TẾBÀOGỐCTếbàogốc 1.1.Khái niệm Tếbàogốctếbào có khả biệt hố thành nhiều loại tếbào khác để thay cho tếbào bị già chết tự nhiên hay chấn thương nhiều nguyên nhân khác Cơ thể có 200 loại tếbào khác thực chức sinh lý cụ thể, ví dụ tếbào da, tếbào cơ, tếbào máu, tếbào thần kinh… Tất loại tếbào hình thành từ vốn tếbàogốc giai đoạn phát triển sớm phôi thai Trong thể trưởng thành, tếbàogốc lưu giữ vị trí đặc biệt gọi “ổ” tếbàogốc Chúng đóng vai trò hệ thống sửa lỗi cho thể nhờ khả phân chia không giới hạn thành nhiều loại tếbào khác nhau, nhằm thay tếbào bị chết tổn thương Đây cách mà tếbàogốc giữ cho thể cân khỏe mạnh 1.2.Nguồn gốctếbàogốcTếbàogốc lấy từ nguồn gốc khác nhau: – Tếbàogốc phôi lấy trực tiếp từ phôi thai giai đoạn phôi bào tức hợp tử sau 6-7 ngày thụ tinh – Tếbàogốc thai lấy từ tếbàogốc đa mô bào thai bị hủy phá thai – Tếbàogốc dây rốn lấy từ màng dây rốn máu dây rốn thai nhi sau sinh – Tếbàogốc từ người trưởng thành lấy từ mô người trưởng thành (tủy xương, máu ngoại vi…) Các tếbàogốc lấy từ phôi, thai, dịch ối, dây rốn, thai, mô khác người sau sinh người trưởng thành Dựa vào nguồn mô lấy để phân lập so với giai đoạn phát triển phôi thai thể người ta chia tếbàogốc thành loại sau: -Tế bàogốc phôi (embryonic stem cells): tếbàogốc lấy từ khối tếbào bên phôi nang 4-7 ngày tuổi Đây tếbào chưa biệt hố, có tính vạn tiềm năng, phát triển thành gần loại tếbào thể -Tế bàogốc thai (foetal stem cells): tếbàogốc phân lập từ tổ chức thai sau nạo phá thai Đây tếbào vạn tiềm đa tiềm năng, tức chúng có tiềm phát triển thành nhiều loại tếbào khác mô quan -Tế bàogốc nhũ nhi (infant stem cells): tếbào đa tiềm vạn tiềm phân lập từ thể trẻ sơ sinh, dây rốn, từ thai -Tế bàogốc trưởng thành (adult stem cells): tếbào chưa biệt hố, tìm thấy số lượng mô người trưởng thành (tủy xương, máu ngoại vi, mô não, mô da, mô ), cho có tính đa tiềm -Tế bàogốc giống tếbàogốc phôi (embryonic like stem cell) hay tếbàogốc vạn tiềm cảm ứng (induced plutipotent stem cell) tếbào tạo cách cảm ứng tếbào biệt hoá thể trở lại trạng thái giống tếbàogốc phơi 1.3.Phân loại tếbàogốc Theo đặt tính hay mức độ biệt hóa 1.3.1 Tếbàogốc tồn hay tếbàogốc thủy tổ (totipotent stem cells) Là tếbào có khả biệt hóa thành tất loại tếbào thể từ tếbào ban đầu Trứng thụ tinh tếbào sinh từ lần phân chia tếbào trứng thụ tinh (giai đoạn - tếbào – blastosomer) 1.3.2 Tếbàogốc vạn (pluripotent stem cells) Là tếbào có khả biệt hóa thành tất tếbào thể có nguồn gốc từ ba mầm phôi – trong, ngồi Các tếbàogốc vạn khơng thể phát triển thành thai, không tạo nên thể sinh vật hồn chỉnh mà tạo nên tế bào, mô định 1.3.3 Tếbàogốc đa (multipotent stem cells) Là tếbào có khả biệt hóa thành nhiều loại tếbào thể từ tếbào ban đầu Các tếbàogốc trưởng thành tếbàogốc tạo máu, tếbàogốc thần kinh có tính đa năng; điều kiện định, chúng chuyển biệt hóa trở nên có tính vạn 1.3.4 Tếbàogốc đơn (mono/unipotential progenitor cells) Tếbàogốc đơn tếbàogốc có khả biệt hóa theo dòng Khả biệt hóa theo dòng cho phép trì trạng thái sẵn sàng tự tái tạo mô, thay tếbào mơ chết già cỗi tếbào mô Công nghệ tếbàogốc 2.1.Khái niệm Là cơng nghệ nghiên cứu tìm kiếm, trì khai thác ứng dụng tếbàogốc Công nghệ tếbàogốc ngành công nghệ nghiên cứu tếbàogốc ứng dụng nhằm nâng cao chất lượng sống người Cơng nghệ tếbàogốc gồm có nhóm cơng việc là: - Tạo nguồn tếbào gốc: tìm kiếm nguồn cung cấp tếbào gốc, tách chiết trì tếbàogốc ngân hàng phòng thí nghiệm để có nguồn tếbàogốc thường trực sử dụng cho nghiên cứu ứng dụng tếbàogốc - Biệt hoá tếbào gốc: tếbàogốctếbào non trẻ chưa có cấu trúc chức chuyên biệt tếbào biệt hoá Biệt hoá tếbàogốc biến đổi tếbàogốc từ chỗ chưa có cấu trúc chức chuyên biệt thành tếbào có cấu trúc chức chuyên biệt tếbào xương, tếbào da, tếbào cơ, tếbào gan, tếbào thần kinh - Ứng dụng tếbào gốc: công việc sử dụng tếbàogốc vào mục đích khác nghiên cứu chế sinh lý bệnh lý thể, nghiên cứu phát triển thuốc biện pháp điều trị Khi cấy vào mơi trường thích hợp, tếbàogốc có khả tăng sinh biệt hóa thành nhiều loại tế bào, mơ quan thể Vì vậy, y học nghiên cứu để ứng dụng tếbàogốc chữa nhiều chứng bệnh như: trí nhớ, Parkinson, tiểu đường type 1, bệnh tim, đột quỵ, ung thư, chấn thương cột sống, viêm khớp xương mãn tính viêm khớp dạng thấp… Bên cạnh đó, nghiên cứu tếbàogốc mở hướng khả quan tái tạo cấy ghép mô, quan nội tạng Tếbàogốc phơi Có phơi túi với số lượng lớn Dễ ni cấy nhân tạo Có tính vạn cao hơn, dễ tăng sinh ni cấy in vitro, cho phép tạo lượng lớn Gần Tếbàogốc trưởng thành Có mơ trưởng thành, số lượng Khó ni cấy nhân tạo Về có tính đa năng, có tính vạn Khơng bất tử, số lần phân chia bị giưới hạn Ít nguy tạo khối u teratoma Nguy tạo khối u teratoma cao Vì mà tếbàogốc phơi chưa sử dụng lâm sàng Để tránh tạo khối u, cần định hướng biệt hóa tếbàogốc phôi trước nuôi cấy nhân tạo Do lấy từ cư thể khác nên TBG phôi Không bất đồng miễn dịch, khơng gây “lạ” với thể nhận có nguy gây thải ghép ghép tự thân nên phản ứng thải ghép Nếu ghép cho người khác bất đồng gây phản ứng thải ghép Không dùn cho ghép tự thân, trừ Các tếbàogốc thân nguồn tế trường hợp TBG tạo kĩ thuật nhân bào tốt cho ghép tạo phơi vơ tính Nuôi cấy tếbàogốc Thành phần môi trường nuôi cấy: • • • • • Muối vơ Carbohydrate, acid béo, amino acid Vitamin Yếu tố vi lượng Huyết 3.1.Ni cấy sơ cấp Là q trình ni cấy thực trực tiếp từ mảnh mô ban đầu đến cấy chuyền lần thứ Gồm bước: thu nhận mô → tách rời tếbào → nuôi cấy tếbào 3.2.Nuôi cấy thứ cấp Là trình ni cấy thực sau lần cấy chuyền Gồm bước: loại bỏ môi trường cũ → rửa bình/đĩa ni → tách tếbàogốc bám vào đáy đĩa→pha loãng tếbàogốc môi trường Thu nhận nuôi cấy tếbàogốc từ tủy xương chuột Đùi chuột vừa thu nhận Nuôi tếbào dụng cụ nuôi phù hợp Lóc bỏ phần thịt Rửa tủy xương dung dịch DMEM thu nhận huyền phù tếbào Rửa lại dung dịch PBS Cắt bỏ hai đầu xương đùi Thu nhận xương đùi chuột Biệt hóa tếbàogốc - Khái niệm: Biệt hóa tếbàogốc trình biến đổi từ tếbàogốc khơng có chức chun biệt thành tếbào chun hóa - Ngun tắc: • • • • • • • Loại bỏ tác nhân biệt hóa khơng định hướng Cảm ứng tếbàogốc biệt hóa thành dạng tếbào mong muốn tác nhân biệt hóa thích hợp Biệt hóa hóa chất: Một số hormone, cytokine, vitamin, ion Ca2+ Tác động lên tếbào làm tếbào thay đổi biểu gen Biệt hóa chất nền: Dựa vào tương tác tếbào chất nuôi cấy tếbào in vitro Mỗi mơ khác có thành phần chất ngoại bào ECM (Extra cellular matrix ) riêng Bổ sung ECM thích hợp vào ni cấy in vitro giúp tếbàogốc biệt hóa thành tếbào mong muốn ... cho nghiên cứu ứng dụng tế bào gốc - Biệt hoá tế bào gốc: tế bào gốc tế bào non trẻ chưa có cấu trúc chức chuyên biệt tế bào biệt hoá Biệt hoá tế bào gốc biến đổi tế bào gốc từ chỗ chưa có cấu... chức chuyên biệt thành tế bào có cấu trúc chức chuyên biệt tế bào xương, tế bào da, tế bào cơ, tế bào gan, tế bào thần kinh - Ứng dụng tế bào gốc: công việc sử dụng tế bào gốc vào mục đích khác... giống tế bào gốc phơi 1.3.Phân loại tế bào gốc Theo đặt tính hay mức độ biệt hóa 1.3.1 Tế bào gốc tồn hay tế bào gốc thủy tổ (totipotent stem cells) Là tế bào có khả biệt hóa thành tất loại tế bào