ROXITHROMYCIN Roxithromycinum C41H76N2O15 P.t.l: 837,0 Roxithromycin (3R,4S,5S,6R,7R,9R,11S,12R,13S,14R)-4-[(2,6-dideoxy-3-C-methyl-3-Omethyl-α-L-ribo-hexopyranosyl)oxy]-14-ethyl-7,12,13-trihydroxy-10-[(E)-[(2methoxyethoxy)methoxy]imino]-3,5,7,9,11,13-hexomethyl-6-[[3,4,6-trideoxy-3(dimethylamino)-β-D-xylo-hexapyranosyl]oxy]oxacyclotetradecan-2-on, phải chứa từ 96,0 đến 102,0% C41H76N2O15 tính theo chế phẩm làm khô Tính chất Bột kết tinh trắng, đa hình Rất khó tan nước, dễ tan aceton, ethanol 96% methylen clorid Khó tan dung dịch acid hydrocloric loãng Định tính A Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) chế phẩm phải phù hợp với phổ hồng ngoại roxithromycin chuẩn (ĐC) Nếu có khác biệt, đo lại phổ dung dịch chế phẩm chất chuẩn có nồng độ 9,0% methylen clorid (TT) B Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (Phụ lục 5.3) Trên sắc ký đồ dung dịch thử (2) phần định lượng phải cho pic có thời gian lưu tương ứng với pic sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (1) Độ màu sắc dung dịch Hòa tan 0,2 g chế phẩm methanol (TT), pha loãng thành 20 ml với dung môi Dung dịch thu phải (Phụ lục 9.2) không màu (Phụ lục 9.3, phương pháp 2) Góc quay cực riêng Từ -93 đến -96o, tính theo chế phẩm làm khô (Phụ lục 6.4) Hòa tan 0,500 g chế phẩm aceton (TT), pha loãng thành 50,0 ml với dung môi Tạp chất liên quan Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (Phụ lục 5.3) Pha động A: Acetonitril - dung dịch amoni dihydrophosphat 5,97% chỉnh pH đến 4,3 dung dịch natri hydroxyd loãng (26 : 74) Pha động B: Nước - acetonitril (30 : 70) Dung môi pha mẫu: Acetonitril - dung dịch amoni dihydrophosphat (TT) 4,86% chỉnh pH đến 5,3 dung dịch natri hydroxyd loãng (TT) (30 : 70) Dung dịch thử : Hòa tan 50,0 mg chế phẩm dung môi pha mẫu, pha loãng thành 25,0 ml với dung môi Dung dịch đối chiếu (1): Hòa tan 50,0 mg roxithromycin chuẩn (ĐC) dung môi pha mẫu, pha loãng thành 25,0 ml với dung môi Dung dịch đối chiếu (2): Pha loãng 1,0 ml dung dịch đối chiếu (1) thành 100,0 ml với dung môi pha mẫu Dung dịch đối chiếu (3): Hòa tan 20,0 mg roxithromycin để xác định độ thích hợp hệ thống (ĐC) dung môi pha mẫu, pha loãng thành 10,0 ml với dung môi Dung dịch đối chiếu (4): Pha loãng 1,0 ml toluen (TT) thành 100,0 ml với acetonitril (TT) Pha loãng 0,2 ml dung dịch thu thành 200,0 ml với dung môi pha mẫu Điều kiện sắc ký: Cột thép không gỉ (15 cm x 4,6 mm) nhồi pha tĩnh hạt hình cầu end-capped octadecylsilyl silica gel (5 µm) với kích thước lỗ 10 nm carbon gắn kết khoảng 19% Duy trì nhiệt độ cột 15 oC Detector quang phổ tử ngoại bước sóng 205 nm Thể tích tiêm: 20 µl, trì nhiệt độ buồng tiêm oC Tốc độ dòng: 1,1 ml/phút với chương trình dung môi: Thời gian (phút) - 50 50 - 51 51 - 80 80 - 81 81 - 100 Pha động A (% tt/tt) 100 100 → 90 90 90 → 100 100 Pha động B (% tt/tt) 0 → 10 10 10 → 0 Tiến hành: Tiêm dung dịch thử, dung dịch đối chiếu (2), (3) (4) Thời gian lưu tương đối: Thời gian lưu tương đối so với roxithromycin (thời gian lưu khoảng 22 phút) tạp chất G (2-methoxyethoxy)methoxy]methyl]oxim) khoảng 1,15 Độ thích hợp hệ thống: Tỷ số peak-Valley (HP/HV): Ít phải 2,0 (tỷ số áp dụng để đánh giá độ thích hợp hệ thống phép thử tạp chất liên quan, pic không tách hoàn toàn tới chân đường nền) HP chiều cao tính từ đường pic tạp chất G; H V chiều cao tính từ đường đến điểm thấp đường cong phân tách pic tạp chất G pic roxithromycin sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (3) Giới hạn: Tạp chất G: Diện tích pic tạp chất G sắc ký đồ dung dịch thử không lớn diện tích pic dung dịch đối chiếu (2) (1,0%) Từng tạp chất có diện tích pic không lớn 0,5 lần diện tích pic dung dịch đối chiếu (2) (0,5%) Tổng diện tích pic tạp chất không lơn lần diện tích pic dung dịch đối chiếu (2) (3,0%) Bỏ qua pic có diện tích nhỏ 0,05 lần diện tích pic dung dịch đối chiếu (2) (0,05%) Bỏ qua pic toluen (dùng dung dịch đối chiếu (4) để xác định pic toluen) Kim loại nặng Không 10 phần triệu (Phụ lục 9.4.8) Hòa tan 2,0 g chế phẩm hỗn hợp nước - aceton (15 : 85), pha loãng thành 20 ml với dung môi Lấy 12 ml dung dịch thử tiến hành theo phương pháp Chuẩn bị mẫu đối chiếu cách pha loãng dung dịch chì mẫu 100 phần triệu (TT) với hỗn hợp nước - aceton (15 : 85) để dung dịch chì phần triệu Nước Không 3,0% (Phụ lục 10.3) Dùng 0,200 g chế phẩm Tro sulfat Không 0,1% (Phụ lục 9.9, phương pháp 2) Dùng 1,0 g chế phẩm Định lượng Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (Phụ lục 5.3) Điều kiện sắc ký phần thử tạp chất liên quan với số thay đổi sau: Kích thước cột: 25 cm x 4,6 mm Pha động: Acetonitril (TT) - dung dịch amoni dihydrophosphat 4,91% điều chỉnh pH đến 5,3 dung dịch natri hydroxyd loãng (TT) (307 : 693) Tốc độ dòng 1,5 ml/phút Tiến hành: Tiêm dung dịch thử, dung dịch đối chiếu (1) (3) Thời gian lưu roxithromycin khoảng 12 phút Độ thích hợp hệ thống: Tỷ số peak-Valley (HP/HV): Ít phải 1,5 HP chiều cao tính từ đường pic tạp chất G; HV chiều cao tính từ đường đến điểm thấp đường cong phân tách pic tạp chất G pic roxithromycin sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (3) Tính toán hàm lượng C41H76N2O15 dựa vào diện tích pic dung dịch thử dung dịch đối chiếu (1) Bảo quản Đựng đồ bao gói kín Nhãn Phải quy định rõ thời hạn sử dụng điều kiện bảo quản Loại thuốc Kháng khuẩn Chế phẩm Viên nén, thuốc bột