Phân tích, đánh giá hiệu quả mang curcumin lên hạt nano chitosan từ tính

MỞ ĐẦU Hiện nay bệnh ung thư đang là căn bệnh nan y và khá phổ biến. Đây là vấn đề mang tính toàn cầu, gây ra những hậu quả đặc biệt nghiêm trọng cho sức khỏe con người. Các nhà nghiên cứu trong nước cũng như trên thế giới đã và đang nghiên cứu tìm ra các loại thuốc có thể điều trị dứt điểm các căn bệnh ung thư Tuy nhiên vấn đề quan trọng là sự hấp thụ các loại thuốc này đối với mỗi cơ thể là khác nhau. Vì vậy làm thế nào để nâng cao hiệu quả hấp thụ thuốc là vấn đề quan tâm nhiều trong nghiên cứu y học hiện nay. Phân tích, đánh giá hiệu quả mang curcumin lên hạt nano chitosan từ tính. phương pháp phân tích hiện đại để đánh giá hiệu quả hấp thụ thuốc trong việc điều trị căn bệnh ung thư hiện nay.

MỞ ĐẦU Hiện bệnh ung thư bệnh nan y phổ biến Đây vấn đề mang tính toàn cầu, gây hậu đặc biệt nghiêm trọng cho sức khỏe người Các nhà nghiên cứu nước giới nghiên cứu tìm loại thuốc điều trị dứt điểm bệnh ung thư [62] Tuy nhiên vấn đề quan trọng hấp thụ loại thuốc thể khác Vì làm để nâng cao hiệu hấp thụ thuốc vấn đề quan tâm nhiều nghiên cứu y học Chitosan, polyme không độc hại, phân hủy tương thích sinh học, nghiên cứu rộng rãi cho mục đích dược phẩm, Một vài ứng dụng chitosan phân phối thuốc, chuyển gen, phủ vết thương công nghệ mô Ngoài ra, hạt nano chitosan chủ đề nghiên cứu nhiều nhà khoa học, chủ yếu tính chất vật lý hóa học độc đáo chúng so với hạt kích thước lớn Trường hợp hạt nano từ tính đặc biệt quan tâm kích thước hạt nano mà tượng từ tính bất thường gọi siêu thuận từ Trong sắt từ oxit (Fe 3O4) loại vật liệu từ quan trọng thu hút ý ngày nhiều nhà nghiên cứu, sử dụng rộng rãi nhiều lĩnh vực nhờ tính chất từ tính nó, đặc biệt lĩnh vực y học [TLTK] Đối với ứng dụng y sinh, hạt nano Fe 3O4 thường xử lý biến tính bề mặt Một mặt biến đổi làm tăng ổn định hóa học hạt nano Fe 3O4, mặt khác, cải thiện tương thích sinh học hạt nano Phải dùng loại polyme thích hợp để biến đổi hạt nano Fe3O4 Nhiều nghiên cứu chitosan biến tính hạt nano từ sử dụng cho ứng dụng y sinh học báo cáo [20,24,78] Liang Zhang chế tạo hạt nano Fe3O4 siêu thuận từ biến tính chitosan carboxymethylat qua liên kết cộng hóa trị papain (enzym nước đu đủ) [40] Các công ty dược phẩm ngày quan tâm đến sản phẩm thực vật mà thực nhiều mục tiêu cách tự nhiên rẻ tiền an toàn so với vật liệu tổng hợp Curcumin polyphenol kỵ nước có nguồn gốc từ củ nghệ, thân rễ loại thảo dược Curcuma longa Curcumin có nhiều ứng dụng, chẳng hạn chất chống oxy hóa, hoạt động kháng khuẩn chống ung thư Đã có nhiều nghiên cứu sử dụng hạt Curcumin gắn lên hạt nano chitosan từ tính để tăng cường ứng dụng y học [12] Chính lí trên, tiến hành nghiên cứu đề tài “Phân tích, đánh giá hiệu mang curcumin lên hạt nano chitosan từ tính” sử dụng phương pháp phân tích đánh giá hiệu hấp thụ thuốc việc điều trị bệnh ung thư CHƯƠNG I: TỔNG QUAN 1.1 Hệ dẫn truyền thuốc điều trị ung thư Dạng thuốc sản phẩm cuối (thành phẩm) trình bào chế, đạt tiêu chuẩn chất lượng quy định, dùng để đưa dược chất vào thể nhằm mục đích phòng hay chữa bệnh Trong bào chế đại, dạng thuốc coi “hệ đưa thuốc” vào thể (Drug Delivery Systems) “hệ trị liệu” (Therapeutic Systems) hay “thiết bị” mang thuốc (Devices) Nói cách khác, dạng thuốc giá mang dược chất, sản phẩm ngành dược đưa đến người bệnh, cầu nối dược sĩ người bệnh Dạng thuốc phải bào chế cho tiện bảo quản, vận chuyển, sử dụng an toàn, hiệu kinh tế Với dược chất, bào chế dạng thuốc khác nhau, dùng theo đường dùng khác dẫn đến tác dụng lâm sàng khác Một chế phẩm thuốc bào chế tốt hướng dẫn sử dụng không tốt không mang lại hiệu quả, chí gây nguy hiểm cho người bệnh Thuốc truyền thống dựa đặc tính hấp thụ thuốc thể, sinh khả dụng phụ thuộc nhiều yếu tố độ tan, pKa, khối lượng phân tử, số lượng liên kết phân tử, độ bền hóa học Tất yếu tố tác động không nhỏ đến khả điều trị bệnh Thông thường chất thuốc truyền thống có khối lượng phân tử nhỏ, khả vượt qua màng ngăn thể dễ thâm nhập vào bào quan tế bào Tuy nhiên hạn chế phân bố thuốc dẫn đến hiệu ứng phụ không mong muốn phải sử dụng thuốc với liều lượng cao để thuốc đáp ứng tốt khả chữa bệnh Bên cạnh khối lượng phân tử nhỏ, thuốc dễ bị đào thải khỏi thể qua đường thận, có nghĩa phải sử dụng liều lượng cao để chữa trị [20] Hiện nay, y học tạo hệ dẫn truyền thuốc nhằm mục đích đưa thuốc đến vị trí cần tới, giảm tác dụng phụ giảm việc phân phối thuốc đến vị trí không mong muốn Một số hệ dẫn truyền thuốc điều chế thành công có tính sinh khả dụng lớn y học Chẳng hạn hệ dẫn truyền thuốc để giải phóng thuốc theo thời gian, thông qua điều khiển thời gian, cho phép thuốc đạt nồng độ điều trị tế bào Ban đầu nồng độ thuốc tăng nhanh sau trình đào thải qua thận chuyển hóa, trao đổi chất (thực bào, enzyme, ) nồng độ thuốc giảm nhanh Do cần phải ý đến vấn đề đào thải thuốc [12] Nồng độ hiệu nồng độ nhỏ để thuốc đạt hiệu điều trị Trong đó, nồng độ giới hạn an toàn giá trị nồng độ mà vượt qua gây độc tác dụng phụ không mong muốn cho thể Do việc thuốc bị đào thải, ta phải sử dụng nhiều liều để đảm bảo thuốc đạt nồng độ trị liệu Tuy nhiên sử dụng không liều lượng, gây tích lũy vượt nồng độ giới hạn an toàn gây tác dụng phụ [12] Hay hệ dẫn truyền thuốc để kiểm soát vị trí giải phóng thuốc theo chế chủ động, nhắm mục đích giải phóng thuốc vị trí mong muốn đồng thời thuốc đưa vào phải vượt qua lớp rào cản khác thể để đến vị trí mong muốn [1] Như việc tạo hệ dẫn thuốc yếu tố quan trọng trình phát huy đặc tính sinh học vật liệu thuốc 1.2 Chitosan 1.2.1 Cấu trúc tính chất chitosan Chitosan (CS) dẫn xuất chitin, thu từ trình tách nhóm axetyl (COCH3) khỏi chitin Thực tế trình tách thường không hoàn toàn nên người ta quy ước theo tỉ lệ tách nhóm axetyl sau: - Tỉ lệ tách nhóm axetyl < 50%, gọi chitin Tên hóa học chitin poly- β-(1-4) N axetyl-D glucosamin, hay gọi Poly-β-(1- 4)-2-amino-2- esoxy - D- glucosamin Chitosan dẫn xuất deaxetyl chitin có công thức cấu tạo sau: Hình 1.1: Công thức cấu tạo chitosan Hay công thức phân tử (C6H11O4N)n  Tính chất vật lý Chitosan chất rắn, xốp, nhẹ, hình vảy, xay nhỏ theo kích cỡ khác nhau, có mầu trắng hay vàng nhạt, tồn dạng: dạng tinh thể dạng vô định hình không mùi, không vị Chitosan không tan nước, kiềm đặc loãng, không tan cồn, axeton dung môi hữu khác Chitosan tan dung dịch axit loãng (pH = 6) tạo thành dung dịch keo suốt, khả tạo màng tốt Độ nhớt chitosan dung dịch axit loãng liên quan tới kích thước khối lượng phân tử trung bình (đây tính chất chung tất dung dịch polime) Do có khả tan tốt chitin nên ứng dụng chitosan đa dạng nhiều Nhiều tính chất chitosan phụ thuộc vào thông số khối lượng phân tử trung bình độ deaxetyl, nên ta thường phải xác định thông số  Tính tan chitosan Chitosan không tan nước, dung dịch kiềm phần lớn dung môi hữu lại tan dung dich loãng axit HCl, HI, HBr, HNO HClO4, tan tốt dung dịch axit CH3COOH Chitosan tan dung dịch axit loãng cách nhận thêm proton vào nhóm amin tự Hằng số phân ly K b nhóm amin xác định qua phương trình : -NH2 + H2O Kb = [OH − ].[-NH 3+ ] [ − NH ] -NH3+ + OHvà pKb= - log Kb (1.1) (1.2) Cũng dung dịch điện ly khác, số phân ly chitosan thực tế phụ thuộc vào % phân ly thời điểm Sự biến đổi giá trị pKa xác định qua phương trình Katchalsy sau : pKa = pH + log [(1-α)/α]= pKo –εΔΨ(α)/kT (1.3) Ở : ΔΨ : Hiệu số điện bề mặt polymer điện cực so sánh α :độ phân ly kT : số Boltzman ε : số điện tử trao đổi  Tính chất hoá học chitin/chitosan[1] Trong phân tử chitin/chitosan có chứa nhóm chức -OH, -NHCOCH3 mắt xích N-axetyl-D-glucozamin nhóm –OH, nhóm –NH2 mắt xích D-glucozamin có nghĩa chúng vừa ancol, vừa amin vừa amit Phản ứng hoá học xảy vị trí nhóm chức tạo dẫn xuất O–, dẫn xuất N–, dẫn xuất O–N Mặt khác chitin/chitosan polime mà monome nối với liên kết β-(1-4)-glicozit; liên kết dễ bị cắt đứt bởi: axit, bazơ, tác nhân oxy-hóa enzim thuỷ phân  Khả hấp thụ tạo phức với ion kim loại chuyển tiếp Chitosan [2,4,70] Trong phân tử chitosan có chứa nhóm chức mà nguyên tử oxi nitơ nhóm chức cặp electron chưa sử dụng, chúng có khả tạo phức, phối trí với hầu hết kim loại nặng như: Hg 2+, Cd2+, Zn2+, Cu2+, Ni2+, Co2+, Tuỳ nhóm chức mạch polyme mà thành phần cấu trúc phức khác Ví dụ: phức Ni(II) với chitin có cấu trúc bát diện với số phối trí 6, phức Ni(II) với chitosan có cấu trúc tứ diện với số phối trí [42] mạng polyme Hình 1.2: Sơ đồ mô tả tạo phức Ni(II) với chitin, chitosan Với diện nhóm amino vị trí hydroxyl vị trí 3, chitosan dễ hình thành chelat - chuỗi chelat với hầu hết ion kim loại Nhưng chitosan dùng công đoạn hấp thụ phải chitosan đóng mạng Quy trình đóng mạng thường sử dụng tác nhân glutraldehyde hay epichlorohydrin Gần người ta hay dùng sóng gamma có mặt cacbon tetrachloride chất nhạy dùng để xác định 1.2.2 Phương pháp điều chế β-chitosan từ mai mực ống[TLTK] β-Chitosan điều chế từ chitin cách sử dụng kiềm đặc (có thể kết hợp với yếu tố nhiệt độ cao) để đeaxetyl hoá β-chitin Phản ứng đeaxetyl hoá chitin thực nhiệt độ phòng (hình 1.3) để giảm thiểu phản ứng oxy hoá cắt mạch chitin diễn song song với phản ứng đeaxetyl hoá dẫn tới làm giảm khối lượng phân tử trung bình Phản ứng oxy hoá cắt mạch polyme tạo hỗn hợp polyme có độ dài mạch khác làm giảm tính đồng sản phẩm Bột β-chitin cho vào bình cầu chứa dung dịch NaOH 40-50% khuấy liên tục 24 Lọc, rửa mẫu nhiều lần nước đến trung tính thu β-chitosan màu trắng (sản phẩm phản ứng đeaxetyl hoá β-chitin) sau lọc, rửa nhiều lần nước cất Quá trình phản ứng tiến hành lặp lại để điều chế chitosan có độ đeaxetyl hóa cao Chiết soxhlet sản phẩm β-chitosan với metanol (24 giờ), axeton (24 giờ), sấy khô tủ sấy chân không 60°C (48 giờ) thu β-chitosan β-Chitosan điều chế không tan nước tan dung dịch axit loãng NaOH 40%-50%   → 24 giờ, nhiệt độ phòng (xử lý lặp lại) Hình 1.3: Sơ đồ điều chế β-chitosan 1.2.3 Các ứng dụng chitosan  Ứng dụng công nghiệp thực phẩm y học [TLTK] Chitosan có khả ức chế hoạt động số loại vi khuẩn E.Coli Một số dẫn xuất chitosan diệt số loại nấm hại dâu tây, cà rốt, đậu có tác dụng tốt bảo quản loại rau có vỏ cứng bên Có thể bảo quản loại thực phẩm tươi sống, đông lạnh bao gói chúng màng mỏng dễ phân hủy sinh học thân môi trường Trong thực tế người ta dùng màng chitosan để đựng bảo quản loại rau đào, dưa chuột, đậu, bưởi, Màng chitosan dai, khó xé rách, có độ bền tương đương với số chất dẻo dùng làm bao gói Nhờ vào tính ưu việt chitosan, cộng với đặc tính không độc, hợp với thể, tự tiêu huỷ được, nên chitosan ứng dụng rộng rãi có hiệu kỹ nghệ bào chế dược phẩm, làm thuốc chữa bỏng, giảm đau, thuốc hạ cholesterol, thuốc chữa bệnh dày, chống đông tụ máu, tăng sức đề kháng, chữa xương khớp chống đựợc bệnh ung thư Tại chiến Iraq vừa qua, Mỹ sử dụng loại băng cứu thương kiểu mới, kỹ thuật cao, có thành phần cấu tạo chất chitosan So với loại băng thường, tốc độ cầm máu, tính sát khuẩn thời gian lành mô sử dụng loại băng có hiệu gấp nhiều lần Và từ lâu, số chuyên gia Trung tâm Huyết học thuộc Viện Hàn lâm Y học Nga phát hiện, chitosan ngăn chặn phát triển chứng nhồi máu tim bệnh đột qụy Điển hình thị trường dược loại thuốc chữa khớp làm từ vỏ tôm có tên Glucosamin thịnh hành toàn giới  Ứng dụng xử lý nước [TLTK] Nước thải hoạt động khai thác mỏ, mạ kim loại, nhà máy điện, chế tạo thiết bị điện đặc biệt hoạt động tổ hợp nhiên liệu hạt nhân, sở quốc phòng, có chứa kim loại có độc tính cao crôm, cađimi, chì, thuỷ ngân, nikel, đồng,… cần xử lý trước thải môi trường Kết tủa hoá học, oxy hoá-khử, lọc học, trao đổi ion, tách màng, hấp thụ vật liệu than,… phương pháp sử dụng rộng rãi để tách kim loại nặng khỏi dòng thải Hấp thụ sinh học phương pháp sử dụng vật liệu sinh học để tách kim loại hay hợp chất hạt khỏi dung dịch Trong năm gần phương pháp đánh giá phương pháp hiệu kinh tế kĩ thuật để loại bỏ ion kim loại gây ô nhiễm nguồn nước mặt nhiều loại nước thải công nghiệp Có nhiều loại chất hấp thụ có khả tách kim loại khỏi dòng thải với chi phí thấp, chitosan có dung lượng hấp thụ cao Chitosan có khả hấp thụ tốt kim loại nặng có nhóm amino tự cấu trúc chitosan tạo thành deaxetyl hoá chitin Các phức chelat làm cho khả hấp thụ kim loại tăng gấp 5-6 lần so với chitin Khi ghép số nhóm chức vào khung cấu trúc chitosan làm tăng khả hấp thụ kim loại chitosan lên nhiều lần Một nhóm tác giả thuộc Phòng nghiên cứu kỹ thuật công trình quân đội Mỹ kết hợp Trung tâm nghiên cứu & quản lý chất thải Ủy ban quản lý tài nguyên thiên Trường đại học Tổng hợp Illinois kết hợp loại vật liệu hấp thụ sinh học với màng chitosan nhôm ôxit Vật liệu màng chitosan biến tính giá thể compozit sứ - nhôm oxit hấp thụ đạt 153,8mg Cr(VI)/g (với nồng độ ban đầu Cr(VI) 1000mg/l) Ảnh hưởng cấu trúc lỗ, độ phân bố kích thước lỗ xốp giá trị pH tới dung lượng hấp thụ rõ rệt Ở giá trị pH thấp, dung lượng hấp thụ tăng Sự có mặt nồng độ cao ion sulfat clorua làm giảm khả hấp thụ kim loại [79] Ở Việt Nam năm gần nhà khoa học nước bắt đầu quan tâm đến chitin Nhiều sở nghiên cứu Trường Đại học Thủy sản Nha Trang, Viện Hóa học - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên - Đại học Quốc gia Hà Nội, tiến hành nghiên cứu, tách chiết chitin, chitosan từ vỏ tôm phế thải chuyển hóa thành nhiều sản phẩm có giá trị ứng dụng thực tế cao 1.3 Nano ôxit sắt từ 1.3.1 Phương pháp tổng hợp Tổng hợp hạt nano sắt từ phương pháp đồng kết tủa [2,48,62] Về nguyên tắc, tổng hợp hạt nano sắt từ oxit theo hai nhóm phương pháp: nhóm phương pháp từ xuống (top-down) nhóm phương pháp từ lên (bottomup) Nhóm phương pháp từ xuống gồm phương pháp chia nhỏ vật liệu thô nghiền thành tinh, nghiền rung Nhóm phương pháp từ lên tập hợp phân tử, nguyên tử thành hạt có kích thước nm Nhóm phân thành hai loại phương pháp vật lý (phun xạ, bốc bay, ) phương pháp hóa học (kết tủa từ dung dịch, hình thành từ pha khí, phương pháp điện hóa, phương pháp siêu âm, ) Phương pháp đồng kết tủa phương pháp thường dùng để tạo hạt ôxit sắt Hyđroxit sắt bị ôxi hóa phần chất ôxi hóa khác tạo hạt từ ion Fe2+ Fe3+ dung môi nước Kích thước hạt (4-15 nm) diện tích bề mặt điều khiển độ pH ion dung dịch Một phương pháp khác thủy nhiệt, thủy nhiệt hợp chất chứa sắt nhiệt độ cao cải thiện đáng kể chất lượng hạt nano Bản chất phương pháp kết tủa đồng thời tất ion có thành phần ôxit phức hợp từ dung dịch mà thường dạng hiđroxit, cacbonat, oxalat,… trộn muối hoà tan kim loại tương ứng theo tỷ lệ xác 10 Làm tương tự với mẫu Fe3O4 – CS – Cur: ta có kết so sánh b b’ phương trình đường chuẩn Fe3O4 – CS – Cur ghi bảng 3.12 Bảng 3.12: Kết so sánh b b’ phương trình đường chuẩn Fe3O4 – CS – Cur N = 10 Trung bình (Mean) b b’ Độ lệch chuẩn Độ sai chuẩn (SD) (SE of mean) 2.19 1.98 0.69 0.63 2.11 1.95 Pvalue 0.867 Như ta có Pvalue = 0.867 > 0.05 nên ta kết luận phương sai b b’ khác nghĩa hay chúng giống Sau ta dùng chuẩn t để xem xét tiếp Tính độ lệch hợp nhât phương sai Spooled giá trị Sx Ai − xB nA nB i =1 i =1 ∑ ( xAi − xA )2 + ∑ ( xBi − xB )2 = S pooled = nA + nB − = ( nA − 1) S A2 + (nB − 1) S B2 n A + nB − (10 − 1)0.692 + (10 − 1)0.632 = = 0.661 10 + 10 − Với số thí nghiệm nhỏ 30 ta dùng chuẩn t (2 phía) để so sánh tthucnghiem = x A − xB S pooled nA nB (2.19 − 1.98) 10.10 = = 0.71 nA + nB 0.661 10 + 10 So sánh giá trị t vừa tính với giá trị t tra bảng (độ tin cậy 95%) ta có: tbảng = t(0.95; 18) = 2.10 > tthucnghiem nên b b’ khác ý nghĩa thống kê hay phương pháp phân tích không mắc sai số hệ thống 3.4 Đánh giá hiệu mang Curcumin hạt nano chitosan từ tính Kết đo độ hấp thụ Curcumin Fe 3O4 – CS – Curcumin theo nồng độ khoảng tuyến tính thu bảng 3.13 Bảng 3.13: Kết đo độ hấp thụ Curcumin Fe3O4 – CS – Cur Nồng độ (mg/l) Độ hấp thụ Nồng độ (mg/l) 57 Độ hấp thụ Cur 1.10-4 2.10-4 4.10-4 6.10-4 8.10-4 1.10-3 2.10-3 4.10-3 6.10-3 Cur 0.161 0.53 0.9 1.24 1.61 1.96 2.32 2.64 2.92 Fe3O4-CS-Cur 1.10-2 2.10-2 4.10-2 6.10-2 8.10-2 1.10-1 2.10-1 3.10-1 4.10-1 5.10-1 Fe3O4-CS-Cur 0.101 0.31 0.6 0.91 1.25 1.58 1.93 2.08 2.26 2.42 Từ kết cho thấy độ hấp thụ Curcumin mẫu nano chitosan từ tính mang curcumin so với độ hấp thụ curcumin nguyên chất khoảng 100 lần Điều cho thấy Curcumin chiếm khoảng 1% mẫu nano chitosan từ tính mang curcumin thu 3.5 Đánh giá phương pháp phân tích 3.5.1 Đánh giá độ lặp phương pháp 3.5.1.1 Đánh giá độ lặp thiết bị Với hệ máy có độ nhạy cao lặp lại ổn định cao đóng vai trò quan trọng phân tích Lặp lại tốt cho độ xác tốt phạm vi cho phép Để đánh giá độ lặp thiết bị tiến hành đo độ hấp thụ máy UV – VIS nồng độ nằm khoảng tuyến tính khảo sát nhiều lần khác Quá trình khảo sát đây, tiến hành đo độ hấp thụ Curcumin nồng độ 6.10-3 (mg/l) Fe3O4 – CS – Cur nồng độ 4.10 -1 (mg/l) lặp lại 10 lần Kết thu bảng 3.14 Bảng 3.14: Độ lặp lại Cur Fe3O4 – CS – Cur Lần lặp Lần Lần Lần Lần Lần Lần Độ hấp thụ Cur Độ hấp thụ 2.91 2.90 2.93 2.92 2.94 2.89 Fe3O4 – CS – Cur 2.27 2.29 2.28 2.24 2.25 2.23 58 Lần Lần Lần Lần 10 Giá trị trung bình RSD(%) 2.88 2.95 2.93 2.91 2.916 0,13 2.30 2.27 2.26 2.22 2.261 0,04 Kết cho thấy RSD < 1% chứng tỏ điều kiện hệ thống thiết bị làm việc ổn định phù hợp với phương pháp phân tích 3.5.1.2 Đánh giá độ chụm, độ lệch chuẩn lặp lại tái lặp phương pháp phân tích Để xác nhận giá trị phương pháp, tiến hành xác định đánh giá độ chụm, độ lệch chuẩn lặp lại độ tái lặp Quá trình đánh giá dựa thay đổi thiết bị phân tích khác cho nhiều kỹ thuật viên khác làm thực nghiệm điều kiện Trong điều kiện phòng thí nghiệm, tiến hành thực nghiệm đổi tay kỹ thuật viên Ở đây, tiến hành đo độ hấp thụ Curcumin nồng độ 6.10-3 (mg/l) Fe3O4 – CS – Cur nồng độ 4.10-1 (mg/l) lặp lại lần với kỹ thuật viên khác Kết thu bảng 3.15 Bảng 3.15: Kết đo độ hấp thụ Curcumin Fe3O4 – CS – Cur phương pháp chuẩn tay kỹ thuật viên STT 10 KTV Cur Fe3O4-CS2,93 2,95 2,9 2,93 2,89 2,91 2,91 2,94 2,9 2,92 Cur 2,24 2,25 2,26 2,25 2,25 2,24 2,23 2,27 2,27 2,25 KTV Cur Fe3O4-CSCur 2,23 2,26 2,25 2,26 2,22 2,24 2,24 2,25 2,25 2,24 2,9 2,91 2,87 2,94 2,92 2,93 2,9 2,91 2,95 2,93 59 Cur KTV Fe3O4-CS-Cur 2,93 2,94 2,9 2,92 2,89 2,95 2,9 2,89 2,91 2,91 2,22 2,26 2,23 2,23 2,26 2,25 2,25 2,26 2,25 2,25 Từ kết trên, sử dụng phần mềm minitab 14, thu bảng liệu thống kê bảng 3.16 Bảng 3.16: Các liệu thống kê đánh giá độ lặp lại phương pháp phân tích Đại lượng đánh giá KTV Cur Xtb Độ lệch chuẩn KTV Fe3O4- 2.918 KTV Cur CS-Cur 2.243 Fe3O4- Cur Fe3O4- 2.916 CS-Cur 2.25 2.914 CS-Cur 2.257 0,016 0,713 0,0236 0,809 0,0211 0,938 0,0216 0,741 0,0205 0,908 lặp lại (SD) Độ lệch chuẩn tương 0,0194 0,665 đối (%RSD) Sai số tương đối (ER) -0,068 -0,752 -0,137 -0,442 -0,205 -0,133 3,76.10-4 2,56.10-4 5,57.10-4 4,45.10-4 4,67.10-4 4,2.10-4 (%) Phương sai Căn vào giá trị %RSD ta thấy phép phân tích Cur Fe3O4-CS-Cur độ chụm hay độ lặp lại KTV1 tốt KTV2 Tuy nhiên KTV có giá trị %RSD < chứng tỏ KTV làm thí nghiệm có độ chụm tốt Dựa vào giá trị sai số tương đối ta thấy ba KTV mắc sai số hệ thống âm Độ đánh giá qua sai số tương đối KTV1 phân tích Cur tốt KTV3 ; phân tích Fe3O4-CS-Cur KTV3 tốt KTV1 Tuy nhiên ba giá trị sai số tương đối thấp ([...]... hành mang curcumin lên hạt nano chitosan từ tính để nhằm làm tăng khả năng hấp thụ của curcumin trong các loại dược liệu của nó Đồng thời, phân tích xác định hàm lượng Curcumin bằng phương pháp UV – Vis để đánh giá hiệu quả mang Curcumin lên hạt nano chitosan từ tính 30 CHƯƠNG 2 THỰC NGHIỆM VÀ CÁC PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Hoá chất và dụng cụ 2.1.1 Hóa chất - Nguyên liệu đầu vào là hạt nano chitosan từ. .. điều kiện và nồng độ mẫu như nhau Các kết quả thu được đem tính giá trị trung bình, giá trị này để đánh giá độ lặp cần khảo sát 2.6.2 Đánh giá độ đúng của phương pháp Ngoài độ lặp thì độ đúng cũng là yếu tố để đánh giá phương pháp phân tích 35 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Tổng hợp hạt nano chitosan từ tính mang Curcumin Hạt nano chitosan từ tính mang Curcumin được tổng hợp ở trên được đem kiểm... liệu nano chitosan từ tính ban đầu Kết quả đo TEM cho thấy kích thước hạt đạt được khoảng 20-25 nm và sự phân bố hạt khá đồng đều So sánh với hạt nano chitosan từ tính ban đầu ta thấy hạt mẫu điều chế được có kích thước lớn hơn hạt nguyên liệu ban đầu tuy nhiên vẫn đảm bảo kích thước nano của hạt Hình 3.1: Hình ảnh TEM của hạt nano chitosan từ tính mang curcumin Kiểm tra EDX cho thấy trong nano chitosan. .. hạt nano Fe 3O4 siêu thuận từ được biến tính bằng chitosan carboxymethylat qua liên kết cộng hóa trị của papain (enzym nước đu đủ) Feng và công sự đã tổng hợp đơn phân tán chitosan/ polyacrylic axit /hạt nano Fe3O4 bằng MRI Donadel và công sự đã chế tạo các hạt oxit sắt từ phủ một lớp chitosan sử dụng cho căn bệnh sốt cao Tuy nhiên, các độ bão hòa từ tính của hạt nano compozit là thấp (22 emu/g) và hiệu. .. chuyển sắt từ - siêu thuận từ được xác định bởi công thức sau [80]: KV < 25kBT Trong đó K là hằng số dị hướng từ tinh thể, V là thể tích hạt nano, k B là hằng số Boltzman, T là nhiệt độ Với một kích thước nhất định thì khi nhiệt độ thấp hạt nano thể hiện tính sắt từ, khi nhiệt độ cao hạt nano thể hiện tính siêu thuận từ Nhiệt độ mà ở đó hạt nano chuyển từ sắt từ sang siêu thuận từ được gọi là nhiệt độ... chitosan từ tính Hạt nguyên liệu này được phòng Polyme thiên nhiên – Viện Hóa học tổng hợp Hạt nano chitosan từ tính thu được có kích thước khoảng 20 nm, đồng thời từ hình ảnh TEM cho thấy kích thước hạt khá đồng đều và thành một khối thống nhất Hình 2.1: Hình ảnh TEM của nano chitosan từ tính - Curcumin: dạng bột - Dung dịch amoniac; axit oleic - Khí: Nitơ 2.1.2 Dụng cụ Bình 2 cổ, con từ, cốc thủy... siêu thuận từ vật liệu hưởng ứng mạnh với từ trường ngoài nhưng khi không có từ trường hạt nano ở trạng thái mất từ tính hoàn toàn Bằng việc lựa chọn bản chất vật liệu và kích thước, chúng ta có thể có được hạt nano siêu thuận từ như mong muốn Hai đặc trưng cơ bản của các chất siêu thuận từ: + Đường cong từ hóa không bị ảnh hưởng của nhiệt độ +Không có hiện tượng từ trễ, có nghĩa là lực kháng từ HC =... các momen từ dao động tự do Do đó không còn từ trường bên trong nữa và vật liệu thể hiện tính thuận từ 15 Trong một vật liệu không đồng nhất, người ta có thể quan sát được cả tính sắt từ và thuận từ của các phân tử ở cùng một nhiệt độ, tức là xảy ra hiện tượng siêu thuận từ Tính siêu thuân từ có được khi kích thước nhỏ đến mức năng lượng nhiệt phá vỡ trạng thái trật tự từ Kích thước chuyển sắt từ - siêu... máy khuấy từ 31 2.2 Phương pháp chế tạo vật liệu nano Fe3O4/β -chitosan /curcumin Lấy 200 ml dung dịch chitosan từ tính (khoảng 5 gam), vừa khuấy vừa nhỏ giọt 45ml dung dịch curcumin 0,5% (Curcumin được pha thành dung dịch 0,5% trong etanol) trong khoảng 10 phút, tiếp theo thêm từ từ 30 ml TPP 0,5% (0,15g) trong khoảng 3 phút Sau đó, tiếp tục khuấy 40 phút, lấy mẫu ra đo pH rồi điều chỉnh pH lên 5 bằng... hưởng ứng dưới tác động của từ trường ngoài nhưng khi ngừng tác động của từ trường ngoài, vật liệu sẽ không còn từ tính nữa Đây là một dặc điểm rất quan trọng khi dùng vật liệu này cho các ứng dụng y sinh học 1.4 Curcumin 1.4.1 Phương pháp tách chiết Curcumin Curcumin là một hỗn hợp của ba curcuminnoit có tên là curcumin, demetoxy -curcumin và bisdemetoxycurcumin, được chiết ra từ củ nghệ vàng (tên khoa ... dầu ete-etyl axetat (tỷ lệ thể tích 9: 1) cho hai lần phát triển Các đốm sắc ký đồ màu sử dụng 1% vanillin axit sulfuric Sự có mặt curcuminoids bán định lượng λ quét λ tham khảo 518 800 nm Các tác... trưng cấu trúc tinh thể, độ đơn pha nhiều thông số liên quan khác Nhiễu xạ tia X thực máy D8-Advance hãng Bruker, CHLB Đức Khoa Hóa học, trường Đại học Khoa học Tự nhiên 2.3.6 Phổ hồng ngoại