111 1aa1779c9a08bd441a1cd19a011454b0

111 1aa1779c9a08bd441a1cd19a011454b0 tài liệu, giáo án, bài giảng , luận văn, luận án, đồ án, bài tập lớn về tất cả các...

signed by CÔNG TY C Digitally CÔNG TY C PHN PHN C IN C IN UÔNG BÍ UÔNG BÍ - VINACOMIN 2016.12.14 VINACOMIN Date: 10:57:38 +07:00 Amino Acid Analysis of Mucins 113113From: Methods in Molecular Biology, Vol. 125: Glycoprotein Methods and Protocols: The MucinsEdited by: A. Corfield © Humana Press Inc., Totowa, NJ10Amino Acid Analysis of MucinsJun X. Yan and Nicolle H. Packer1. IntroductionAmino acid analysis is a commonly used technique that provides quantitative esti-mation of the amounts of proteins/amino acids present in a sample and/or qualitativeinformation on the amino acid composition of a protein. For protein analysis, the tech-nique essentially involves acid hydrolysis of amino acid peptide bonds within the pro-tein; chemical derivatization of hydrolysate (amino acids) of the protein; and high-performance liquid chromatography (HPLC) separation, detection, and analysis ofthose derivatized amino acids.The commercially available amino acid analyzers (e.g., Waters Pico-Tag system[Waters Corp., Milford, MA]; GBC AminoMate system [GBC Scientific, Dandenong,Victoria, Australia]) have made amino acid analysis more practical and feasible inroutine protein analysis laboratories. The sensitivity of the analysis has been dramati-cally increased to low picomole levels of proteins, including those low molecularweight (10–20 kDa) ones (low amount of total amino acids analyzed) (1).In this chapter, we describe a 9-fluorenylmethyl oxycarbonyl chloride (FMOC)-based precolumn derivatization amino acid analysis that has been extensively vali-dated (1,2). Although the detailed protocols on the use of the automated GBCAminoMate (GBC Scientific) amino acid analyzer have been described elsewhere (3),here, we emphasize the procedures that are used in a manual operation. Thus, thistechnique can be easily adapted in any laboratory where an HPLC system with a fluo-rescent detector and gradient controller is available.Acid hydrolysis is the first and most important step to release the amino acids fromthe proteins, and it must be carefully controlled in the analysis of mucins. The acidhydrolysis described here recovers 16 amino acids (asparagine and glutamine aredeamidated to their corresponding acids, whereas tryptophan and cysteine are destroyed).During the acid hydrolysis, the carbohydrate side chains on the mucins are degraded.Because of the high carbohydrate content of mucins (up to 90% of the dry weight), thesugars can be caramelized and further charcoaled, and the acid hydrolysis results in ablack residue. This residue appears to precipitate protein/amino acids, interferes with 114 Yan and Packerchromatography, and leads to a significantly lower recovery of all the amino acids,especially serine and threonine. Strong acid, high temperature, and short time acidhydrolysis (12 N HCl at 155°C for 1 h) is generally used in our laboratory for lessglycosylated proteins (1). We have found that weaker acid, lower temperature, andlonger time (ensuring the completion of the hydrolysis) acid hydrolysis (6 N HCl at105°C for 24 h) is a must to obtain reproducible quantitative analysis of mucin gly-coproteins. The hydrolysate of mucin is then derivatized with Fmoc on the α-aminogroups under alkaline conditions. The derivatized amino acids are separated by a C18reversed-phase column and detected by fluorescence. Our routine analyses have shownthat the method described here is reliable and useful for both quantitative andqualitative mucin glycoprotein amino acid analysis.2. Materials2.1. Apparatus2.1.1. Hydrolysis Equipment1. Hydrolysis vessel: the design can be viewed on the World Wide Web at http://www.bio.mq.edu.au/APAF (see Note 1).2. Vacuum pump: Savant Speedvac (Savant Industries, Farmingdale, NY) (or equivalent)with a vacuum gauge.3. Two-way line connection to an argon line and a vacuum pump.4. Autosampler glass Lo i Tài kho n 1 - Tài s n ng n h n có 24 tài kho n, chia thành 6 nhóm:ạ ả ả ắ ạ ảNhóm Tài kho n 11ả - V n b ng ti n, có 3 tài kho n:ố ằ ề ảTÀI KHO N 111ẢTI N M TỀ Ặ M t s ngun t c h ch tốn ộ ố ắ ạK t c u và n i dung ph n nh ế ấ ộ ả ảPh ng pháp h ch tốn k tốn ươ ạ ếTài kho n này dùng đ ph n ánh tình hình thu, chi, t n qu t i qu c a doanhả ể ả ồ ỹ ạ ỹ ủ nghi p bao g m: Ti n Vi t Nam, ngo i t , vàng, b c, kim khí q, đá q.ệ ồ ề ệ ạ ệ ạH CH TỐN TÀI KHO N NÀY C N TƠN TR NGẠ Ả Ầ ỌM T S QUY Đ NH SAUỘ Ố Ị1. Ch ph n ánh vào TK 111 “Ti n m t” s ti n m t, ngo i t th c t nh p,ỉ ả ề ặ ố ề ặ ạ ệ ự ế ậ xu t qu ti n m t. Đ i v i kho n ti n thu đ c (chuy n n p ngay vào Ngân hàngấ ỹ ề ặ ố ớ ả ề ượ ể ộ (khơng qua qu ti n m t c a đ n v ) thì khơng ghi vào bên N Tài kho n 111 “Ti nỹ ề ặ ủ ơ ị ợ ả ề m t” mà ghi vào bên N Tài kho n 113 “Ti n đang chuy n”.ặ ợ ả ề ể2. Các kho n ti n m t do doanh nghi p khác và cá nhân ký c c, ký qu t iả ề ặ ệ ượ ỹ ạ doanh nghi p đ c qu n lý và h ch tốn nh các lo i tài s n b ng ti n c a đ n v .ệ ượ ả ạ ư ạ ả ằ ề ủ ơ ị3. Khi ti n hành nh p, xu t qu ti n m t ph i có phi u thu, phi u chi và có đế ậ ấ ỹ ề ặ ả ế ế ủ ch ký c a ng i nh n, ng i giao, ng i cho phép nh p, xu t qu theo qui đ nh c aữ ủ ườ ậ ườ ườ ậ ấ ỹ ị ủ ch đ ch ng t k tốn. M t s tr ng h p đ c bi t ph i có l nh nh p qu , xu tế ộ ứ ừ ế ộ ố ườ ợ ặ ệ ả ệ ậ ỹ ấ qu đính kèm.ỹ4. K tốn qu ti n m t ph i có trách nhi m m s k tốn qu ti n m t, ghiế ỹ ề ặ ả ệ ở ổ ế ỹ ề ặ chép hàng ngày liên t c theo trình t phát sinh các kho n thu, chi, xu t, nh p qu ti nụ ự ả ấ ậ ỹ ề m t, ngo i t và tính ra s t n qu t i m i th i đi m.ặ ạ ệ ố ồ ỹ ạ ọ ờ ể5. Th qu ch u trách nhi m qu n lý và nh p, xu t qu ti n m t. Hàng ngàyủ ỹ ị ệ ả ậ ấ ỹ ề ặ th qu ph i ki m kê s t n qu ti n m t th c t , đ i chi u v i s li u s qu ti nủ ỹ ả ể ố ồ ỹ ề ặ ự ế ố ế ớ ố ệ ổ ỹ ề m t và s k tốn ti n m t. N u có chênh l ch, k tốn và th qu ph i ki m tra l iặ ổ ế ề ặ ế ệ ế ủ ỹ ả ể ạ đ xác đ nh ngun nhân và ki n ngh bi n pháp x lý chênh l ch.ể ị ế ị ệ ử ệ6. nh ng doanh nghi p có ngo i t nh p qu ti n m t ph i quy đ i ngo i tỞ ữ ệ ạ ệ ậ ỹ ề ặ ả ổ ạ ệ ra Đ ng Vi t Nam theo t giá giao d ch th c t c a nghi p v kinh t phát sinh, ho cồ ệ ỷ ị ự ế ủ ệ ụ ế ặ t giá giao d ch bình qn trên th tr ng ngo i t liên ngân hàng do Ngân hàng Nhàỷ ị ị ườ ạ ệ n c Vi t Nam cơng b t i th i đi m phát sinh nghi p v kinh t đ ghi s k tốn.ướ ệ ố ạ ờ ể ệ ụ ế ể ổ ếTr ng h p mua ngo i t v nh p qu ti n m t ngo i t b ng Đ ng Vi tườ ợ ạ ệ ề ậ ỹ ề ặ ạ ệ ằ ồ ệ Nam thì đ c quy đ i ngo i t ra Đ ng Vi t Nam theo t giá mua ho c t giá thanhượ ổ ạ ệ ồ ệ ỷ ặ ỷ tốn. Bên Có TK 1112 đ c quy đ i ngo i t ra Đ ng Vi t Nam theo t giá trên s kượ ổ ạ ệ ồ ệ ỷ ổ ế tốn TK 1112 theo m t trong các ph ng pháp: Bình qn gia quy n; Nh p tr c, xu tộ ươ ề ậ ướ ấ tr c; Nh p sau, xu t tr c; Giá th c t đích danh (nh m t lo i hàng hố đ c bi t).ướ ậ ấ ướ ự ế ư ộ ạ ặ ệTi n m t b ng ngo i t đ c h ch tốn chi ti t theo t ng lo i ngun t trênề ặ ằ ạ ệ ượ ạ ế ừ ạ ệ Tài kho n 007 “Ngo i t các lo i” (TK ngồi B ng Cân đ i k tốn).ả ạ ệ ạ ả ố ế7. Đ i v i vàng, b c, kim khí q, đá Trường tiểu học Vónh TrungGV:Phùng Thò TiếtTHIẾT KẾ BÀI DẠYMôn : ToánBài : CÁC SỐ TRÒN CHỤC TỪ 111 ĐẾN 200.Tuần : 29Ngày dạy :I./ MỤC TIÊU: Giúp HS.- Biết các số từ 111 đến 200 gồm các trăm, các chục, các đơn vò.- Đọc và viết thành thạo các số từ 111 đến 200.- So sánh được các số từ 111 đến 200. Nắm được thứ tự các số từ 111 đến 200.II./ ĐỒ DÙNG DẠY HỌC :- Các hình vuông to, các hình vuông nhỏ, các hình chữ nhật như ở bài học.III./ CÁC HOẠT ĐỘNG DẠY HỌC :1. Khởi động : 1’2. Bài cũ : 3. Bài mới :Hoạt động của thầy Hoạt động của trò10’ 1. Hoạt động 1: Đọc và viết các số từ 111 đến 200. Mục tiêu: Giúp HS đọc thành thạo các số này. Cách tiến hành : a. Làm việc chung cả lớp:- GV nêu vấn đề học tiếp các số và viết lên bảng như phần bài học như sách giáo khoa.- Viết và đọc số 111.Hướng dẫn HS cách đọc số 111.- Viết và đọc số 112.Tương tự như trên.b. Làm việc cá nhân:GV nêu tên số – Yêu cầu HS lấy các hình vuông phù hợp.20’ 2. Hoạt động 2: Thực hành. - HS xác đònh số trăm số chục và số đơn vò.- Một trăm mười một.- HS lấy các hình vuông. Trường tiểu học Vónh TrungGV:Phùng Thò TiếtMục tiêu: Củng cố cách đọc viết số. Cách tiến hành : + Bài 1: GV treo bảng phụ hướng dẫn HS làm việc.+ Bài 2: GV yêu cầu HS vẽ tia số vào vở rồi làm bài.+ Bài 3: Điền dấu vào chỗ chấm.4’ 3. Hoạt động 3: Củng cố – Dặn dò.- Nhận xét tiết học.- HS làm bài.- HS tự làm bài.- HS làm bài vào vở – Nêu cách so sánh.IV./ RÚT KINH NGHIỆM TIẾT DẠY:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . [...]... nucleotit C Đảo vị trí căp nucleotit D Mất ba căp nucleotit thuộc một bộ ba 21 Đột biến giao tử là: A đột biến phát sinh trong nguyên phân, ở một tế bào sinh dưỡng B đột biến phát sinh trong giảm phân, ở một tế bào sinh dục nào đó C đột biến phát sinh trong giảm phân, ở một tế bào xôma D đột biến phát sinh trong lần nguyên phân dầu của hơp tử 22 Đột biến mất một cặp nuclêôtit thứ 5 là A-T ở gen cấu trúc dẫn... biến gen phát sinh trong nguyên phân? A Chỉ được truyền lại cho thế hệ sau bằng sinh sản hữu tính B.Được nhân lên thông qua quá trình tự nhân đôi của ADN C Chỉ được truyền lại cho thế hệ sau bằng sinh sản sinh dưỡng D Sẽ phát triển thành thể khảm 51 Những đặc điểm nào sau đây là đúng khi nói về đột biến gen trội phát sinh trong giảm phân? a/ Có khả năng truyền lại được cho thế hệ sau bằng sinh sản hữu... Loại biến dị nào dưới đây được di truyền qua sinh sản hữu tính? A Đột biến xôma B Thường biến C Đột biến xảy ra ở tế bào sinh dưỡng D Thể đa bội chẵn ở thực vật 60 Đột biến phát sinh trong giảm phân của tế bào sinh dục chín được gọi là: A đột biến giao tử B đột biến xôma C đột biến tiền phôi D giao tử đột biến 61 Đột biến phát sinh trong giảm phân của tế bào sinh dục chín sẽ tạo ra: A đột biến giao tử... bội thể? D Đột biến gen? 47 Các cơ thể thực vật đa bội lẻ không sinh sản hữu tính được là do A thường không có hoặc hạt rất bé B không có cơ quan sinh sản C rối loạn quá trình hình thành giao tử D có thể sinh sản sinh dưỡng bằng hình thức giâm, chiết, ghép cành 48 Sự tổ hợp của 2 giao tử đột biến (n –1 –1) và (n – 1) trong thụ tinh sẽ sinh ra hợp tử có bộ NST là: A (2n - 3) hoặc (2n- 1- 1- 1) B (2n-... (2n- 1- 1- 1) 49 Những đặc điểm nào sau đây là đúng khi nói về đột biến gen lặn phát sinh trong giảm phân của cơ thể thực vật? a/ Có khả năng truyền lại được cho thế hệ sau bằng sinh sản hữu tính 31 b/ Được nhân lên thông qua quá trình tự nhân đôi của ADN c/ Có khả năng truyền lại được cho thế hệ sau bằng sinh sản sinh dưỡng d/ Được gọi là đột biến giao tử Tổ hợp trả lời đúng là: A a, b, c, d B a,... đã nhân đôi nhưng thoi vô sắc không được hình thành làm cho NST không phân li sẽ tạo ra A thể dị bội B thể tứ bội C thể tam bội D thể đa nhiễm 37 Cơ thể đa bội có tế bào to cơ quan sinh dưỡng lớn phát triển khoẻ, chống chịu tốt là do: A số NST trong tế bào của cơ thể tăng gấp 3 lần dẫn đến số gen tăng gấp ba lần B tế bào của thể đa bội có hàm lượng ADN tăng gấp bội nên quá trình sinh tổng hợp các chất... gen tăng gấp ba lần B tế bào của thể đa bội có hàm lượng ADN tăng gấp bội nên quá trình sinh tổng hợp các chất hữu cơ diễn ra mạnh C các thể đa bội không có khả năng sinh giao tử bình thường D thể đa bội chỉ được nhân lên nhờ sinh sản sinh dưỡng 38 Trong mối quan hệ giữa giống- kỹ thuật canh tác- năng suất cây trồng: A năng suất phụ thuộc nhiều vào chất lượng giống, ít phụ thuộc vào kỹ thuật canh tác... nuclêôtit của gen thì số liên kết hiđrô của gen đột biến ít hơn số liên kết hiđrô của gen bình thường là: A 4 hặc 5 B 4 hoặc 6 C 5 hoặc 6 D 4 hoặc 5 hoặc 6 70 Nguyên nhân phát sinh thường biến là A do rối loạn các phản ứng sinh lý, sinh hoá nội bào B do tác động của các tác nhân lý hoá trong ngoại cảnh C do tác động trực tiếp của điều liện sống D Tất cả các nguyên nhân trên đều đúng 71.Tính chất biểu hiện... được và có lợi cho sinh vật 8 Tính trạng nào sau đây ở gà có mức phản ứng hẹp nhất? A Sản lượng trứng B Trọng lượng trứng C Sản lượng thịt D Hàm lượng prôtêin trong thịt 9 Tần số đột biến là: A tần số xuất hiện các cá thể bị đột biến trong quần thể giao phối 26 B tỷ lệ giữa các cá thể mang đột biến gen so với số cá thể mang biến dị C tỷ lệ giao tử mang đột biến trên tổng số giao tử