Phan văn kiểm báo cáo khoa học năm 2010

NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG KỸ THUẬT KHAI THÁC TINH DỊCH BÒ BẰNG THIẾT BỊ ĐIỆN TỬ ELECTRO-EJACULATION Phan Văn Kiểm, Phan Lê sơn, Phan Trung Hiếu, Nguyễn Hữu Sắc Bộ môn Sinh lý, Sinh hoá TTVN Trạm Nghiên cứu Sản xuất Tinh đông lạnh Moncada Tóm tắt bò đực laisind bò đực H Mông 3- 4năm tuổi, khối lượng thể khoảng 330- 400kg tiến hành khai thác tinh thiết bị phóng tinh điện tử Electro-Ejaculation (E-E) Đây phương pháp kích thích phản ứng xuất tinh bò dựa nguyên tắc: Sử dụng xung điện yếu ngắn kích thích thần kinh vùng xoang chậu ( qua trực tràng) gây phản xạ phóng tinh tức Kết thí nghiệm cho thấy: Vị trí đặt đầu dò trực tràng khoảng 30-35cm, thời gian kích thích khoảng 20 giây, cường độ xung điện khoảng 32 von thích hợp để kích thích bò đực phóng tinh Tinh dịch khai thác có khối lượng chất lượng tương đương với phương pháp khai thác âm đạo giả: tinh dịch có mầu trắng sữa; V (ml): 5,10 ml; A(%): 70,67%; C ( tỷ/ml): 0,73; pH: 7,23 Đặt vấn đề Kỹ thuật khai thác tinh dịch gia súc khâu quan trọng thiếu công tác TTNT nhằm nâng cao suất chất lượng vật nuôi (Nguyễn Tấn Anh, Nguyễn Thiện, Lưu Kỷ - 1995) Trên giới, để khai thác tinh dịch ngưòi ta nghiên cứu ứng dụng nhiều phương pháp như: phương pháp lấy tinh âm đạo giả, thiết bị phóng tinh điện tử ( bò, trâu, ngựa, dê cừu…) phương pháp lấy tinh tay ( lợn, gia cầm…) Phương pháp lấy tinh thiết bị phóng tinh điện tử Electro-Ejaculation (E-E) dựa nguyên tắc sử dụng loạt xung động điện yếu ngắn qua khung xoang chậu, nơi mà phản ứng xuất tinh kích thích ( JC Rodger; IG White, 1975; Melissa Rouge and R Bowen 2002.) Phương pháp sử dụng thiết bị phóng tinh điện tử ( RAU Animal Ejaculator, Model E.E 2000) dùng để khai thác tinh hầu hết động vật có vú động vật hoang dã Kỹ thuật thường sử dụng lấy tinh kiểm tra tinh dịch đực dùng làm giống, đực giống thần kinh hưng phấn (khó huấn luyện) có vấn đề chân móng Điểm ưu việt phương pháp đực không cần huấn luyện & lượng dùng kích thích gây phóng tinh thấp ( từ Ác quy 12 vol) Do nghiên cứu ứng dụng để khai thác tinh bò nhiều nước giới như: Australian (Rodger, J.C ; White, I.G, 1975), Canada (Cathy J Waldner, and Albert D Barth (2004) Britoa L.F.C; Arteagaa.A.A ( 2004); bò sữa, bò thịt… Ở Việt Nam việc khai thác tinh dịch gia súc, gia cầm nghiên cứu âm đạo giả mát xa góp phần quan trọng việc nâng cao suất vật nuôi Tuy nhiên phương pháp kỹ thuật lấy tinh thiết bị phóng tinh điện tử chưa nghiên cứu ứng dụng Để khai thác sử dụng tốt thiết bị phòng thí nghiệm trọng điểm ( TNTĐ) nghiên cứu chuyển giao vào sản xuất Chúng tiến hành đề tài: Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật khai thác tinh dịch bò thiết bị điện tử E- E, nhằm khai thác chủ động tinh dịch bò thiết bị điều kiện Việt Nam Vật liệu phương pháp nghiên cứu 2.1 Vật liệu - Thí nghiệm tiến hành bò đực laisind bò H Mông, 3- tuổi, khối lượng 330-400 kg, chăm sóc nuôi dưỡng theo quy định quản lý sử dụng bò đực giống ( Quyết định số 66/2005/QĐ-BNN ngày 31/10/2005 Bộ trưởng Bộ NN& PTNT) - Thiết bị điện tử Electro- Ejaculator ( RAU Animal Ejaculator, Model EJ 2000) thuộc phòng thí nghiệm trọng điểm, viện Chăn nuôi: gồm điều khiển, bình ắc quy 12 vol, đầu dò, dây dẫn, ống hứng tinh… 2.2 Nội dung nghiên cứu - Nghiên cứu xác định vị trí đặt đầu dò thiết bị E.E bò đực - Nghiên cứu xác định thời gian kích thích cường độ xung điện thiết bị E-E bò đực - Nghiên cứu đánh giá chất lượng tinh dịch sử dụng thiết bị E-E 2.3 Phương pháp nghiên cứu - Phương pháp khai thác tinh: Theo phương pháp Rodger, J.C ; White, I.G (1975) - Phương pháp đánh giá số tiêu chất lượng tinh: Màu sắc tinh: đánh giá mắt thường sau lấy tinh Thể tích tinh dịch(V) ống đong có chia độ, Hoạt lực tinh trùng (A) kính hiển vi sử dụng phần mềm Sperm Vision 3.0 Nồng độ (C) máy so màu SDM-S Minitub ( Đức) pH: xác định máy đo pH 2.4 Địa điểm thực - Trung tâm Thực nghiệm bảo tồn vật nuôi - Trạm nghiên cứu & sản xuất tinh Môn Ca Đa - Bộ môn Sinh lý, Sinh hóa & TTVN, Viện Chăn nuôi - Thời gian từ 4/ 2009 đến 31/12/ 2009 Kết đạt 3.1 Xác định vị trí đặt đầu dò thiết bị Electro- Ejaculator ( E- E) bò đực Sau kích thích bò thải phân, nhẹ nhàng đưa đầu dò vào sâu sâu khung xoang chậu với mức khoảng 10-15cm; 20-25 cm 30-35 cm, xoay mặt cực đồng hướng phía lưng Bật công tắc thiết bị quan sát đáp ứng phóng tinh bò qua co rút dương vật Kết thu thể bảng Bảng Sự đáp ứng bò với vị trí đặt đầu dò thiết bị E- E Độ sâu đầu dò trực tràng 10-15 cm 20-25 cm 30-35 cm Sự đáp ứng bò + +++ * Sự đáp ứng bò đực sau kích thích thiết bị E- E - Chưa đáp ứng : - ( chưa có phản xạ xuất tinh) - Đáp ứng yếu : + ( bắt đầu có biểu co rút dương vật thải nước tiểu) - Đáp ứng mạnh : + + + ( xuất co rút dương vật phóng tinh) Qua bảng nhận thấy: - Khi đưa đầu dò qua trực tràng vào khoang chậu khoảng 10-15cm 20-25 cm nhận thấy bò chưa xuất phản xạ xuất tinh - Với độ sâu đầu dò khoảng 30-35 cm, bò co rút dương vật mạnh phóng tinh sảy 3.2 Kết xác định thời gian & cường độ xung điện thích hợp thiết bị E - E bò đực Sau xác định vị trí đặt đầu dò với độ sâu khoảng 30-35cm vị trí thích hợp để kích thích bò đực phóng tinh Thí nghiệm tiếp tục với thời gian 5; 10; 15 20 giây với cường độ xung điện tương ứng là: 8; 16; 24 32 von nhằm xác định thời gian cường độ xung điện thích hợp, có tác dụng kích thích phóng tinh bò đực, kết trình bày bảng Bảng Kết xác định thời gian điện xung điện thích hợp E-E Thời gian( giây) 10 15 20 Điện (Von) 16 + 24 + ++ 32 ++ +++ * Sự đáp ứng bò đực sau kích thích thiết bị E- E - Chưa đáp ứng : - (chưa có phản xạ xuất tinh) - Đáp ứng yếu : + (bắt đầu có biểu co rút dương vật & thải nước tiểu) - Đáp ứng mạnh : + + + (xuất co rút dương vật phóng tinh) Qua bảng nhận thấy: Khi kích thích với thời gian 5-10 giây cường độ xung điện từ 8-32 von chưa nhận thấy dấu hiệu phản xạ phóng tinh Khi kích xung điện với cường độ từ 24-32 von, khoảng 15 giây, nhận thấy phản xạ phóng tinh xuất hiện, nhiên chưa đủ mạnh( dương vật thò khỏi bao quy đầu, co rút yếu, bò có phản xạ thải nước tiểu tinh thanh, phản xạ xuất tinh chưa xuất hiện) Tuy nhiên, thú có túi( Kangaroo) thời gian cường độ xung điện thích hợp để khai thác tinh: Rodger, J.C; White, I.G ( 1975) Phản xạ phóng tinh nhận biết rõ rệt bò đực bị kích thích với xung điện đạt 32 von, thời gian khoảng 20 giây Lúc chân sau bò đạp mạnh, bò kêu ọ, co rút dương vật rõ, dương vật thò hẳn với tinh dịch phóng Kết kiểm tra chất lượng tinh dịch thể bảng 3.3 Kết đánh giá chất lượng tinh dịch sử dụng thiết bị E- E Sau bò xuất tinh, tinh dịch đánh giá so sánh với phương pháp lấy tinh âm đạo giả với số tiêu chính: thể tích tinh dịch(V) ống đong có chia độ, hoạt lực (A) kính hiển vi có hình, nồng độ (C) máy đo nồng độ máy đo pH Kết thể bảng Bảng Một số tiêu sinh học tinh dịch sử dụng thiết bị E- E Chỉ tiêu Bò đực Bò đực số1 Bò đực số Bò đực số * Màu sắc V(ml) A (%) C (Tỷ/ml) pH Trắng sữa Trắng sữa Trắng sữa 4,00 ± 0,12 4,80 ± 0,18 6,50 ± 0,21 80 ± 0,15 67 ± 0,12 65 ± 0,09 1,05± 0,12 0,65± 0,03 0,48± 0,09 7,0± 0,09 7,2± 0,03 7,5± 0,06 * Bò H Mông Từ số liệu bảng khai thác tinh bò thiết bị E.E thu kết sau: - Mầu sắc tinh dịch: trắng sữa - Khối lượng tinh dịch: V (ml): dao động từ 4- 6,5ml, trung bình đạt 5,10 ml - Hoạt lực tinh trùng : A(%) : khoảng 65-80% tinh trùng tiến thẳng, trung bình 70,67% - Nồng độ tinh trùng C (tỷ/ml): 0,73, dao động 0,48 – 1,05 tỷ/ml - pH tinh dịch: đạt trung bình 7,23, dao động từ – 7,5 Khi so sánh với phương pháp lấy tinh âm đạo giả cho kết tương đương : V( 3,85,8ml) ; A( 70-81%) ; C(0,55-1,20 tỷ/ml) pH( 7,0 – 7,3) Kết không sai khác nhiều với kết nhóm tác giả Phan Văn Kiểm, Trịnh Quang Phong, Vũ Chí Cương… ( 2007) nghiên cứu số tiêu sinh học tinh dịch bò vùng cao Hà Giang phương pháp lấy tinh qua âm đạo giả : tinh dịch có màu trắng ngà trắng sữa; V: 3,87 ml ; A: 84,9 ( %); C: 0,859(tỷ/ml) pH: 7,0 Với kết thu tương đương với kết mà nhóm tác giả: Cathy J Etson, Cheryl L Waldner, and Albert D Barth (2004) Palmera C.W; Britoa L.F.C; Arteagaa.A.A ( 2004); ) nghiên cứu phương pháp mát xa âm đạo giả bò thịt Như việc thử nghiệm phương pháp kỹ thuật khai thác tinh bò thiết bị E- E cho kết qủa tốt, ứng dụng việc khai thác tinh dịch bò đực giống khó huấn luyện có vấn đề chân móng Kết luận đề nghị 4.1 Kết luận Từ kết trình bày trên, rút số kết luận sau: • Vị trí đặt đầu dò (Probe) thích hợp thiết bị Electro- Ejaculation ( E - E) bò đực lai sind bò H Mong khoảng 30-35cm • Thời gian kích thích khoảng 20 giây với điện xung điện khoảng 32 von thích hợp để kích thích bò đực phóng tinh • Các tiêu tinh dịch bò lai sind bò H Mong khai thác thiết bị E - E tương đương với phương pháp lấy tinh âm đạo giả 4.2 Đề nghị Cho thử nghiệm lấy tinh thiết bị Electro- Ejaculation (E- E) bò đực hướng sữa, hướng thịt để khai thác tối đa tiềm chúng sản xuất tinh đông lạnh Tài liệu tham khảo Nguyễn Tấn Anh, Nguyễn Thiện, Lưu Kỷ (1995) Một số kết nghiên cứu Sinh sản & TTNT gia súc gia cầm Tuyển tập công trình nghiên cứu khoa học kỹ thuật chăn nuôi ( 1969-1995) Phan Văn Kiểm , Trịnh Quang Phong, Vũ Chí Cương, Jean Charles Maillard, Lệnh Hậu Tuế ( 2007) Bảo tồn giống bò vùng cao Hà Giang tinh bò đông lạnh & Kỹ thuật thụ tinh nhân tạo Thông tin KHKT chăn nuôi Viện chăn nuôi.12 2007 Rodger, J.C ; White, I.G ( 1975) Electroejaculation of Australian marsupials and analyses of the sugars in the seminal plasma from three macropod species Journal of Reproduction and Fertility.( 1975) 43 233239 Cathy J Etson, Cheryl L Waldner, and Albert D Barth (2004) Evaluation of a segmented rectal probe and caudal epidural anesthesia for electroejaculation of bulls 45(3): 235–240.Can Vet J 2004 March; Palmera C.W; Britoa L.F.C; Arteagaa.A.A ( 2004) Comparison of electroejaculation and transrectal massage for semen collection in range and yearling feedlot beef bulls Colorado State University, Fort Collins 80523