TRIMETHOPRIM Trimethoprimum C14H18N4O3 P.t.l: 290,3 Trimethoprim 2,4 diamino-5-(3,4,5-trimethoxybenzyl) pyrimidin, phải chứa từ 98,5 đến 101,0% C14H18N4O3, tính theo chế phẩm làm khô Tính chất Bột trắng trắng vàng Rất khó tan nước, khó tan ethanol 96%, tan cloroform, thực tế không tan ether Định tính Có thể chọn hai nhóm định tính sau: Nhóm I: A Nhóm II: B, C, D A Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) chế phẩm phải phù hợp với phổ hồng ngoại trimethoprim chuẩn (ĐC) B Hoà tan khoảng 25 mg chế phẩm ml dung dịch acid sulfuric 0,005 M (TT) (đun nóng cần), thêm ml dung dịch kali permanganat (TT) 1,6% dung dịch natri hydroxyd 0,1 N (TT) Đun sôi cho vào dung dịch nóng 0,4 ml dung dịch formaldehyd (TT) Trộn đều, thêm ml dung dịch acid sulfuric 0,5 M, trộn đun sôi Làm lạnh lọc Thêm vào dịch lọc ml methylen clorid (TT), lắc mạnh Lớp hữu có huỳnh quang xanh lục quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 365 nm C Điểm chảy chế phẩm phải từ 199 đến 203 °C (Phụ lục 6.7) D Hoà tan khoảng 20 mg chế phẩm dung dịch natri hydroxyd 0,1 N (TT) pha loãng thành 100,0 ml với dung môi Pha loãng 1,0 ml dung dịch thành 10,0 ml dung dịch natri hydroxid 0,1 N (TT) Tiến hành đo phổ hấp thụ tử ngoại (Phụ lục 4.1) dung dịch khoảng 230 nm đến 350 nm Dung dịch cho cực đại hấp thụ 287 nm A(1%, cm) bước sóng cực đại từ 240 đến 250 Màu sắc dung dịch Hoà tan 0,5 g chế phẩm 10 ml hỗn hợp methylen clorid - methanol - nước (5 : 4,5 : 1) Dung dịch thu màu đậm màu mẫu VN7 (Phụ lục 9.3 Phương pháp 2) Tạp chất liên quan Không 0,2% Xác định phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silicagel GF254 (TT) Dung môi khai triển: Ethyl acetat - methanol - nước - acid formic khan (85 : 10 : : 2) Dung dịch thử: Hoà tan 0,2 g chế phẩm hỗn hợp nước - methanol - cloroform (1 : 4,5 : 5) thành ml dung dịch Dung dịch đối chiếu: Pha loãng ml dung dịch thử thành 10 ml, lấy ml dung dịch pha thành 50 ml hỗn hợp dung môi dung dịch thử Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng µl dung dịch Triển khai sắc ký bình sắc ký không bão hoà đến dung môi 17 cm Làm khô mỏng luồng khí lạnh phút quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm Đặt vào đáy bình sắc ký đĩa (để bay clor) có chứa hỗn hợp dung dịch acid hydrocloric M - nước - dung dịch kali permanganat 1,5% (1 : : 2), đậy bình để 15 phút Đặt mỏng làm khô vào đậy bình mỏng tiếp xúc với clor phút Rút mỏng đuổi khí clor thừa luồng khí lạnh nhỏ giọt dung dịch kali iodid - hồ tinh bột (TT) vào vùng chất hấp phụ phía điểm xuất phát không cho màu xanh Phun lên mỏng dung dịch kali iodid - hồ tinh bột (TT) quan sát ánh sáng thường Trong hai lần quan sát, ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm trước xử lý với clor ánh sáng ban ngày sau phun thuốc thử vết phụ sắc ký đồ dung dịch thử không đậm màu vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu Kim loại nặng Không 20 phần triệu (Phụ lục 9.4.8) Lấy 1,0 g chế phẩm tiến hành thử theo phương pháp Dùng ml dung dịch chì mẫu 10 phần triệu (TT) để chuẩn bị mẫu đối chiếu Mất khối lượng làm khô Không 1,0% (Phụ lục 9.6) (1,000 g; 100 - 105 °C) Tro sulfat Không 0,1% (Phụ lục 9.9, phương pháp 2) Dùng 1,0 g chế phẩm Định lượng Hoà tan 0,250 g chế phẩm 50 ml acid acetic khan (TT) Chuẩn độ dung dịch acid percloric 0,1 N (CĐ) Xác định điểm kết thúc phương pháp đo điện (Phụ lục 10.2) ml dung dịch acid percloric 0,1 N (CĐ) tương đương với 29,03 mg C14H18N4O3 Tác dụng Kháng khuẩn Chế phẩm Viên nén