Nghiên cứu ảnh hưởng của chất kích thích sinh trưởng và chất hữu cơ đến khả năng nhân nhanh ra rễ và giai đoạn ngoài vườn ươm cây lan hoàng thảo

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM -   - ĐÀM VĂN THƢỢNG NGHIÊN CỨU ẢNH HƢỞNG CỦA CHẤT KÍCH THÍCH SINH TRƢỞNG VÀ CHẤT HỮU CƠ ĐẾN KHẢ NĂNG NHÂN NHANH, RA RỄ VÀ GIAI ĐOẠN NGOÀI VƢỜN ƢƠM CÂY LAN HỒNG THẢO (Dendrobium) KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo: Chính quy Chuyên ngành: Cơng nghệ Sinh học Khoa: CNSH-CNTP Khóa học: 2011-2015 Thái nguyên 2015 ii ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM -   - ĐÀM VĂN THƢỢNG NGHIÊN CỨU ẢNH HƢỞNG CỦA CHẤT KÍCH THÍCH SINH TRƢỞNG VÀ CHẤT HỮU CƠ ĐẾN KHẢ NĂNG NHÂN NHANH, RA RỄ VÀ GIAI ĐOẠN NGOÀI VƢỜN ƢƠM CÂY LAN HOÀNG THẢO (Dendrobium) KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo: Chính quy Chun ngành: Cơng nghệ Sinh học Khoa: CNSH-CNTP Khóa học: 2011-2015 Giảng Viên Hƣớng Dẫn: ThS Lƣơng Thị Thu Hƣờng Thái nguyên 2015 iii LỜI CẢM ƠN Đƣợc trí Ban giám hiệu nhà trƣờng, Ban chủ nhiệm Khoa Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm thời gian thực tập tốt nghiệp thực đề tài: “Nghiên cứu ảnh hưởng chất kích thích sinh trưởng chất hữu đến khả nhân nhanh rễ giai đoạn vườn ươm lan Hoàng Thảo” Qua tháng thực tập phịng ni cấy mơ khoa Cơng nghệ sinh học Cơng nghệ thực phẩm đến tơi hồn thành đề tài Để đạt đƣợc kết nhƣ ngày hôm xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu nhà trƣờng, Ban chủ nhiệm Khoa thầy cô giáo môn tạo điều kiện giúp đỡ suốt thời gian qua Tôi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới Cơ giáo ThS Lƣơng Thị Thu Hƣờng ThS Nguyễn Thị Tình tận tình bảo, hƣớng dẫn tơi thời gian thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn K.S Lã Văn Hiền tận tình hƣớng dẫn nhƣ tạo điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành khóa luận suốt thời gian thực tập phịng thí nghiệm Cuối cùng, tơi xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè hết lịng động viên, giúp đỡ tạo điều kiện vật chất tinh thần cho tơi q trình học tập nghiên cứu Do trình độ thời gian thực đề tài có giới hạn nên đề tài khơng thể tránh khỏi sai sót Tơi mong nhận đƣợc đóng góp ý kiến thầy bạn để đề tài tơi đƣợc hồn thiện Em xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, ngày 20 tháng năm 2015 Sinh viên thực Đàm Văn Thượng iv DANH MỤC BẢNG Bảng 1: Các cơng thức thí nghiệm có bổ sung dịch chiết khoai tây cà rốt 18 Bảng 2: Các cơng thức thí nghiệm tốt thí nghiện kết hợp với nƣớc dừa 19 Bảng 3: Các công thức thí nghiệm có bổ sung nƣớc dừa 70ml kết hợp với nồng độ Kinetine khác 20 Bảng 4: Các công thức thí nghiệm có bổ sung hàm lƣợng khoai tây khác kết hợp với nồng độ BA khác 20 Bảng 5: Các cơng thức thí nghiệm thay đổi nồng độ than hoạt tính khác 21 Bảng 6: Các cơng thức thí nghiệm có bổ sung nồng độ NAA khác 22 Bảng 7: Các cơng thức thí nghiệm có bổ sung GA3 với nồng độ khác 22 Bảng 4.1 Tổng số chồi thu đƣợc hệ số nhân chồi lan Hồng Thảo đƣợc ni cấy mơi trƣờng MS có bổ xung dịch chiết khoai tây cà rốt ứng với (CT) thí nghiệm 25 Bảng 4.2 Tổng số chồi thu đƣợc, hệ số nhân hình thái chồi Lan Hồng thảo sau tuần ni cấy mơi trƣờng có bổ xung dịch chiết khoai tây 50g/l + cà rốt 20g/l kết hợp với hàm lƣợng nƣớc dừa ứng với (CT) thí nghiệm 27 Bảng 4.3 Tổng số chồi thu đƣợc, hệ số nhân chồi hình thái chồi lan Hồng Thảo đƣợc nuôi cấy môi trƣờng MS +70ml nƣớc dừa kết hợp với nồng độ Kinetine ứng với Công thức 29 Bảng 4.5 tổng số rễ thu đƣợc, tỷ lệ tạo rễ chất lƣợng rễ sau tuần nuôi cấy môi trƣờng bổ sung hàm lƣợng than hoạt tính ứng với (CT): 33 Bảng 4.6 Số rễ thu đƣợc, tỷ lệ tạo rễ chất lƣợng rễ sau tuần nuôi cấy mơi trƣờng có bổ sung NAA với nồng độ khác 34 Bảng 4.7 Số thu đƣợc, tỷ lệ sống chất lƣợng thu đƣợc sau tuần ni cấy có bổ sung GA3 với nồng độ khác 36 v DANH MỤC HÌNH Hình 4.1 Biểu đồ hệ số nhân lan Hoàng Thảo bổ xung dịch chiết khoai tây cà rốt vào môi trƣờng ni cấy 26 Hình 4.2 Hệ số nhân chồi Lan Hoàng thảo sau tuần nuôi cấy môi trƣờng bổ sung hàm lƣợng nƣớc dừa kết hợp với khoai tây 50g/l+ cà rốt 20g/l 28 Hình 4.3 Hệ số nhân chồi Lan Hồng Thảo sau tuần ni cấy mơi trƣờng bổ sung nƣớc dừa kết hợp với nồng độ Kinetine khác 30 Bảng 4.4 Tổng số chồi thu đƣợc, hệ số nhân chồi hình thái chồi sau tuần nuôi cấy môi trƣờng bổ sung hàm lƣợng khoai tây khác kết hợp với nồng độ BA 31 Hình 4.4 Hệ số chồi Lan Hồng Thảo sau tuần nuôi cấy môi trƣờng bổ sung khoai tây kết hợp BA 32 Hình 4.5 thể tỷ lệ tạo rễ sau tuần ni cấy có bổ sung than hoạt tính 33 Hình 4.6 Ảnh hƣởng NAA đến khả rễ (sau tuần theo dõi) 35 Hình 4.7 Ảnh hƣởng GA3 đến khả sinh trƣởng phát triển lan Hoàng Thảo ( sau tuần theo dõi) 36 vi DANH MỤC CỤM TỪ VIẾT TẮT DNA Deoxyribonucleic Acid CT Công thức BA Benzyladenin Đ/C Đối chứng K Kinetin (6- Furfurylaminopurine) THT Than hoạt tính KT Khoai tây CR Cà rốt vii MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC BẢNG iv DANH MỤC HÌNH v DANH MỤC CỤM TỪ VIẾT TẮT vi MỤC LỤC vii PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích nghiên cứu 1.3 Yêu cầu đề tài 1.4 Ý nghĩa đề tài PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.1.1 Khái niệm nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.1.2 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.1.3 Tính tồn tế bào 2.1.4 Phân hóa phản phân hóa tế bào 2.2 Gới thiệu hoa lan Hoàng thảo (Dendrobium) 2.2.1 Nguồn gốc phân bố 2.2.2 Đặc điểm thực vật học lan Hoàng Thảo (Dendrobium) 2.2.3 Đặc điểm thực vật học chi lan Hoàng Thảo (Dendrobium) 11 2.3 Tình hình nghiên cứu nƣớc nƣớc 12 2.3.1 Tình hình nghiên cứu sản xuất hoa lan việt nam 12 2.3.2 Tình hình nghiên cứu lan giới 14 PHẦN 3: VẬT LIỆU NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 3.1 Đối tƣợng (vật liệu) phạm vi nghiên cứu 16 3.2 Đối tƣợng nghiên cứu 16 3.3 Phạm vi nghiên cứu 16 3.4 Hóa chất thiết bị 16 viii 3.4.1 Hóa chất 16 3.4.2 Thiết bị 16 3.5 Điều kiện nuôi cấy 17 3.6 Địa điểm thời gian tiến hành nghiên cứu 17 3.7 Nội dung nghiên cứu phƣơng pháp nghiên cứu 17 3.7.1 Nội dung nghiên cứu 17 3.7.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 17 3.7.3 Phƣơng pháp thu thập, sử lý số liệu tiêu đánh giá 23 PHẦN 4: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 25 4.1 Kết ảnh hƣởng dịch chiết khoai tây, cà rốt nƣớc dừa có bổ xung chất kích thích sinh trƣởng Kinetine, BA đến khả nhân nhanh Lan Hoàng Thảo 25 4.1.1 Ảnh hƣởng dịch chiết khoai tây cà rốt đến khả nhân nhanh Lan Hoàng Thảo 25 4.1.2 Ảnh hƣởng hàm lƣợng khoai tây + cà rốt tốt kết hợp với nƣớc dừa đến khả nhân nhanh Lan Hoàng Thảo 27 4.1.3 Ảnh hƣởng hàm lƣợng nƣớc dừa kết hợp với Kinetine đến khả nhân nhanh lan Hoàng Thảo 29 4.1.4 Ảnh hƣởng hàm lƣợng khoai tây khác kết hợp với BA 31 4.2 Kết nội dung 33 4.2.1 Kết ảnh hƣởng hàm lƣợng than hoạt tính đến khả rễ 33 4.2.2 Kết ảnh hƣởng NAA đến khả rễ 34 4.2.3 Kết ảnh hƣởng GA3 đến giai đoạn sinh trƣởng phát triển Lan Hoàng Thảo 36 PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 38 5.1 Kết luận 38 5.2 Kiến nghị 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO 40 Tài liệu tiếng việt 40 ix Tài Liệu Tiếng Anh 41 PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Trong giới lồi hoa nói hoa lan lồi hoa đẹp quyến rũ mê hồn màu sắc hƣơng thơm, đặc biệt đƣờng nét hoa thật cầu kỳ, sắc sảo, thêm vào hoa lan có đặc tính bền tƣơi lâu ngồi giá trị làm cảnh trang trí, hoa lan cịn đƣợc sử dụng với nhiều mục đích khác nhƣ: Dùng làm thực phẩm (giống Orchis), rau xanh (giống Anoetochilus), trà uống (loài Jumellea fragrans), hƣơng liệu (Vannila plannifolia) đặc biệt lan cịn đƣợc dùng làm dƣợc liệu, có tác dụng chữa bệnh nhƣ số loài lan thuộc chi Orchis, Platanthera, Gymnadenda, Dactylorhiza đặc biệt chi Lan Hoàng Thảo (Dendrobium nobile, Caulis Dendrobium, dendrobium loddgesii, Dendrobium Chrysanthum, Dendrobium fimbriatum, Dendrobium nobile Lindi) (Đỗ Huy Bích, 2004) [1] (Dƣơng Đức Huyến cs, 1989) [2] Tuy nhiên trình phát triển kinh tế, xã hội nguyên nhân khác nhiều loài lan Hoàng Thảo nƣớc ta bị tuyệt chủng bị đe dọa tuyệt chủng (Vũ Ngọc Lan cs 2011) [3] Năm 2004 số lồi lan thuộc chi hồng thảo có danh lục đỏ “Sách đỏ Việt Nam” nhƣ: Thủy Tiên Hƣờng (Dendrobium amabile (Lour ƠBrien, 1990) Hạc Vĩ (Dendrobium aphyllum (Roxb.) C Fisch 1928), Ngọc Vạn Vàng (Dendrobium Chrysanthum Lindl 1830), Kim Diệp (Dendrobium fimbriatum Hook 1823), Hoàng thảo hoa Trắng – Vàng (Dendrobium nobile var albolu – teum) (Phan Thúc Huân, 1989) [4] Do vừa có giá trị làm hoa cảnh vừa làm dƣợc liệu nên nhiều lồi lan địa miền trung du phía bắc bị khai thác mức vào mục đích thƣơng mại đứng trƣớc nguy bị cạn kiệt Vì việc nghiên cứu nhân giống nhằm 38 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Sau thời gian nghiên cứu thử nghiệm ni cấy lan Hồng Thảo mơi trƣờng MS bản, có bổ sung chất hữu cơ, than hoạt tính hàm lƣợng chất kích thích sinh trƣởng nhƣ: Kinetine, BA, NAA, GA với hàm lƣợng khác đƣa kết luận: - Mơi trƣờng thích hợp cho nhân nhanh chồi có bổ xung hàm lƣợng chất hữu khoai tây 50g/l + 20g/l cà rốt vào môi trƣờng nuôi cấy MS cho hệ số nhân nhanh chồi cao MS + Agar 5.4g/l + đƣờng 30g/l + Inositon 100mg/l + khoai tây 50g/l + cà rốt 20g/l - Mơi trƣờng thích hợp cho nhân nhanh có bổ xung 100ml nƣớc dừa kết hợp với khoai tây 50g/l + cà rốt 20g/l tốt vào môi trƣờng cho hệ số nhân nhanh cao MS + Agar 5.4g/l + đƣờng 30g/l + Inositon 100mg/l + khoai tây 50g/l + cà rốt 20g/l + nƣớc dừa 100ml - Ảnh hƣởng nồng độ Kinetine 0.5 mg/l có bổ xung hàm lƣợng nƣớc dừa 70ml cho hệ số nhân nhanh tốt MS + Agar 5.4g/l + đƣờng 30g/l + Inositon 100mg/l + nƣớc dừa 70ml + Kinetine 0.5mg/l - Ảnh hƣởng BA 0.3 mg/l có bổ xung hàm lƣợng khoai tây khác cho kết nhân nhanh cao MS + Agar 5.4g/l + đƣờng 30g/l + Inositon 100mg/l +khoai tây 20g/l + BA 0.3mg/l - Ảnh hƣởng than hoạt tính đến khả rễ, tốt bổ xung 150mg/l than hoạt tính 39 MS + Agar 5.4g/l + đƣờng 30g/l + Kinetine 0.3mg/l + nƣớc dừa 70ml + than hoạt tính 150mg/l - Ảnh hƣởng NAA đến khả rễ tốt MS + Agar 5.4g/l + đƣờng 30g/l + nƣớc dừa 50ml + NAA 1mg/l - Ảnh hƣởng GA3 đến giai đoạn sinh trƣởng phát triển lan Hoàng Thảo tốt MS + Agar 5.4 g + đƣờng 30g/l + BA 0.3mg/l + NAA 1mg/l + GA3/ppm 200 5.2 Kiến nghị Nhân giống invitro phƣơng pháp nhân nhanh hiệu Vì cần có nhiều cách kết hợp hiệu môi trƣờng MS chất kích thích có bổ sung hợp chất hữu (khoai tây, cà rốt, nƣớc dừa, táo, chuối…) Nhằm tiếp cận phƣơng pháp hiệu Tiếp tục nghiên cứu ảnh hƣởng GA3, BA đến khả tái sinh lan Hoàng Thảo Nghiên cứu ảnh hƣởng chất kích thích sinh trƣởng đến khả sinh trƣởng phát triển lan Hoàng Thảo vƣờn ƣơm 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chƣơng, Nguyễn Thƣợng Dong, Đỗ Trung Đàm, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Nhu, Nguyễn Tập, Trần Toàn (2004) Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam Nhà xuất khoa học kỹ thuật tr.803 - 807 Dƣơng Đức Huyến L V Averyanov (1989) A new variety Dendrobium nobile var alboluteum from the South Vietnam region Bot Zhurn (Leningrad), 74 (7): 1039-1040 Vũ Ngọc Lan cộng sự, 2011 “Ảnh hƣởng của dinh dƣỡng qua đến trình sinh trƣởng phát triển lan Hoàng Thảo Thạch Hộc (Dendrobium nobile Lindl) Phan Thúc Huân (1989) Hoa lan cảnh vấn đề phát triển sản xuất kinh doanh xuất khẩu, Nhà Xuất Nông nghiệp thành phố Hồ Chí Minh, tr.12-14-34 Đỗ Năng Vịnh (2005), công nghệ tế bào thực vật ứng dụng, Nxb Nông nghiệp Hà Nội Nguyễn Tiến Bân (2007) Sách đỏ Việt Nam Phần II Thực vật tr 436437, NXB Khoa học tự nhiên công nghệ Trần hợp (1990) phong lan việt nam Nxb Nông Nghiệp TPHCM Võ Văn Chi (1996) Từ điển thuốc Việt Nam Nhà xuất Y học, Hà Nội Nguyễn Hữu Huy cộng (1995) “Mấy nét cuội nguồn phong lanĐặc sản quý nƣớc nhiệt đới” Việt Nam hương sắc Số 1.Tr 15-16 10 Nguyễn Thiện Tịch - Đoàn Thị Hoa, Trần Sĩ Dũng, Huỳnh Thị ngọc Nhân (1987), Kỹ thuật trồng hoa lan, Nhà xuất Đồng Nai Tr.72 - 89 41 11 Dƣơng Ngọc Bích Quyên, 2000 “Khảo sát môi trƣờng nuôi cấy ảnh hƣởng đến nhân giống in vtro lan Cymbidium Khóa luận tốt nghiệp 12 Phạm Thị Liên, viện di truyền nông nghiệp trung tâm thực nghiệm sinh học nông nghiệp cơng nghệ cao “Nghiên cứu quy trình phat triển số giống lan Hoàng thảo (Dendrobium) miền bắc Việt Nam phục vụ nƣớc xuất khẩu” 13 Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Xuân Trƣờng, Nguyễn Thị Lý Anh, Nguyễn Thị Hƣơng, Lại Đức Lƣu (2006) Bƣớc đầu nghiên cứu ứng dụng cơng nghệ khí canh nhân nhanh giống khoai tây cấy mơ Tạp chí Khoa học kỹ thuật Nông nghiệp, số + tr 73-78 14 Nguyễn Thị Tâm (2007), “ Ảnh hƣởng số yếu tố môi trƣờng giá thể đến sinh trƣởng lan Dendrobium hybrid in vitro”, Tạp chí Khoa học & Công nghệ - Số 3(43) (2006) 15 Lê Văn Hồng (2007) Giáo trình ni cấy mơ tếbào thực vật Đại học Đà Nẵng 16.Huỳnh Văn Thới, 1996 Cẩm nang nuôi trồngv kinh doanh phong lan NXB Trẻ, TPHCM 17.Lê Văn Hồng (2008), Giáo trình cơng nghệ ni cấy mô & tế bào thực vật, Nxb khoa học kỹ thuật, Đà Nẵng Tài Liệu Tiếng Anh 18 Haberlandt, G (1902) Culturversuche mit isolierten Pflanzenzellen SitzBer Mat Nat Kl Kais Akad Wiss Wien 111 69–92 [Ref list] 19 Lam chan cộng 2006 Development of simple sepuence repeat (SSR) masker and their use in indertification of Dendrobium varieties Molecular Ecology notes 20.Yoneo Sagawa lecturing in Nagoya, Japan in 1990 Sagawa Y, T Shoji 1967 (913–1961) 42 21.Mamari cộng sự, 2000 “Effect of growth hormone extracts from coconut water on the growth of reflasked Dendrobium protocorms”, Philippines-Journal – of – Crop – Scinec (philippine): P 30 22.NhutDt cộng 2003, The importanceof the explant on regeneration inthin cell layertechnology, in vitro cell Dev Biol Plant, 39, pp 266 – 276 23.Okmoto cộng sự, 2002 “Robotic transplanting of Orchid Protocorm in mericlone culture” , Journal - of – the – Japanese – Society – of – Agricultural – Machinery (Japan): p 103 – 110 43 PHỤC LỤC Phục lục 1: Một số kết ảnh thí nghiệm Hình Ảnh hƣởng dịch chiết khoai tây + cà rốt đến khả nhân nhanh lan HồngThảo 44 Hình 2: Ảnh hƣởng hàm lƣợng khoai tây + cà rốt tốt kết hợp với nƣớc dừa đến khả nhân nhanh 45 Hình 3: Ảnh hƣởng chất hữu tự nhiên kết hợp với Kinetine Hình 4: Ảnh hƣởng hàm lƣợng chất tự nhiên khác kết hợp với BA 46 Hình 5: Ảnh hƣởngcủa than hoạt tính đến khả rễ 47 Hình 6: Ảnh hƣởng NAA đến khả rễ 48 Phục lục 2: kết sử lý số liệu Bảng 5.1 Ảnh hƣởng dịch chiết khoai tây cà rốt đến khả nhân nhanh Lan Hoàng Thảo BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE THUONG 20/ 5/** 19:25 PAGE Ảnh hƣởng dịch chiết khoai tây cà rốt đến khả nhân nhanh Lan Hoàng Thảo VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT 1.56500 * RESIDUAL 313000 12 280000 13.41 0.000 233333E-01 * TOTAL (CORRECTED) 17 1.84500 108529 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFE CTS FILE THUONG 20/ 5/** 19:25 PAGE Ảnh hƣởng dịch chiết khoai tây cà rốt đến khả nhân nhanh Lan Hoàng Thảo MEANS FOR EFFECT CT -CT NOS HSN 3 3.90000 3 3.13333 3.10000 3.13333 3.20000 SE (N= 3) 3.03333 0.881917E-01 5%LSD 12DF 0.271749 -ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE THUONG 20/ 5/** 19:25 PAGE Ảnh hƣởng dịch chiết khoai tây cà rốt đến khả nhân nhanh Lan Hoàng Thảo F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT (N= 18) SD/MEAN | HSN NO BASED ON BASED ON % OBS TOTAL SS RESID SS | 18 3.2500 0.32944 0.15275 | | | | | 4.7 0.000 Bảng 5.2: Ảnh hƣởng hàm lƣợng khoai tây + cà rốt tốt kết hợp với nƣớc dừa đến khả nhân nhanh Lan Hoàng Thảo BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE THONG 20/ 5/** 19:10 PAGE Ảnh hƣởng hàm lƣợng khoai tây + cà rốt tốt kết hợp với nƣớc dừa đến khả nhân nhanh Lan Hoàng Thảo VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION SQUARES DF SUMS OF SQUARES MEAN F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT 2.10278 350463 10.72 0.000 49 * RESIDUAL 14 457600 326857E-01 * TOTAL (CORRECTED) 20 2.56038 128019 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE THONG 20/ 5/** 19:10 PAGE Ảnh hƣởng hàm lƣợng khoai tây + cà rốt tốt kết hợp với nƣớc dừa đến khả nhân nhanh Lan Hoàng Thảo MEANS FOR EFFECT CT CT NOS HSN 2.24000 2.50000 3 3.23333 3.00000 2.86667 2.83333 2.50000 SE (N= 3) 0.104380 5%LSD 14DF 0.316608 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE THONG 20/ 5/** 19:10 PAGE Ảnh hƣởng hàm lƣợng khoai tây + cà rốt tốt kết hợp với nƣớc dừa đến khả nhân nhanh Lan Hoàng Thảo F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT (N= 21) SD/MEAN | HSN NO BASED ON BASED ON % OBS TOTAL SS RESID SS | 21 27390 0.35780 0.18079 | | | | | 6.6 0.0002 Bảng 5.3: Ảnh hƣởng hàm lƣợng chất hữu tự nhiên tốt kết hợp với chất kích thích sinh trƣởng đến khả nhân nhanh PAGE Ảnh hƣởng hàm lƣợng chất hữu tự nhiên tốt kết hợp với chất kích thích sinh trƣởng đến khả nhân nhanh VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION SQUARES DF SUMS OF MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT 777333 * RESIDUAL 194333 10 240000 8.10 0.004 240000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.01733 726667E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE THUONG7 20/ 5/** 17:51 PAGE Ảnh hƣởng hàm lƣợng chất hữu tự nhiên tốt kết hợp với chất kích thích sinh trƣởng đến khả nhân nhanh MEANS FOR EFFECT CT CT NOS HSN 2.26667 2.70000 3 2.93333 2.43333 50 2.60000 SE (N= 3) 0.894427E-01 5%LSD 10DF 0.281837 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE THUONG7 20/ 5/** 17:51 PAGE Ảnh hƣởng hàm lƣợng chất hữu tự nhiên tốt kết hợp với chất kích thích sinh trƣởng đến khả nhân nhanh F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT (N= 15) SD/MEAN | NO BASED ON BASED ON % OBS TOTAL SS RESID SS | HSN 15 2.5867 0.26957 0.15492 | | | | | 6.0 0.0037 Bảng 5.4: Ảnh hƣởng hàm lƣợng chất hữu tự nhiên khác kết hợp vơi BA BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE THUONG9 20/ 5/** 18:47 PAGE Ảnh hƣởng hàm lƣợng chất hữu tự nhiên khác kết hợp vơi BA VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT 2.34933 * RESIDUAL 587333 10 460000 12.77 0.001 460000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.80933 200667 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE THUONG9 20/ 5/** 18:47 PAGE Ảnh hƣởng hàm lƣợng chất hữu tự nhiên khác kết hợp vơi BA MEANS FOR EFFECT CT CT NOS HSN 3.23333 4.26667 3 3.60000 3.33333 3.20000 SE (N= 3) 0.123828 5%LSD 10DF 0.390186 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE THUONG9 20/ 5/** 18:47 PAGE Ảnh hƣởng hàm lƣợng chất hữu tự nhiên khác kết hợp vơi BA F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT (N= 15) SD/MEAN | HSN | NO BASED ON BASED ON % OBS TOTAL SS RESID SS | 15 3.5267 0.44796 0.21448 | | | 6.1 0.0007 | 51 Phụ lục Môi trƣờng Table 1: Preparation of modified Murashige DNA Skoog’s MS medium Bottle Component Stock Solution (g/l) I NH4NO3 KNO3 MgSO4.7H2O MgSO4.4H2O ZnSO4.7H2O CuSO4.5H2O CaCl2.2H2O KI CoCl2.6H2O KH2PO4 H3PO3 Na2MoO4.2H2O FeSO4.7H2O Na2EDTA.2H2O Nicotinic acid Glycine ThiamineHCl PyridoxineHCl 82.5 95 37,0 2,23 1,058 0,0025 44,0 0,083 0,0025 17,0 0,62 0,025 2,784 3,724 100 100 100 100 II III IV V Vitamin Inositon Sucrose Agar PH Amount to take preparation (ml) 20 10 10 10 10 0,5 2,0 0,1 0,5 Final concentratic (mg/ l) 1.650,0 1.900,0 370,0 22,3 10,6 0,025 440,0 0,83 0,025 170,0 6,2 0,25 27,85 37,25 0,5 2,0 0,1 0,5 100,0 30.000,0 8000,0 5,8 52 Table 2: Preparation of modified Gamborg’s B5 medium (E-24medium S) Bottle Component Stock Solution (g/l) Amount to take preparation (ml) Final concentratic (mg/ l) KNO3 (NH4)2SO4 MgSO4.7H2O NaH2PO4.H2O MnSO4.H2O H3PO3 ZnSO4.7H2O KI Na2MoO4.2H2O CuSO4.5H2O CoCl2.6H2O FeSO4.7H2O Na2EDTA CaCl2.2H2O Inositon 160 100ml Vitamin Sucrose Agar PH Nicotinicacid ThiamineHCL PyridoxineHCL 5,6 to 5,8 100 100 100 10 1,0 10,0 1,0 800,0 ... -   - ĐÀM VĂN THƢỢNG NGHIÊN CỨU ẢNH HƢỞNG CỦA CHẤT KÍCH THÍCH SINH TRƢỞNG VÀ CHẤT HỮU CƠ ĐẾN KHẢ NĂNG NHÂN NHANH, RA RỄ VÀ GIAI ĐOẠN NGỒI VƢỜN ƢƠM CÂY LAN HỒNG THẢO (Dendrobium) KHĨA LUẬN... nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm thời gian thực tập tốt nghiệp thực đề tài: ? ?Nghiên cứu ảnh hưởng chất kích thích sinh trưởng chất hữu đến khả nhân nhanh rễ giai đoạn vườn ươm lan Hồng Thảo? ??... tục nghiên cứu ảnh hƣởng GA3, BA đến khả tái sinh lan Hoàng Thảo Nghiên cứu ảnh hƣởng chất kích thích sinh trƣởng đến khả sinh trƣởng phát triển lan Hoàng Thảo vƣờn ƣơm 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO