Nghiên cứu lên men các chủng vi sinh probiotics và ứng dụng trong chăn nuôi gà

B GIÁO D C VÀ ÁÀO T O TRƯ NG Á I H C TÂY NGUYÊN PHÙNG DI P LÀI NGHIÊN C U LÊN MEN CÁC CH!NG VI SINH PROBIOTICS VÀ NG D NG TRONG CHĂN NUÔI GÀ LU%N VĂN TH C SĨ SINH H C BUÔN MA THU T, NĂM 2011 B GIÁO D C VÀ ÁÀO T O TRƯ NG Á I H C TÂY NGUYÊN PHÙNG DI P LÀI NGHIÊN C U LÊN MEN CÁC CH!NG VI SINH PROBIOTICS VÀ NG D NG TRONG CHĂN NUÔI GÀ Chuyên ngành: Sinh h c th c nghi m Mã s : 60 42 30 LU%N VĂN TH C SĨ SINH H C Ngư.i hư1ng d4n khoa h8c: PGS.TS Nguy>n Anh Dũng BUÔN MA THU T, NĂM 2011 i L I CAM ĐOAN Tôi xin cam ñoan ñây công trình nghiên c u c a riêng Các s li u, k!t qu# nêu lu$n văn trung th'c chưa ñư)c công b b+t kỳ m-t công trình khác M/i s' giúp ñ2 thông tin trích d5n ñã ñư)c nêu rõ ngu8n g c Ngư:i cam ñoan Phùng Di p Lài ii L I C M ƠN Đ@ hoàn thành lu$n văn t t nghi p này, xin tA lòng bi!t ơn sâu sDc ñ!n: PGS.TS NguyHn Anh Dũng, Giám ñ c Trung tâm Công ngh Sinh h/c, Trư:ng ĐKi H/c Tây Nguyên, ngư:i hưMng d5n khoa h/c tr'c ti!p ñã t$n tình hưMng d5n phương pháp nghiên c u ñóng góp nhiOu ý ki!n quí báu, giúp ñ2 su t trình h/c t$p, nghiên c u hoàn thành lu$n văn Lãnh ñKo Trư:ng ĐKi H/c Tây Nguyên, t$p th@ thQy cô giáo phòng Sau ñKi h/c, Khoa khoa h/c T' nhiên&Công ngh Khoa Nông Lâm nghi p Các bKn bè ngư:i thân ñã giúp ñ2, ñ-ng viên trình h/c t$p nghiên c u Trân tr/ng c#m ơn Ngư:i th'c hi n Phùng Di p Lài iii M CL C M Đ U 1 Tính c p thi t M c tiêu c!a ñ$ tài Ý nghĩa khoa h,c Ý nghĩa th.c ti/n Gi2i h3n ñ$ tài CHƯƠNG T6NG QUAN TÀI LI9U 1.1 T:ng quan v$ vi sinh v>t probiotics 1.2 Thành phAn c!a probiotics 1.2.1 Bacillus subtilis 1.2.2 Lactobacillus acidophilus 1.2.3 Saccharomyces cerevisiae 1.2.4 Nitrosomonas sp 10 1.3 Tiêu chí ch,n l.a vi sinh v>t probiotics 11 1.4 Cơ ch tác ñEng c!a probiotics 11 1.4.1 Tác ñ ng kháng khu n 11 1.4.2 Tác ñ ng bi u mô ru t 12 1.4.3 Tác ñ ng mi"n d#ch 12 1.4.4 Tác ñ ng ñ$n vi khu n ñư&ng ru t 12 1.4.5 Tác ñ ng tăng kh( h)p th* th+c ăn 12 1.5 Vai trò c!a probiotics 12 1.5.1 Đ-i v.i v/t nuôi 12 1.5.2 Đ-i v.i ngư&i 13 1.6 MEt sI lưu ý sL d ng probiotics 13 1.7 Y u tI Pnh hưQng ñ n hiRu quP c!a probiotics 13 1.8 Công nghR lên men 14 iv 1.8.1 Gi-ng vi sinh v/t 14 1.8.2 Nhân gi-ng vi sinh v/t 15 1.8.3 Lên men 16 1.9 Các d3ng ch phXm vi sinh v>t (VSV) 18 1.9.1 Ch$ ph m nhân nuôi môi trư&ng th4ch b5ng 18 1.9.2 Ch$ ph m VSV d4ng d#ch th 18 1.9.3 Ch$ ph m VSV d4ng khô 19 1.9.4 Ch$ ph m VSV d4ng ñông khô 19 1.9.5 Ch$ ph m d4ng b t ch)t mang 20 1.10 Tình hình nghiên c^u 24 1.10.1 Trên th$ gi.i 24 1.10.2 Trong nư.c 26 CHƯƠNG N_I DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CdU 33 2.1 NEi dung nghiên c^u 33 2.2 Phương pháp nghiên c^u 33 2.2.1 Đ-i tư9ng v/t li;u 33 2.2.2 Phương pháp phân l/p b(o qu(n m?u 34 2.2.3 Phương pháp phân tích ñ#nh lư9ng vi sinh v/t 36 2.2.4 Phương pháp nghiên c+u xây dBng quy trình nuôi c)y chDng vi sinh probiotics 38 2.2.5 Phương pháp nghiên c+u (nh hưEng cDa ch$ ph m probiotics chăn nuôi gà 41 2.2.6 Phương pháp xF lý th-ng kê 41 CHƯƠNG KfT QU NGHIÊN CdU VÀ TH O LUgN 42 3.1 Nghiên c^u mô tP ñhc ñiim sinh h,c c!a mEt sI ch!ng vi sinh Probiotics 42 3.1.1 ĐHc ñi m hình thái khu n l4c cDa chDng vi sinh probiotics 42 3.1.2 ĐHc ñi m sinh hIc cDa chDng vi sinh probiotics 43 v 3.1.3 M-i tương quan giKa ñ ñ*c (chM s- OD) s- lư9ng t$ bào (CFU/ml) 43 3.2 Nghiên c^u quy trình lên men ch!ng vi sinh probiotics t3o ch phXm probiotics 47 3.2.1 Tnh hưEng cDa môi trư&ng nuôi c)y ñ$n sinh trưEng cDa chDng vi sinh probiotics 47 3.2.2 Tnh hưEng cDa th&i gian nuôi c)y ñ$n sinh trưEng cDa chDng vi sinh probiotics 53 3.2.3 Tnh hưEng cDa pH ñ$n sinh trưEng cDa chDng vi sinh probiotics 55 3.2.4 Tnh hưEng cDa nhi;t ñ ñ$n sinh trưEng cDa chDng vi sinh probiotics 57 3.2.5 Tnh hưEng cDa ñ lVc ñ$n sinh trưEng cDa chDng vi sinh probiotics 59 3.2.6 Xây dBng qui trình t4o ch$ ph m probiotics 61 3.3 nh hưQng c!a thki gian bPo quPn ñ n m>t ñE VSV c!a ch phXm 63 3.4 Nghiên c^u hiRu quP c!a viRc sL d ng ch phXm probiotics chăn nuôi gà 64 3.4.1 Tnh hưEng cDa ch$ ph m probiotics ñ$n s- lư9ng tr+ng 65 3.4.2 Tnh hưEng cDa ch$ ph m probiotics ñ$n kh-i lư9ng tr+ng 67 3.4.3 Tnh hưEng cDa ch$ ph m probiotics ñ$n kh( kháng b;nh E gà ñX tr+ng 69 KfT LUgN VÀ Đm NGHn 73 TÀI LI9U THAM KH O 75 vi CÁC CHo VIfT TpT _ MRS Deman Rogosa Sharpe _ ĐTQH Đcc tính quang h/c _MCN Mct cDt ngang _ MT Môi trư:ng _ B.subtilis Bacillus subtilis _ L.acidophilus Lactobacillus acidophilus _ S.cerevisiae Saccharomyces cerevisiae _ VSV Vi sinh v$t _ rpm Rounds per minutes (vòng mfi phút) _ TB Trung bình vii DANH M C CÁC B NG B#ng 1.1: Tình hình chăn nuôi gia cQm Đak Lak 10 năm (2000_2009) 32 B#ng 2.1: inh hưjng c a thành phQn MT ñ!n sinh trưjng c a B.subtilis 38 B#ng 2.2: inh hưjng c a thành phQn MT ñ!n sinh trưjng c a L.acidophilus 38 B#ng 2.3: inh hưjng c a thành phQn MT ñ!n sinh trưjng c a S.cerevisiae 39 B#ng 2.4: inh hưjng c a thành phQn MT ñ!n sinh trưjng c a Nitrosomonas sp 39 B#ng 3.1: Hình thái khukn lKc c a ch ng vi sinh v$t 42 B#ng 3.2: Hình thái t! bào c a ch ng vi sinh probiotics 43 B#ng 3.3: Chl s OD s lư)ng t! bào (CFU/ml) B.subtilis 43 B#ng 3.4: Chl s OD s lư)ng t! bào (CFU/ml) L.acidophilus 44 B#ng 3.5: Chl s OD s lư)ng t! bào (CFU/ml) S.cerevisiae 45 B#ng 3.6: Chl s OD s lư)ng t! bào (CFU/ml) Nitrosomonas sp 46 B#ng 3.7: inh hưjng c a thành phQn môi trư:ng ñ!n sinh trưjng c a B subtilis 48 B#ng 3.8: inh hưjng c a môi trư:ng nuôi c+y ñ!n sinh trưjng L.acidophilus 49 B#ng 3.9: inh hưjng c a môi trư:ng nuôi c+y ñ!n sinh trưjng c a S.cerevisiae 50 B#ng 3.10: inh hưjng c a môi trư:ng nuôi c+y ñ!n sinh trưjng c a Nitrosomonas sp 52 B#ng 3.11: inh hưjng c a th:i gian nuôi c+y ñ!n sinh trưjng c a ch ng 54 viii B#ng 3.12: inh hưjng c a pH ñ!n sinh trưjng c a ch ng 56 B#ng 3.13 inh hưjng c a nhi t ñ- ñ!n sinh trưjng c a ch ng 58 B#ng 3.14: inh hưjng c a t c ñ- lDc ñ!n sinh trưjng c a ch ng 59 B#ng 3.15: inh hưjng c a th:i gian b#o qu#n ñ!n sinh trưjng c a ch ng 63 B#ng 3.16: inh hưjng c a ch! phkm probiotics ñ!n s lư)ng tr ng 66 B#ng 3.17: inh hưjng c a ch! phkm probiotics ñ!n kh i lư)ng tr ng 67 B#ng 3.18: S gà bq nhiHm b nh TB ô theo ngày 70 Ph l c 7nh hư8ng c9a th i gian b o qu n ñ n sinh trư8ng c9a ch9ng - B.subtilis T ng m t ñ S khu n l c ñ pha loãng Th i gian khu n l c (tháng) LLL 10*7 10*8 (CFU/ml) 135 45 1,5×1010 137 99 30 1,1×1010 105 82 22 9,0×109 85 66 17 7,3×109 71 56 10 5,9×109 58 45 4,6×109 46 - L.acidophilus T ng m t ñ S khu n l c ñ pha loãng Th i gian khu n l c (tháng) LLL 10*7 10*8 (CFU/ml) 124 37 1,4×1010 131 109 31 1,2×1010 112 86 26 9,7×109 93 70 19 7,9×109 78 52 11 5,6×109 55 39 6 4,1×109 41 - S.cerevisiae Th i gian (tháng) 10*8 T ng m t ñ khu n l c (CFU/ml) 31 1,3×1010 22 9,3×109 15 8,2×109 12 5,6×109 10 4,9×109 4,2×109 10*8 T ng m t ñ khu n l c (CFU/ml) 32 1,1×1010 27 9,5×109 20 8,1×109 16 6,4×109 4,5×109 2,7×109 S khu n l c ñ pha loãng LLL 2 2 2 10*7 120 125 85 89 78 80 51 55 46 48 39 42 - Nitrosomonas sp Th i gian (tháng) S khu n l c ñ pha loãng LLL 2 2 2 10*7 105 98 85 89 74 76 57 61 39 46 25 27 Ph l c 8: 7nh hư8ng c9a ch phIm probiotics chăn nuôi gà 7nh hư8ng ñ n sK lưLng trMng S lưCng ĐC CT1 trDng L1 L2 L3 L1 L2 L3 L1 TB/ô/tháng 420 427 429 442 446 448 456 421 430 433 445 448 449 459 426 429 435 449 451 451 462 428 431 435 451 451 452 465 428 431 437 452 453 454 466 434 436 436 455 455 456 469 CT2 L2 L3 462 461 465 465 469 470 463 464 466 466 469 471 Title 7nh hư8ng c9a ch phIm probiotics ñ n sK lưLng trMng ! % " # /3" % & ' & (% # (% ' !) * , ! ! 335", ) * ' + ' + & & # -3-#-"222 /3 # , 7777777777777777777777777777777777777777777777777 # 33."222 52-5"222 335"55$ 5252"222 , 3/2" 5#23"222 7777777777777777777777777777777777777777777777777 # 3-/",,, #- "222 3-5"222 #-53"222 , 3,2"222 #-$2"222 3,#",,, #-$3"222 / 3-5" #-5."222 3,/",,, #,2."222 33/",,, #,,."222 33 ",,, #,3-"222 $ 3/2",,, #,/#"222 #2 3/#",,, #,/3"222 ## 3/,"222 #,/$"222 #3//",,, #, "222 #, 3.2",,, #,5#"222 #3 3.#",,, #,53"222 #/ 3.3",,, #,$,"222 # 3./",,, #,$."222 # #5 , # 3.5"222 #323"222 #5 2"222 #3#2"222 7777777777777777777777777777777777777777777777777 : ! % : & % 4< 4< % = 77777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777 # # " 23 5,"5/ "5#3/ 2"2222 # ## $,"$- .$," #55" /5 2"2222 7, ,3 #-3"$., ," / 77777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777 /, #-25."/$, 77777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777 && & % 2"3,> ; & Phân h ; : ! & , Phân h[...]... ñV tài: Nghiên c u lên men các ch ng vi sinh probiotics và ng d'ng trong chăn nuôi gà 2 M'c tiêu c a ñ tài i Xây d0ng quy trình nuôi cLy nhân gi ng các ch-ng vi sinh probiotics ñ 1ng d3ng trong chăn nuôi gà i Đánh giá hi"u qu% c-a ch ph)m probiotics trong chăn nuôi gà ñk tr1ng 3 Ý nghĩa khoa h/c K t qu% nghiên c1u c-a ñV tài góp ph n làm sáng tl vai trò c-a vi" c sT d3ng các ch-ng vi sinh probiotics. .. n c-a gi ng và m t ñ t bào vi sinh v t c n nhân 1.8.3 Lên men Là giai ño!n nuôi cLy vi sinh v t ñ chúng t!o s%n ph)m hoBc sinh kh i vi sinh v t… Đây là khâu quy t ñ9nh m t quy trình lên men Ngư=i ta thư=ng sT d3ng hai phương pháp lên men là lên men bV mBt và lên men chìm 1.8.3.1 Lên men bV mBt Lên men bV mBt là th0c hi"n nuôi cLy vi sinh v t trên bV mBt môi trư=ng d9ch th hoBc bán rZn i Nuôi cLy trên... b"nh và tăng trư;ng trong chăn nuôi [20] NhiVu trư=ng h p, con ngư=i quá l!m d3ng kháng sinh trong y hXc, cônginông nghi"p ñã xuLt hi"n vi khu)n kháng kháng sinh T, ñó li"u pháp m8i ra ñ=i là dùng vi sinh probiotics [59] Nghiên c1u vai trò c-a vi sinh v t trong ch ph)m probiotics ñã ñư c quan tâm ; m t s nư8c trên th gi8i HX ñã nghiên c1u và 1ng d3ng trong chăn nuôi gia c m, gia súc, th0c ph)m,… Probiotics. .. và s ... ñV tài: Nghiên c u lên men ch ng vi sinh probiotics ng d'ng chăn nuôi gà M'c tiêu c a ñ tài i Xây d0ng quy trình nuôi cLy nhân gi ng ch-ng vi sinh probiotics ñ 1ng d3ng chăn nuôi gà i Đánh... pháp lên men lên men bV mBt lên men chìm 1.8.3.1 Lên men bV mBt Lên men bV mBt th0c hi"n nuôi cLy vi sinh v t bV mBt môi trư=ng d9ch th hoBc bán rZn i Nuôi cLy bV mBt d9ch th (dùng cho nhóm vi sinh. ..B GIÁO D C VÀ ÁÀO T O TRƯ NG Á I H C TÂY NGUYÊN PHÙNG DI P LÀI NGHIÊN C U LÊN MEN CÁC CH!NG VI SINH PROBIOTICS VÀ NG D NG TRONG CHĂN NUÔI GÀ Chuyên ngành: Sinh h c th c nghi m Mã