NGHIÊN cứu CÔNG NGHỆ xử lý nước THẢI dệt NHUỘM BẰNG ENZYME LACCASE

TRƢỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC - CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM * Formatted: Indent: First line: 0", Right: 0.03" LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Đề tài: NGHIÊN CỨU CÔNG NGHỆ XỬ LÝ NƢỚC THẢI DỆT NHUỘM BẰNG ENZYME LACCASE Hƣớng dẫn khoa học: PGS TS Tô Kim Anh Học viên thực hiện: Lớp: KIỀU TRUNG ĐÔNG 11BCNSH Comment [C1]: Xem lại ngày Formatted: Not Highlight Formatted: Not Highlight Formatted: Not Highlight Formatted: Not Highlight Hà Nội ngày 30 25 tháng năm 20122013 Formatted: Not Highlight Formatted: Not Highlight Formatted: English (U.S.) i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng Những số liệu kết nghiên cứu luận án trung thực chƣa đƣợc tác giả khác công bố Hà Nội, ngày 25 tháng năm 2013 Kiều Trung Đông ii LỜI CẢM ƠN Trƣớc hết, xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc tới PGS.TS Tô Kim Anh – Viện Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm – Trƣờng Đại học Bách Khoa Hà Nội tận tình hƣớng dẫn dìu dắt cho suốt trình nghiên cứu Bên cạnh đó, xin chân thành cảm ơn PGS.TS Hoàng Thị Lĩnh – Bộ môn Vật liệu Công nghệ hóa Dệt tận tình hƣớng dẫn giúp đỡ suốt trình học tập nghiên cứu môn Tôi xin chân thành cảm ơn TS Phạm Tuấn Anh – giảng viên môn Hóa sinh-Vi sinh Sinh học phân tử, Th.s Lê Tuân, Th.s Phạm Hoàng Nam – cán nghiên cứu môn Hóa sinh-Vi sinh Sinh học phân tử, học viên hƣớng dẫn tận tình giúp đỡ suốt trình học tập nghiên cứu môn Tôi xin đƣợc cảm ơn tất cán học viên Trung tâm nghiên cứu phát triển công nghệ sinh học - Viện Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm – Trƣờng Đại học Bách Khoa Hà Nội động viên, hƣớng dẫn tận tình tạo điều kiện thuận lợi cho trình thực nghiên cứu Cuối cùng, xin cảm ơn gia đình bạn bè động viên, khích lệ tạo điều kiện tốt cho học tập nghiên cứu Xin chân thành cảm ơn! iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN iii MỤC LỤC Error! Bookmark not defined DANH MỤC CÁC TỪ NGỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC BẢNG viii DANH MỤC HÌNH ẢNH viii MỞ ĐẦU PHẦN I TỔNG QUAN T I LIỆU 1.1 SỰ Ô NHIỄM BỞI CÁC THUỐC NHUỘM 1.1.1 Các loại thuốc nhuộm thƣờng dùng ngành dệt nhuộm 1.1.2 Cấu tạo chung tạo nên màu sắc thuốc nhuộm 1.2 HIỆN TR NG V Đ C T NH CỦA NƢỚC THẢI DỆT NHUỘM 1.2.1 Hiện trạng ô nhiễm nƣớc thải dệt nhuộm Việt Nam 1.2.2 Đ c tính nƣớc thải dệt nhuộm 10 1.3 MỘT SỐ PHƢƠNG PHÁP XỬ L NƢỚC THẢI DỆT NHUỘM HIỆN NA 13 1.3.1 Một số phƣơng pháp xử lý 13 1.3.1.1 Phƣơng pháp hóa lý 13 1.3.1.2 Phƣơng pháp hóa học 14 1.3.1.3 Xử lý nƣớc thải phƣơng pháp sinh học 15 1.3.2 Ƣu nhƣợc điểm phƣơng pháp sử dụng 17 1.4 LACCASE 18 1.4.1 Cấu trúc phân tử laccase 18 1.4.2 Cơ chế xúc tác enzyme laccase 19 1.4.2.1 Xúc tác chuyển hóa hợp chất phenol 19 1.4.2.2 Xúc tác chuyển hóa hợp chất khác 20 1.4.2.3 Xúc tác khử màu thuốc nhuộm 21 1.4.3 Tính chất laccase 26 iv 1.4.4 Nguồn thu laccase 26 1.4.5 Khả khử màu thuốc nhuộm laccase 27 1.4.6 Khả khử màu thuốc nhuộm laccase từ Pleurotus florida 29 PHẦN II VẬT LIỆU V PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 31 2.1 VẬT LIỆU, HÓA CHẤT, THUỐC NHUỘM V NƢỚC THẢI DỆT NHUỘM 31 2.1.1 Các mẫu vật nghiên cứu 31 2.1.2 Vi sinh vật 31 2.1.3 Các thiết bị 33 2.1.4 Môi trƣờng nuôi cấy 34 2.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 2.2.1 Phƣơng pháp phân tích 34 2.2.1.1 Xác định sinh khối nấm mốc 34 2.2.1.2 Xác định hoạt độ enyzme [41] 34 2.2.1.3 Phƣơng pháp xác định hàm lƣợng thuốc nhuộm 36 2.2.1.4 Khảo sát đ c tính enzyme 36 2.2.1.5 Phƣơng pháp xác định COD 37 2.2.1.6 Phƣơng pháp xác định BOD 38 2.2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 40 2.2.2.1.Thu nhận enzyme từ canh trƣờng vi sinh vật 40 2.2.2.2 Thu nhận enzyme từ bã thải trồng nấm 40 2.2.2.3 Chọn lọc enzyme có khả khử màu thuốc nhuộm 40 2.2.2.4 Xác định điều kiện khử màu thuốc nhuộm enzyme 40 2.2.2.5.Chọn lọc nấm có khả khử màu thuốc nhuộm 40 2.2.2.6 Xử lý nƣớc thải với enzyme 41 PHẦN III KẾT QUẢ V THẢO LUẬN 45 3.1 THU NHẬN CÁC CHẾ PHẨM ENZ ME SỬ DỤNG CHO NGHIÊN CỨU 45 3.1.1 Enzyme từ canh trƣờng Phomopsis sp N7.2 45 3.1.2 Enzyme từ canh trƣờng P florida 46 3.1.3 Các nguồn enzyme khác 46 v 3.1.4 Thành phần hệ enzyme enzyme nghiên cứu 47 3.2 S NG LỌC ENZ ME CÓ KHẢ NĂNG PHÂN HỦ THUỐC NHUỘM 48 3.2.1 Khả khử màu thuốc nhuộm Reactive blue 19 48 3.2.2 Khả khử màu thuốc nhuộm Rb19 canh trƣờng P florida 49 3.2.2 Khả khử màu thuốc nhuộm khác enzyme từ bã giá thể nấm 52 3.3 THU NHẬN V KHẢO SÁT Đ C T NH ENZ ME TỪ BÃ TRỒNG P FLORIDA 55 3.3.1 Thu nhận enzym 55 3.3.2 Khảo sát số đ c tính chế phẩm enzyme 55 3.3.3 Khảo sát điều kiện khử màu thuốc nhuộm bới laccase bã thải P florida 57 3.4 THỬ NGHIỆM KHỬ M U NƢỚC THẢI DỆT NHUỘM NHỜ CHẾ PHẨM LACCASE THU TỪ BÃ THẢI TRỒNG NẤM P FLORIDA 65 3.4.1 Thành phần nƣớc thải 65 3.4.2 Điều kiện khử màu nƣớc thải 66 3.4.3 Xây dựng mô hình thí nghiệm cho khử màu nƣớc thải dệt nhuộm Rb19 69 KẾT LUẬN 75 KIẾN NGHỊ 76 T I LIỆU THAM KHẢO 77 PHỤ LỤC 84 vi DANH MỤC CÁC TỪ NGỮ VIẾT TẮT TT Các từ Giải thích từ thuật ngữ viết tắt thuật ngữ viết tắt ABTS 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) RBBR Remazol Brilliant Blue R BOD Nhu cầu oxy hóa sinh học COD Nhu cầu oxy hóa hóa học DO GUA Guaiacol SYR syringaldazine, SYR DMP 2,6-dimethoxyphenol HBT 1-hydroxybenzotriazole 10 kDa Kilo dalton 11 PHBS 4-hydroxybenzenesulfonic acid 12 HOBT 1-hydroxybenzotriazole 13 NTRb19 Nƣớc thải chứa thuốc nhuộm Rb19 14 NTRr261 Nƣớc thải chứa thuốc nhuộm Rr261 15 Rb19 Reactive blue 19 16 Rbl5 Reactive black 17 Rb21 Reactive blue 21 18 Rr261 Reactive red 261 19 Ry186 Reactive yellow 186 20 Q Nồng độ oxy hòa tan Lƣu lƣợng vii DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Phân bố lớp hóa học thuốc nhuộm hoạt tính Bảng 1.2 Tổn thất thuốc nhuộm sau nhuộm loại xơ sợi [28] Bảng 1.3 Nguồn phát sinh chất ô nhiễm nƣớc thải dệt nhuộm Bảng 1.4 Các phân lớp chất màu vào dòng thải: Bảng 1.5 Các công đoạn gây ô nhiễm đ c tính nƣớc thải [11] 10 Bảng 1.6 Đ c tính nƣớc thải số xí nghiệp Dệt nhuộm Việt Nam [11] 10 Bảng 1.7 Tính chất nƣớc thải nhà máy Dệt nhuộm TP Hồ Chí Minh [10] 11 Bảng 1.8 Tính chất nƣớc thải nhà máy Dệt nhuộm Hà Nội [11] 11 Bảng 1.9 Số lƣợng hóa chất, thuốc nhuộm sử dụng xí nghiệp dệt nhuộm [12] 12 Bảng 2.1 Thể tích mẫu lựa chọn với khoảng giá trị BOD 38 Bảng 3.1 Thành phần hệ enzyme nghiên cứu 47 Bảng 3.2 Hiệu suất thu nhận enzyme từ bã trồng P florida 55 Bảng 3.4.Thành phần mẫu nƣớc thải thí nghiệm 65 Bảng 3.5 Đ c tính nƣớc thải Rb sau xử lý 74 viii DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Cơ chế xúc tác phânhủy tiểu phần phenol lignin laccase [15] 19 Hình 1.2 Cơ chế xúc tác phân hủy tiểu phần chất phenol laccase [14; 17] 21 Hình 1.3 Cơ chế đề xuất phân hủy thuốc nhuộm I laccase 23 Hình 1.4 Cơ chế đề xuất phân hủy thuốc nhuộm II laccase 25 Hình 2.1 Các mẫu bãthải trồng nấm đƣợc sử dụng nghiên cứu 31 Hình 2.2 Hệ thống thí nghiệm xử lý nƣớc thải dệt nhuộm 43 Hình 3.1 Động thái sinh trƣởng tổng hợp laccase Phomopsis sp N7.2 45 Hình 3.2 Sinh trƣờng tổng hợp laccase P florida 46 Hình 3.3 Khả khử màu thuốc nhuộm Rb19 50mg/L enzyme nghiên cứu 48 Hình 3.4 Khả khử màu thuốc nhuộm Rb19 canh trƣờng P florida 50 Hình 3.5 Hiệu khử màu thuốc nhuộm Rb19 canh trƣờng P.florida 51 Hình 3.6 Sự khử màu loại thuốc nhuộm khác hệ enzyme nghiên cứu 53 Hình 3.7 Hiệu khử màu thuốc nhuộm lacccase 54 Hình 3.8 Ảnh hƣởng pH (A) độ bền pH (B)củalaccase từ bã trồng P florida 56 Hình 3.9 Ảnh hƣởng nhiệt độ tới hoạt độ (A) độ bền (B) bã thải P florida 57 Hình 3.10 Hiệu khử màu thuốc nhuộm Rb19 50 mg/l chế phẩm enzym pH khác sau 24h 58 Hình 3.11 Hiệu xử lý loại thuốc nhuộm nhiệt độ khác laccase từ bã trồng P florida 59 Hình 3.12 Sự khử màu thuốc nhuộm Rb19 laccase từ bã thải P.florida với nồng độ oxy khác 60 Hình 3.13 Mức độ khử màu thuốc nhuộm theo thời gian 61 Hình 3.14 Hiệu khử màu loại thuốc nhuộm nồng độ laccase P florida khác 62 Hình 3.15 Ảnh hƣởng nồng độ oxy tới khả khử màu nƣớc thải Rb 66 Hình 3.16 Sự khử màu nƣớc thải nồng độ enzyme khác sau 24h 67 ix Formatted: Heading 1, Space After: 10 pt, Tab stops: Not at 6.33" Hình 3.17 Hiệu khử màu nƣớc thải Rb (A) nƣớc thải Rr (B)tại nồng độ enzym khác 68 Hình 3.18 Ảnh hƣởng thời gian xử lý nồng độ enzym tới tốc độ khử màu thuốc nhuộm nƣớc thải Rb (A) nƣớc thải Rr (B) 69 Hình 3.19 Diễn biến trình khử màu nƣớc thải NTRb với tốc độ dòng vào 225 ml/h 71 Hình 3.20 Diễn biến trình khử màu nƣớc thải NTRb với tốc độ dòng vào 300 ml 72 Hình 3.21 Diễn biến trình khử màu nƣớc thải NTRb với tốc độ dòng vào 400 ml 73 x KẾT LUẬN Đã thu nhận khảo sát khả khử màu thuốc nhuộm 05 chế phẩm enzyme từ canh trƣờng nấm mốc bã thải trồng nấm Enzyme thu nhận đƣợc từ bã thải P florida có khả khử màu nhiều loại thuốc nhuộm: Rb19: 93%; Rr261: 66%; Rbl5: 64%; Rb21: 48%; Ry186: 22% Đã thu nhận xác định điều kiện hoạt động chủ yếu chế phẩm enzyme thô từ bã thải nấm P florida Enzym hoạt động tối ƣu nhiệt độ 70oC pH với chất ABTS, nhiệt độ 30oC pH – với thuốc nhuộm RB19 Quá trình khử màu nƣớc thải dệt nhuộm với mô hình nƣớc thải NTRb hệ thống xử lý phòng thí nghiệm quy mô lít đƣợc xác định với điều kiện sau: Q = 300 ml/h, nồng độ laccase: 0.20 U/ml, nhiệt độ 30oC, pH 7, DO = 7.3 mg/l, thời gian lƣu nƣớc thải hệ thống 3.3 h Hệ thống đạt hiệu xử lý BOD 87%, COD 80.22%, độ màu Pt – Co 85.8%, TSS 97%, tải trọng 310 g thuốc nhuộm/ lít.ngày Nƣớc thải đầu phù hợp với tiêu chuẩn B QCVN 13 : 2008/BTNMT 75 KIẾN NGHỊ 1 Tiếp tục nghiên cứu khả xử lý nƣớc thải dệt nhuộm canh trƣờng nấmP.floridavà tối ƣu hóa điều kiện trình khử màu 2 Thu nhận hệ enzyme từ giá thể trồng nấm P.florida thu nhận canh trƣờng chủng nấm sò qui mô lớn để sử dụng cho hệ thống xử lý nƣớc thải dệt Formatted: Space After: 10 pt Formatted: Font: Not Bold Formatted: Indent: Left: 0.05", Numbered + Level: + Numbering Style: 1, 2, 3, … + Start at: + Alignment: Left + Aligned at: 0.1" + Indent at: 0.35" Formatted: Font: Times New Roman, 13 pt Formatted: Font: Not Bold Formatted: Font: Times New Roman, 13 pt nhuộm Tiếp tục nghiên cứu khả cố định hệ enzyme laccase từ giá thể trồng nấm P.florida ho c cố định hệ sợi P.florida để khử màu nƣớc thải dệt nhuộm nhằm tối ƣu chi phí sử dụng enzyme hay chủng Formatted: Font: Not Bold Formatted: Indent: Left: 0.05", Numbered + Level: + Numbering Style: 1, 2, 3, … + Start at: + Alignment: Left + Aligned at: 0.25" + Indent at: 0.5" Formatted: Font: Times New Roman, 13 pt 76 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Hoàng Thị Lĩnh ctv (2005), "Báo cáo đề tài cấp Sở: Nghiên cứu công nghệ xử lý nguồn nƣớc thải gi t tẩy nhuộm sở gi t-tẩy-nhuộm Hà Nội nhằm giảm thiểu ô nhiễm môi trƣờng", Sở KH & CN - UBNDTP Hà Nội, Hà Nội Đ ng Thị Cẩm Hà (2012), Nghiên cứu công nghệ sản xuất enzyme ngoại bào laccase, manganese peroxydase, lignin peroxydase (MnP, LiP) từ vi sinh vật phục vụ xử lý chất ô nhiễm đa vòng thơm, Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam, Bộ Khoa học Công nghệ Huỳnh Trung Hải Phạm Minh Huyền (1996), "Nghiên cứu xử lý nƣớc thải công đoạn Nhuộm, Hội thảo khoa học: Giảm thi u chất thải công nghiệp dệt", Hà Nội Hồ Văn Khánh (1999), "Nghiên cứu xử lý số chất mầu hữu nước thải nhuộm phương pháp hòa tan anốt", Luận án tiến sĩ, Viện Hóa học Cao Hữu Trƣợng Hoàng Thị Lĩnh (1995), Hóa học thuốc nhuộm, Nhà xuất khoa học kĩ thuật, Hà Nội Nguyễn Hữu Xuân Nhân (2010), Nghiên cứu thực nghiệm xử lý màu hoạt tính nƣớc thải dệt nhuộm mô hình công nghệ sinh học kỵ khí hai giai đoạn, TP Hồ Chí Minh, Đại học Kỹ thuật Công nghệ Đ ng Trần Phong (2004), Sinh thái m i trường dệt nhuộm, Nhà xuất khoa học kỹ thuật Hà Nội Nguyễn Phƣơng Thảo (2005), "Báo cáo đề tài cấp Sở: Xử lý hợp chất hữu có khó phân hủy nƣớc thải dệt nhuộm trình ozon hóa nhằm giảm thiểu ô nhiễm Cty Dệt Minh Khai", Viện Hóa học - Viện KH & CN VN, Hà Nội Bộ Nông Nghiệp Phát Triển Nông Thôn (2012), Thực trạng giải pháp phát triển sản xuất nấm tỉnh phía Bắc 77 10 Lâm Minh Triết (2008), Xử lý nƣớc thải đô thị công nghiệp - Tính toán thiết kế công trình, Nhà xuất Đại học Quốc gia Tp Hồ Chí Minh 11 Trung tâm Khoa học Công nghệ Môi Trƣờng (1997), Kết nghiên cứu khảo sát thuộc chƣơng trình điều tra môi trƣờng, Đại học Bách Khoa, Hà Nội 12 Võ Thị Ngọc Xuân (1999), Nghiên cứu thực nghiệm đề xuất công nghệ khả thi xử lý nước thải ngành công nghệ dệt-nhuộm, Luận văn thạc sĩ, trƣờng Đại Học Bách Khoa Thành Phố Hồ Chí Minh Tiếng Anh 13 Abadulla E., Tzanov T.,Costa S., Robra K., Cavaco-Paulo A and Georg M Gübitz1 (2000), "Decolorization and Detoxification of Textile Dyes with a Laccase from Trametes hirsuta", Applied and Environmental Microbiology, 66(8): 3357–3362 14 Archibald F S., Bourbonnais R., Jurasek L., Paice M G and Reid I D (1997), "Kraft pulp bleaching and delignification by Trametes versicolor", Journal of Bioscience and Bioengineering, 53: 215-236 15 Arias M E., Arenas M., Rodrı´guez J., Soliveri J., Ball A S and Herna ´ndez M, (2003), "Kraft pulp biobleaching and mediated oxidation of a nonphenolic substrate by laccase from Streptomyces cyaneus CECT 3335", Applied and Environmental Microbiology, 69: 1953-1958 16 Asgher M., Kamal S and Iqbal HMN (2012),"Improvement of catalytic efficiency, thermo-stability and Dye decolorization capability of pleurotus ostreatus IBL-02 laccase by hydrophobic Sol Gel entrapment", Chemistry Centre Journal, 110 17 Banci L., Ciofi-Baffoni S and Tien M (1999), "Lignin and Mn peroxidasecatalyzed oxidation of phenolic lignin oligomers", Biochemistry, 38: 3205-3210 18 Bortone G (1995), "Effects of an anaerobic zone in a textile wastewater treatment plant", Water Science and Technology, 32: 133–140 78 19 Campos R., Kandelbauer A., Robra K H., Cavaco-Paulo A.and Gübitz G M (2001), "Indigo degradation with purified laccases from Trametes hirsuta and Sclerotium rolfsii", Journal Biotechnology, 89: 131–139 20 Chandel A K., Kapoor R K., Singh A and Kuhad R C (2007), "DetoxiWcation of sugarcane bagasse hydrolysate improves ethanol production by Candida shehatae NCIM 3501", Bioresource Technology, 98: 1947-1950 21 Chivukula M and Renganathan V (1995), "Phenolic azo dye oxidation by laccase from Pyricularia oryzae", Appled Environmental Microbiol, 61: 4374– 4377 22 Chung K T and Stevens S E (1993), "Degradation of azo dyes by environmental microorganism and helminths", Environmental Toxicoloxy and Chemmistry, 12: 2121–2132 23 Easton G A (1995), Colour in dye house effluent, Bradford, UK, Society of Dyers and Colourists 24 Filazzola M T., Sannino F., Rao M A and Gianfreda L (1999), "Effect of various pollutants and soil-like constituents on laccase from Cerrena unicolor", Journal of Environmental Quality, 28: 1929-1938 25 Givaudan A., Effosse A., Faure D., Potier P., Bouillant M L and Bally R (1993), "Polyphenol oxidase in Azospirillum lipoferum isolated from rice Rhizosphere evidence for laccase activity in nonmotile strains of Azospirillum lipoferum", Fems Microbiology Letters 108: 205-210 26 Gorman M J., Dittmer N T., Marshall J L and Kanost M R (2008), "Characterization of the multicopper oxidase gene family in Anopheles gambiae" Insect Biochemistry and Molecular Biology, 38: 817-824 27 Guillen F., Gomez-Toribio V., Martinez M J and Martinez A T (2000), "Production of hydroxyl radical by the synergistic action of fungal laccase and aryl alcohol oxidase", Archives of Biochemistry and Biophysics, 383: 142-147 28 Hobbs S J (1989), J.S.D.C pp 335 (In: P Cooper (1995) 105, Colour in Dyehouse Effluent, SDC: Bradford, Bradford, pp.12) 79 29 Shore J (1990), Colorants and auxiliaries, Vol I, SDC: Bradford, Bradford 30 Johnson D L., Thompson J L., Brinkmann S M., Schuller K A and Martin L L (2003), "Electrochemical characterization of purified Rhus vernicifera laccase: voltammetric evidence for a sequential four-electron transfer", Biochemistry, 42: 10229-10237 31 Jolivalt C., Raynal A., Caminade E., Kokel B., Le Goffic F.and Mougin C (1999), "Transformation of N ',N '-dimethyl-N-(hydroxyphenyl)ureas by laccase from the white rot fungus Trametes versicolor", Applied Microbiology and Biotechnology, 51: 676-681 32 Junghanns C., Moeder M., Krauss G., Martin C and Schlosser D (2005), "Degradation of the xenoestrogen nonylphenol by aquatic fungi and their laccases", Microbiology, 151: 45-57 33 Kiiskinen L L., Ra¨tto¨ M and Kruus K (2004), "Screening for novel laccaseproducing microbes”, Journal of Applied Microbiology, 97: 640–646 34 Kiiskinen L (2005), Characteration and heterologuos production of novel laccase from Melanocarpus albomyces, Helneski University of Technology, Journal of Pharmacy and Biological Sciences, vol 2(1) 35 Krishnaveni M and Kowsalya R (2011), "Characterization and decolorization of dye and textile effluent by laccase from pleurotus florida- a white-rot fungi", International Journal of Pharma and Bio Sciences, vol 2(1) 36 Kummer P (1871), "Der Führer in die Pilzkunde (Mushroom-hunter's guide)", 146 pp 37 Kunamneni A (2008), "Engineering and Application of fungal laccase for organic synthesis", Microbial Cell Factories.Journal for Asia on Textile & Apparel, (8(1)): pp 66-64 38 Lee F (1997), "Reactive dyes and the problem if effluent",Journal for Asia on Textile & Apparel, (8(1)): pp 66-64 80 39 Lee I Y., Jung K H., Lee C H and Park Y H (1999), "Enhanced production of laccase in Trametes vesicolor by the addition of ethanol", Biotechnology Letters, 21: 965-968 40 Linke D., Bouws H., Peters T., Nimtz M., Berger R G and Zorn H (2005), "Laccases of Pleurotus sapidus: Characterization and Cloning", Journal of Agricultural and food chemistry, 53: 9498 - 9505 41 Nguyen Thi Phuong Mai, Le Quang Hoa, To Kim Anh, Duong Thi Phuc Hau and Dang Thi Thu (2011), "Optimization of the expression of laccase from white-rot fungus Trametes versicolor in Aspergillus niger D15#26", The 3rd AUN/SEED Net Regional Conference in Biotechnology: “Towards the biotechnology industry in the region”, March 3-4, 2011, Hanoi, Vietnam, pp 107 42 Murugesan K., In-Hyun N., Young-Mo K and Yoon-Seok C (2006), "Decolorization of reactive dyes by a thermostable laccase produced by Ganoderma lucidum in solid state culture", School of Environmental Science and Engineering, POSTECH, San 31, Hyoja-dong, Nam-gu, Pohang 790-784 Republic of Korea 43 O'Neill C., Lopez A., Esteves S., Hawkes F., Hawkes D L and Wilcox S (2000), "Azo-dye degradation in an anaerobic-aerobic treatment system operating on simulated textile effluent", Appled Biochemistry and Biotechnoly, 53: 249– 254 44 Pakshirajan K., Jaiswal S and Das R K (2011), "Biodecolourization of azo dyes using phanerochaete chrysosporium: effect of culture conditions and enzyme activities" Journal of Science and Industry Research, 70: 987–991 45 Sathiya Moorthi Perumal, Deecaraman Munuswamy, Periyar Selvam Sellamuthu, Murugesan Kandasamy and Kalaichelvan Puthupalayam Thangavelu (2007) "Biosorption of textile dyes and effluents by Pleurotus florida and Trametes hirsuta with evaluation of their laccase activity", Iranian Journal of Biotechnology, 5(No 2) 81 46 Klaus Piontek, Matteo Antorini and Thomas Choinowski Crystal (2002), "Structure of a Laccase from the FungusTrametes versicolor at 1.90-Å Resolution Containing a Full Complement of Coppers",The Journal of Biological Chemistry 277(pp): 37663 47 Praveen K., Viswanath B., Usha K Y., Pallavi H., Venkata Subba Reddy G and Naveen M and Rajasekhar Reddy B (2011), "Lignolytic Enzymes of a Mushroom Stereum ostrea Isolated from Wood Logs" Enzyme research, 2011: pages doi:10.4061/2011/749518 48 Shanmugam S., Kumar T., Sathish, Rajasekaran P and Palvannan T (2008), Effect of fungal enzyme (Pleurotus florida) on the decolorization of reactive dyes and textile effluents, Colourage 55(11): p66 49 Ce´sar Ferna´ndez Sa´nchez, Tzanko Tzanov, Georg M Gu¨bitz and Artur Cavaco Paulo (2002), "Voltammetric monitoring of laccase-catalysed mediated reactions" Bioelectrochemistry, 58 149 – 156 50 Sathishkumar P., Murugesan K and Palvannan T (2010), "Production of laccase from Pleurotus florida using agro-wastes and efficient decolorization of Reactive blue 198", Journal of Basic Microbiology, 50(4): 360–367 51 Shin K S., Oh I K and Kim C J (1997), "Production and Purification of Remazol Brilliant Blue R Decolorizing Peroxidase from the Culture Filtrate of Pleurotus ostreatu", Applied and Environmental microbiology, 5: 1744 – 1748 52 Spadaro J T., Lorne I and Renganathan V (1994), "Hydroxyl radical mediated degradation of azo dyes: evidence for benzene generation", Environment Science and Technology, 28: 1389–1393 53 Ana P M Tavares, Raquel O Cristóvão, José M Loureiro, Rui R Boaventura and Eugénia A Macedo (2007), "Treatment of textile dyes effluents by laccase mediator system" LSRE-Laboratory of Separation and Reaction Engineering, Faculdade de Engenharia, Departamento de Engenharia Química, Universidade Porto 82 54 Thurston C F (1994), "The structure and function of fungal laccases.", Microbiology 140: 19-26 55 Tien M and Kent Kirk T (1984), "Lignin degrading enzyme from Phanerochaete chrysosporium : purification, characterization and catalytic propreties of a unique H2O2-requiring oxygenase", Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 81: 2280-2284 56 Xu F (1996), "Oxidation of phenols, anilines, and benzenethiols by fungal laccases: Correlation between activity and redox potentials as well as halide inhibition", Biochemistry, 35: 7608-7614 57 Xu F., Kulys J J., Duke K., Li K., Krikstopaitis K., Deussen H W., Abbate E., Galinyte V and Schneider P (2000), "Redox Chemistry in Laccase-Catalyzed Oxidation of N-Hydroxy Compounds", Applied and Environmental of Microbiology, 66: 2052-2056 58 Yoshida H (1883), "Chemistry of lacquer (urushi)", Journal Chemical Soccien, 43: 472–486 59 Andrea Zille (2005), Laccase Reactions for Textile Applications, Universidade Minho 83 PHỤ LỤC Phụ lục - Môi trƣờng – Môi trƣờng nuôi cấy lỏng nấm mốc Thành phần môi trƣờng Basel cho 400 ml dung dịch nuôi cấy Glucose Asparagin Peptone MgSO4.7H2O KH2PO4 K2HPO4.3H2O CuSO4.5H2O Malt extract Tween 80 (NH4)2SO4 Cao nấm men Kháng sinh (Chloraphenicol) Vi lƣợng (Oligo) 4g 1.2 g 2g 0.2 g 0.2 g 0.4 g 0.04 g 0.4 g 0.4 µL 0.2 g 0.6 g 0.04 g 40 µL - Môi trƣờng PDA – Môi trƣờng giữ giống Thành phần môi trƣờng PDA Agarose Glucose Dịch chiết khoai tây 84 2g 3g 100 ml Phụ lục - Sự khử màu loại thuốc nhuộm nồng độ khác laccase từ bã thải trồng nấm P floridatrong 24h Mẫu 1; 2; 3; có nồng độ enzyme cuối tƣơng ứng 0.1; 0.2; 0.5; U/ml Mẫu mẫu kiểm chứng, enzyme đƣợc thay nƣớc cất 85 Phụ lục - Đƣờng chuẩn mẫu thuốc nhuộm nghiên cứu Đƣờng chuẩn thuốc nhuộm Rb19 1.6 y = 0.0137x R² = 0.996 1.4 1.2 1.329 OD OD Blue 0.8 0.705 0.572 0.439 0.6 0.4 Linear (OD Blue) 0.3 0.16 0.2 0 50 100 Nồng độ thuốc nhuộm mg/l 86 150 Formatted: Font: (Default) Times New Roman, 13 pt, Not Bold OD Đƣờng chuẩn thuốc nhuộm Rb21 1.8 1.6 1.4 1.2 0.8 0.6 0.4 0.2 1.701 y = 0.0169x R² = 0.9992 Series1 0.853 0.683 0.489 0.308 0.163 Linear (Series1) 0 50 100 150 Nồng độ thuốc nhuộm mg/l Đƣờng chuẩn thuốc nhuộm Rb21 1.8 1.701 y = 0.0169x R² = 0.9992 1.6 1.4 OD Blue 21 1.2 Linear (OD Blue 21) 0.853 0.683 0.8 0.6 0.489 0.4 0.308 0.163 0.2 0 50 100 150 87 Đƣờng chuẩn thuốc nhuộm Ry186 1.2 y = 0.0098x R² = 0.9986 0.96 OD 0.8 0.6 OD Yellow 0.5 0.404 0.303 0.205 0.107 0.4 0.2 0 50 100 150 Nồng độ thuốc nhuộm mg/l Đƣờng chuẩn thuốc nhuộm Rbl5 y = 0.0261x + 0.0455 R² = 0.999 2.5 OD 1.5 0.5 0 20 40 60 80 100 Nồng độ thuốc nhuộm mg/l 88 120 Đường chuẩn thuốc nhuộm Rr261 2.5 y = 0.0199x + 0.0253 R² = 0.9991 Axis Title 1.5 Series1 Linear (Series1) 0.5 0 50 100 150 Axis Title 89 ... sử dụng enzyme xử lý nƣớc thải Dệt nhuộm đƣợc bắt đầu nghiên cứu Để góp phần phát triển phƣơng pháp xử lý tiến hành thực đề tài Nghiên cứu công nghệ xử lý nƣớc thải dệt nhuộm enzyme laccase ... đậm) Hiện chƣa có công trình xử lý nƣớc thải dệt nhuộm sử dụng vi sinh vật hay enzyme để xử lý nƣớc thải dệt nhuộm quy mô công nghiệp Việc nhập enzyme thƣơng mại làm chi phí xử lý tăng, lợi nhuận... kế cho xử lý nƣớc thải phƣơng pháp hóa học hay lý học.Với đ c thù riêng ngành dệt nhuộm, khâu xử lý nƣớc thải mà đ c 16 biệt vấn đề xử lý màu nƣớc nhiều hạn chế.Các hệ thống xử lý nƣớc thải phƣơng