quy trình xây dựng bộ kit phát hiện nhanh vi sinh vật

BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HCM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC & KỸ THUẬT MÔI TRƯỜNG ĐỀ TÀI Công nghệ lên men để sản xuất chế phẩm sinh học có khả tính cao Công nghệ lên men Page GVHD: Đỗ Thị Hoàng Tuyến Nhóm: TP Hồ Chí Minh, tháng 05 năm 2016 Mục lục 1.1 Công nghệ lên men Page DANH SÁCH CÁC THÀNH VIÊN TRONG NHÓM STT HỌ VÀ TÊN MSSV Trang Thị Ánh Tuyết 2008130095 Huỳnh Thị Phương Khương 2008130096 Phan Huy Hoàng 2003130063 Nguyễn Bảo Anh 2008130046 Dương Vũ Linh 200813009 Công nghệ lên men Page Lời mở đầu Các chứng khoa học phát triển hỗ trợ nghiên cứu học lâm sang cho probiotics cung cấp lợi ích sức khỏe Là chế phẩm sinh học nhạy cảm với nhiều yếu tố môi trường, truyền nhiều chủng có nguồn gốc từ ruột phức tạp hầu hết chủng thương mại lựa chọn sở tính công nghệ chúng loại trừ số chủng có tính chất y tế Đến nay, sản xuất probiotic thực việc sử dụng phương pháp lên men truyền thống, số trường hợp kết hợp với việc sử dụng tác nhân không gây chết để tăng cường khả phát triển tế bào, việc bổ sung chất bảo vệ cung cấp lớp vỏ capxun để bảo vệ tế bào Tuy nhiên, công nghệ lên men thông thường, chẳng hạn lên men liên tục hệ thống tế bào cố định, có tiềm để nâng cao hiệu suất loài vi sinh vật có điều kiện lên men khó Những công nghệ sử dụng để phát triển giống nhằm cải thiện sinh lý chức ruột để mở rộng phạm vi chế phẩm sinh học thương mại có sẵn, mở rộng ứng dụng sản phẩm Giới thiệu Công nghệ lên men Page Với kiến thức điều chỉnh yếu tố làm gia tăng nhanh chóng vi sinh vật đường ruột, bổ sung loại sản phẩm thực phẩm có vi khuẩn probiotic phát triển đáng kể Thuật ngữ "probiotic" đề cập đến tác dụng vi sinh vật xác định, sản phẩm có chứa vi sinh vật khả thi, (chủ yếu lactobacilli bifidobac-tiêu chuẩn về) với số lượng đủ để làm thay đổi hệ vi sinh khoang thể vật chủ mà mang lại ảnh hưởng có lợi cho sức khỏe Có chứng khoa học ngày tăng trì hệ vi sinh vật đường ruột khỏe mạnh cung cấp số lợi ích sức khỏe cho thể chế phẩm sinh học đóng góp Tuy nhiên, có công nghệ lớn cho chế phẩm sinh học đó, có xuất xứ ruột, nhạy cảm với nhiều áp lực môi trường, chẳng hạn axit, oxy nhiệt Trước probiotic có lợi cho sức khỏe người phải đáp ứng số tiêu chí Thứ nhất, pro-biotic phải có khoa học xác nhận tính chất y tế chứng minh an toàn Nó cần phải có tính công nghệ cao để sản xuất quy mô lớn tích hợp vào sản phẩm thực phẩm mà không khả tồn chức tạo hương vị khó chịu kết cấu Ngoài ra, probiotic phải thể tỷ lệ sống cao trình hạ lưu (như ly tâm sấy khô) trình lưu trữ sản phẩm thực phẩm, sống cao thông qua đường tiêu hóa tính khả thi cao trang web hoạt động yêu cầu, với hoạt động cao môi trường ruột Tính khả thi chế phẩm sinh học thông số quan trọng thực phẩm probiotic phát triển Mặc dù số lượng tế bào cần thiết để tạo lợi ích điều trị đến khác chức căng thẳng ảnh hưởng sức khỏe mong muốn, mức độ tối thiểu chung 106 loại vi khuẩn probiotic khả thi mililit gram sản phẩm thực phẩm chấp nhận Một số yếu tố minh họa Hình ảnh hưởng đến khả tồn vi khuẩn probiotic đạt mục tiêu Mặc dù tính khả thi quan trọng của, số khảo sát biến động lớn khả sống thấp vi khuẩn probiotic thực phẩm Hiện chủng thương mại chủ yếu Công nghệ lên men Page lựa chọn cho sản phẩm công nghệ mình, loại trừ số chủng với hứa hẹn tính sức khỏe Do đó, nhu cầu thử nghiệm công nghệ cho phép sản lượng tế bào cao quy mô lớn đảm bảo ổn định probiotic thực phẩm mạnh mẽ, nhiều chủng gốc ruột khó khăn để tuyên truyền sống cao quan trọng cho hai lý kinh tế ảnh hưởng sức khỏe Ngoài ra, công nghệ hiệu dẫn đến hiệu sản phẩm lớn đa dạng hóa chủng với phát triển chủng công nghệ không phù hợp vào sản phẩm Bài viết thảo luận phát triển công nghệ lên men cho sản xuất vi khuẩn probiotic cách tiếp cận tiềm để nâng cao hiệu suất sinh vật khó tính suốt trình lên men, chế biến sâu, sử dụng sản phẩm thương mại, để cải thiện chức ruột Quy trình bao gồm ứng dụng tác nhân không gây chết sản xuất tế bào công nghệ lên men mới, chẳng hạn cố định lên men tế bào màng sinh học, hứa hẹn lĩnh vực sử dụng để thay đổi cấu sinh lý tế bào nhằm tối ưu hóa tồn chức hệ VSV đường ruột Bảng Các yếu tố ảnh hưởng đến khả tồn chế phẩm sinh học từ sản xuất đến đường tiêu hóa Công nghệ lên men Page Sự lên men: • • • • Thành phần môi trường phát triển Tính độc hại sản phẩm (ví dụ: axit hữu cơ, hydrogen peroxide) Oxy hòa tan Khối tế bào kết thúc Quá trình hạ lưu: • • • • • Áp lực Thành phần môi trường đông lạnh sấy Điều kiện nhiệt độ khắc nghiệt (sấy phun, sấy lạnh) Áp suất khí oxy Thẩm thấu nội bào Lưu trữ: • • • • • Axit hãng thực phẩm Áp suất khí oxy Cạnh tranh với vi sinh vật khác sản phẩm Nhiệt độ Độ ẩm Đường tiêu hóa: • • • Điều kiện có tính axit dày Hoạt động enzyme Thành phần môi trường (ví dụ: diện loại đường lên men) • Muối mật ruột non Công nghệ sử dụng để tăng cường tính khả thi tế bào Các quy trình công nghiệp để sản xuất thực phẩm, bao gồm chế phẩm sinh học, sử dụng lên men thông thường với tế bào bị gián đoạn Một số phương pháp tiếp cận nghiên cứu để nâng cao khả tồn lúc bảo quản chế biến sâu, lưu trữ cuối tiêu hóa Chúng bao gồm ứng dụng ứng suất gây chết suốt trình lên men, việc bổ sung chất bảo vệ, bao gồm chất tan tương thích (ví dụ betain nghiên cứu rộng rãi), bảo vệ tế bào cách vi đóng gói Khả Công nghệ lên men Page vi sinh vật phát triển tồn phụ thuộc phần lớn vào khả chúng để thích ứng với thay đổi môi trường Thích ứng với môi trường bất lợi thường kết hợp với cảm ứng số lượng lớn gen, tổng hợp protein stress phản ứng, phát triển áp lực khác Trên sở kiến thức này, phương pháp tăng cường tồn lâu dài lactobacilli bifidobacteria cách giảm tác động nguy hiểm áp lực môi trường điều kiện trình nghiên cứu gần để nâng cao sức đề kháng tế bào để căng thẳng môi trường xảy trình sản xuất, lưu trữ tiêu hóa Hiện nay, kỹ thuật chủ yếu dựa vào ủ tế bào tự điều kiện khác nhiệt độ, nồng độ muối cao, muối mật, hydrogen peroxide pH thấp Phản ứng chủng khác Bifidobacteria để tăng nhiệt độ gây chết, phương pháp điều trị muối muối mật cách tổng hợp protein stress bảo vệ cụ thể dẫn đến khả chịu di động cải tiến để ứng suất tương đồng hay dị tương đồng thích ứng nhiệt với bảo vệ chéo (ví dụ nhiệt muối điều hòa) cho thấy cải thiện sống Lactobacillus paracasei NFBC 338 phun khô Trong nghiên cứu khác, sống Bifidobacterium longum môi trường phát triển 0C tăng lên đáng kể tế bào đưa lên điều kiện đói 30 60 phút Tương tự khả chịu axit Bifidobacterium lactis (ở pH 3,5 dịch dày tổng hợp) tăng lên đáng kể sau giảm độ pH trung bình tăng trưởng từ 6,0 đến 5,2 điều kiện đói Axit pha tĩnh phương pháp điều trị chủng Bifidobacteria sản xuất thích nghi bảo vệ phản ứng khác Tế bào phản ứng với áp lực gây chết phụ thuộc vào căng thẳng ứng suất áp dụng Vì vậy, trường hợp chế chung để đáp ứng với áp lực gây chết, lên men điều kiện phải xác định cho loại vi khuẩn Quá trình nhiều lao động tốn Ngoài ra, áp lực gây chết dẫn đến giảm hoạt động tế bào cuối với thay đổi chức tế bào vi sinh ruột Rõ ràng có cần thiết phải phát triển sâu sắc hiểu biết stress phản ứng chế probiotics Công nghệ lên men Page Công nghệ lên men sử dụng tế bào bị gián đoạn 2.1 Lên men liên tục Cho đến nay, liệu báo cáo trình lên men liên tục với chế phẩm sinh học, phương pháp cung cấp lợi ích thời gian gần xem xét Doleyres et al cho Bifidobacteria Lựa chọn cẩn thận điều kiện, nuôi cấy liên tục dẫn đến hai tế bào có suất cao hiệu suất thể tích trình, giảm yêu cầu công suất chế biến hạ lưu Đang hoạt động ổn định, tế bào sản xuất nuôi cấy liên tục kiểm soát trạng thái sinh lý, điều chỉnh thông số môi trường, chẳng hạn thành phần môi trường tỷ lệ pha loãng, sau để xác định tăng trưởng cụ thể tỷ lệ vi sinh vật hệ thống Mặc dù lên men liên tục khó khăn để hoạt động điều kiện công nghiệp, đánh giá cao nhạy cảm với đặc điểm ô nhiễm tế bào bị theo thời gian, công nghệ giá trị điều tra sử dụng để sản xuất tế bào khác áp dụng điều kiện kiểm soát tốt Một ví dụ hai giai đoạn trình lên men liên tục trình sản xuất chế phẩm sinh học minh họa bảng Đây loại hình hệ thống liên tục cung cấp công cụ cho sàng lọc hiệu áp lực gây chết lên men thông thường, hệ thống ổn định nhanh chóng để thay đổi điều kiện lò phản ứng thứ hai (sau 5-7 lần cư trú, tương ứng với vài giờ) Hiện hành, số liệu tiềm hạn chế lên men liên tục cho sản xuất probiotic với kiểm soát sinh lý Công nghệ lên men Page 10 Bảng Hai giai đoạn trình lên men liên tục cho việc sản xuất chế phẩm sinh học Hai giai đoạn trình lên men liên tục cho sản xuất chế phẩm sinh học, với lò phản ứng (R1) hoạt động với tế bào tự cố định lò phản ứng thứ hai (R2) tiêm tế bào tự sản xuất R1 (A) Lò phản ứng R1 hoạt động với tế bào tự (ở độ pha loãng thấp tỷ lệ sản xuất tế bào giai đoạn tăng trưởng theo cấp số nhân cuối); hình ảnh bên trái cho thấy ảnh chụp hiển vi Bifidobacterium longum sản xuất hệ thống (B) Lò phản ứng R1 hoạt động với tế bào cố định mức cao tốc độ pha loãng mật độ tế bào; hình ảnh bên trái cho thấy quang ảnh chụp hiển vi phần hạt-cố định Lactococcus lactis Các tế bào sản xuất lò phản ứng R1 với sinh lý học định nghĩa bị ứng suất gây chết (ví dụ bỏ đói, độ pH thấp, cao nhiệt độ, độ muối, vv ; căng thẳng minh họa tia sét) R2 lò phản ứng thứ hai điều kiện kiểm soát Hệ thống ổn định nhanh chóng để thay đổi điều kiện lò phản ứng thứ hai (sau 5-7 lần cư trú, tương ứng với 2,5-3,5 h cho hệ thống thiết kế cho ứng Công nghệ lên men Page 11 dụng căng thẳng 30 phút), cho phép kiểm tra hiệu số áp lực thời gian thí nghiệm lên men 2.2 Phản ứng sinh học màng Trong hệ thống màng với bổ sung liên tục vào môi trường, tế bào giữ lại phản ứng sinh học siêu lọc vi lọc màng phân tử nhỏ khuếch tán qua lỗ xốp màng theo kích thước chúng Do đó, sản phẩm trao đổi chất ức chế loại bỏ thấm nhập tế bào tập trung phía retentate Các phần tế bào tập trung thu hoạch theo đợt liên tục, điều trị hạ lưu bổ sung cho tế bào tập trung trước đông lạnh đông khô Rất liệu báo cáo sản xuất tế bào probiotic lò phản ứng màng, hệ thống dẫn đến sản lượng tế bào suất thể tích cao Tuy nhiên, sinh lý tế bào chức không nghiên cứu Thật vậy, tế bào chịu nhiều áp lực lò phản ứng màng, chẳng hạn nồng độ chất dinh dưỡng thấp, oxy, thẩm thấu khí ứng suất ảnh hưởng đến vi khuẩn nhạy cảm, dẫn đến tác dụng bảo vệ chéo với áp lực khác Cuối cùng, liên kết tế bào để tế bào liên lạc mật độ tế bào cao phần retentate gây phản ứng cảm ứng ảnh hưởng đến sinh lý tế bào Cần nghiên cứu yếu tố tác động chúng sinh lý, thể dục thẩm mỹ chức chế phẩm sinh học để khám phá tiềm hệ thống cho việc sản xuất tế bào căng thẳng thích nghi (retentate phần tế bào giữ lại màng) Công nghệ lên men Probiotic với tế bào cố định Trong tự nhiên, vi sinh vật thường sống tổ chức cao cộng đồng kèm theo chất polymer (hoặc màng sinh học) sản xuất mà tuân thủ bề mặt trơ Màng sinh học thường bao gồm hỗn hợp thành phần, chẳng hạn protein, axit nucleic exopolysaccharides Các exopolysaccharides sản xuất hầu hết vi khuẩn polysaccharides thành tế bào ngoại bào tiết môi Công nghệ lên men Page 12 trường xung quanh Sự hình thành màng sinh học chiến lược lớn sống vi khuẩn Khi màng sinh học sản xuất số mật độ dân số, tế bào vi khuẩn trải qua tương tác phức tạp cell-to-cell, tín hiệu hệ thống đại biểu cảm ứng tích lũy với ngưỡng nồng độ kiểm soát biểu gen khác phần khác màng sinh học giai đoạn phát triển khác chúng Cấu trúc màng sinh học tự nhiên tìm thấy ruột, nơi vi khuẩn phát triển niêm mạc ruột gắn liền với mẩu thức ăn (xem thêm viết Macfarlane Macfarlane vấn đề này) Kiểu hình màng sinh học mô tả rộng rãi vi khuẩn Gram âm, biết hình thành màng sinh học vi khuẩn Gram dương Các nghiên cứu với tác nhân gây bệnh thực phẩm Gram dương cho thấy tế bào trưởng thành màng sinh học biểu kiểu hình thay đổi liên quan đến sinh lý vi khuẩn, chuyển hóa chép gene Vi khuẩn truyền nhiễm màng sinh học nói chung nhiều khả kháng thuốc kháng sinh yếu tố môi trường bất lợi nhiệt độ cao, độ pH thấp thẩm thấu Sự gia tăng sức đề kháng vi khuẩn để điều trị kháng sinh vật chủ xác định lý cho nhiễm trùng màng sinh học liên quan đến Tuy nhiên, có vài số liệu báo cáo thay đổi sinh lý gây tăng trưởng màng sinh học vi khuẩn thực phẩm có lợi, bao gồm chế phẩm sinh học Cố định tế bào sử dụng để thực lên men tế bào với mật độ cao cho tế bào chuyển hóa sản xuất Đối với ứng dụng thực phẩm, ngậm tế bào chất gian bào polymer sinh học gel cấp thực phẩm (ví dụ kcarrageenan, alginate gellan) sử dụng rộng rãi Một số ưu điểm so với trình lên men tự di động chứng minh: mật độ tế bào cao, tái sử dụng biocatalysts, cải thiện khả chống ô nhiễm công vi khuẩn, tăng cường ổn định plasmid, phòng chống rửa nuôi cấy liên tục, bảo vệ vật lý hóa học tế bào Các cố định tăng trưởng tế bào hỗ trợ vững Công nghệ lên men Page 13 trình ủ trường dinh dưỡng việc hình thành khu vực mật độ tế bào cao (nồng độ tế bào thông thường từ 5x1010 đến5x1011 khuẩn lạc hình thành đơn vị / ml, có từ 10 đến 50 lần cao so với nuôi cấy hàng loạt truyền thống) Khu vực kéo dài từ bề mặt -chất xúc tác sinh đến vị trí bố trí hình tròn, nơi tăng trưởng tế bào bị ngăn cản thiếu chất, tích tụ chất ức chế / điều kiện môi trường không thuận lợi khác pH thấp Màng sinh học dạng tăng trưởng tế bào xảy lớp ngoại vi hạt gel cho thấy cung cấp cho tỷ lệ giải phóng tế bào cao vào nước dùng lên men lượng lớn, kết áp suất cao mở rộng di động, va chạm lực cắt lò phản ứng sinh, dẫn cấy hiệu môi trường với số lượng lớn Chỉ có vài nghiên cứu xem xét việc áp dụng cố định tế bào để sản xuất probiotic Lên men liên tục với B longum cố định hạt cao su gel gellan sản xuất nồng độ tế bào cao tăng gấp bốn lần suất tích tỷ lệ pha loãng 0,5h -1 so sánh với nuôi cấy hàng loạt tự tế bào pH tối ưu Gần cho thấy, bất động hỗn hợp có chứa chủng Lactococcus lactis trội chủng B longum cạnh tranh cho phép sản xuất liên tục ổn định nuôi hỗn hợp tập trung hệ thống hai lò phản ứng tương tự minh họa hình 2b; nhiệt độ thông số quan trọng cho tỷ lệ căng thẳng văn hóa khác Bảng Báo cáo tác dụng cố định tế bào sinh lý vi khuẩn probiotic tiềm Phương thức canh tác FC Mẻ/ IC lô Công nghệ lên men Loài Những thay đổi sinh lý học tế bào Lactococcus - Tăng khả chịu nước vệ sinh Leuconostoc strains amoni bậc bốn Page 14 FC liên tục /IC liên tục IC liên tục FC lô/IC liên tục Lactococcus lactis Lactococcus lactis Bifidobacterium longum - Lactococcus lactis FC Mẻ / IC lô Lactobacillus rhamnosus FC mẻ / IC liên tục lên men Lactobacillus rhamnosus IC lên men liên tục - Thay đổi trạng thái oxi hóa khử - Thay đổi pH nội bào - Thay đổi tổng hợp lactate Lactococcus lactis Lactobacillus delbueckii - - dehydrogenase Tăng hoạt động axit hóa với thời gian nuôi cấy Tăng khả chịu hydrogen peroxide Tăng tồn đông khô Tăng sống điều kiện tiêu hóa Giảm nhạy cảm với kháng sinh Giảm nhạy cảm để nisin Z Sản xuất exopolysaccharide thay đổi từ hòa tan để không hòa tan Tăng cường lực axit hóa Tăng khả chịu axit Tăng khả chịu Z nisin Gia tăng khả axit hóa Tăng cường lực axit hóa hoạt động tự phân hủy giảm Tăng tồn đông - khô Một số nghiên cứu thay đổi vi khuẩn cố định công bố triển lãm tăng trưởng, hình thái sinh lý học so với tế bào sản xuất thông thường nuôi cấy tế bào tự (tóm tắt Bảng cho vi khuẩn axit lactic chế phẩm sinh học, xem xét Junter et al cho loạt vi sinh vật cố định nhân tạo tự nhiên khác).Tuy nhiên, ảnh hưởng cố định đặc điểm công nghệ sinh lý vi khuẩn probiotic gần báo cáo Trong hệ thống nuôi cấy liên tục hai giai đoạn có chứa cố định B longum L lactis, bảng 2b, tế bào tự từ hai chủng môi trường tạo cho thấy tăng khả chịu áp lực khác nhau, bao gồm sấy khô (sấy thăng hoa), hydrogen peroxide (nước oxy già), mô điều kiện dày, nisin kháng sinh Sức đề kháng tăng Công nghệ lên men Page 15 lên rõ rệt theo thời gian với thời gian nuôi cấy nói chung cao sau ngày so với tế bào pha tĩnh sản xuất hàng loạt tế bào tự trình lên men theo mẻ Các nghiên cứu gần khác với cố định lactobacilli phát thay đổi sinh lý quan trọng, gia tăng lớn sức đề kháng tế bào đến nisin Z pH thấp, khả tăng cường trình axit hóa, cảm ứng tổng hợp sản xuất cao exopolysaccharides không hòa tan Một số yếu tố đề xuất để giải thích cho đáp ứng với stress phi cụ thể tế bào cố định: diện độ dốc lớn sản phẩm ức chế (axit hữu cơ) pH chất xúc tác sinh học, hoạt động nồng độ tế bào cao hoạt động hạn chế khuếch tán, việc lựa chọn quần thể phụ kháng căng thẳng với thời gian hiệu ứng cảm biến chất Việc bao bọc tế bào cao lớp ngoại vi hạt liên hệ chặt chẽ tế bào cố định gây đặc điểm sinh lý mà thường điều khiển cảm ứng chế điều chỉnh biểu định gen Trong hệ thống mật độ tế bào phụ thuộc vào cảm ứng chất, vi khuẩn sản xuất tín hiệu phân tử ngoại bào peptide biến đổi hoạt động peptide thuốc gây cảm ứng cho biểu gen nồng độ phân tử vượt ngưỡng giá trị định Những thay đổi cuối dẫn đến cạnh tranh lợi mật độ, thích ứng ứng phó có hiệu với thay đổi điều kiện môi trường, kết hợp tương tác vi khuẩn họ vô sinh môi trường sinh học Như vậy, sản xuất tế bào công nghệ cố định tế bào đưa sinh lý học mà đặc biệt thích hợp để thích ứng với phát triển điều kiện cạnh tranh đường tiêu hóa, điều chưa chứng minh Dữ liệu cho thấy tế bào cố định kết hợp với nuôi cấy liên tục sử dụng để sản xuất hiệu quả, bước trình, tế bào probiotic với tăng cường khả chịu áp lực môi trường cải thiện công nghệ chức đặc trưng Ngoài ra, giai đoạn lên men thứ hai thêm vào để thực thêm thiếu điều kiện thích ứng áp lực khác Tuy nhiên, Công nghệ lên men Page 16 nghiên cứu bổ sung cần thiết để làm sáng tỏ chế phân tử sinh lý hiệu ứng để phát triển ứng dụng công nghiệp dựa công nghệ tiên tiến Chỉ thị sinh học đánh giá khả phát triển chức theo dõi trình Bởi chế phẩm sinh học phải trì khả tối ưu hai sản phẩm ruột, nghiên cứu trước công nghệ ứng với áp lực vi khuẩn probiotic dựa phép đo khả tồn tế bào, chủ yếu với số lượng Tuy nhiên, phương pháp nuôi cấy dựa cung cấp ước lượng chệch số lượng tế bào khả thi gần bị tổn thương vi khuẩn không hoạt động thường phát Ngoài ra, phân tích nuôi cấy dựa khả sống yếu tố dự đoán đầy đủ cho chức probiotic, mà nên điểm đánh dấu cuối cho phát triển công nghệ Vì thế, lĩnh vực probiotics, phương pháp bổ sung nên sử dụng để nghiên cứu sinh lý học tế bào cho nghiên cứu bản, trình phát triển giám sát, đánh giá sản phẩm Phương pháp phân tử đếm đo dòng tế bào huỳnh quang lai tạo chỗ sử dụng để đánh giá khả tồn sản phẩm, thời gian gần thể cho việc đánh giá chất lượng viên nang probiotic thương mại đồ uống không sữa Đo dòng tế bào cho phép nhóm quần thể phân biệt thể chất lựa chọn cho đặc tính nữa; vậy, kỹ thuật đặc biệt hữa ích để nghiên cứu chế thích ứng áp lực tiểu quần thể Hiện nay, hạn chế quan trọng cho việc thiết lập điều kiện tối ưu cho sản xuất probiotic vắng mặt mặt mục tiêu tối ưu tế bào sinh lý học hàng đầu chức cao chế phẩm sinh học ruột Trong nghiên cứu gần đây, DNA microarray sử dụng để giám sát biểu gen Lactobacillus plantarum phẫu thuật cắt bỏ phân đoạn ruột Các biểu cụ thể gen mã hóa hấp thu đường trao đổi chế, tổng hợp amino acid, phân chia tế bào liên quan đến áp lực gen quan sát, tiêu Công nghệ lên men Page 17 sống sót, hoạt động trao đổi chất tăng trưởng probiotics ruột Cách tiếp cận công cụ mạnh mẽ thông lượng cao không để cung cấp nhìn sâu sắc vào thể tương tác vật chủ vi khuẩn, phát triển mặt mục tiêu sinh lý cho sản phẩm probiotic Tổng quát hơn, công nghệ “ngắn”phiên mã, protein trao đổi chất sử dụng để đánh giá, so sánh cấu sinh lý probiotic ruột, giai đoạn khác sản xuất, bổ sung chúng vào thực phẩm Một mục tiêu tốt cho trình phát triển tối ưu hóa để có tế bào sau sản xuất mà có cấu hình tương tự tế bào ruột, suất cao khả tồn Đo dòng tế bào phương pháp PCR cung cấp công cụ nhanh chóng hiệu cho đặc tính sinh lý tế bào sau sản xuất Sau xác định thị sinh học cho chức tế bào phương pháp “ngắn”, vết huỳnh quang cho thị sinh học nên phát triển áp dụng để theo dõi trình kiểm soát chất lượng sản phẩm Ví dụ đo dòng tế bào định lượng protein tế bào cụ thể đo lường toàn màng Gần đây, đo dòng tế bào tự động phát triển sử dụng để giám sát trình lên men liên tục mức độ đơn bào Công nghệ lên men Page 18 Figure Chiến lược nghiên cứu tương lai nhằm tối ưu hóa sản xuất probiotic I Kết luận Cho đến bây giờ, công nghệ phát triển để sản xuất probiotic tập trung vào phương pháp để có nhiều tế bào kỹ thuật kinh tế cụ thể Rõ ràng, thêm vào số lượng tế bào cao, tế bào sinh lý quan trọng để đảm bảo tế bào phù hợp để tồn trình hạ lưu mà chúng thể chức cao Một chiến lược cho tương lai nghiên cứu nhằm mục đích tối ưu hóa sản xuất probiotic thể Figure Hơn công nghệ lên men tiên tiến để sản xuất nuôi cấy thực phẩm cần phải kiểm tra liên quan đến tế bào tạo với khả tồn cao với chức cung cấp Chỉ thị sinh học đáng tin cậy Công nghệ lên men Page 19 thuận tiện cần phát triển để theo dõi trình đánh giá sản phẩm Về vấn đề này, công nghệ “ngắn” đặc biệt hữu ích cho việc xác định thị sinh học có chức liên quan Những cách tiếp cận giúp xác định chế thích hợp thích ứng với áp lực cần thiết để phát triển công nghệ chung sở khoa học cho việc sản xuất probiotic nhạy cảm, qua mở rộng phạm vi probiotic thương mại ứng dụng sản phẩm Ngoài ra, công cụ tạo thuận lợi cho phương pháp sàng lọc để xác định chủng probiotic kết hợp đặc tính kỹ thuật chức phù hợp Công nghệ lên men Page 20