贵州农业科学 2008 , 36(4): 92 ～ 94 G uizho u A g ricultural Science s 植物保护 ·土壤肥料 · 微生物 [ 文章编号] 1001-3601(2008)04-0233-0092-03 固体培养条件对蛹虫草产子实体和虫草菌素的影响 文庭池 ,2 , 康冀川 1, 2＊ , 李光荣 , 雷帮星 ,2 (1 贵州大学 贵州省生化工程中心 , 贵州 贵阳 550025;2 西南药用生物资源教育部工程研究中心 , 贵州 贵阳 550025) [ 摘 要] 研究了营养液不同 pH 值和米粒大小两个培养条件对蛹虫草固体发酵产子实体和 虫草菌素的 影响 。 当营养 液 pH 值为 ～ 时子实体的产 量最大 , 营养液 pH 值为 时 , 虫草菌素总的产量最 大 , 达 48 44 g/ 瓶 。 较大 的米粒有利 于 蛹虫草子实体的生长 , 较小的米粒有利于蛹虫 草虫草菌素的积累 。 子实体的产量随 着米粒的变 小而减少 ; 子实 体中虫草菌 素 的含量随着米粒的变小而增加 。 当采用整米 作为培 养基基 质时 , 蛹虫草 子实体 产量最 大 , 达 67 g/ 瓶 , 当 采用 40 目 米 +10 目米(1 ∶1 , M/ M)作为培养基基质时 , 蛹虫草子 实体中虫草菌素含量最大 , 达 87%, 虫草菌素总的产量也最大 , 达52 46 mg/ 瓶。 [ 关键词] 蛹虫草 ;固体发酵 ;子实体 ;培养基 ;虫草菌素 [ 中图分类号] S567 +5 [ 文献标识码] A Effects of Different Solid Culture Condition on Fruit Body and Cordycepin Output of Cordyceps militaris 1,2 WEN T ing-chi ,2＊ , KA NG Ji-chuan , LI Guang-ro ng , L EI Bang-xing 1,2 (1 Guizhou Center f or Biochemistry Engineering , Guizhou University , Guiy ang, Guizhou 550025 ;2 Southwest China Center f or Pharmaceutical Bio-resources Engineering , Ministry of E ducation , Guiyang , Guizhou 550025 , China) Abstract :T he so lid media w ith differ ent pH va lue and rice g rain size w ere used in the fermentatio n o f Cordy ce ps militaris to study the effects o n the f ruit bo dy and co rdy cepin output.T he results show tha t the maximum fruit body yield a nd co rdycepin output (48 44 g/ bo ttle)is o btained on the medium with pH ～ and pH respectively , the fruit body yield reduces with decrease of rice g rain size and the co rdy cepin content in the fruit body reduces w ith increase o f rice g rain size T he maximum fr uit bo dy y ield (1 67 g/ bo ttle) is o btained o n the medium with who le rice g rains and the maximum co rdycepin co ntent in the fruit bo dy (1 87 %)and co rdycepin output (52 46 mg/ bot tle)ar e obtained the medium with 40 and 10 mesh o f rice g rain size (1 ∶1, M/ M) Key words:Cord yceps mi litaris ;solid fermentatio n;fruit body ;medium ;co rdycepin 蛹虫草(Cordy ceps mi li tari s)菌粉在我国作为 一类新药(中药国药准字 Z 20030034/ 35)已 获得国 家药品监督管理局批准进入临床 , 其有效成分主要 是虫草多糖 , 核苷 类物质(主要 是虫草菌素), 虫草 酸 , 甾体等 ; 虫草菌素(co rdycepin)是蛹虫草产生的 [ 1] [ 2] 一种重要次生代谢产物 , 它的抗菌 、降血脂 、抗 [ 3] 肿瘤和抗癌作用 愈来愈受到人们的重视 。目前蛹 虫草已实现了大规模固体培养 , 但虫草子实体中虫 草菌素产量较低 。 据报道 , 人工蛹虫草子实体虫草 菌素的含量为 %～ % [ 4-5] , 要充分利用这一 有价值的资源就必须寻求提高产量的有效途径 。 近 年来 , 蛹虫草固体发酵的研究主要集中在培养基成 分的优化上 。本文首次报道了米粒大小对蛹虫草子 实体和虫草菌 素产量的影响 , 也研究 了营养液 pH 对蛹虫草子实体和虫草菌素产量的影响 。为进一步 提高蛹虫草子实体和虫草菌素的产量提供了更简便 的途径 。 材料与方法 1 材料 1 菌株 蛹虫草(Cordyceps mi li tari s)无性 型 , 蛹 草拟 青霉(Paecilom yces mi li tari s)0671 菌 株 , 分离自四川省瓦屋山自然保护区采集的蛹虫草 鲜标本 。保存于贵州省生化工程中心真菌学与药用 真菌研究室 。 1 试剂 虫草菌素(Cordy cepi n)标准品购于 美国 Sig ma 公司 。 其他实验用试剂均为分析纯 。 1 培养基 1)菌种活化培养基(PDA): 马铃薯 200g 过滤 取汁 、葡萄糖 20g , 水 000 mL , pH 值自然 。 2)蛹虫草固体发酵基质为不同颗粒度的大米(市 售籼稻 , 每 个 玻璃 瓶 装 20g)。 营养 液 为 : 蛋白胨 10g/ L , 蔗糖 20g/ L , MgSO · 7H O 1g/ L , KH PO4 g/ L 。基质 ∶营养液为 ∶1 质量比配比, 初始 pH 值自然 ,无色玻璃瓶容积为 350mL( 内径 2cm , 高 度 15cm),用聚乙烯膜封口, 121 ℃灭菌 30min 。 1 设备 分析型 H P LC : 100 series ; Agi lent T echno logy , U S ; JA 2003 电子天平 , 上海天平仪 器厂 ; Z K-82A 型真空干燥箱 , 上海实验仪 器总厂 ; SB2200 型超 声波清 洗机 , 上 海 BRANSON 公 司 ; YX400 高压蒸汽灭菌锅 , 上海三申医疗器械有限公 司; 其他为一般常规仪器 。 [ 收稿日期] 2008-05-20 ;2008-05-29 修回 [ 基金项目] 贵州省中药现代化项目“ 优质蛹虫草菌丝体及虫草菌素生产关键技术的研究”[ 黔科合中药专字(2007)5012] ; 贵州省高层次 人 才科研条件特助项目“ 蛹虫草菌丝体及虫草菌素产业化核心技术的研究”[ 黔人领函(2007)26] [ 作者简介] 文庭池(1979 -), 男 , 理学硕士 , 讲师 , 从事应用微生物学研究 。 E-mai l : ti ngchiw en @yahoo.com ＊ 通讯作者 : 康冀川 , 教授 , 博士生导师 。 E-mail : jichuank @yahoo com 第 期 方法 蛹虫草固体发酵产子实体 将 1m L 活化 菌株的孢子悬液(孢子浓度为 ×106 个/ m L)接种 于灭菌的大米培养基上 , 然后放入人工气候室黑暗 培养 , 培养温度前 10d 恒定在 23 ℃, 10 d 后 为刺激 子实体的产生改为变温培养(白天 23 ℃, 晚上 16 ℃, 白天光照 12 h/ d , 光照强度 500 lx); 培养 70d 后 , 收 获子实体和培养基 , 用于干重和虫草菌素的检测 , 每 组设 10 瓶重复 , 取 10 瓶数据的平均值 。 2 样品中虫草菌素的测定 将收获的子实体 和培养基在 50 ℃烘箱里烘干 , 再用粉碎机粉碎 ; 参 [ 6] 照 Mao 等 方法采用 H P LC 测定子实体和培养基 中虫草菌素的含量 。 米粒大小对蛹虫草固体发酵子实体干重和 培养基干重的影响 分别以整米 、10 目米 、14 目米 、 20 目米 、40 目米以及它们的两两组合(1 ∶1 , M/ M) 为培养基基质 , 基质 ∶营养液为 ∶1 质量配比加 入营养液 。灭菌后接种蛹草拟青霉培养 70 d , 分别 收获子实体和培养基 , 称量干重 。 米粒大小对蛹虫草固体发酵子实体和培养 基虫草菌素含量的影响 分别以整米 、10 目米 、14 目米 、20 目米 、40 目米以及它们的两两组合(1 ∶1 , M/M)为培养基基质 , 基质 ∶营养液为 ∶1 质量 配比 加 入营 养 液 。 灭菌 后 接种 蛹 草 拟青 霉 培 养 70 d , 分别收获子实体和培养基 , 用于虫草菌素含量 的测定 。 营养液不同 pH 值对蛹虫草固体发酵子实 体干重和培养基干重的影响 分别把营养液 pH 调 为 0, 5, 0, 5, 0, ,8 。 灭菌后接种蛹 草拟青霉培养 70 d , 收获子实体和培养基 , 称量其干 重。 营养液不同 pH 值对蛹虫草固体发酵子实 体和培养基虫草菌素含 量的影响 分别把营 养液 pH 调为 0, 5, ,6 5, 0, 5, 。 灭菌后 接种蛹草拟青霉培养 70d , 收获子实体和培养基 , 分 别测定虫草菌素的含量 。 干重偏大(最大组为整米(1 67g/ 瓶), 其次为整米 +10 目米(1 59g/ 瓶) ), 说明米粒越大 , 经灭菌蒸熟 后 , 培养基不容易粘在一起 , 空隙越大 , 透气性较好 , 子实体生长越好 , 培养基利用越充分 , 但并不意味着 其虫草菌素(次级代谢产物)产量越大 。 2 米粒大小对蛹虫草固体发酵子实体和培养基 中虫草菌素含量的影响 从试验结果(表 2)可看出 , 子实体中虫草菌素含 表 米粒大小对蛹虫草固体发酵子实体干重和培养基干重的影响 T abl e The ef f ect of rice grain siz e on d ry weight of f rui t body and m edium in C mi li tar is 米粒大小 结果与分析 米粒大小对蛹虫草固体发酵子实体干重和培 养基干重的影响 从表 可以看出 , 子实体干重最大和最小的两 组相差 63 72 %, 子实体的产量随着米粒的 变小而 减少 , 子实体干重越大的实验组培养基干重就越小 (如子实 体干 重 最大 的 组分 别为 整 米(1 67 g/ 瓶)、整米 +10 目米(1 59 g/ 瓶)、10 目 米(1 55 g/ 瓶), 其培养基干重很小 , 为 10 09 ～ 10 34 g/瓶 , 证 明发酵越充分 , 培养基利用也越充分 , 子实体也生长 得更好 。 含有 40 目米的实验组子实体干重偏小 , 说 明米粒越小 , 经灭菌蒸熟后 , 培养基容易粘在一起 , 熟米粒结合越紧密 , 透气性越差 , 培养基利用越不充 分 , 导致培养基干重偏大 ; 含有整米的实验组子实体 子实体干重/(g/ 瓶) 培养基干重/(g/瓶) Rice grain Dry weigh t of Dry weight of size fruit body m edium 67 10 32 整 米 +10 目米 W hole rice grain +10 m es h 59 10 34 整 米 +14 目米 W hole rice grain + 14 mes h 52 10 32 整 米 +20 目米 W hole rice grain + 20 mes h 28 11 40 整 米 +40 目米 W hole rice grain + 40 mes h 07 13 15 10 目米 10 mesh 55 10 09 14 目米 +10 目米 14 m esh + 10 mesh 25 11 00 14 目米 14 m es h 51 10 34 20 目米 +10 目米 20 mes h + 10 m esh 22 10 70 20 目米 +14 目米 20 m esh + 14 mesh 50 10 37 20 目米 20 mes h 19 10 81 40 目米 +10 目米 40 m esh + 10 mesh 35 12 96 40 目米 +14 目米 40 m esh +10 mesh 22 11 67 40 目米 +20 目米 40 m esh +20 mesh 20 12 81 40 目米 40 mesh 02 13 50 整米 表2 W hole rice grain 米粒大小对蛹虫草固体发酵子实体和培养基中虫草菌素含量 的影响 T abl e The ef fect of rice grain size on cordy cepin content in f ruit body and medium in C mi li tar is 米粒大小 Rice grain size 整米 子实体中虫草 培养基中虫草 总的虫草菌素 菌素含量/ % 菌素含量/ % 产量/(mg/瓶) Cordycepin tent Cordycepin content T otal cor d- in fruit body in medium ycepin yield 70 26 38 52 73 26 38 49 75 24 36 17 81 29 43 43 40 26 49 17 74 27 38 71 01 26 41 23 76 33 45 60 72 28 38 74 10 32 49 68 93 30 43 50 87 21 52 46 67 23 47 22 63 25 51 59 54 24 48 11 W hole rice grain 整米 +10 目米 W hole rice grain +10 m esh 整米 +14 目米 W hole rice grain +14 m esh 整米 +20 目米 W hole rice grain + 20 m es h 整米 +40 目米 · 93 · 文庭池 等 固体培养条件对蛹虫草产子实体和虫草菌素的影响 W hole rice grain + 40 m es h 10 目米 10 m es h 14 目米 +10 目米 14 m es h +10 mesh 14 目米 14 m es h 20 目米 +10 目米 20 m es h + 10 m esh 20 目米 +14 目米 20 m es h + 14 m esh 20 目米 20 m es h 40 目米 +10 目米 40 m es h + 10 m esh 40 目米 +14 目米 40 m es h +14 mesh 40 目米 +20 目米 40 m es h +20 mesh 40 目米 40 m es h · 94 · 贵 州 农 业 科 学 量最大和最小的两组相差 167 %, 总的虫草 菌素产 量最大和最小的两组相差 45 %。 子实体中 虫草菌 素的含量随着米粒的变小而增加 , 子实体中虫草菌 素含量越大的实验组(均为含有 40 目米的实验组), 其培养基中虫草菌素含量反而不高〔如子实体中虫 草菌素含量最大 的 组依次 为 : 40 目米 +10 目米 (1 87 %), 40 目米 +14 目米(1 67 %), 40 目米 +20 目米(1 63 %), 其培养基中虫草菌素含量却很小 , 均 在 23 %左右〕, 说明发酵虽然不很充分 , 子实体生 长较差 , 但其子实体中虫草菌素却积累较多 , 这也证 明了在机体生长受到限制时真菌更容易积累次级代 [ 7] 谢产物 。 含有整米的实验组子实体中虫草菌素含 量偏低 , 说明米粒越大 , 培养基不容易粘在一起 , 透 气性越佳 , 蛹虫草生长条件越好 , 就偏向生物量(初级代谢)方面积累 , 同时减少 了次级代谢产物(虫草菌素)的积累 。 结果表明 , 较 大的米粒有利于蛹虫草子实体的生长 , 较小的米粒 有利于蛹虫草虫草菌素的积累 。当采用整米作为培 养基基质时 , 蛹 虫草 子实 体产 量最 大(达 67 g/ 瓶); 当采用 40 目米 +10 目米作为培养基基质时 , 蛹虫草子实体中含虫草菌素量最大(达 87 %), 虫 草菌素总的产量也最大(达 52 46m g/ 瓶)。 营养液 pH 对蛹虫草固体发酵子实体干重和 培养基干重的影响 从表 可以看出 , 在不同的营养液 pH 条件下 , 子实体干重最大和最小的两组相差 28 37 %, 说明营 养液 pH 对蛹虫草固体发酵子实体产量影响不大 。 当营养液 pH 为 5～ 时 , 子实体的产量最大 , 这 与其他研究者得出的结果相似 。 营养液 pH 对蛹虫 草固体发酵培养基干重影响也不大 , 均为 11 g 左右 。 表 不同 pH 对蛹虫草固体发酵子实体干重和培养基干重的影响 Table T he ef f ect of medi um pH on dry w ei ght of frui t body and medi um i n C mi l it ari s pH 值 pH 5 6 7 子实体干重/(g/ 瓶) Weig ht o f f ruit body 47 81 61 59 52 41 45 培养基干重/ (g/ 瓶) Dry W eight of medium 11 03 10 90 11 61 11 21 11 07 11 41 11 45 表4 不同 pH 对蛹虫草固体发酵子实体和培养基中虫草 菌素含量 的影响 Table T he ef fect of m edium pH on cordycepin cont ent i n f ruit body an d medium in C m il it ari s pH 值 pH 子实体中虫 草菌素含量/ % C o rdy cepin content 培养基中虫 草菌素含量/ % C ordy cepin content 总的虫草菌素 产量/(m g/ 瓶) T ot al co rdy cepin 5 6 7 in fruit body 38 52 74 72 65 55 43 in medium 20 22 27 33 31 29 25 y ield 27 65 33 39 43 26 48 44 44 20 40 84 34 86 注 : 总的虫草菌素产量 =(子实体干重 ×子实体中虫草菌素含量)+(培养基 干重 ×培养基中虫草菌素含量)。 Not e : T o tal co rdycepin yie ld =(dry w eig ht of f rui t body ×co rdy cepin co ntent in fruit body) +(dry w eight ×co rdycepin co ntent in medium) 2008 , 36 卷 营养液 pH 对蛹 虫草固体发酵子实体和培养 基中虫草菌素含量的影响 从表 可看出 , 在不同的营养液 pH 条件下 , 子 实体 中虫草菌素 含量最大 和最小的 两组相差 94 74 %; 总的虫草菌素产量最大和最小的两组相差 75 19 %。说明 , 营养液 pH 对蛹虫草固体发酵产生 虫草菌素的影响很大 。 当营养液 pH 为 时, 子 实体中 含虫草 菌素的 量最大(0 74 %); 当营 养液 pH 为 时 , 虫 草 菌 素 总 的 产 量 也 最 大 (达 48 44 mg/ 瓶)。 说明 , 偏酸性(pH 5)的营养液有 利于虫草菌素的积累 。 讨论 1)虫草菌素是蛹虫草重要的活性成分 , 具有显 著的药理作用 。 虫草菌素的生产有两条途径 : 化学 [ 8] 法和生物法 。 Aman 等报道 , 用化学合成方法大 规模生产虫草菌素相当麻烦而且不易纯化 。生物法 有: 液体表面培养(静置)、液体深层培养和固体培养 种 , 固体培养生产虫草菌素有投入小 , 产量较高 , 对环境友好等优点 , 适合于大规模工业生产 。本研 究利用简单可行的方法 , 提高了虫草菌素的单位产 量 , 为虫草菌素的广泛应用奠定了基础 。 2)营养液 pH 对蛹虫草固体发酵子实体产量 的影响不大 。当营养液 pH 值为 ～ 时子实 体 的产 量 最 大 , 这 与 其 他 研 究 者 得出 的 结 果 相 [ 0] 似 。偏酸性(pH 5)的营养液有利于虫草菌素 的积累 。 3)Munnisw aran 等[ 9] 在研究用黑曲霉生产纤 维素酶的影响条件时指出 , 基质颗粒的大小(特定的 表面积)是固体发酵中一个非常关键的因素 。当基 质颗粒越小时 , 用于生长的表面积就越大 , 但颗粒间 孔隙率就越小 ; 相反当基质颗粒越大时 , 饱和表面面 积就越小 , 颗粒间孔隙率就越大 ; 饱和表面面积和孔 隙率这两个成反比的因子间的相互作用决定了菌丝 的生长情 况和 酶的 生 产效 率 。 Sun 等[ 11] 、Suresh [ 2] [ 13] 等 和 Kizhakkedat hu 等 在研究其它真菌的固 体发酵时 , 也得出了同样的结论 。 本实验中随着米 粒的增大 , 米粒间孔隙率就越大 , 透气性越佳 , 蛹虫 草菌丝生长越好 , 就越偏向生物量方面积累 。相反 随着米粒的减小 , 用于生长的表面积就越大 , 米粒间 孔隙率就越小 , 培养基容易粘在一起 , 这样透气性变 差 , 蛹虫草菌丝生长受阻 , 因而就偏向次级代谢产物 (虫草菌素)方面积累 。 从肉眼观察结果来看 , 随着 米粒的减小 , 培养基容易粘在一起(大 米淀粉的特 性), 这样菌丝就不容易刺入培养基内部生长 , 菌丝 主要集中在表面生长 。 故真菌的生长及其次级代谢 产物的积累不仅和培养基基质的颗粒大小有关 , 还 与其颗粒自身的物理特性也有关 。 [参 考 [ 1] Cun ningham K G , Hu tchins on S A , M anson W , et al Cordycepin , a met ab oli c p rodu ct f rom cult ures of C ordyceps mili taris (Lin n )Link Part I.Isolati on and characterisati on [ J] J Chem S oc, 1951 : 2299-2300 文 献] (下转第 96 页) · 96 · 贵 州 农 业 科 学 表2 名称 复配混合物对斜纹夜蛾的毒力测定结果 有效成 毒力回归方程 相关 LD 50 共毒 分配比 (y =a +bx) 1∶1 y =6 9639+1 9938x 系数 (μg/ 头) 系数 9680 1035 58 3∶1 5∶1 y =6 3513+1 8358 x y =6 0476+1 7039 x 971 1836 61 951 0 2428 65 7∶1 10∶1 y =5 9173 +2 3010x y =5 7692+2 0060 x 967 3993 49 954 4136 60 敌百虫︰高效氯氟 1∶1 氰菊酯 2∶1 y =4 9773 +1 6571x y =5 0755 +1 5526x 911 0320 51 984 8941 67 4∶1 6∶1 y =5 0454 +1 7663x y =4 5993 +1 8219x 890 9425 71 973 6593 42 8∶1 1∶1 y =4 3159+1 6001 x y =6 1773 +2 0129x 940 2 6750 27 943 2601 43 5∶1 10∶1 y =5 3160+2 0205 x y =5 2549+1 8661 x 979 6976 37 981 7302 52 15∶1 20∶1 y =5 1248+2 8048 x y =5 6023+1 9572 x 960 0 9026 50 897 4924 103 5∶1 10∶1 15∶1 y =5 9200+1 6504 x y =5 4147 +1 2360 x y =5 2946 +1 7412x 829 0 2770 63 969 4618 59 975 6774 51 20∶1 25∶1 y =5 4290+1 5216 x y =5 1253 +1 5558x 965 5225 76 951 8308 53 5∶1 10∶1 y =6 0159 +2 6890x y =5 3746 +2 1469x 971 418 48 988 0 6692 46 15∶1 20∶1 y =5 3381 +1 9493x y =6 1432 +2 2074x 891 6708 57 0 967 3035 144 25∶1 y =5 6135 +1 8220x 917 4606 104 药剂 敌百虫︰醚菊酯 敌百虫︰毒死蜱 敌百虫︰甲维盐 敌 百 虫︰ 联苯 菊 酯 2 敌百虫与几种单剂复配对斜纹夜蛾的活性 敌百虫与几种单剂复配对斜纹夜蛾的毒力测定 结果见表 。 敌百虫与醚菊酯复配的 组配比的 LD 50 高于 醚菊酯的 LD50 , 低于敌百虫的 LD50 , 共毒系数明显 小于 100 , 两个单剂互作表现为拮抗作用 。 敌百虫与高效氯氟氰菊酯复 配的 组配 比的 LD 50 高于两个单剂的 LD 50 , 共毒系数明显小于 100 , 两个单剂互作表现为拮抗作用 。 敌百虫与毒死蜱复配的 组配比的 LD 50 均高 于毒死蜱的 LD50 ; 敌百虫与毒死蜱 15 ∶1 的 LD50 高 于敌百虫 , 其它几组的 LD50 低于敌百虫的 L D50 。 其 中 20 ∶1 的共毒系数略高于 100 , 两个单剂互作表 现为联合作用 。 敌百虫与甲维盐复配的 组配比的 LD 50 均高 2008 , 36 卷 于甲维盐的 L D50 ; 配比 25 ∶1 的 LD 50 略高于敌百虫 的 LD50 外 , 其它配比的 LD50 都低于敌百虫的 LD50 。 组配比的共毒系数都明显低于 100 , 两个单剂互作 表现为拮抗作用 。 敌百虫与联苯菊 酯复配的 组配比中 , 20 ∶1 和 25 ∶1 的 LD50 较低 。其中 , 20 ∶1 的共毒系数明 显大于 100 , 两个单剂互作对斜纹夜蛾具有明显的 增效作用 ; 25 ∶1 的共毒系数略大于 100 , 两个单剂 互作对斜纹夜蛾具有联合作用 。其他 配比的 LD50 明显小于 100 , 对斜纹夜蛾产生拮抗作用 。 小结与讨论 1)醚菊酯 、毒死蜱 、甲胺基阿维菌素苯甲酸盐 和联苯菊酯对斜纹夜蛾幼虫的活性高 , 高效氯氟氰 菊酯的活性较好 , 敌百虫的活性较低 。 敌百虫与其 他 种杀虫剂的配比中 , 敌百虫 ∶毒死蜱 20 ∶1 的 共毒系数为 103 , 敌百虫 ∶联苯菊酯 25 ∶1 的共 毒系数为 104 , 这两组复配对斜纹夜蛾表现为联 合作用 ; 敌百虫 ∶联 苯菊酯 20 ∶1 的 共毒系 数为 144 , 对斜纹夜蛾表现增效作用 ; 其他配比的共毒 系数明显小于 100 , 对斜纹夜蛾表现拮抗作用 。 2)敌百虫是低毒杀虫剂 , 市场价格低 , 与联苯 菊酯 20 ∶1 的比例复配 , 增强对斜纹夜蛾的毒力作 用 , 在生产防治和复配杀虫剂开发方面具有重要的 参考价值 。 同时单剂毒力测定结果为杀虫剂交替使 用和延缓斜纹夜蛾对杀虫剂抗性的发展提供了一定 的参考依据 。 致谢 : 南京农业大学植保学院 2004 届实习生简 崇海 , 西北农林科技大学植保学院 2004 届实习生陈 兴华 、杨胜强 , 贵州大学植保学院 2004 届实习生吴 钦彬 、王磊参加本实验工作 , 特此感谢 。 [参 考 [ 1] 华南农业大学 农 业昆虫 学(下 册)[ M] 北京 :农业 出版 社 , 1981 唐启义 , 冯明光 实用统计分析计算机处理平台[ M] 北京 :中 国农业出版社 , 1997 : 135-139 [ 2] 文 献] (责任编辑 :杨 林) (上接第 94 页) [ 2] [ 3] [ 4] [ 5] [ 6] [ 7] [ 8] 朱 平 , 朱海波 , 朱慧心 , 等 3′ -脱 氧腺苷 在制备 降血脂 药物 中的应用 : 中国 , 200310101650 7[ P] 2003-10 Horow it z B, G oldf inger B A , M armu r J Ef fect of cordycepin t ri phosphat e on th e nu clear D N A-dependent RN A p oly merases an d poly(A) polymerase f rom t he yeast S accharomyces cerevisiae[ J] A rch Biochem Biophys , 1976 , 172 : 143-148 孙诗清 , 李多伟 , 任 静 , 等 RP-HPLC 测定 不同产地 人工蛹 虫草中虫草素的含 量[ J] 西 北药学 杂志 , 2005 , 20(6): 244245 温 鲁 , 夏 敏 , 葛宜和 , 等 以虫草素和腺苷含量为指标优化 蛹虫草人工栽培[ J] 江苏农业科学 , 2005 , 21(4): 359-363 M ao X B , Eks riw ong T , Chauvat ch arin S , et al O pt imiz at ion of carb on s ou rce and carbon/ ni t rogen rat io for cordycepin p roducti on by sub merged cult ivat ion of m edici nal mu shroom Cordyceps mili taris[ J] Proces s Bioch e, 2005 , 40 : 1667-1672 刑来 君 , 李 明春 普通 真菌 学[ M ] 北京: 高 等 教育 出版 社 , 1999 : 155 A man S , A nderson D J , Connolly T J , et al From adenosin e t o 3′ -deoxyaden osi ne:development and scale-up [ J ] O rg [ 9] [ 10] [ 11] [ 12] [ 13] Process Res D ev, 2000 , : 601-605 M uni sw aran P K A , S elva K umar P , Charyul u , N C L N Product ion of a cellul ase f rom coconut coir pit h in s oli d st at e f erment ation[ J] Journal of Chemical T echnology and Bi ot ech nology 1994 , 60 : 147-151 赵春燕 , 李 红 , 张 敏 , 等 北虫草人工栽培条件的优化[ J] 沈阳农业大学学报 , 2006 , 37(2): 209-212 Sun T , Li P , Liu B , et al S olid s tat e ferment at ion of rice chaff for fi brinolyt ic enzyme production by Fu sariu m oxys porum[ J] Biot echnology Let t ers , 1997 , 19(5): 465-467 Su resh P V , Chandrasek aran M U ti li zation of praw n wast e f or chi tinase production by t he m arin e f ungus Beauveria bassianaby solid st ate f ermentat ion[ J] W orld Journal of M icrobiology & Biot echnology , 1998 , 14 :655-660 K izhakkedathu N N , R ajeev K S , Paru kut t yam ma P U tili zati on of ri ce st raw f or laccase production by St rept omy ces psammot icu s in s oli d-s tat e f ermentat ion[ J] J Ind M icrobi ol Bi otech nol , 2007 , 34 : 665-674 (责任编辑 :杨 林) ... riw ong T , Chauvat ch arin S , et al O pt imiz at ion of carb on s ou rce and carbon/ ni t rogen rat io for cordycepin p roducti on by sub merged cult ivat ion of m edici nal mu shroom Cordyceps. .. fect of rice grain size on cordy cepin content in f ruit body and medium in C mi li tar is 米粒大小 Rice grain size 整米 子实体中虫草 培养基中虫草 总的虫草菌素 菌素含量/ % 菌素含量/ % 产量/(mg/瓶) Cordycepin tent Cordycepin content... Table T he ef fect of m edium pH on cordycepin cont ent i n f ruit body an d medium in C m il it ari s pH 值 pH 子实体中虫 草菌素含量/ % C o rdy cepin content 培养基中虫 草菌素含量/ % C ordy cepin content 总的虫草菌素 产量/(m