Nghiên cứu bào chế gel chứa tiểu phân nano bạc clorid

MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i MỤC LỤC ii DANH MỤC CÁC BẢNG v DANH MỤC CÁC HÌNH Error! Bookmark not defined DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT vii ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN .3 1.1 Giới thiệu chung công nghệ nano 1.1.1 Khái niệm công nghệ nano 1.1.2 Đặc tính hệ tiểu phân nano 1.1.3 Kỹ thuật bào chế hệ nano 1.1.3.1 Kỹ thuật phân chia (top-down) 1.1.3.2 Kỹ thuật kết tụ tiểu phân (bottom – up) 1.2 Đặc điểm hấp thu qua da hệ nano 1.2.1 Đặc điểm sinh lý da 1.2.2 Đặc điểm hấp thu hệ nano 1.3 Ưu điểm hệ tiểu phân nano 1.3.1 Tăng hấp thu, tăng sinh khả dụng .9 1.3.2 Tăng độ ổn định dược chất 10 1.3.3 Tăng tính an toàn .10 1.4 Nhược điểm hệ tiểu phân nano 10 1.5 Tổng quan bạc tiểu phân nano bạc 11 1.5.1 Giới thiệu chung bạc 11 1.5.2 Tác dụng tiểu phân nano chứa bạc 14 1.5.3 Hệ giải phóng ion bạc kéo dài – tiểu phân nano bạc clorid 17 1.5.4 Một số sản phẩm ứng dụng tiểu phân nano chứa bạc y dược mỹ phẩm 18 CHƯƠNG 2: NGUYÊN VẬT LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .19 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị 19 ii 2.1.1 Nguyên vật liệu .19 2.1.2 Thiết bị 20 2.2 Nội dung nghiên cứu 20 2.3 Phương pháp nghiên cứu Error! Bookmark not defined.0 2.3.1 .Điều chế tiểu phân nano bạc clorid 200 2.3.1.1 Phương pháp điều chế hệ tiểu phân nano bạc clorid 20 2.3.1.2 Phương pháp đánh giá kích thước phân bố kích thước tiểu phân nano bạc clorid 211 2.3.1.3 Phương pháp xác định zeta tiểu phân nano bạc clorid 221 2.3.1.4 Phương pháp đánh giá hình dạng tiểu phân nano bạc clorid 22 2.3.2 Phương pháp bào chế gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 22 2.3.2.1 Lựa chọn tá dược 22 2.3.2.2 Quy trình bào chế gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 23 2.2.2.3 Phương pháp đánh giá gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 233 2.3.2.4 Đánh giá khả giải phóng ion Ag+ từ gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 25 2.4 Đánh giá tác dụng kháng khuẩn in vitro gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 26 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 28 3.1 Điều chế, xác định kích thước, phân bố kích thước, Zeta hình dạng tiểu phân nano bạc clorid 28 3.2 Bào chế gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 30 3.2.1 Lựa chọn tá dược tạo gel 30 3.2.1.1 Đánh giá ảnh hưởng tá dược tạo gel đến thể chất gel 30 3.2.1.2 Đánh giá ảnh hưởng tá dược tạo gel đến kích thước tiểu phân nano AgCl 31 3.2.2 Nghiên cứu ảnh hưởng tá dược giữ ẩm đến kích thước tiểu phân nano bạc clorid gel 33 3.2.3 Nghiên cứu ảnh hưởng tá dược bảo quản đến kích thước tiểu phân nano bạc clorid gel 34 3.2.4 Đánh giá số đặc tính lý-hóa gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 36 3.2.5 Hàm lượng dược chất gel nano AgCl 37 3.3 Đánh giá khả giải phóng ion Ag+ từ gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 38 iii 3.4 Đánh giá tác dụng kháng khuẩn in vitro gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 39 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 411 4.1 Điều chế tiểu phân nano bạc clorid 411 4.2 Bào chế gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 411 4.3 Đánh giá số đặc tính gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 422 4.4 Đánh giá khả giải phóng ion Ag+ từ gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 433 4.5 Đánh giá tác dụng kháng khuẩn in vitro gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 433 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC iv DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Số nguyên tử có hạt nano bạc 13 Bảng 2.1 Nguyên liệu sử dụng nghiên cứu 19 Bảng 3.1 Kích thước tiểu phân, phân bố kích thước tiểu phân zeta hỗn dịch nano bạc clorid 28 Bảng 3.2 Độ nhớt thể chất gel bào chế với số tá dược nồng độ khác 30 Bảng 3.3 Tỷ lệ poloxamer 188 (P188) polxamer 407 (P407) mẫu gel khảo sát .31 Bảng 3.4 Đường kính trung bình phân bố kích thước tiểu phân AgCl gel bào chế với tá dược tạo gel khác 32 Bảng 3.5 Đường kính trung bình phân bố kích thước tiểu phân AgCl gel bào chế với nồng độ glycerin khác .33 Bảng 3.6 Đường kính trung bình phân bố kích thước tiểu phân AgCl gel bào chế với nồng độ nipagin khác .34 Bảng 3.7 Công thức bào chế 100 (g) gel nano bạc clorid 0,13% (kl/kl) 35 Bảng 3.8 Đường kính trung bình, phân bố kích thước Zeta gel nano bạc clorid 0,13% so với silvasorb gel (kl/kl) theo thời gian 36 Bảng 3.9 Độ hấp thụ nguyên tử dung dịch bạc chuẩn 37 Bảng 3.10 Kết định lượng hoạt chất gel nano bạc clorid 38 Bảng 3.11 Lượng ion bạc giải phóng từ gel nano bạc clorid so với Silvasorb gel theo thời gian 38 gel nano bạc clorid S aureus Bảng 3.12 Đường kính vòng vô khuẩn E coli so với dạng thuốc mỡ thân nước Silvasorb® Gel® .40 v DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Sơ đồ bào chế tiểu phân nano Hình 1.2: Tác động ion bạc lên vi khuẩn 14 Hình 1.3: Ion bạc vô hiệu hóa enzym chuyển hóa oxy vi khuẩn 15 Hình 1.4: Ion bạc liên kết với base DNA 15 Hình 1.5 Thuốc kháng khuẩn dùng cho vết bỏng chứa tiểu phân nano bạc clorid 17 Hình 2.1 Sơ đồ quy trình bào chế hỗn dịch nano bạc clorid 21 Hình 2.2 Sơ đồ quy trình bào chế gel chứa tiểu phân nano bạc clorid……… …23 Hình 3.1: Kích thước phân bố kích thước hỗn dịch nano bạc clorid 288 Hình 3.2 Thế Zeta hỗn dịch tiểu phân nano bạc clorid 299 Hình 3.3 Tiểu phân nano bạc clorid chụp kính hiển vi điện tử quét 29 Hình 3.4 Sơ đồ qui trình bào chế gel nano bạc clorid hàm lượng 0,13% 35 Hình 3.5 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc cường độ hập thụ nồng độ bạc 37 Hình 3.6: Lượng ion bạc giải phóng từ gel nano bạc clorid so với Silvasorb gel theo thời gian (giờ) 39 Hình 3.7 Tác dụng kháng khuẩn in vitro gel nano bạc clorid S aureus (bên trái) E coli (bên phải) so với dạng thuốc mỡ thân nước Silvasorb® Gel .40 vi DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT AAS Atomic Absorbtion Spectrometric (phổ hấp thu nguyên tử) ADN Acide désoxyribonucléique ARN Acide ribonucléique ARS Atomic resonance spectography (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân) BP British Pharmacopoeia (Dược điển Anh) DĐVN Dược điển Việt Nam DSC Differentiel scanning calometry (Phân tích nhiệt vi sai) KTTP Kích thước tiểu phân PDI Poly dispersity index (Chỉ số đa phân tán) PBKT Phân bố kích thước PVA Polyvinyl alcohol SEM Scanning electron microscope (Kính hiển vi điện tử quét) TEM Transmission electronic microscope (Kính hiển vi điện tử truyền qua) TB Trung bình USP The United States Pharmacopoeia (Dược điển Mỹ) X X-ray diffraction (nhiễu xạ tia X) vii ĐẶT VẤN ĐỀ Đã từ lâu, bạc biết đến nguyên tố có khả khử trùng mạnh tồn tự nhiên Cách khoảng 200 năm nhà khoa học xem huyết người dịch keo, keo bạc sử dụng rộng rãi làm chất kháng khuẩn để chữa bệnh nấm da, điều trị vết thương, vết bỏng, bệnh miệng, làm thuốc nhỏ mắt,… Bước sang kỷ 20, đời phát triển thuốc kháng sinh, kháng khuẩn đẩy dần thuốc có nguồn gốc từ bạc vào lãng quên Trong năm gần đây, với phát triển vượt bậc công nghệ Nano, việc sử dụng bạc hợp chất bạc dạng hạt có kích thước nano ngành y tế quan tâm trở lại mở khả thay thuốc kháng sinh thông thường có nguy bị đề kháng cao Các nhà khoa học chứng minh kích thước nano, bạc tăng hoạt tính sát khuẩn lên gấp nhiều lần Chúng có khả tiêu diệt nhiều loài nấm, vi khuẩn virus kể chủng kháng kháng sinh vòng vài phút tiếp xúc, khả đề kháng vi sinh vật bạc hợp chất thấp Tuy nhiên tiểu phân nano bạc nguyên tố có nhược điểm khả giải phóng ion bạc thấp, chưa có thuốc kháng khuẩn thực phát triển từ tiểu phân nano bạc nguyên tố Trong lịch sử, bạc sử dụng làm thuốc nhiều dạng khác như: bạc nitrat, bạc protacgon, bạc sulfadiazine,… Mỗi loại có ưu nhược điểm riêng Dung dịch bạc nitrat cho nồng độ ion bạc cao thường cao gây độc tác dụng ngắn; bạc protacgon có màu không ưa chuộng, độ ổn định thấp; bạc sulfadiazin sử dụng dạng kem khó vệ sinh vết thương, thời gian tác dụng ngắn Gần nhờ ứng dụng công nghệ nano, nhà khoa học dược phát triển thành công thuốc sử dụng tiểu phân nano muối tan bạc cho mục đích chống nhiễm khuẩn Các thuốc có ưu điểm kiểm soát tốc độ giải phóng ion bạc mức tối ưu, thời gian dài, thuốc dạng gel dễ sử dụng dễ vệ sinh Các nghiên cứu theo hướng chưa triển khai nước Nhằm phát triển thuốc chống nhiễm khuẩn da có tác dụng tối ưu kéo dài, khoa Y Dược – ĐHQGHN điều chế xác định đặc tính tiểu phân nano bạc clorid Các thử nghiệm sinh học in vitro chứng tỏ tiểu phân có tác dụng tốt bạc sulfadiazin vi khuẩn Gram dương Gram âm thử nghiệm [3] Trên sở đó, tiến hành đề tài: “Nghiên cứu bào chế gel chứa tiểu phân nano bạc clorid” nhằm mục tiêu sau: Bào chế gel chứa tiểu phân nano bạc clorid hàm lượng 0,13% xác định số đặc tính hệ Đánh giá tác dụng kháng khuẩn in vitro gel bào chế số chủng vi sinh vật CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu chung công nghệ nano 1.1.1 Khái niệm công nghệ nano Công nghệ nano khoa học sáng tạo nguyên liệu, thiết bị hệ thống hữu ích nhờ thao tác, sếp mức nguyên tử, phân tử cầu trúc siêu phân tử giới hạn kích thước 1-100 nm, đồng thời khai thác đặc tính tượng xuất vật chất kích thước nano [1], [2], [3], [9], [28] Công nghệ nano có ba thuộc tính quan trọng thao tác thực mức nano, kích thước vật liệu mức nano kết công nghệ nano tạo vật liệu, thiết bị hệ thống hưu ích [5] 1.1.2 Đặc tính hệ tiểu phân nano - Kích thước tiểu phân nano: Kích thước phân bố kích thước tiểu phân đặc điểm quan trọng hệ tiểu phân nano Yếu tố ảnh hưởng đến khả giải phóng thuốc từ hệ nano độ ổn định tiểu phân nano Đồng thời, đặc điểm ảnh hưởng tới trình sinh học thuốc thể khả đưa thuốc tới đích Trong số nghiên cứu giới tiểu phân nano chế tạo 1000 nm đến vài chục nano mét [28], [20] - Bề mặt tiểu phân kết tụ tiểu phân nano: Tiểu phân có kích thước nhỏ diện tích bề mặt tiểu phân lớn, số phân tử bề mặt tiểu phân nhiều tốc độ hòa tan lớn Khi tiểu phân kích thước nano diện tích tiếp xúc bề mặt tăng lên, lực hút Van der Waals lớn nên khả kết tụ cao [20], [28] [23] Tiểu phân nano vào hệ tuần hoàn dễ bị hệ thống miễn dịch nhận biết loại khỏi hệ tuần hoàn bời bạch cầu Chính bề mặt sơ nước tiểu phân yếu tố định cho hấp phụ thành phần máu, chủ yếu protein gây tượng opsonin hóa Vì vậy, để đảm bảo hoạt tính dược chất, kéo dài thời gian lưu thuốc hệ tuần hoàn đưa thuốc tới đích, bề mặt tiểu phân nano cải thiện để hạn chế tối đa tượng opsonin hóa Điều đạt việc bao màng thân nước quanh tiểu phân nano polymer thân nước có khả phân hủy sinh học như: poly ethylen glycol, poly hexadecyl cyanoacrylat poly ethylen glycol/poly lactic acid [20] Điện tích bề mặt tiểu phân đặc tính quan trọng tạo nên tính chất đặc biệt hệ tiểu phân nano Điện tích bề mặt ảnh hưởng đến tương tác tĩnh điện tiểu phân với với thành phần dịch sinh học bề mặt màng sinh học - Từ tính tính chất qung học tiểu phân nano: Đa số tiểu phân nano thể tính chất từ quang đặc biệt Thí dụ, vật liệu sắt từ trở nên siêu thuận từ kích thước nhỏ 20 nm, tức chúng không giữ từ tính thiếu vùng từ Tuy nhiên, chúng chịu tác dụng từ trường Nhưng vật liệu hữu ích cho thuốc giải phóng đích [12] Tiểu phân kim loại (điển hình vàng bạc) có tính chất quang học phụ thuộc vào kích thước tiểu phân Màu sắc tiểu phân thay đổi theo kích thước cộng hưởng bề mặt Nhưng nguyên liệu thích hợp cho chế tạo phận cảm biến thiết bị chuẩn đoán hình ảnh [12], [28] 1.1.3 Kỹ thuật bào chế hệ nano Có hai chiều hướng ngược để bào chế tiểu phân nano dược chất: từ tiểu phân lớn (bột siêu mịn – micronized powder) nghiền thành tiểu phân nano (top-down) từ phân tử nhỏ kết tủa thành tiểu phân nano lớn (bottom-up) [6] Tiểu phân micro Tiê Nghiền Tiểu phân nano Kết tủa Phân tử Hình 1.1 Sơ đồ bào chế tiểu phân nano - Kỹ thuật phân chia (top-down): dùng kỹ thuật nghiền biến dạng để biến vật liệu thể khối với tiểu phân thô thành tiểu phân kích thước nano Kỹ thuật gồm hai nhóm chủ yếu nghiền bi đồng hóa áp suất cao [26], [28] dung dịch poloxamer chuyển sang dạng gel rắn Quá trình có tính thuận nghịch nên thường gọi thoái biến nhiệt: dạng gel bị thoái biến chuyển dạng lỏng ban đầu hạ nhiệt độ xuống Vì trình bào chế gel sử dụng poloxamer, trước tiên cần ngâm poloxamer vào nước cất, để tủ lạnh qua đêm cho trương nở nghiền đồng hóa kết hợp với đưa hỗn hợp nhiệt độ phòng để tạo gel Quá trình nghiền thường tạo nhiều bọt khí nên sau đồng hóa phải để gel nghỉ nhằm làm giảm bọt khí trước đóng gói Nhiệt độ gel hóa dung dịch chứa hỗn hợp poloxamer phụ thuộc vào loại poloxamer sử dụng tỷ lệ chúng Vì phải khảo sát tỷ lệ phối hợp khác poloxamer 188 poloxamer 407 để tìm công thức thích hợp Thành phần nồng độ tá dược sử dụng có ảnh hưởng mạnh mẽ đến kích thước độ ổn định tiểu phân dược chất Do sau bào chế cần đánh giá lại kích thước phân bố kích thước tiểu phân AgCl sản phẩm đồng thời theo dõi biến động thông số theo thời gian Ngoài cần lưu ý đến tính chất hóa học ion Ag+, chúng dễ bị tác động ánh sáng diện kim loại khác nên trình bào chế bảo quản phải tránh ánh sáng đồng thời sử dụng dụng cụ phi kim loại 4.3 Đánh giá số đặc tính gel chứa tiểu phân nano bạc clorid Khảo sát số đặc tính gel chứa tiểu phân nano bạc clorid cho thấy gel có pH gần với pH da, yếu tố giúp giảm kích ứng Độ nhớt phù hợp cho phép gel lưu lại da lâu so với dạng dung dịch Gel có chất thân nước, phân tán tốt nước nên dễ dàng rửa vệ sinh vết thương so với kem bạc sulfadiazin So sánh với sản phẩm thương mại Silvasorb dạng gel vô định hình nhận thấy gel bào chế có cảm quan tốt Định lượng phương pháp AAS cho thấy hàm lượng dược chất thực tế mẫu gel gần 100% hàm lượng lý thuyết Giá thành phép định lượng cao, yếu tố hạn chế trình nghiên cứu KTTP dược chất gel bào chế so với Silvasorb® Gel nhỏ hơn, phân bố đồng giá trị tuyệt đối Zeta lại nhỏ PDI Zeta liên quan đến khả giữ ổn định KTTP dược chất cần theo dõi KTTP thời gian dài Tuy nhiên, độ ổn định sản phẩm tập hợp nhiều yếu tố, khả giữ ổn định KTTP có khả giữ ổn định thể chất, khả trì 42 chất hóa học dược chất, Các yếu tố cần đánh giá đồng thời theo dõi độ ổn định sản phẩm 4.4 Đánh giá khả giải phóng ion Ag+ từ gel chứa tiểu phân nano bạc clorid Nồng độ diệt khuẩn tối thiểu (MBC) ion Ag+ dung dịch nước nằm khoảng 1-5mg/l Kết đánh giá khả giải phóng hoạt chất cho thấy nồng độ ion Ag+ dung dịch đạt MBC sau trì ngày Như vậy, tốc độ giải phóng hoạt chất từ dạng thuốc chưa nhanh mong đợi sản phẩm kháng khuẩn cho tác dụng kéo dài Nồng độ ion Ag+ môi trường trì mức xấp xỉ MBC yếu tố giúp làm giảm độc tính gel bạc clorid so với dạng thuốc từ bạc khác Mặt khác, khả tiêu diệt vi sinh vật thuốc kháng khuẩn phụ thuộc nhiều vào điều kiện môi trường Sự có mặt anion chất hữu vết thương làm giảm tác dụng thuốc Đối với gel AgCl, ion Ag+ nằm dạng kết hợp với Cl- nên tác dụng bị ảnh hưởng môi trường sử dụng 4.5 Đánh giá tác dụng kháng khuẩn in vitro gel chứa tiểu phân nano bạc clorid So sánh tác dụng kháng khuẩn gel bạc clorid với Silvasorb® Gel thấy tác dụng sản phẩm bào chế vi khuẩn Gram dương yếu phổ tác dụng lại rộng Điều liên quan đến kích thước, điện tích tiểu phân dược chất khả giải phóng ion Ag+ Tiểu phân AgCl gel bào chế có đường kính nhỏ hơn, tích điện nên khả tiếp cận xâm nhập qua lớp màng lipid kép bao bên vi khuẩn Gram âm cao Để chứng minh giả thiết cần tiến hành nghiên cứu sinh học chuyên sâu Cũng cần lưu ý, giảm kích thước tiểu phân dược chất biện pháp làm tăng tác dụng diệt khuẩn Tuy nhiên dạng thuốc dùng da với mục đích điều trị chỗ, không nên sử dụng tiểu phân bé để tránh xâm nhập sâu qua lớp da hay vào tuần hoàn hệ thống, dẫn đến khó khăn việc kiểm soát sử dụng thuốc gia tăng tác dụng phụ không mong muốn Kích thước tiểu phân dược chất dạng thuốc nằm khoảng 300-1.000 nm phù hợp 43 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Kết luận 1.1 Bào chế gel chứa tiểu phân nano bạc clorid hàm lượng 0,13% đánh giá số đặc tính gel Đã đánh giá ảnh hưởng số tá dược tạo gel HPMC E6; HEC; CMC; Carbopol 940; poloxamer 188; poloxamer 407 đến thể chất KTTP gel AgCl Ảnh hưởng nồng độ tá dược giữ ẩm glycerin tá dược bảo quản nipagin đến KTTP khảo sát Từ xây dựng công thức qui trình bào chế chứa tiểu phân nano bạc clorid hàm lượng 0,13% công thức sau: Hỗn dịch nano AgCl 0,26% PEG 600 50,00% Poloxamer 407 16,00% Poloxamer 188 6,00% Glycerin 0,50% Nipagin 0,05% Nước cất lần vừa đủ 100,00% Gel nano bạc clorid có KTTP trung bình khoảng 340 nm, phân bố kích thước tương đối đồng (PDI ≈ 0,2) Các tiểu phân tích điện âm với Zeta khoảng -11 mV, pH= 6,0; độ nhớt = 12.300 cP, khả giải phóng ion Ag+ kéo dài ngày khoảng 0,22 mg (55%) Hàm lượng AgCl gel xác định phương pháp đo phổ hấp thụ nguyên tử 0,1303% theo khối lượng, 100,23% so với hàm lượng lý thuyết 1.1 Đánh giá tác dụng kháng khuẩn in vitro gel nano bạc clorid chủng vi khuẩn S.aureus E.coli Gel bào chế có tác dụng kháng khuẩn S aureus E coli Tác dụng S aureus yếu so với Silvasorb® Gel tác dụng E coli lại mạnh đáng kể Đề xuất - Tiếp tục nghiên cứu độ ổn định gel nano bạc clorid - Tiến hành thử nghiệm tác dụng kháng khuẩn gel nhiều chủng vi sinh vật Các hoạt tính sinh học khác sản phẩm độc tính với tế bào lành, ảnh hưởng đến trình liền vết thương, tính kích ứng, cần khảo sát tiếp 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bộ môn bào chế - Trường Đại học Dược Hà Nội (2004), Sinh dược học bào chế, NXB Y Học (2009), tr 136-195 Bộ môn bào chế - Trường Đại học Dược Hà Nội (2004), Một số chuyên đề bào chế đại, NXB Y Học, tr 1-80 Trịnh Ngọc Dương, Nguyễn Thị Thanh Bình, Chengsavang SIATOUTHO, Nguyễn Thanh Hải “Điều chế, theo dõi độ ổn định đánh giá khả giải phóng ion bạc in vitro bột đông khô nano bạc clorid”, Tạp Chí Dược Học, Số 475 (2015) Tr 14-18 Chử Thị Thu Huyền, Nguyễn Thị Thanh Bình, Trịnh Ngọc Dương, Nguyễn Thanh Hải, Khoa Y Dược , Đại học Quốc gia Hà Nội.,Tạp chí khoa học, Khoa học Tự nhiên Công nghệ (2014),.“ Nano tiểu phân bạc triển vọng ứng dụng Dược” tr 23-32 Từ Minh Koóng – Nguyễn Thanh Hải (2007), “ Công nghệ nano sản xuất dược phẩm”, Tạp chí dược học, số 369, tr 2-4 Võ Xuân Minh, Phạm Thị Minh Huệ (2013), Kỹ, thuật nano liposome ứng dụng Dược phẩm – Mỹ phẩm, NXB Y Học tr 9-52 Võ Xuân Minh (2005), Dạng thuốc tác dụng đích – số chuyên đề bào chế đại, NXB Y Học, tr 158-187 Thanh Thi Thủy, (2011), “Điều chế bạc kim loại kích thước nano qua phức myristat bạc với amin”., Tạp chí Phân tích Hóa lý Sinh học, tr 3-5 Lê Văn Truyền (2007), “Công nghệ nano, y học nano dược phẩm nano”, Tạp chí dược học, số 370, tr 2-3 Tiếng Anh 10 Asharani PV, Lian Wu Y, Gong Z, Valiyaveettil S Toxicity of silver nanoparticles in zebrafish models Nanotechnology., 2008 jun 25; 19(25) 255102 11 Atiyeh B S., Costagliola M., Hayek S N., Dibo S A., 2007, “Effect of silver on burn wound infection control and healing: review of the literature” Burns J Int Soc Burn Inj, 33(2),pp.139-148 12 Bharat Bhushan (2004), Springer hand book of technology, Springer Germany, pp.12-36 45 13 Chaloupka K, Malam Y, Seifalian AM (2010) “Nanosilver as a new generation of nanoproduct in biomedical applications” Trends Biotechnol; 28(11):pp, 580–888 14 Catarina Pinto Reis et al (2006), “Nanoencapsulation I Methods for preparation of drug-loaded polymeric nanoparticles”, Nanomed., 2, pp.8-21 15 Castillo PM., Herrera JL., Fernandez – Monstesinos R., et al (2008), “Tiopronin monolayer – protected silver nanoparticles modulate IL-6 secretion mediated by Toll-like receptor ligands” Nanomed, 3(5), pp.627-635 16 Elechiguerra JL, Burt JL, Morones JR, Camacho-Bragado A, Gao X, Lara HH, et al (2005), “ Interaction of silver nanoparticles with HIV-1” J Nanobiotechnology 29(3), pp.6 17 Fei Han et al (2008), “Investigation of nanostructured lipid carriersfor transdermal delivery of frurbiprofen”, Drug Dev Ind Pharm., 34, pp.453-458 18 Guangyin Lei (2007), "Synthesis of Nano-Silver Colloids and Their AntiMicrobial Effects." Master thesis of Science In Materials Science & Engineering, pp 3-6 19 Haririshna Devalapally (2007), “Role of nanotechnonogy in pharmaceutical product development”, J.Pharm Sci.,96, pp.2547 20 Jorg Kreuter (2007), “Nanoparticles – a historical perspective”, Int J Pharm., 331, pp 1-10 21 Kipp J E (2004), “The role of sold nanoparticle technology in the parenteral delivery of poorly water-soluble drugs”, Int J Pharm., 284, pp 109-122 22 Kim JS, Kuk E, Yu KN, Kim J-H, Park SJ, Lee HJ, et al (2007), Antimicrobial effects of silver nanoparticles Nanomedicine Nanotechnol Biol Med Mar: pp, 95101 23 Libo Wu et al (2011), “Physical anh chemical stability of drug nanoparticles”, Adv Drug Del Rev., 63, pp 456-469 24 Mohanraj VJ and Y chen (2006), “Nanoparticles-A review”, Trop J Pharm Res., 5,1, pp.561-573 25 Meiwan et al (2010), “Preparation and anti-bacterties of a temperature-sensitive gel containing silver nanoparticles”, Pharmazie 65.,pp 1-6 26 Nalwa H.S (2004), Encyclopedia of nanoscience and nanotechnology 1, American Scientific Publishers, USA, pp.777-813 27 Nalwa H.S (2004), Encyclopedia of nanoscience and nanotechnology 4, American Scientific Publishers, USA, pp.359-377 46 28 Ober C A., R B Gupta (2011), “Nanoparticle technology for drug delivery”, Ide@s CONCYTEG, (72), pp.714-726 29 Podaralla Satheesh Kumar et al (2007), “Novel approach for delivery of insulin loaded poly lactide-co-glycolide nanoparticles using a combination of stabilizers”, Drug Del., 14, pp 517-529 30 R.H.H Neubert (2011), “Overcoming the stratum corneum: The modulation of skin penetration”, Skin Phar Phy., 19, pp.106-121 31 Reinhard H.H Neubert (2011), “Potentials of new nanocarriers for dermal and transdermal drug delivery”, Eur J Phar and Biophar, 77, pp.1-2 32 R Alvarez – Roman et al (2004), “Skin penetration anh distribution of polymeric nanoparticles”, J Cont Rel., 99, pp.53-62 33 Shahverdi AR., Minaeian S., Shahverdi HR., et al (2007), “Rapid synthesis of silver nanoparticles using culture supernatants of Enterobacteria: A novel biological approach” Process Biochem, 42(5), pp 919-923 34 Sun RW-Y, Chen R, Chung NP-Y, Ho C-M, Lin C-LS, Che C-M (2005) “Silver nanoparticles fabricated in Hepes buffer exhibit cytoprotective activities toward HIV-1 infected cells” Chem Commun Camb Engl.(40):pp, 5059–6120 35 Tien D-C., Tseng K-H., Liao C-Y., et al (2008), Colloidal silver fabrication using the spark discharge system and its antimicrobial effect on Staphylococcus aureus, Med Eng Phys, 30(8), pp 948-952 36 Tony Burn, Stephen Breathnach, Neil Cox, Chritopher Griffiths (2004), Rook’s textbook of dermatology, G Canale&C SpA, Italy, pp 20-38 37 Van Eerdenburgh B Et al (2007), “Characterization of physico-chemical properties and pharmaceutical performance of sucrose co-freeze-dried solid nanoparticulate powders of the anti-HIV agent loviride prepared by media milling”, Int.J Pharm., 338, pp 298-306 38 Vigneshwaran N., Nachane RP., Balasubramanya RH., et al (2006), “A novel one-pot “green” synthesis of stable silver nanoparticles using soluble starch” Carbohydr Res, 341 (12), pp 2012-2018 39 Xin-Cai Xiao and Zong-Guo Hong (2010), “Firstborn microcrystallization method to prepare nanocapsules containing artesunate”, Int.J Nanimed., 5, pp 483-486 47 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Định lượng Ag máy hấp thụ nguyên tử AAS 48 Phụ lục 2: Thế zata gel AgCl sau bào chế 49 Phụ lục 3: Thế zata gel AgCl sau bào chế tuần 50 Phụ lục 4: KTTP gel AgCl bào chế 51 Phụ lục 5: KTTP gel AgCl sau bào chế tuần 52 Phụ lục Kích thước tiểu phân Silvasorb Gel 53 Phụ lục 7: Kích tiểu phân gel HEC chứa dược chất 54 Phụ lục Kích tiểu phân gel CMC chứa dược chất 55 Phụ lục 9: Kích thước tiểu phân gel HPMC chứa dược chất 56 [...]... của tiểu phân - Khảo sát độ ổn định của hệ tiểu phân nano bạc clorid bào chế được  Bào chế gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 0,13% - Nghiên cứu xây dựng công thức bào chế gel chứa tiểu phân nano bạc clorid - Viết qui trình bào chế gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 0,13% - Đánh giá một số đặc tính của gel bào chế được - Xác định hàm lượng dược chất trong gel - Đánh giá khả năng giải phóng dược chất... dạng của bạc được sử dụng để nghiên cứu phát triển các thuốc dạng này: nano tiểu phân bạc; nano tiểu phân các muối bạc; hệ các ion bạc và nano tiểu phân bạc phối hợp với các polymer khác nhau… Trong đó các hệ nano tiểu phân của các muối ít tan của bạc được chú ý nhiều và đã được phát triển thành công thành thuốc có nhiều giá trị (Silvasorb – Thuốc điều trị nhiễm khuẩn từ nano tiểu phân bạc clorid) Hình... Quanta 200 - Cân phân tích, tủ sấy, Buret, tủ ấm, tủ lạnh, nhiệt kế,… 2.2 Nội dung nghiên cứu  Khảo sát quá trình bào chế hệ tiểu phân nano bạc clorid bằng phương pháp kết tụ tiểu phân theo quy trình được phát triển bởi Khoa Y Dược – ĐHQGHN - Đánh giá một số đặc tính của hệ tiểu phân nano bạc clorid: kích thước tiểu phân, phân bố kích thước tiểu phân, thế zeta, hình dạng của tiểu phân - Khảo sát độ... kháng khuẩn in vitro của gel với chủng vi sinh vật Gram âm Escherichia coli ATCC 25922 (E coli) và chủng vi sinh vật Gram dương Staphylococcus aureus ATCC 1128 (S aureus) 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Điều chế hệ nano hệ tiểu phân nano bạc clorid 2.3.1.1 Phương pháp điều chế hệ tiểu phân nano bạc clorid Tiểu phân nano bạc clorid được tổng hợp bằng phương pháp kết tụ tiểu phân theo quy trình được... (n =3) 27 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Điều chế, xác định kích thước, phân bố kích thước, thế Zeta và hình dạng tiểu phân nano bạc clorid Hỗn dịch nano bạc clorid được bào chế theo phương pháp đã trình bày ở phần mục 2.2.1, mỗi mẫu điều chế 100g hỗn dịch nano bạc clorid Kết quả thu được hỗn dịch nano bạc clorid trong suốt, phân tán trong nước cất Để đánh giá hỗn dịch nano AgCl, đo KTTP theo phương... Kích thước tiểu phân, phân bố kích thước tiểu phân và thế zeta của hỗn dịch nano bạc clorid STT KTTP (nm) PdI Zeta 1 254,7 0,126 -16 2 261,1 0,138 -16,3 3 265,0 0,135 -15 4 271,5 0,141 -15,3 5 267,0 0,124 -15,5 KTTP trung bình 263,62 0,128 -15,6 Hình 3.1: Kích thước và phân bố kích thước của hỗn dịch nano bạc clorid 28 Hình 3.2 Thế Zeta của hỗn dịch tiểu phân nano bạc clorid Tiểu phân nano bạc clorid thu... thước tiểu phân, khoảng có tác dụng là 1-10 nm [17]  Tác dụng chống viêm Nhiều nghiên cứu khoa học đã làm sáng tỏ cơ chế chống viêm của tiểu phân nano bạc Trong 1 nghiên cứu lâm sàng trên 15 bệnh nhân, miếng dán tiểu phân nano bạc đẩy mạnh sự lành của các vết loét ở chân Tiểu phân nano bạc không chỉ giảm số lượng tế bào viêm ở vết thương mà còn có đáp ứng chống viêm do làm giảm sự thâm nhập của bạch... chứa tiểu phân nano bạc clorid 2.3.2.3 Phương pháp đánh giá gel chứa tiểu phân nano bạc clorid - Kích thước, phân bố kích thước và thế Zeta của tiểu phân dược chất Hòa loãng gel trong một lượng nước cất thích hợp Đo KTTP, chỉ số đa phân tán và thế Zeta của tiểu phân dược chất bằng máy Zetasizer Nano ZS90 Malvern, như mô tả trong mục 2.3.1.2 và 2.3.1.3 - pH Đo pH bằng các phương pháp: - Đo pH của gel. .. khoảng 250-270 nm, phân bố kích thước tương đối đồng đều (PDI ≈ 0,13) Các tiểu phân tích điện âm với thế Zeta khoảng -15 mV Ảnh thu được từ kính hiển vi điện tử quét (hình 3.3.) cho thấy các tiểu phân nano polyme có dạng hình lập phương Hình 3.3 Tiểu phân nano bạc clorid chụp bằng kính hiển vi điện tử quét 29 3.2 Bào chế gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 3.2.1 Lựa chọn tá dược tạo gel 3.2.1.1 Đánh giá... đại M=20x - 800000x độ phân giải δ = 1,0 nm; điện áp gia tốc U = 0,5-30 kV Chuẩn bị mẫu: hỗn dịch nano bạc clorid được đông khô, mẫu được đưa lên một khay nhôm nhỏ và được bao phủ bởi một lớp platin mỏng trong môi trường khí argon bằng thiết bị chuyên dụng 2.3.2 Phương pháp bào chế gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 2.3.2.1 Lựa chọn tá dược - Tá dược tạo gel Các tiểu phân nano bạc clorid được đưa vào ... hệ tiểu phân nano bạc clorid: kích thước tiểu phân, phân bố kích thước tiểu phân, zeta, hình dạng tiểu phân - Khảo sát độ ổn định hệ tiểu phân nano bạc clorid bào chế  Bào chế gel chứa tiểu phân. .. nano bạc clorid 0,13% - Nghiên cứu xây dựng công thức bào chế gel chứa tiểu phân nano bạc clorid - Viết qui trình bào chế gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 0,13% - Đánh giá số đặc tính gel bào. .. tiểu phân nano bạc clorid 22 2.3.2 Phương pháp bào chế gel chứa tiểu phân nano bạc clorid 22 2.3.2.1 Lựa chọn tá dược 22 2.3.2.2 Quy trình bào chế gel chứa tiểu phân nano bạc clorid