I CẤU TẠO CHUNG CỦA SỢI NẤM 1. Hình thái và cấu tạo của sợi nấm 2Vách ngăn ở sợi nấm: 3Mô (tissue) của hệ sợi nấm: 4Các dạng biến đổi của hệ sợi nấm: 4.1Bào tử áo, bào tử, tế bào phình lớn: 4.2Sợi hút (haustorium): 4.3 Sợi áp (appressorium) và đệm xâm nhiễm (infection cushion 4.4 Sợi nấm bắt mồi (traps): 4.5 Rễ giả (rhizoid) và Sợi bò (stolon): Bài 9 Nấm sợi (Filamentous Fungi) NẤM SỢI (FILAMENTOUS FUNGI) PHƯƠNG PHÁP LẤY MẪU : I. Mẫu đất. II. Lá và cành cây khô: III. Lá tươi và vỏ cây: IV. Phân. V. Côn trùng. VI. Nước ngọt và các vật liệu có trong nước ngọt. VII. Nước mặn và các vật liệu có trong nước mặn. PHƯƠNG PHÁP PHÂN LẬP: 1. Phương pháp dùng kim nhọn: 2. Phương pháp phân lập bào tử đơn độc: 3. Phương pháp dùng vi thao tác Skerman: 4. Phương pháp pha loãng: 5. Phương pháp pha loãng kết hợp với xử lý tia cực tím: 6. Phương pháp phân lập nấm đảm và nấm túi (Basidiomycetes và Ascomycetes) 7. Phương pháp rửa bề mặt: PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LOẠI NẤM SỢI I Yêu cầu: II. Quy trình định loại một chủng nấm sợi: III. Tiến hành định loại KHOÁ PHÂN LOẠI ĐẾN LỚP I. LỚP NẤM TIẾP HỢP (ZYGOMYCETES) II. LỚP NẤM BẤT TOÀN (DEUTEROMYCETES) 1. Đặc điểm đặc trưng 2. Phân lớp của nấm bất toàn: 3. Những bộ phận sinh sản vô tính. KHOÁ 1: KHOÁ 2 I. Amerocodidium II. Didymoconidium III. Phragmoconidium IV. Dictyoconidium V. Scolecoconidium VI. Helicoconidium VII. Stauroconidium VIII. Miscellaneous fungi IX. Synnematous fungi:
Bài Vi nấm (Microfungi) ĐẠI CƯƠNG VỀ VI NẤM Nấm (Fungi, số Fungus) giới riêng- Giới nấm (Fungi), khoa học nghiên cứu nấm gọi Nấm học (Mycology) Người ta biết đến nấm sử dụng nấm từ thời cổ xưa Theo Quách Mạt Nhược, tác giả Bộ Trung quốc sử cảo người Trung Quốc biết ăn nấm từ cách 6000-7000 năm Nghề nấu rượu có sử dụng nấm men nấm sợi xuất Trung Quốc từ cách 7000-8000 năm Việc sử dụng nấm làm dược liệu (Thần khúc) có Trung Quốc từ cách 2550 năm Các nấm dùng làm thuốc Phục linh, Chư linh, Linh chi , Tử linh, Lơi hồn, Mã bột, Thiền hoa, Trùng thảo, Mộc nhĩ…đã ghi sáchThần nông thảo kinh thời gian khoảng năm 100-200 sau Công nguyên Ở phương Tây , Ray ( 1684-1704) người Anh, vào đặc điểm sinh thái để phân 94 loại nấm thành nhóm khác sách Lịch sử thực vật Sau nghiên cứu phân loại nấm lớn vào hình thái Magnol (1689), Tournefort (1694) Khi Leewenhoek (1632-1723) làm kính hiển vi phóng đại 200-300 lần người ta bắt đầu ý đến nấm nhỏ hay gọi vi nấm.Nhà khoa học Italia P.A.Micheli (1679-1737) người dùng kính hiển vi để nghiên cứu nấm tác phẩm Các chi thực vật (Nova Plantarum Genera) xuất năm 1729 ông nêu lên bảng phân loại chi nấm Mucor, Tuber, Aspergillus… Học giả Hà Lan D.C.H Persoon (1761-1836) sách Synopsis Methodica Fungarum Mycologia Europeae đặt sở cho phương pháp hệ thống phân loại nấm Học giả Thụy Điển E.M Fries (1794-1878) có nhiều cống hiến việc phân loại nấm lớn Khoảng 100 năm sau việc phân loại đa số nấm lớn dựa nghiên cứu Fries Người vận dụng thuyết tiến hóa Darwin vao việc phân loại nấm nhà khoa học Đức H.A.De Bary (1831-1888) Ơng xuất sách Hình thái học sinh lý học nấm vào năm 1866 với sở phân loại dựa trật tự tiến hóa Ơng nghiên cứu nguồn gốc tiến hóa nấm, sáng tạo nên giả thuyết Đơn nguyên luận Về sinh lý học, năm 1869 J.Raulin phát nguyên tố vi lượng Zn cần cho sinh trưởng Asperrgillus niger; năm 1901 E.Wilders cho biết để sinh trưởng nấm cần nhân tố Biotin, Thiamin, Inositol… Về Di truyền học Blakeslee (1904) phát phối hợp sợi nấm khác giới tính nấm Mucor Sau phát tương tự Kniep (1920 với nhiều loài nấm Đảm, Dodge (1928) với nấm Neurospora Về sau với nấm Neurosporra người ta nghiên cứu sâu di truyền học sở nghiên cứu mà Beadles (1945) đề xuất học thuyết Một gen-một enzym Nhà nấm học Italia P A Saccardo (1845-1920) chỉnh lý nghiên cứu nấm biên soạn tiếng La Tinh 25 tập Kỷ yếu Nấm Tiến Sinh học phân tử kỹ thuật kính hiển vi điện tử đem lại diện mạo cho việc nghiên cứu phân loại học sinh lý học nấm Các thành tựu nghiên cứu tổng kết đầy đủ tập sách Giới Nấm (The Fungi) G C Ainsworth cộng (Vol 1, 2.3.4A.4B New York and London: Academic Press, 1963-1973) Năm 1995 tái lần thứ Từ điển nấm (Dictionary of the Fungi) Ainsworth Bisby Nấm chia thành ngành (Division, Phylum): - Ngành Chytridiomycota - Ngành Zygomycota - Ngành Ascomycota - Ngành Basidiomycota Theo thuật ngữ Latinh tên taxon phân loại nấm sau: Ngành-mycota; Ngành phụmycotina; Lớp- mycetes; Lớp phụ- mycetidae; Bộ-ales; Bộ phụ- ineae;Họ-aceae; Họ phụ- oideae Hiện tồn hệ thống phân loại nấm không thống với nhau, chủ yếu hệ thống phân loại theo Ainsworth cộng (1973), V.Arx (1981), Ainsworth & Bisby (1983), Kendrick (1992), Ainsworth & Bisby (1995), Alexopoulos & Mins (1996) Chúng sử dụng hệ thống phân loại theo Giáo trình nấm học CBS ( CBS Course of Mycology ), lần xuất thứ 4, Baarn, Delft, 1998: Ngành Lớp Labyrinthulea Labyrinthomorpha Pseudofungi Thraustochytriacea Hyphochytriomycetes Lớp phụ nhóm Chytridiomycota Oomycetes Chytridiomycetes Zygomycetes Zygomycota Trichomycetes Archiascomycetes Saccharomycetes Ascomycetes discomycetes Major licheneized orders plectomycetes pyrenomycetes Ascomycota loculoascomycetes powdery mildews Laboulbeniomycetes conidial ascomycetes (Hyphomycetes, Coelomycetes) Urediniomycetes Platyglomycetidae Basidiomycota Urediniomycetidae Ustilaginomycetes Tremellomycetidae Dacrymycetidae Hymenomycetes Auriculariomycetidae Hymenomycetidae Các lồi nấm khơng tìm thấy (đúng chưa tìm thấy) dạng sinh sản hữu tính xếp chung vào nhóm Nấm bất tồn – Fungi imperfecti Theo hệ thống phân loại Saccardo (1880,1886) nấm xếp thành lớp- Lớp Deuteromycetes Khi phát thấy quan sinh sản hữu tính người ta đổi tên lồi xếp sang lớp khác Ví dụ nấm lúa von trước gọi Fusarium moniliforme, sau tìm thấy quan sinh sản hữu tính lại chuyển thành lồi Gibberella fujikuroi Các nấm bất toàn xếp nhóm conidial Ascomycetes hay conidial Basidiomycetes Hiện người ta cho tự nhiên có khoảng triệu đến 1,5 triệu loài nấm định tên khoảng 10 000 chi 70 000 loài, Trung Quốc điều tra 40 000 loài Riêng loài nấm thuộc Nấm bất toàn nước ta phát 338 loài thuộc 306 chi khác (Bùi Xuân Đồng, 2004) Bảo tàng giống chuẩn vi sinh vật (VTCC) thuộc Trung tâm Công nghệ sinh học Đại học Quốc gia Hà Nội hợp tác với Viện NITE Nhật Bản điều tra nghiên cứu khu hệ vi nấm Việt Nam có nhiều khả tìm thấy lồi khoa học Vậy lồi nấm Vi nấm (Microfungi)? Đó tất nấm khơng có mũ nấm (quả thể, fruit-body) thấy rõ mắt thường Người ta gọi nấm có mũ nấm nấm bậc cao Tuy nhiên nuôi cấy sợi nấm nấm bậc cao để nghiên cứu để sản xuất sinh khối chúng coi vi nấm đối tượng nghiên cứu ngành Vi sinh vật ( giống loài vi nấm khác) Để nghiên cứu vi nấm bắt buộc phải quan sát kính hiển vi phải ni cấy điều kiện vô khuẩn vi khuẩn Căn vào hình thái người ta chia vi nấm thành hai nhóm khác nhau: nhóm Nấm men ( Yeast ) nhóm Nấm sợi (Filamentous fungi) Chúng khác hình thái khơng phải taxon phân loại riêng biệt Nhiều nấm men có dạng sợi khó phân biệt với nấm sợi I1 CẤU TẠO CHUNG CỦA SỢI NẤM Hình thái cấu tạo sợi nấm Sợi nấm (hypha) có dạng hình ống phân nhánh bên chứa chất nguyên sinh lưu động Về chiều dài chúng có sinh trưởng vơ hạn đường kính thưopừng thay đổi phạm vi 1-30µm (thơng thường 5-10 µm) Đầu sợi nấm có hình viên trụ, phần đầu gọi vùng kéo dài (extension zone) Lúc sợi nấm sinh trưởng mạnh mẽ vùng thành tế bào phát triển nhanh chóng, vùng dài đến 30 µm Dưới phần thành tế bào dày lên không sinh trưởng thêm Màng nguyên sinh chất thường bám sát vào thành tế bào Trên màng nguyên sinh chất có số phần có kế cấu gấo nếp hay xoặ lại, người ta gọi biên thể màng (plasmalemmasome) hay biên thể (lomasome) Nhiều chúng có tác dụng tiết xuất chất Thành tế bào (cell wall) nấm có thành phần hóa học khác Đây tiêu chí quan trọng định loại nấm sau thành phần thành tế bào số nấm: Chi nấm: Thành phần thành tế bào: Glucan Cellulose Chitine Chitosan Mannan 16 58 - 54 36 10