SKKN KHẢO SÁT KIỂU NHÂN CỦA HÀNH TA (ALLIUM ASCALONICUM L.)

SKKN KHẢO SÁT KIỂU NHÂN CỦA HÀNH TA (ALLIUM ASCALONICUM L.)SKKN KHẢO SÁT KIỂU NHÂN CỦA HÀNH TA (ALLIUM ASCALONICUM L.)SKKN KHẢO SÁT KIỂU NHÂN CỦA HÀNH TA (ALLIUM ASCALONICUM L.)SKKN KHẢO SÁT KIỂU NHÂN CỦA HÀNH TA (ALLIUM ASCALONICUM L.)SKKN KHẢO SÁT KIỂU NHÂN CỦA HÀNH TA (ALLIUM ASCALONICUM L.)SKKN KHẢO SÁT KIỂU NHÂN CỦA HÀNH TA (ALLIUM ASCALONICUM L.)SKKN KHẢO SÁT KIỂU NHÂN CỦA HÀNH TA (ALLIUM ASCALONICUM L.)SKKN KHẢO SÁT KIỂU NHÂN CỦA HÀNH TA (ALLIUM ASCALONICUM L.)SKKN KHẢO SÁT KIỂU NHÂN CỦA HÀNH TA (ALLIUM ASCALONICUM L.)SKKN KHẢO SÁT KIỂU NHÂN CỦA HÀNH TA (ALLIUM ASCALONICUM L.)SKKN KHẢO SÁT KIỂU NHÂN CỦA HÀNH TA (ALLIUM ASCALONICUM L.)SKKN KHẢO SÁT KIỂU NHÂN CỦA HÀNH TA (ALLIUM ASCALONICUM L.)

1 MỤC LỤC TÓM TẮT GIỚI THIỆU .2 PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .3 2.1 Phương tiện 2.2 Phương pháp nghiên cứu .4 2.2.1 Quy trình 2.2.2 Khảo sát kiểu nhân KẾT QUẢ THẢO LUẬN 3.1 Quy trình thực tiêu hiển vi tạm thời cố định .5 3.1.1 Thời gian thu mẫu 3.1.2 Xử lý mẫu trước cố định 3.1.3 Cố định mẫu vật 3.1.4 Nhuộm mẫu vật 3.1.5 Thực tiêu hiển vi cố định 3.1.6 Làm mẫu .8 3.2 Nhận diện tiền kỳ trình nguyên phân 3.3 Khảo sát kiểu nhân .8 3.3.1 Hình dạng nhiễm sắc thể 3.3.2 Số lượng nhiễm sắc thể 3.3.3 Những nghiên cứu kiểu nhân hành ta (Allium ascalonicum L.) .13 KẾT LUẬN .13 TÀI LIỆU THAM KHẢO 14 KHẢO SÁT KIỂU NHÂN CỦA HÀNH TA (ALLIUM ASCALONICUM L.) TÓM TẮT Mục tiêu đề tài là: i) Tìm quy trình thực tiêu hiển vi tạm thời cố định nhiễm sắc thể rễ hành ta (Allium ascalonicum L.), ii) Thực 30 tiêu hiển vi cố định rễ hành ta (Allium ascalonicum L.), iii) Khảo sát kiểu nhân hành ta (Allium ascalonicum L.) Rễ hành ta (Allium ascalonicum L.) xử lý sốc nhược trương với citrat natri 0,1% xử lý với – oxyquinoline Các tiêu hiển vi tạm thời cố định thực theo phương pháp ép với chất cố định Carnoy biến đổi phẩm nhuộm aceto carmine 1% Kiểu nhân hành ta (Allium ascalonicum L.) xác định dựa khảo sát hình dạng, số lượng kích thước nhiễm sắc thể tế bào giai đoạn tiền kỳ (prometaphase) kỳ (metaphase) trình nguyên phân Kết tìm quy trình thực tiêu tạm thời cố định nhiễm sắc thể hành ta (Allium ascalonicum L.) thực 30 tiêu hiển vi cố định nhiễm sắc thể hành ta (Allium ascalonicum L.) với độ tương phản cao, tế bào không bị teo, quan sát rõ hình thái nhiễm sắc thể Kiểu nhân hành ta (Allium ascalonicum L.) K (n = 8) = 6m + 1sm + 1st Từ khóa: Allium ascalonicum L., acetocarmine, kiểu nhân (karyotype), nhiễm sắc thể đồ, sốc nhược trương, – oxyquinoline GIỚI THIỆU Do ổn định hình thái nhiễm sắc thể cố định số lượng nên mơ tả hình thái nhiễm sắc thể gọi kiểu nhân (karyotype) đặc trưng cho loài (Phạm Thành Hổ, 2004) Kiểu nhân xác định số lượng, kích thước, hình thái nhiễm sắc thể, tính trạng đặc trưng cho nhiễm sắc thể lồi Nghiên cứu kiểu nhân có ý nghĩa lớn phân loại thực vật, lai xa, đa bội hóa, đột biến, v.v… Kiểu nhân lồi thực vật khác đặc trưng cho loài (Trần Tú Ngà, 1982) Việc nghiên cứu kiểu nhân (karyotype) giúp hiểu rõ hình thái, kích thước xếp nhiễm sắc thể trình phân bào nguyên nhiễm (mitosis), đặc biệt giai đoạn tiền kỳ (Phùng Thị Thanh Tâm, 2005) Đồng thời, việc nghiên cứu kiểu nhân loài đưa tiêu chuẩn chung để phân loại nhiễm sắc thể loài chi Nhiễm thể đồ biểu diễn kiểu trung bình nhiễm sắc thể, sở nghiên cứu chúng nhiều tế bào Trên nhiễm thể đồ biểu diễn nhiễm sắc thể cặp Mỗi nhiễm sắc thể uốn thẳng hình thức lược đồ có vị trí tâm động Trong nhiễm thể đồ nhiễm sắc thể xếp theo trật tự kích thước giảm dần Nhiễm sắc thể lớn Hiện có số nghiên cứu kiểu nhân như: kiểu nhân Allium fistulosum L., Allium sativum L., Allium cepa L kiểu nhân số loài lai Allium wakegi Araki Allium ascalonicum L., Allium wakegi Araki Allium fistulosum L Một nghiên cứu gần Thái Lan (10/01/2010) khảo sát hình thái nhiễm sắc thể cách tổng quát số loài thuộc chi Allium Allium fistulosum L., Allium cepa L., Allium sativum L., Allium ampeloprasum Kích thước trung bình nhiễm sắc thể từ 3.893 µm đến 6.059 µm hầu hết nhiễm sắc thể có tâm cân (Rangsiruji et al, 2010) Hành ta (Allium ascalonicum L.) đối tượng sử dụng phổ biến giảng dạy, có số lượng nhiễm sắc thể tương đối ít, đối tượng dễ tìm phổ biến đồng sông Cửu Long Mặc dù số lượng nhiễm sắc thể hành ta (Allium ascalonicum L.) tương đối kích thước nhiễm sắc thể dài, khó khảo sát số lượng hình thái Theo Trần Tú Ngà, mẫu vật xử lý với dung dịch – oxyquinoline Sau xử lý, nhiễm sắc thể có bề dày tăng lên đến 1,5 lần Ngồi ra, mẫu vật xử lý với citrat natri Chính thực tiễn trên, chúng tơi tiến hành nghiên cứu đề tài: “Khảo sát kiểu nhân hành ta (Allium ascalonicum L.) nhằm đưa kết luận ban đầu kiểu nhân hành ta, làm tài liệu tham khảo cho nghiên cứu kiểu nhân loài thuộc chi Allium, tài liệu phục vụ cho trình dạy học trường Trung học phổ thông, Cao đẳng Đại học PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Phương tiện Thiết bị dụng cụ: tủ sấy, kính hiển vi, lọ thủy tinh, bình tam giác, kim mũi nhọn, lame, lammelle, ống nhỏ giọt, đĩa petri… Vật tư hóa chất: giấy thấm, trứng gà, nước cất, cồn tuyệt đối, xylene, axit acetic, carmine alum lack, glycerin, Baume canada, citrat natri, - oxyquinoline… 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Quy trình - Giâm hành ta (Allium ascalonicum L.) cát ẩm từ – ngày thu rễ vào buổi sáng từ 8h30 đến 10 sáng - Xử lý mẫu trước cố định: + Xử lý với – oxyquinoline: cho 0,58 g – oxyquinoline vào 200 ml nước cất ấm để sẵn tủ hút, cho rễ vừa thu vào dung dịch – oxyquinoline pha nhiệt độ từ 10 – 14oC + Xử lý sốc nhược trương: cho rễ vừa thu vào citrat natri có nồng độ 0,1%; 0,2%; 0,3% - Cố định: cho mẫu vật sau xử lý vào dung dịch Carnoy biến đổi - Nhuộm mẫu: ngâm mẫu vật dung dịch aceto-carmine khoảng 45 phút - Làm mủn mẫu vật: đun mẫu vật chứa dung dịch aceto-carmine từ – phút - Tách lame lammelle: chọn tiêu có mẫu đẹp, đặt băng đá CO2 từ 150 – 180 phút Sau đó, dùng lưỡi lam tách lam khỏi lammelle - Khử nước: chuyển tiêu qua lọ thủy tinh chứa cồn có nồng độ 50, 60, 70, 75, 80, 85, 90, 95, cồn tuyệt đối từ – 17 giây - Làm mẫu: làm mẫu n – butanol xylen - Dán nhãn: dán nhãn lên tiêu ghi rõ tên tiêu bản, ngày, tháng, năm làm tiêu 2.2.2 Khảo sát kiểu nhân - Hình dạng nhiễm sắc thể: nhận diện tiền kỳ trình nguyên phân tiêu cố định (mẫu xử lý với citrat natri) để khảo sát hình dạng nhiễm sắc thể 5 - Kích thước nhiễm sắc thể: Ở tiêu có kỳ đẹp, nhiễm sắc thể nằm mặt phẳng, không chồng chéo lên dùng trắc vi thị kính trắc vi vật kính để đo kích thước nhiễm sắc thể dùng phần mềm photoshop chỉnh sửa ảnh (Trần Tú Ngà, 1982) - Đếm số lượng nhiễm sắc thể: chọn 30 tế bào tiền kỳ kỳ trình nguyên phân tiêu cố định (mẫu xử lý với citrate natri – oxyquinoline), đếm ố lượng nhiễm sắc thể tế bào thống kê xử lý để khảo sát số lượng nhiễm sắc thể tế bào, giả thuyết ban đầu tế bào hành ta (Allium ascalonicum L.) có 2n = 16 nhiễm sắc thể với độ tin cậy 95% - Lập kiểu nhân: dựa kết khảo sát hình dạng, số lượng kích thước để lập kiểu nhân Nguyên tắc lập kiểu nhân theo Levan (1964) sau: + Nhiễm sắc thể dài xếp trước, ngắn xếp sau + Nếu nhiễm sắc thể có kích thước nhiễm sắc thể tâm cân xếp trước, tâm lệch xếp sau + Đánh số phân nhóm xếp nhiễm sắc thể thường trước, nhiễm sắc thể giới tính xếp sau (khơng có kiểu nhân tế bào dinh dưỡng, tế bào soma) Bảng Phân loại nhiễm sắc thể Vị trí tâm động Tỉ lệ cánh (r) Vùng Vùng Vùng gần Vùng gần tận Vùng tận 1,1 – 1,7 1,7 – 3,1 – >7 Phân loại nhiễm sắc thể M: tâm cân m: tâm cân Sm: tâm lệch St: tâm lệch mút T: tâm mút KẾT QUẢ THẢO LUẬN 3.1 Quy trình thực tiêu hiển vi tạm thời cố định 3.1.1 Thời gian thu mẫu Mẫu vật thu thời gian khoảng đến 45 phút 3.1.2 Xử lý mẫu trước cố định - Sốc nhược trương với citrat natri Chúng tiến hành số nghiệm thức kết sau: Bảng Nghiệm thức nồng độ thời gian sốc nhược trương Nồng độ (%) Thời gian (phút) 0,1 30 Kết Đa số nhiễm sắc thể chưa phân tán, tế bào trương lên 0,2 0,3 45 Nhiễm sắc thể phân tán, nằm rời rạc, tế bào trương lên không bị vỡ 60 Nhiễm sắc thể phân tán tốt 30 Nhiễm sắc thể chưa phân tán, tế bào trương lên 45 Nhiễm sắc thể phân tán chưa nhiều 60 Nhiễm sắc thể phân tán chồng lên 30 Nhiễm sắc thể chưa phân tán, nằm chồng lên 45 Nhiễm sắc phân tán chưa nhiều 60 Nhiễm sắc thể phân tán nằm chồng lên - Sốc hành ta (Allium ascalonicum L.) citrat natri 0,1% 45 phút làm tế bào trương lên, nhiễm sắc thể phân tán tế bào quan sát nhiễm sắc thể kép, tâm động, thể kèm đếm số lượng nhiễm sắc thể Những mẫu có nhiễm sắc thể nằm phân tán tế bào xử lý với citrate natri sử dụng để khảo sát hình dạng, số lượng kích thước nhiễm sắc thể 10µm 10µm Chromatid Tâm động Thể kèm Hình Nhiễm sắc thể kép tiền kỳ Hình Nhiễm sắc thể mang thể kèm - Xử lý với - oxyquinoline Mẫu vật xử lý với – oxyquinoline quan sát thể kèm, đếm số lượng nhiễm sắc thể kích thước tăng lên khoảng 1,5 lần Vì xử lý với – oxyquinoline kích thước nhiễm sắc thể thay đổi nên không dùng mẫu xử lý với – oxyquinoline để khảo sát hình dạng kích thước nhiễm sắc thể Thể kèm 10µm Hình Nhiễm sắc thể mang thể kèm 3.1.3 Cố định mẫu vật Chúng chọn Carnoy biến đổi làm dung dịch cố định với tính chất thấm nhanh vào mẫu vật dễ nhuộm sau cố định dung dịch carnoy Những đối tượng khác có thời gian cố định khác Đối với hành ta (Allium ascalonicum L.) chọn thời gian cố định Kết cho thấy dung dịch thời gian cố định thích hợp với hành ta (Allium ascalonicum L.), tiêu quan sát tế bào không bị biến dạng 3.1.4 Nhuộm mẫu vật Khâu quan trọng trình nhuộm phải tạo độ tương phản tế bào chất nhiễm sắc thể Trong số loại phẩm nhuộm carmine loại phẩm nhuộm thường sử dụng để nhuộm nhân tế bào thực vật Trong thí nghiệm nhằm tăng bắt màu phẩm nhuộm, sử dụng acetocarmine 1% kết hợp với sắt (III) clorua (FeCl3) Bảng Nghiệm thức thời gian nhiệt độ nhuộm mẫu (nhiệt độ phòng thí nghiệm) Thời gian (phút) Kết 30 Nhiễm sắc thể tế bào chất bắt màu hồng nhạt 60 Nhiễm sắc thể bắt màu hồng đậm, tế bào chất bắt màu hồng nhạt 90 Nhiễm sắc thể bắt màu hồng đậm 120 Nhiễm sắc thể tế bào chất bắt màu hồng đậm Kết luận: Khi nhuộm mẫu vật với acetocarmine kết hợp với dung dịch sắt (III) clorua (FeCl3) 60 phút, tế bào có độ tương phản cao, nhiễm sắc thể bắt màu hồng đậm, tế bào chất bắt màu hồng nhạt 3.1.5 Thực tiêu hiển vi cố định Trong trình nghiên cứu muốn giữ lại mẫu vật tốt để làm tài liệu dùng cho học tập giảng dạy, tiêu tạm thời phải chuyển thành tiêu cố định Chuyển tiêu tạm thời thành tiêu cố định - Tiêu tạm thời đặt băng đá khô ngăn lạnh tủ lạnh, khoảng 120 – 180 phút, tiêu đóng băng, dùng lưỡi lam gỡ lammelle khỏi lame - Tiến hành khử nước lọ cồn có nồng độ khác từ thấp đến cao Cụ thể sau: Cồn 500 Cồn 600 Cồn 700 15 giây 15 giây 15 giây Cồn 850 Cồn 900 Cồn 950 15 giây 15 giây 10 giây Cồn 750 Cồn 800 15 giây 15 giây Cồn tuyệt đối 10giây Trước tìm nghiệm thức thử nhiều nghiệm thức khác Nếu thời gian khử nước lọ cồn lâu (nhất cồn có nồng độ cao) tế bào bị teo, ngược lại thời gian khử nước không đủ tế bào bị màu sau vài ngày, chí tế bào bị vỡ nước Kết cho thấy: khử nước với nghiệm thức tế bào có độ tương phản cao, quan sát rõ nhiễm sắc thể 3.1.6 Làm mẫu Chúng làm mẫu n – butanol xylen kết tế bào quan sát rõ, độ tương phản cao n – butanol 10 giây xylen giây 3.2 Nhận diện tiền kỳ trình nguyên phân Đặc điểm tế bào tiền kỳ trình nguyên phân: Để tiến hành khảo sát kiểu nhân hành ta Chúng chọn tế bào tiền kỳ kỳ giữa, vào giai đoạn tiền kỳ trình nguyên nhiễm, nhiễm sắc thể xoắn cực đại nằm rải rác chưa tập trung mặt phẳng xích đạo tế bào 10µm Hình Tế bào tiền kỳ 3.3 Khảo sát kiểu nhân 3.3.1 Hình dạng nhiễm sắc thể Nhiễm sắc thể khảo sát tiền kỳ (prometaphase) kỳ (metaphase) trình nguyên phân Lúc này, nhiễm sắc thể có hình dạng đặc trưng lồi 9 Kết nghiên cứu cho thấy tế bào rễ hành (Allium ascalonicum L.) tiền kỳ kỳ có nhiễm sắc thể kép gồm chromatid đính tâm động (Hình 6) Khi xử lý mẫu với citrat natri 0,1%, quan sát thể kèm nhiễm sắc thể thể kèm xuất cặp nhiễm sắc thể có tâm lệch mút (Hình 5) 10µm Hình Nhiễm sắc thể mang thể kèm 10µm Hình Nhiễm sắc thể kép tiền kỳ Theo Rangsiruji et al., (2010), hành ta (Allium ascalonicum L.) lồi có mang thể kèm nhiễm sắc thể kết nghiên cứu quan sát thể kèm hành ta (Allium ascalonicum L.) Allium ascalonicum L Hình Nhiễm sắc thể mang thể kèm (Nguồn: Rangsiruji et al., 2010) 3.3.2 Số lượng nhiễm sắc thể Chọn tế bào tiền kỳ (prometaphase) có nhiễm sắc thể phân tán đếm Đếm số nhiễm sắc thể 30 tế bào, xử lý thống kê tìm giá trị trung bình phương sai kết sau: 10 Bảng Thống kế số lượng nhiễm sắc thể STT Số lượng NST STT Số lượng NST STT Số lượng NST 16 11 15 21 17 16 12 16 22 16 16 13 16 23 16 16 14 13 24 15 16 15 16 25 18 16 16 16 26 16 16 17 15 27 16 16 18 16 28 16 16 19 16 29 16 10 17 20 13 30 16 Số lượng NST trung bình/tế bào X 15,83 Độ lệch chuẩn ∂ 0,95 NST: Nhiễm sắc thể Giả thiết X = 16 với độ tin cậy – α = 95%, ε = 0,34  khoảng ngẫu nhiên (15,83 ± 0,34) t = - 0,98  chấp nhận giả thiết số lượng nhiễm sắc thể tế bào 16 Khi khảo sát tế bào tiền kỳ (prometaphase) xử lý – oxyquinoline hay citrat natri 0,1% đếm số lượng nhiễm sắc thể Ngoài ra, xử lý mẫu với – oxyquinoline quan sát nhiễm sắc thể mang thể kèm (Hình 9) Thể kèm 13 10µm 11 12 15 10 2 16 14 Hình Nhiễm sắc thể xử lý với - oxyquinoline 10µm 14 13 10 15 16 11 12 Hình Nhiễm sắc thể xử lý với citrat natri 0,1% 3.3.3 Kích thước nhiễm sắc thể + Đo mẫu trắc vi thị kính Chọn tế bào tiền kỳ có nhiễm sắc thể nằm rải rác, dùng trắc vi thị kính trắc vị vật kính đo kích thước nhiễm sắc thể, dựa vào kết đo, dùng phần mềm photoshop để tách rời nhiễm sắc thể ra, sau lập kiểu nhân nhiễm sắc đồ hành ta (Allium ascalonicum L.) 11 10µm Hình 10 Nhiễm sắc thể tiền kỳ Bảng Phân loại nhiễm sắc thể hành ta (Allium ascalonicum L.) (Hình 10) Cặp NST Vị trí tâm động L (µm) S (µm) C (µm) SAT (µm) L/S (µm) Tâm cân 7,8 7,5 15,3 1,04 Tâm cân 5,4 13,4 1,48 Tâm lệch 2,8 11,8 Tâm cân 6,8 4,9 11,7 1,39 Tâm lệch 7,8 3,1 10,9 2,52 Tâm cân 5,7 10,7 1,14 Tâm cân 5.7 4,2 9,9 1,36 Tâm cân 4,9 4,7 9,6 1,04 0,5 2,73 L: chiều dài cánh dài; S: chiều dài cánh ngắn; C: Tổng chiều dài NST; SAT: chiều dài thể kèm; L/S: tỉ lệ cánh Hình 11 Kiểu nhân hành ta (Allium ascalonicum L.) + Đo ảnh 10µm Hình 12 Nhiễm sắc thể tiền kỳ Bảng Phân loại nhiễm sắc thể hành ta (Allium ascalonicum L.) (Hình 13) Cặp Vị trí tâm động L (cm) S (cm) C (cm) SAT (cm) L/S 12 NST 1 Tâm lệch 1,3 0,7 1,86 Tâm cân 1,1 0,7 1,8 1,57 Tâm cân 1,2 1,1 2,3 1,09 Tâm cân 1,1 0,9 1,22 Tâm lệch mút 1,4 0,3 1,7 Tâm cân 0,7 1,7 1,43 Tâm cân 0,9 0,9 1,8 1,00 Tâm cân 0,9 0,6 1,5 1,50 0,1 3,5 Hình 13 Kiểu nhân hành ta (Allium ascalonicum L.) Sau tiến hành đo kích thước nhiễm sắc thể số tế bào, nhận thấy: kiểu nhân mẫu khảo sát ln có cặp tâm cân Đo nhiễm sắc thể tế bào ảnh thu kết Rangsiruji et al (2010) công bố Nhưng đo mẫu trắc vi thị kính kết khác cặp nhiễm sắc thể so với Rangsiruji Với trắc vi thị kính tại, ứng với 10 µm, chiều dài trung bình nhiễm sắc thể khoảng µm – µm, khả sai số xảy lớn Sau khảo sát đo số mẫu nhiễm sắc thể, đưa kết luận sau: số lượng nhiễm sắc thể hành ta (Allium ascalonicum L) 2n = 16 Qua trình thực đề tài xác định công thức kiểu nhân hành ta (Allium ascalonicum L.): K (n = 8) = 6m + 1sm + 1st Cặp nhiễm sắc thể 2, 3, 4, 5, 7, tâm cân, cặp nhiễm sắc thể số tâm lệch cặp nhiễm sắc thể số tâm lệch mút có mang thể kèm, trùng với kết cơng bổ Rangsiruji et al (2010) Ngồi ra, dựa vào kiểu nhân để xây dựng nhiễm sắc thể đồ hành ta (Allium ascalonicum L.) 13 10µm Hình 14 Nhiễm sắc thể đồ hành ta (Allium ascalonicum L.) 3.3.3 Những nghiên cứu kiểu nhân hành ta (Allium ascalonicum L.) Kết nghiên cứu hành ta (Allium ascalonicum L.) Seo et al (1975) cơng bố có kết tương tự kết nghiên cứu Rangsiruji (2010) KẾT LUẬN Trên sở kế thừa quy trình chung làm tiêu hiển vi cố định, chúng tơi tìm quy trình thực tiêu hiển vi tạm thời cố định nhiễm sắc thể hành ta (Allium ascalonicum L.) với thuốc nhuộm aceto-carmine phương pháp xử lý sốc nhược trương xử lý với - oxyquinoline Dung dịch nhược trương citrate natri 0,1% sử dụng với thời gian thích hợp 45 phút Acetocarmine sử dụng với vai trò vừa chất cố định vừa dung dịch nhuộm mẫu Với quy trình này, tiêu làm đạt yêu cầu hình thức nội dung Màu sắc tương phản rõ rệt, quan sát tâm động, nhiễm sắc thể kép, eo thắt thức thể kèm Ngồi ra, chúng tơi khảo sát kiểu nhân hành ta (Allium ascalonicum L.) K (n=8) = 6m + 1sm + 1st Ứng dụng kết kết nghiên cứu đề tài trên, thực hành 20 Sinh học 10 với hình ảnh nhiễm sắc thể rõ hơn, đặc biệt sử dụng hình ảnh kết nghiên cứu dạy kiến thức nhiễm sắc thể Ứng dụng phương pháp thực hành đề tài giúp học sinh hiểu rõ thêm kiến thức nguyên phân, phát triển tư khoa học đặc biệt nâng cao khả tự học học sinh 14 TÀI LIỆU THAM KHẢO Hoàng Thị Sản 2003 Phân loại thực vật Nhà xuất Giáo dục Hà Nội Nguyễn Bá 2006 Hình thái học thực vật Nhà xuất Giáo dục Hà Nội Nguyễn Như Hiền 2002 Di truyền công nghệ tế bào soma Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Hà Nội Phan Cự Nhân 2003 Di truyền học Nhà xuất Giáo dục Hà Nội Phạm Thành Hổ 2007 Nguồn gốc loài người Nhà xuất Giáo dục Trần Tú Ngà 1892 Giáo trình thực tập di truyền trồng Nhà xuất nông nghiệp Hà Nội Trần Công Khánh 1980 Kỹ thuật dùng nghiên cứu thực vật dược liệu Nhà xuất y học Hà Nội Neil A Campbell 2004 Biology The Benjamin/ Cummings Publishing Company, Inc Jaroslav Jurcak 1999 A modification to the acetocarmine method of chromosome colouring in the school practice, biologica, 37, 7-14 Albert Levan Cytological studies in Allium, VI the chromosome morphology of some diploid species of Allium 19-329 Ghulam Murtaza 2005 Karyotype of Pisum sativum L International journal of Agriculture & Biology 1560-8530/2005/07-1-118-120 Deniz yuzbasioglu and fatma nual 2004 Karyotyping, c-and nor banding of Allium sativum L cultivated in turkey Bot, 36 (2), 343-349 Joe Hin Tjio and Albert Levan The use of oxyquinoline in chromosome analysis 21-63 http://docs.google.com/viewer?a=v&q=cache http://www.thinkpdf.com/0b/0ba5c3fcac65308e-download.pdf http://kentsimmons.uwinnipeg.ca/cm1504/lifecyclecells.html ... ii) Thực 30 tiêu hiển vi cố định rễ hành ta (Allium ascalonicum L.), iii) Khảo sát kiểu nhân hành ta (Allium ascalonicum L.) Rễ hành ta (Allium ascalonicum L.) xử lý sốc nhược trương với citrat... vào kiểu nhân để xây dựng nhiễm sắc thể đồ hành ta (Allium ascalonicum L.) 13 10µm Hình 14 Nhiễm sắc thể đồ hành ta (Allium ascalonicum L.) 3.3.3 Những nghiên cứu kiểu nhân hành ta (Allium ascalonicum. .. tiễn trên, tiến hành nghiên cứu đề tài: Khảo sát kiểu nhân hành ta (Allium ascalonicum L.) nhằm đưa kết luận ban đầu kiểu nhân hành ta, làm tài liệu tham khảo cho nghiên cứu kiểu nhân loài thuộc