vi

BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM KHOA CNSH & KTMT BÀI TIỂU LUẬN HOẠT ĐỘ eNZYME GVHD : Hoàng Xuân Thế SVTH : Nguyễn Thanh Tuyền 2208140008 Nguyễn Thị Tường Vi 2208140009 HOẠT ĐỘ ENZYME PHƯƠNG PHÁP NGUYÊN TẮC TIÊU CHUẨN OAOC Phương pháp xác định hoạt độ enzyme Người ta không định lượng enzyme cách trực tiếp mà thường xác đ ịnh gián ti ếp thơng qua xác định độ hoạt động (cịn gọi hoạt độ) enzyme Để xác định hoạt độ enzyme dịch chiết chế phẩm người ta th ường dùng ph ương pháp vật lý hóa học Các phương pháp, so màu, đo khí, đo đ ộ phân c ực, đo đ ộ nh ớt, chu ẩn đ ộ dùng phổ biến nghiên cứu định lượng phản ứng enzyme  Có thể chia ba nhóm phương pháp sau: Đo lượng chất bị hay lượng sản phẩm tạo thành thời gian nh ất đ ịnh ứng v ới m ột n ồng đ ộ enzyme xác định Đo thời gian cần thiết để thu lượng biến thiên nh ất đ ịnh c ch ất hay s ản ph ẩm v ới m ột n ồng đ ộ enzyme nh ất đ ịnh Chọn nồng độ enzyme để thời gian nh ất định thu đ ược bi ến thiên nh ất đ ịnh v ề c ch ất hay s ản ph ẩm PROTEASE  - phương pháp anson Nguyên tắc: Dùng dịch chiết có enzyme thủy phân protein Sau diệt enzyme kết tủa protein chưa bị thủy phân trichloacetic acid định lượng sản phẩm tạo thành phản ứng phản ứng màu với thuốc thử Folin, kết phân tích dựa vào đồ thị chuẩn tyrosine đơn vị hoạt độ protease lượng enzyme phân giải protein tạo thành sản phẩm hòa tan trichloacetic acid tương ứng với micromol tyrosine (0,181 mg) phút, 300C  - phương pháp babakina: Nguyên tắc : phương pháp dựa thủy phân casein ( hemoglobin) enzyme có dung dịch chế phẩm nghiên cứu Các liên kết peptit thủy phân làm giảm khả liên kết phân tử với HCl Xác định giảm khả liên kết cho phép xác định hoạt độ enzyme β- glucosidase  Nguyên tắc : phương pháp dựa sở thủy phân p- nitrophenylglucoza ( p-NPG) b ởi enzyme có dung dịch chế phẩm nghiên cứu thành p-nitrophenol ) p=NP)  Xác định lượng p-nitrophenyl tạo thành tính hoạt đ ộ enzyme Đo đ ộ h ấp th ụ c dung dịch sau phản ừng bước sóng 405nm xác định lượng p-nitrophenyl tạo thành HOẠT ĐỘ ENZYME AMILAZA α-Amylase Glucoamilaza HOẠT ĐỘ ENZYME AMILAZA α-Amylase Nguyên tắc:  Dựa sở thủy phân tinh bột E có dịch chế phẩm nghiên cứu tới dextrin có phân tử lượng khác  Đo cường độ màu tạo thành tinh bột sản phẩm thủy phân với iot máy so màu quang điện Tiêu chuẩn OAOC 985.29 Tiêu chuẩn OAOC 2009.01 HOẠT ĐỘ ENZYME AMILAZA Glucoamilaza Phương pháp vi lượng Phương pháp sử dụng E glucooxydaza HOẠT ĐỘ ENZYME AMILAZA Glucoamilaza Phương pháp vi lượng Nguyên tắc:  Dựa sở thủy phân tinh bột E glucoamilaza có chế phẩm nghiên cứu  Xác định lượng glucoza tạo thành tính hoạt độ E Tiêu chuẩn OAOC HOẠT ĐỘ ENZYME AMILAZA Glucoamilaza Sử dụng E glucooxydaza Nguyên tắc:  Dựa sở thủy phân tinh bột E glucoamilaza có chế phẩm nghiên cứu  Xác định lượng glucoza tạo thành qua phản ứng xác tác đặc hiệu E glucooxydaza xác định hoạt độ E Tiêu chuẩn OAOC 969.39 https://books.google.com.vn/books? id=D9RwcUKQsHsC&pg=PA161&lpg=PA161&dq=aoac+enzyme+amylase+glucoamylase&source=bl& ots=QhSwoPSMbG&sig=oqngTIKHGmhVMgpOv2GEjC1gI4g&hl=vi&sa=X&redir_esc=y#v=onepage &q=aoac%20enzyme%20amylase%20glucoamylase&f=false HOẠT ĐỘ ENZYME Phytaza Nguyên tắc:  Dựa sở thủy phân phytat natri E có dịch chế phẩm nghhiên cứu thành phosphate vô   Xác định lượng phosphate vô tạo thành tính hoạt độ E Phosphat vơ mơi trường axit yếu kết hợp với amoni hetamolypdat amoni monovanadat tạo thành phức màu vàng  Đo độ hấp thu ánh sáng bước sóng 415nm dung dịch sau phản ứng xác định lượng phosphat tạo thành TIÊU CHUẨN OAOC: 2000.12 HOẠT ĐỘ ENZYME Phytaza TIÊU CHUẨN OAOC: 2000.12 ... 2009.01 HOẠT ĐỘ ENZYME AMILAZA Glucoamilaza Phương pháp vi lượng Phương pháp sử dụng E glucooxydaza HOẠT ĐỘ ENZYME AMILAZA Glucoamilaza Phương pháp vi lượng Nguyên tắc:  Dựa sở thủy phân tinh bột E... id=D9RwcUKQsHsC&pg=PA161&lpg=PA161&dq=aoac+enzyme+amylase+glucoamylase&source=bl& ots=QhSwoPSMbG&sig=oqngTIKHGmhVMgpOv2GEjC1gI4g&hl =vi& sa=X&redir_esc=y#v=onepage &q=aoac%20enzyme%20amylase%20glucoamylase&f=false HOẠT ĐỘ ENZYME Phytaza