Xác định nitrit bằng pp UV VIS

I QUY TRÌNH VÀ KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM Bước đầu pha chế dung dịch chuẩn NO2- 5ppm từ dung dịch chuẩn gốc 100 ppm nước cất lần , theo số liệu tính toán từ công thức sau: NV1=NV2 => 25.5=100.V2 => V2= 1,25 (ml) Sau hút 1,25ml dung dịch NO2- 100ppm sử dụng nước cất lần để định mức lên đến 25ml Hút dung dịch chuẩn theo thể tích yêu cầu Tiến hành bước theo thí nghiệm Thêm chất vào bình Thao tác lắc binh sau lần thêm hóa chất Sau thao tác xong bước để yên bình 15 phút màu sắc bình ổn định sau tiến hành đo mật độ quang Hình Các bình mẫu chuẩn bị đem đo mật độ quang Đem bình mẫu đo mật độ quang Thực quét sóng bình mẫu để xác đinh bước sóng phù hợp việc đo mật độ quang Vì ta sử dụng bình chưa thêm chất chuẩn để quét sóng nên bước sóng theo hình ta thấy ƛmax=525 nm theo yêu câu dùng binh dãy để quét phổ sóng chọn bình có pha chuẩn làm mẫu nên mà quét sóng kết quét sóng không xác Công thức tính nồng độ ppm : NV1=NV2 Công thức tính số μɡ NO2- chuẩn dãy: m=Nc/Vc Bảng xử lí số liệu Bình Vchuẩn ppm (ml) 0.0 0.0 0.5 1.0 2.0 Vmẫu (ml) 0.0 5.0 5.0 5.0 5.0 Nồng độ (ppm) chuẩn dãy chuẩn 0.0 0.0 0.1 0.2 0.4 Số μɡ chuẩn dãy chuẩn 0.0 0.0 2.5 10 Độ hấp thu A 0.0 0.094 0.172 0.273 0.418 Tính toán kết : a.Thiết lập phương trình hồi qui có dạng: Y = A + B.X theo nồng độ (ppm) hàm lượng (μg) nitrit có bình đo A Đồ Thị tuyến tính A theo nồng độ (ppm) 0,45 0,4 y = 0,8174x + 0,0962 R² = 0,9958 0,35 0,3 0,25 0,2 0,15 0,1 0,05 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 ppm Phương trình hồi qui có dạng: Y = A + B.X theo nồng độ (ppm): y = 0,8174x + 0,0962 Phương trình hồi qui có dạng: Y = A + B.X theo hàm lượng (μg) nitrit có bình đo A Đồ Thị tuyến tính A theo hàm lượng Nitrit (μg) 0,45 0,4 y = 0,0327x + 0,0962 R² = 0,9958 0,35 0,3 0,25 0,2 0,15 0,1 0,05 0 10 12 μg Phương trình theo hàm lượng (μg) y = 0,0327x + 0,0962 b Tính nồng độ (ppm) hàm lượng nitrite (μg) mẫu có bình đo + Tính nồng độ (ppm) mẫu có bình đo Từ phương trình hồi quy A= 0,8174x + 0,096 Ta có: Cđo = a/b = 0,0962 / 0,8174= 0,117(ppm) Tính hàm lượng nitrite (μg) mẫu có bình đo Hàm lượng nitrite mẫu = Cđo Vđo= 0,117 25= 2,94 (μg) c Căn vào thể tích mẫu lấy đem đo Cđo, tính hàm lượng dung dịch mẫu ban đầu qui ppm Giả định trình xử lý mẫu sau: Cân 0.1243 g mẫu rắn, xử lý mẫu định mức thành 100 mL dung dịch mẫu xác định Lấy mL dung dịch mẫu cho vào bình định mức lên màu thí nghiệm Số (μg) có 25 mL: m = C.V = 0,117 25 = 2,94 (μg) Số (μg) có 100 mL: mhh = 2,94 (100/5) = 58,8 (μg) Hàm lượng dung dịch mẫu ban đầu: C = 58,8/0,1243 = 473,41(ppm) -Nhận xét Thí nghiệm Ta thấy đường tuyến tính A theo ppm hay theo (μg) có điểm bình bị sai lệch trình hút hóa chất có xảy sai sót , hút không đung vạch pipet bầu, hay giai đoạn định mức Các số liệu chưa chuẩn xác trình thí nghiệm nhận thấy Dung dịch thuốc thử Griess B có cặn màu đen nhỏ Có thể chất thuốc thử bị hư ảnh hưởng môi trường dẫn đến sai số lúc đo Và yêu cầu thí nghiệm tiến hành đo mẫu tiến hành quét phổ cho kỷ thuật đường chuẩn thêm chuẩn cho kết không xác Vì lúc mẫu thêm chất chuẩn Ứng dụng thí nghiệm tiến hành để định lượng nitrit số thực phẩm Thông qua trình sử lý mẫu , từ tiến hành kỷ thuật ta đo hàm lượng nitrit II TRẢ LỜI CÂU HỎI Câu Trình vai trò hóa chất sử dụng qui trình xác định?  NO2¯ chất chuẩn  Acid acetic tạo môi trường acid mạnh  Griess A, B làm thuốc thử tạo phức  Nước cất để định mức tráng rửa dụng cụ Câu Vì cần phải có bình số để làm dung dịch so sánh? Kỹ thuật sử dụng áp dụng nào? Ưu điểm so với kỹ thuật thêm chuẩn so sánh?  Cần phải có bình bình mẫu trắng nhằm để hiệu chỉnh máy trình quét phổ đo quang Để hạn chế ảnh hưởng mẫu  Kỹ thuật đường chuẩn thêm chuẩn ( thêm chuẩn vào mẫu ) áp dụng nồng độ chất phân tích nhỏ (vi lượng)  Ưu điểm phương pháp thêm chuẩn loại ảnh hưởng mẫu Tuy nhiên, phương pháp áp dụng dung dịch tuân theo định luật Lambert-Beer Câu Giả sử nồng độ NO2 - 1ppm không nghiệm định luật lambert Beer Với liệu thí nghiệm, tính lượng cân mẫu hay thể tích mẫu đảm bảo định luật Lambert Beer nghiệm cho trường hợp sau: a Ta có công thức xác định hàm lượng nitrit mẫu thử ; biểu thị miligram ion nitrit kilogam tính theo công thức: 20000 Ct m.V Ct: Nông độ ion nitrit thu từ đường chuẩn , tương ứng độ hấp thụ đo (µg/l) m: khối lượng phần mẫu thử tính (g) V : thể tích lấy từ dịch lọc (ml) Để thỏa định luật Lambert beer , ta chọn liệu thí nghiệm để nằm đường chuẩn dựng Vì ta chon nông độ ppm la 0,4 Từ vào công thức : 20000.0,4 = => m =0,064 (g) m.25 b Hàm lượng NaNO2 nước thải theo số liệu quan trắc môi trường dao động 5-7ppm Thực kỹ thuật đường chuẩn them chuẩn số ml mẫu cần lấy bao nhiêu? Câu 4: Nếu yêu cầu định lượng nitrit mẫu giống Có thiết phải thực hai đường chuẩn thêm chuẩn không?  Không thiết phải thực hai đường chuẩn thêm chuẩn phương pháp loại trừ khác biệt thành phần mẫu dung dịch mẫu dung dịch chuẩn Câu 5: Định lượng nitrit mẫu có mẫu giống Thực sau: Hãy tính lượng nitrit mẫu Đối với mẫu mẫu tính kết không? Mẫu 1: Ta có ΔC2 = ΔC3=0,5 ΔC4= ΔC5=2 Suy A= 0,068ΔC+ 0,089 Nên Cx = 0,089 : 0,068 = 1,31ppm Vậy m= 1,31 x 5= 6,55 (µg) Đối với mẫu 2, mẫu tính thực sai phương pháp III TÌM HIỂU THÊM VỀ CHỈ SỐ NITRIT CÓ TRONG THỰC PHẢM & NƯỚC Ni tơ (N) dạng Nitrat hóa chất vô cần thiết cho sinh trưởng phát triển trồng Hợp chất ni tơ có sẵn đất, thể động thực vật nên tất nhiên có có rau Vấn đề chúng hàm lượng trình canh tác người ta bổ sung chất cho dạng hợp chất vô hay hữu Khi thiếu nitrat sinh trưởng phát triển kém, chuyển màu vàng, đẻ nhánh phân cành Nhưng thừa Nitrat làm sinh trưởng mạnh nên yếu, dễ lốp đổ, dễ bị sâu bệnh công Ngoài dư thừa N sản phẩm trồng (đặc biệt rau xanh) gây tác hại lớn tới sức khỏe người -Vai trò nitrit: nông nghiệp làm phân đạm bón cho giúp phát triển tốt, thực phẩm làm chất bảo quản chế biên thịt a) nguồn nitrat, nitrit thực phẩm -Trong rau củ Trong qúa trình trồng rau người trồng sử dụng phân đạm bón cho nhằm much đích kích thích phát triển cây.Dạng phân sử dụng thường dạng nitrat Tuy nhiên sử dụng rau củ phần phân đạm chưa sử dụng ăn rau củ đă gián tiếp đưa lượng nitrat vào cỏ thể Khi bón phân cho cây, loại phân đạm sử dụng bị vi khuẩn đất chuyển hoá thành NH4+ NO3- hấp thụ Nitrat amoni phần chủ yếu hấp thụ, phần giải phóng khí dạng N2, NH3 phần lại tích tụ đất tan nước ngầm - Trong nước Nitơ có nước thải hình thức khác nhau: • Nitơ hữu (amino acids, proteins, purines, pyrimidines, and nucleic acids); • Nitơ amôniắc (NH3-N);Nitrít (NO2-N); Nitrát (NO3-N) Trong mẫu nước thải chưa xử lý, phần lớn thường amôniắc nitơ hữu chất bị ôxy hoá thành nitrít sau nitrát môi trường Khi bón phân đạm cho phần tích tụ vào đất phần lại thấm vào mạch nước ngầm Vì nước thải có hàm lượng nitrit mà nước ngầm có nitrit -Trong thịt cá Người ta tẩm nitrit vào thịt làm chậm trình phát triển Botulinal toxin độc tố làm hư thịt, tăng màu sắc làm chậm trình ôi thiêu b) Tác Hại NiTrit, NiTrat (độc tính) Các muối nitrat có độc tính không cao độc tính tăng lên chuyển nitrit nhờ hệ vi khuẩn có miệng -Tính độc trực tiếp : Muối nitrit có khả oxy hóa hemoglobin máu thành methemoglobin Do cản trở trình vận chuyển oxy hemoglobin nuôi thể , làm cho thể thiếu oxy Người bị thiếu oxy nặng dẫn đến hôn mê sâu tử vong điều dễ xảy trẻ em -Tính độc gián tiếp Nitrite tác động với axit amin( có từ việc thoái hóa protein) tạo thành nitrosamine hợp chất có khả gây đột biến sinh ung thư c) Các số cho phep Nitrit có thực phẩm Hàm lượng nitrit cho phép rau củ STT Tên mẫu mgNO3/ kg STT Tên mẫu mgNO3/ kg Giá đổ 580 Cải cúc 1100 Củ Cải 300 Rau muống 950 Xu Hào 430 Rau cải xanh 890 Cải 900 … Hàm lượng nitrit cho phép sản phẩm chế biến từ thịt: Quy định hàm lượng nitrit có nước uông số quốc gia tổ chức: Một số phương pháp xác đinh hàm lượng nitrit  Phương pháp lên màu axit sunfanilic α Naphtylamin  Phương pháp xác đinh hàm lượng nitrit nitrat băng cách khử cadimi đo quang phổ  Phương pháp lên màu mẫu axit sunfanilic phenol ... độ (ppm) hàm lượng nitrite (μg) mẫu có bình đo + Tính nồng độ (ppm) mẫu có bình đo Từ phương trình hồi quy A= 0,8174x + 0,096 Ta có: Cđo = a/b = 0,0962 / 0,8174= 0,117(ppm) Tính hàm lượng nitrite... trường hợp sau: a Ta có công thức xác định hàm lượng nitrit mẫu thử ; biểu thị miligram ion nitrit kilogam tính theo công thức: 20000 Ct m.V Ct: Nông độ ion nitrit thu từ đường chuẩn , tương... xanh 890 Cải 900 … Hàm lượng nitrit cho phép sản phẩm chế biến từ thịt: Quy định hàm lượng nitrit có nước uông số quốc gia tổ chức: Một số phương pháp xác đinh hàm lượng nitrit  Phương pháp lên