Phân lập, định danh và xác định đặc điểm sinh hóa của các chủng vi khuẩn kị khí, ưa nhiệt, sinh cellulase (4)

Luận Văn Thạc Sĩ Khóa 18 Hồng Ngun KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận Từ kết thực nghiệm thực phần trên, rút số kết luận sau: Phân lập làm 11 chủng vi khuẩn kị khí ưa nhiệt có khả tạo vòng phân giải cellulose tinh thể Các đặc điểm sinh lý, hình thái chủng khảo sát: DM5-1, DM7-1, DR5-1, DM8-1, DT2-1 TQ1-2 cho thấy chúng chủng vi khuẩn gram dương, hình que, có khả hình thành bào tử, kị khí, ưa nhiệt sinh cellulase Trên môi trường PCS, chủng DR5-1 TQ1-2 có khả sử dụng sử dụng giấy lọc cao 100% sau 20 ngày ni cấy Hoạt tính enzyme cellulase thu đuợc nuôi cấy mơi trường PCS cho thấy hoạt tính chúng tương đối yếu chủng vi khuẩn báo cáo trước đây, chủng có hoạt tính cellulase cao TQ1-2 đạt 0.069UI/ml dịch ni cấy Hoạt tính endoglucanase phát In-situ gel polyacrylamide sau điện di SDS-PAGE Các vạch phân giảicos trọng lượng phân tử khoảng 45000-85000 Dalton: o Chủng DM5-1, DM8-1, TQ1-2 có hai vạch phân giải CMC o Chủng DM7-1, DR5-1, DT2-1 có vạch phân giải CMC Hai chủng DR5-1 TQ1-2 có khả thuộc giống Clostridium phương pháp PCR với cặp mồi S-G-Clos-0586-S-21 S-G-Clos-1205-A-21 đặc trưng cho giống Clostridium Mối quan hệ chủng khảo sát chủng ngân hàng gen xác định dựa việc giải trình tự đoạn gen rDNA 16S cặp mồi universal xây dựng phân loại loài Các yếu tố ảnh hưởng đến hoạt tính enzyme cellulase nhiệt độ, pH thời gian nuôi cấy xác định: 81 Luận Văn Thạc Sĩ Khóa 18 Hồng Ngun o Chủng DM8-1 DT2-1 có hoạt tính cellulase cao 50oC Các chủng DM5-1, DM7-1, DR5-1, TQ1-2 có hoạt tính cellulase tối ưu 60oC o Các chủng DM7-1 DM8-1 có hoạt tính cellulase cao pH Các chủng DM5-1, DR5-1, DT2-1, TQ1-2 có hoạt tính cellulase tối ưu pH o Trong thời gian ni cấy 20 ngày, chủng DM7-1, DT2-1, TQ1-2 có hoạt tính cellulase gia tăng theo thời gian ni cấy, chủng DM5-1, DR5-1, DM8-1 có hoạt tính cellulase tối ưu thời điểm 16 ngày nuôi cấy 4.2 Kiến nghị Với mục đích phân lập định danh chủng vi khuẩn kị khí, ưa nhiệt, sinh cellulase, xác định đặc tính sinh hóa chúng Kết đề tài tiền đề cho nghiên cứu vi khuẩn nước, số ứng dụng chúng Vì chúng tơi có số kiến nghị nhằm hoàn thiện đề tài mở hướng nghiên cứu tương lai: Khảo sát đặc điểm sinh hóa chủng, với kết định danh để có đầy đủ liệu cho việc định danh vi khuẩn phân lập Khảo sát khả sinh ethanol chủng vi khuẩn để ứng dụng vào việc lên men phế phẩm rơm rạ, phế phẩm cellulose khác Đồng thời, khảo sát ảnh hưởng tương hỗ số điều kiện nuôi cấy: ảnh hưởng nhiệt độ, pH, kim loại, vitamin,… nhằm nâng cao khả thu nhận ethanol chủng nuôi cấy Khảo sát khả tạo cellulosome môi trường cellulose tinh thể Xác định hoạt tính enzyme khác mơi trường ni cấy: xylanase, hemicellulase, spectinase… Khảo sát hoạt tính xylannase phát In-situ gel polyacrylamide sau điện di SDS-PAGE 82 ... DM8-1 có hoạt tính cellulase tối ưu thời điểm 16 ngày nuôi cấy 4.2 Kiến nghị Với mục đích phân lập định danh chủng vi khuẩn kị khí, ưa nhiệt, sinh cellulase, xác định đặc tính sinh hóa chúng Kết đề... hóa chủng, với kết định danh để có đầy đủ liệu cho vi c định danh vi khuẩn phân lập Khảo sát khả sinh ethanol chủng vi khuẩn để ứng dụng vào vi c lên men phế phẩm rơm rạ, phế phẩm cellulose khác... vi khuẩn nước, số ứng dụng chúng Vì chúng tơi có số kiến nghị nhằm hoàn thiện đề tài mở hướng nghiên cứu tương lai: Khảo sát đặc điểm sinh hóa chủng, với kết định danh để có đầy đủ liệu cho vi c