Môn: CN enzyme Bài tập động học Enzyme Bài 1: Cho Enzyme : lysozyme Cơ chất : NAM-NAG Lysozyme,một enzyme co nươc mắt thủy phân liên kết beta-1,4-glycoside đường đôi nói Vận đầu ban đầu (Vo) đo với nồng độ chất NAM-NAG từ 0.3 mM to 9.0 mM Vận tốc phản ứng enzyme đo trường hợp không có chất ức chế mM chất ức chế X mM chất ức chế Y Thí nghiệm động học cho kết dứơi đây: [NAM-NAG] Vo (mmoles/min) Không ức chế Vo (mmoles/min) + Chất ức chế I= X Vo (mmoles/min) + Chất ức chế I=Y 0.3 mM 0.5 mM 1.0 mM 3.0 mM 9.0 mM 10.4 14.5 22.5 33.8 40.5 4.1 6.4 11.3 22.6 33.8 2.8 3.9 5.5 7.8 9.1 a) Vẽ cấu trúc NAM-NAG b) Tính Km, Vmax trường hợp Xác định dạng ức chế Bài Để xác định hoạt tính enzyme vận tốc phản ứng , mL cellubiose (100 µmol/ml) 44 ml đệm khuấy bình Phản ứng xảy đưa vào hỗn hợp phản ứng 1ml enzyme beta-glucosidase chứa mg protein/ml Ở 1, 5, 10, 15 30 phút , 0.1 ml mẫu lấy từ hỗn hợp phản ứng nồng độ glucose xác định Kq sau: Thời gian (phút) 10 15 30 Nồng độ glucose (µmol/mL) 0.05 0.23 0.38 0.52 1.03 a Tính hoạt tính enzyme beta-glucosidase (U/mL) dd enzyme hoat tính riêng enzyme dd (U/mg protein)? b Tính vận tốc ban đầu pư? Bài 3: Một chất carohydrate (S) thủy phân có mặt enzyme với thông số động học M-M Km= 200 mol/m3 Vmax = 100 mol/m3min Viết biểu thức thay đổi s theo t thiết bị phản ứng theo mẻ với nồng độ chất ban đầu 300 mol/m3 TS Nguyễn Hoài Hương Môn: CN enzyme Bài Thông số động học Km=0.01 mol/L 10% chất tiêu thụ phút Nồng độ chất ban đầu 3.4 x10-4 mol/L Cho pứ tuân thủ động học M-M A) Tính vmax B) Tính nồng độ chất sau 15 phút TS Nguyễn Hoài Hương