RECOMBINANT DNA CÔNG NGHỆ TÁI TỔ HỢP

BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ KỸ THUẬT MÔI TRƯỜNG ỨNG DỤNG CÔNG NGHỆ TÁI TỔ HỢP DNA ĐỂ SẢN XUẤT CÁC SẢN PHẨM HỮU ÍCH CHO CON NGƯỜI GVHD: PGS TS NGUYỄN VĂN VINH Thành viên nhóm: Nguyễn Thị Ngọc Diễm (2208150003) Huỳnh Bảo Đăng Khoa (2208150006) Phan Thị Kiều Oanh (2208152002) NỘI DUNG TRÌNH BÀY Giới thiệu công nghệ DNA tái tổ hợp Ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp Giới thiệu công nghệ DNA tái tổ hợp Công nghệ DNA tái tổ hợp tập hợp kỹ thuật phân tử để định vị, phân lập, biến đổi nghiên cứu đoạn DNA DNA tái tổ hợp (recombinant DNA) tạo từ hai hay nhiều nguồn vật liệu di truyền khác Phân tử DNA tái tổ hợp tạo nhờ kỹ thuật ghép nối đoạn DNA cá thể khác loài, loài khác Giới thiệu công nghệ DNA tái tổ hợp Quy trình tạo DNA tái tổ hợp Bước 1: Nuôi tế bào chủ tế bào cho gene quan tâm Bước 2: Tách DNA plasmid DNA tế bào cho Bước 3: Cắt DNA plasmid DNA mục tiêu loại enzyme cắt giới hạn Bước 4: Trộn nối loại DNA enzyme nối tạo DNA tái tổ hợp hoàn chỉnh Giới thiệu công nghệ DNA tái tổ hợp Bước 5: Chuyển DNA tái tổ hợp vào tế bào nhận (E coli) Bước 6: Chọn lọc nhân dòng tế bào mang gene tái tổ hợp Bước 7: Nghiên cứu điều kiện để gene biểu sản phẩm Giới thiệu công nghệ DNA tái tổ hợp Các loại enzyme dùng công tái tổ hợp DNA Enzyme giới hạn (Restriction Enzyme) Cắt trình tự đặc hiệu thông thường từ 4-6 nucleotide Một số loại enzyme cắt giới hạn Giới thiệu DNA tái tổ hợp Các loại enzyme dùng công tái tổ hợp DNA Enzyme nối (ligase): xúc tác hình thành các liên kết phosphatdiester nối loại đoạn acid nucleotide với Một số loại enzyme khác Giới thiệu công nghệ DNA tái tổ hợp Vector chuyển gen có số yêu cầu bản: Có trình tự khởi đầu chép (ori) để tự chép mà tồn độc lập Trình tự nhận biết cho RE tạo vết cắt để chèn gene Trình tự điều hòa (promoter) tạo điều kiện thuận lợi phiên mã gene Đảm bảo di truyền bền vững DNA tái tổ hợp Có gene đánh dấu (marker) nhận biết tế bào chủ nhận Giới thiệu công nghệ DNA tái tổ hợp Một số loại vector Vector plasmid DNA vòng tròn Sao chép độc lập tế bào Có khả mang số gen có khả biểu thành protein pBR322: p: plasmid B: Bolivar R: Rodriguez 322: thứ tự chủng vk tách plasmid Giới thiệu công nghệ DNA tái tổ hợp Một số loại vector Vector phage: virus vi khuẩn Cosmid vector: vector nhân tạo kết hợp thuộc tính plasmid phage dùng nhân dòng DNA lớn (40-45kb) Ti plasmid: bắt nguồn từ Agrobacterium tumifaciens thường dùng chuyển gen thực vật Vector nhiễm sắc thể nhân tạo nấm men YAC Vector virus tế bào eurkaryote Giới thiệu công nghệ DNA tái tổ hợp Một số loại vector Vector phage: virus vi khuẩn Cosmid vector: vector nhân tạo kết hợp thuộc tính plasmid phage dùng nhân dòng DNA lớn (40-45kb) Ti plasmid: bắt nguồn từ Agrobacterium tumefaciens thường dùng chuyển gen thực vật Vector nhiễm sắc thể nhân tạo nấm men YAC Vector virus tế bào eurkaryote Giới thiệu công nghệ DNA tái tổ hợp Một số kỹ thuật để biến nạp plasmid tái tổ hợp vào tế bào nhận Giới thiệu công nghệ DNA tái tổ hợp Gene gun Hãng Bio-Rad Ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp Ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp dược phẩm Sản xuất loại dược phẩm hormone, interferon, vaccine… Ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp dược phẩm Sản phẩm Growth hormone công nghệ DNA tái tổ hợp Ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp dược phẩm Inferferon α2a Vaccine viêm gan B Ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp nông nghiệp Tạo thực vật chuyển gene có nhiều ứng dụng thực tế:  Cải thiện giống trồng: Chuyển vào trồng gen: kháng thuốc diệt cỏ, kháng sâu, kháng nấm, kháng virus, thay đổi sắc tố hoa… Gene Bt: kháng sâu Gene GT: kháng thuốc diệt cỏ gốc Glyphosphate Ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp nông nghiệp  Nâng cao phẩm chất trồng Bước phát triển lớn thứ thực vật chuyển gene giúp tăng hàm lượng amino acid, lipid, vitamin, độ ngọt… Daffodil Golden rice Ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp nông nghiệp  Nâng cao phẩm chất trồng Giống lúa IR64 phổ biến Đông Nam Á Nam Á chuyển gene ferritin (mã hóa protein trữ sắt với hàm lượng cao) từ đậu nành gene “nicotianamine synthase” từ giống lúa khác giúp trữ kẽm sắt Nguồn: http://iasvn.org Ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp nông nghiệp  Sản xuất hóa chất đặc biệt từ thực vật  Dầu nhờn công nghiệp: Cây cải dầu chuyển gene làm thay đổi thành phần acid béo hạt ứng có nhiều ứng dụng  Brassica napus – Cải dầu Chất dẻo Ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp nông nghiệp  Sản xuất protein trị liệu Ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp nông nghiệp  Sản xuất protein trị liệu Tài liệu tham khảo Trịnh Đình Đạt, Công nghệ sinh học – tập công nghệ di truyền, 2007, NXB Giáo Dục Phạm Thành Hổ, Di truyền học, 2010, NXB Giáo Dục http://www.sci.sjp.ac.lk/vle/pluginfile.php/11386/mod_resource/content/0/Applications_1.pdf http://iasvn.org/homepage/Giong-lua-bien-doi-gen-giau-sat-va-kem-7968.html ... nghệ DNA tái tổ hợp Ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp Giới thiệu công nghệ DNA tái tổ hợp Công nghệ DNA tái tổ hợp tập hợp kỹ thuật phân tử để định vị, phân lập, biến đổi nghiên cứu đoạn DNA DNA... tạo DNA tái tổ hợp Bước 1: Nuôi tế bào chủ tế bào cho gene quan tâm Bước 2: Tách DNA plasmid DNA tế bào cho Bước 3: Cắt DNA plasmid DNA mục tiêu loại enzyme cắt giới hạn Bước 4: Trộn nối loại DNA. .. tổ hợp (recombinant DNA) tạo từ hai hay nhiều nguồn vật liệu di truyền khác Phân tử DNA tái tổ hợp tạo nhờ kỹ thuật ghép nối đoạn DNA cá thể khác loài, loài khác Giới thiệu công nghệ DNA tái