QUININ BISULFAT Quinini bisulfas C20H24N2O2 H2SO4 7H2O P.t.l: 548,6 Quinin bisulfat (8S, 9R)-6'-methoxycinchonan-9-ol hydrosulfat heptahydrat, phải chứa từ 98,5 đến 101,5% C20H24N2O2 H2 SO4, tính theo chế phẩm khan Tính chất Tinh thể không màu hay bột kết tinh trắng, không mùi, vò đắng, lên hoa không khí khô Dễ tan nước, tan ethanol 96% Đònh tính A Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel G (TT) Dung môi khai triển: Diethylamin - ether - toluen (15 : 36 : 60) Dung dòch thử: Dung dòch chế phẩm 1,0% methanol (TT) Dung dòch đối chiếu (1): Dung dòch quinin sulfat chuẩn (ĐC) 1,0% methanol (TT) Dung dòch đối chiếu (2): Dung dòch chứa 1,0% chất quinidin sulfat chuẩn quinin sulfat chuẩn (ĐC) methanol (TT) Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng µl dung dòch Sau triển khai sắc ký, lấy mỏng ra, làm khô luồng không khí 15 phút chạy sắc ký nhắc lại Sấy khô mỏng 105 oC 30 phút, để nguội phun thuốc thử iodoplatinat (TT) Vết sắc ký đồ dung dòch thử phải tương tự vò trí, màu sắc kích thước với vết sắc ký đồ dung dòch đối chiếu (1) Phép thử có giá trò sắc ký đồ dung dòch đối chiếu (2) cho vết tách rõ ràng B Chế phẩm đáp ứng phép thử “pH” C Chế phẩm cho phản ứng đặc trưng sulfat (Phụ lục 8.1) pH pH dung dòch chế phẩm 1%: 2,8 - 3,4 (Phụ lục 6.2) Góc quay cực riêng Từ -208 đến -216o, tính theo chế phẩm khan (Phụ lục 6.4) Dùng dung dòch chế phẩm 3% dung dòch acid hydrocloric 0,1 M (TT) để đo Các alcaloid cinchona khác Xác đònh phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Pha động: Hoà tan 6,8 g kali dihydrophosphat 3,0 g hexylamin 700 ml nước, điều chỉnh pH đến 2,8 dung dòch acid phosphoric M (TT), thêm 60 ml acetonitril (TT) pha loãng thành 1000 ml nước Dung dòch thử: Hoà tan 20 mg chế phẩm ml pha động, đun nóng nhẹ cần thiết, pha loãng thành 10 ml với pha động Dung dòch đối chiếu (1) dung dòch đối chiếu (2) chuẩn bò tương tự dung dòch thử, thay chế phẩm quinin sulfat chuẩn (ĐC) thu dung dòch đối chiếu (1) quinidin sulfat chuẩn (ĐC) thu dung dòch đối chiếu (2) Dung dòch đối chiếu (3): Pha loãng 1,0 ml dung dòch đối chiếu (1) thành 10,0 ml với pha động Pha loãng 1,0 ml dung dòch thu thành 50,0 ml với pha động Dung dòch đối chiếu (4): Hoà tan 10 mg thioure pha động thành 10 ml Dung dòch phân giải: Hỗn hợp đồng thể tích dung dòch đối chiếu (1) dung dòch đối chiếu (2) Điều kiện sắc ký: Cột thép không gỉ (25 cm x 4,6 mm) nhồi pha tĩnh C (5 µm) (Hypersil ODS µm thích hợp) Detector quang phổ hấp thụ tử ngoại đặt bước sóng 250 nm cho sắc ký đồ dung dòch đối chiếu (4) 316 nm cho sắc ký đồ dung dòch khác Tốc độ dòng: 1,5 ml/phút Thể tích tiêm: 10 µl Cách tiến hành: Tiêm dung dòch đối chiếu (2) (4), cần thiết điều chỉnh nồng độ acetonitril pha động để sắc ký đồ thu từ dung dòch đối chiếu (2) có hệ số dung lượng pic quinidin 3,5 đến 4,5, Vo tính từ pic thioure sắc ký đồ dung dòch đối chiếu (4) Tiêm dung dòch đối chiếu (1), (2), (3) dung dòch phân giải Sắc ký đồ dung dòch đối chiếu (1) cho pic quinin pic dihydroquinin có thời gian lưu tương đối so với quinin khoảng 1,4 Sắc ký đồ dung dòch đối chiếu (2) cho pic quinidin pic dihydroquinidin có thời gian lưu tương đối so với quinindin khoảng 1,2 Sắc ký đồ dung dòch phân giải cho pic: quinin, dihydroquinin, quinidin, dihydroquinidin đònh tính so sánh thời gian lưu chúng với pic tương ứng sắc ký đồ dung dòch đối chiếu (1) dung dòch đối chiếu (2) Phép thử có giá trò sắc ký đồ dung dòch phân giải có độ phân giải pic quinin quinidin 1,5 độ phân giải pic dihydroquinidin quinin 1,0 tỷ số tín hiệu pic nhiễu đường sắc ký đồ dung dòch đối chiếu (3) Tiêm dung dòch thử Tiến hành sắc ký khoảng thời gian gấp 2,5 lần thời gian lưu pic Tính hàm lượng phần trăm tạp chất liên quan phương pháp chuẩn hoá, bỏ qua pic có diện tích nhỏ diện tích pic sắc ký đồ dung dòch đối chiếu (3) (0,2%) Hàm lượng dihydroquinin không 10%, hàm lượng tạp chất liên quan rửa giải trước quinin không 5% hàm lượng tạp chất liên quan khác không 2,5% Tro sulfat Không 0,1% (Phụ lục 9.9, phương pháp 1) Nước Từ 19,0 đến 25,0% (Phụ lục 10.3) Dùng 0,20 g chế phẩm Cation chuẩn độ Phải từ 75,3 đến 79,6%, tính theo chế phẩm khan, xác đònh phương pháp sau: Thêm vào dung dòch nước thu mục đònh lượng 0,1 ml dung dòch phenolphtalein (TT) đònh lượng dung dòch acid hydrocloric 0,1 N (CĐ) ml dung dòch natri hydroxyd 0,1 N (CĐ) tương đương với 16,32 mg [C20H26N2O2]2+ Đònh lượng Hoà tan 0,450 g chế phẩm 15 ml nước Thêm 25 ml dung dòch natri hydroxyd 0,1 M (CĐ) chiết cloroform (TT) lần, lần 25 ml Tập trung dòch chiết cloroform (TT) rửa 20 ml nước Gộp dung dòch nước thu để đem thử cation chuẩn độ Làm khan dòch chiết cloroform (TT) natri sulfat khan (TT), bốc tới khô áp suất kPa, hoà tan cắn lại 50 ml acid acetic khan (TT) Tiến hành chuẩn độ theo phương pháp đònh lượng môi trường khan (Phụ lục 10.6, phương pháp 1), dùng dung dòch tím tinh thể (TT) làm thò ml dung dòch acid percloric 0,1 N (CĐ) tương đương với 21,13 mg C20H24N2O2 H2SO4 Bảo quản Trong lọ kín, tránh ánh sáng Loại thuốc Trò sốt rét Chế phẩm Viên nén