, Benzyl Adenine and Nano Silver”, Agricultural communications, 2(2):28-34 16 Australian Government, Department of Health and Ageing, Office of the Gene Technology Regulator (2005), The Biology and Ecology of Dianthus caryophyllus L (Carnation) 17 El-Naggar Aly H (2009), “Response of Dianthus caryophyllus L plants to foliar nutrition”, World J Agri Sci., 5(5):622-630 32 18 Van Overbeek J., Conklin M E., Blakeslee A F (1941), “Factors in coconut milk essential for growth and development of very young Datura embryos”, Science, 94:350-351 19 Yong J W H., Ge L., Ng Y F., Tan S N (2009), “The chemical composition and biological properties of coconut (Cocos nucifera L.) water”, Molecules, 14(12):5144-5164 20 Fariman Z K., Tehranifar A (2011), “Effect of Essential Oils, Ethanol and Methanol to Extend the Vase-life of Carnation (Dianthus caryophyllus L.) Flowers”, J Biol Environ Sci., 5(14):91-94 21 Suthar R K., Habibi N., Purohit S D (2010), Influence of agar concentration and liquid medium on in vitro propagation of Boswellia serrata Roxb, (Vol 10), Indian Journal of Biotechnology 22 Arif M., Rauf S., Din A.U., Rauf M., Afrasiab H (2014), “High Frequency Plant Regeneration from Leaf Derived Callus of Dianthus caryophyllus L.”, American Journal of Plant Science, 5:2454-2463 23 Kharrazi M., Nemati H., Tehranifar T., Bagheri A., Sharifi A (2011), “In Vitro Culture of Carnation (Dianthus caryophyllus L.) Focusing on the Problem of Vitrification”, J Biol Environ Sci., 5(13):1-6 24 Khatun M M., Rahman M M., Roy P K (2013), “In vitro Regeneraton and Field Evaluation of Carnation (Dianthus caryophyllus L.) Through Shoot Tip and Node Culture”, Journal of applied Science and Technology, 9(1):93-99 25 Khatun M., Roy P.K., Razzak M A (2018), “Additive effect of coconut water with various hormoneson in vitro regeneration of carnation (Dianthus caryophyllus L.)”, J Anim Plant Sci., 28(2):589-596 33 26 Montakarn P., Kamnoon K (2011), “Effect of Basal Media and Sugar Types on in vitro Regeneration of Grammatophyllum speciosum Blume”, Not Sci Biol, 3(3):101-104 27 Debergh P.C (1983), “Effects of agar brand and concentration on the tissue culture medium”, Physiologiae Plant, 59:270-276 28 Rolland F., Moore B., Sheen J (2002), “Sugar sensing and signaling in plants”, The Plant Cell, 14:185-205 29 Onozaki T (2018), “Breeding of carnations (Dianthus caryophyllus L.) for long vase life”, Breeding Science, 68:3-13 30 Murashige T., Skoog F (1962), “A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures”, Physiol Pl., 15(3):473-497 31 Nguyen TQ, Kozai micropropagation: II T (2002), “Environmental control in Effects of culture medium environment and biological features on the growth of in vitro plants”, Advan Nat Sci., 3(1):81-90 32 Liemt G Van (2000), The world cut flower industry: Trends and prospects, ILO, Geneva C Tài liệu Internet 33 http://nhanong.netnews.vn/trong-hoa-cam-chuong-cong-nghe-cao-tai-dalat-mid-4-6-0-6507.html 34 http://www.dfa.com.vn/View.aspx?ParentID=59&ID=125 35 https://www.sbc-vietnam.com/san-pham/hoa-chat-thi-nghiem/thach-moitruong-agar-agar.aspx 34 ... cứu ảnh hƣởng nƣớc dừa đến sinh trƣởng Cẩm chƣớng in vitro - Nghiên cứu ảnh hƣởng agar đến sinh trƣởng Cẩm chƣớng in vitro - Nghiên cứu ảnh hƣởng saccarozơ đến sinh trƣởng Cẩm chƣớng in vitro. .. ảnh hƣởng saccarozơ đến sinh trƣởng Cẩm chƣớng in vitro 14 Bảng 3.1 Ảnh hƣởng nƣớc dừa đến đến sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng in vitro 18 Bảng 3.2 Ảnh hƣởng agar đến sinh. .. giống Cẩm chƣớng in vitro 20 Hình 3.2 Ảnh hƣởng agar đến sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng in vitro 25 Hình 3.3 Ảnh hƣởng saccarozơ đến sinh trƣởng năm giống Cẩm chƣớng in