Tìm hiểu sự tăng trưởng và tích lũy tinh dầu trong thân rễ của cây nghệ đen curcuma zedoaria rosc

ABA abscisic acid (acid abscisic) BA (BAP) 2,4-D benzyl adenine (benzyl amino purin) GA3 gibberellic gibberellic) 1.3.3 Thành phần hóanuôi học tổng hợp tinh dầu 6.1.4 hưởng BA lên trọng lượng khô hàm lượng tinh Conacid xin(acid vôẢnh biết ơncủa Ba, Mẹ sinh thành, dĩvà ống tạo điều LỜI CẢM ƠN Trang 2.2.9dầu ởXử lýNghệ chất điều tăngvườn trưởng thực vật Nghệ đen 57 đenhòa indol acetic acid (acid indol acetic) 11 vườn.26 kiện cho có hội tiếp tục học tập Xin cảm ơn anh Hai, gia ìỈLh Má CÁC CHỮ VIẾT TẮT i Đề tài thực Bộ môn Sinh lý Thực vật, Khoa Sinh học, Trường MỞ ĐẦU Xử 6.22.2.10 THẢO LUẬN 60 tất cảbutyric người thânindol quan tâm giúp hoc trongcủa thờitinh gian dầu qua CÁC CHỮ VIẾT TẮT indol acid (acid butyric) 1.3.4 Hoạt tínhđốsinh Đại HọcMỤC Khoa BẢNG ii Học Tự Nhiên, Đại Học Quốc Gia Thành phố Hồ Chí Minh DANH 6.2.1 Sự tăng trưởng, cấu trúc giải phẫu tích lũy tinh dầu của27củ lý số liệu jasmonic acid (acid jasmonic) 14 Nghệ Để hoàn thành luận văn này, em xinRosc chân (Zingiberaceae) thành tỏ lòng biếtlàơnloài đến: NghệMỤC đen Curcuma zedoaria thân thảo lâu DANH HÌNH iii KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 đen 60 TP Hồ tìm Chí Minh, 03 năm 2011 1.3.5 Sựthấy dùng tinh dầu nông y dược a-naphthalene acetic acid (acid a-naphthalene acetic) năm, có thân rễ (củ) tháng nhiều nước thuộc vùng nhiệt đớivà Việt Cố GS TS Mai Trần Ngọc Tiếng, người Thầy sáng lậpnghiệp nên Bộ môn Sinh DANH MỤC ẢNH v 3.1 KẾT QUẢ 28 6.2.2 SựLan thay đổi trọng lượng khô, độ hô hấp, hàm lượng tinh Nam, Ân Độvà Thái Trong yem học cổ củ Nghệ để trị 14 primary thickening meristem, mô phân sinh dày cấpcường Nguyễn Thị Bình lý Thực Vật tạo điều kiện cho cóDuy cơtruyền, hội học vàđen thực tập dùng chuyên 3.1.1 Sự bột hoạt tính chất điều hòa tăng trưởng thực vật củ Nghệ đen MỞ bệnhĐẦU xanh xao, thiếu hưởng máu, viêm loét dày, phần quan trọng củtrưởng Nghệ ngành 1.4 Ảnh củadạ chấtThành tăng trưởng, cấu trúc giải phẫu tíchđiều lũy hòa tinhtăng dầu củ trọng lượng khô cấp một.63 QUAN TÀI LIỆU đen1là TỔNG tinh tích dầu có đen tính kháng khuẩn, kháng nấm, kháng virus, diệt côn trùng28 lũy tinh dầu Nghệ đen 65 Nghệ vườn thực vật đến tăng trưởng PGS.TS trọng lượng tươi Bùi Trang Việt, người Thầy gi ảng dạy truyền đạt cho em chống oxitích hóa, raĐỀ dùng để Nghệ làm gia vị, nước hoa, lũyngoài hợp thứ cấp 16 KẾT LUẬN VÀ NGHỊ 68 4củ Sự 1.1 tăng NGHỆ trưởng ĐEN .2 củ vườn kiến thức cảchất kinh nghiệm đen quý Thầy t ạo điều kiện tốt cho28 em nay, nhiều nghiên cứu nàyvấn nhưđềtạo củ insuốt vitro (Anisuzzaman làm5Hiện quen môi trường vàvề gợiloài mở nhiều thời gian học Auxin tập29 1.4.1 Cấu trúc giải phẫu Nghệ đen 7.1với KẾT LUẬN 68 1.1.1 .Phân loại cs, 2008), phânvăn tích phần hóa học tính kháng oxi hóa tinh dầu Nghệ thực 6.1.1 luận tạithành Bộ môn S 16 7.2 ĐỀ NGHỊ 68 đen (Trần Thị cs, 2007), nuôi dịch treo tế bào (Nguyễnlượng Hoàngtinh Lộc ự Việt thayHoa đổiSanh, trọng lượngkhoa khô,cấy cường hấp, TS Nguyễn Du trưởng Sinh học độ hô nhận em hàm vào chuyên ngành 1.4.2 Gibberellin bột hoạt vật TÀI THAM KHẢO 69 1.1.2 Đặc sinh củ học cs,LIỆU 2009), đãvà thựctính hiện.chất điều hòa tăng trưởng thực điểm tận tình giảng dạy, góp ý cho em học tập Nghệ đen cấp vườn 36 Nhằm làm tăng tích lũy tinh dầu phát triển củ, đề tài: “Tìm hiểu 17 PHỤ LỤC PGS TS Thịlượng Bạchkhô, Mai,cường PGS độ TS.hôBùi Lệ, lượng PGS TS Minh > Sự thay đổiVõ trọng hấpVăn hàm tinhNguyễn bột 1.4.3 Acid Phân abscisic trưởng vàmôi tíchtrường lũy tinh dầu thân rễ Nghệ đen Curcuma zedoaria 1.1.3 -tăng Thành phần MSNhựt, Châu, PGS TS Dương TS.trong Nguyễn Thị Quỳnh, TS Nguyễn Hữu Hổ bố củ NghệTấn đen cấp vườn 36 Rosc.” thực nhằm mục đích: 17 TS.>LêSự Thị Thủy Tiên tậnchất tình giảng dạy, ý chothực em học thay đổi hoạt tính hòaCông tínggóp tr ưởng vật củtập Nghệ - Bài báo gởi đăng tạp chí Khoa điều học nghệ, ĐHQGTPHCM - Tìm hiểucấp tăng trưởng rễ, tích lũy tinh dầu liên hệ tăngCytokinin trưởng đen trongthân vườn .38 1.4.4 Th.S Phan Ngô Hoang, Thầy t ận tình góp ý, giúp đỡ em lúc khóT 1.1.4 tích lũy tinh dầu thân rễ khăn, tạo 6.1.2 điều kiện thuận lợi cho em suốt thời gian học tập thực S 18 ác dụng dược lý ự nuôi chấtcấy điều in hòa vitro tăngvà trưởng quanthực sátvật hoạt vào động thời điểm củathích mô hợp phân đểsinh làm luận- văn.Áp dụng 1.4.5 Acid jasmonic dày 41 tăng1.1.5 tíchcấp lũy tinh dầu thân rễ Em xin chân thành cảm ơn: 19 > Sự nuôiThành cấy in vitro .41 phần hóa học Th.S Trần Thanh Hương, Th.S Trịnh Cẩm Tú, Th.S Trần Thị Thanh Hiền, VẬT LIỆU VÀ động PHƯƠNG PHÁP 20 >2 Quan sát hoạt mô phân sinh dày cấp 41 Cô Lê 2.1 Thị1.1.6 Thanh Xuân, Th.S Đỗ Thường Kiệt dẫn động viên em VẬT LIỆU 20 6.1.3 Ảnh hưởng chất điều hòa ăng tr ưởng trong suốt thờiCác giannghiên học tập cứu thực hiệnvà luận văn.nước Nghệ đen thực vật lên gia Vật tăng liệu dùng để phân tích xử lý 2.1.1 đường thân lũy 18, tinh19,dầu câysinh Nghệ CácCỦ anh chịkính bạnvàcaohoạt họcđộng khóa tích 16, 17, cácởem viênđen khóain 1.2 .6 20 vitro.46 2005, 2006, 2007, em Hiệp, chị Huyền giúp đỡ chia sẻ Bình thời 1.2.1 .Sự hình thành củ dùngGA nuôi cấy > qua Ảnh 2.1.2 hưởng chất điều hòa tăng trưởng Vật thựcliệu vật (IAA, 3, BA) gian lên gia tăng đường kính thân hoạt động tích lũy tinh dầu Nghệ 20 đen in vitro 46 2.1.3 Vật liệu dùng sinh trắc nghiệm IAA IBA JA NAA PTM TLK TLT 2,4-dichlorophenoxyacetic acid MỤCi LỤC v DANH MỤC ẢNH Trang Ảnh 1.1 Cây Nghệ đen Curcuma zedoaria .3 Ảnh 3.1 Sự phát triển củ Nghệ đen từ củ mẹ (m) 30 Ảnh 3.2 Củ nghệ đen vườn sau (A), (B), (C) 10 (D) tháng trồng .31 Ảnh 3.3 Lát cắt ngang củ Nghệ đen với bó libe mộc xếp chồng lên bó mộc chuyên hóa ly tâm 32 Ảnh 3.4 Lát cắt ngang củ Nghệ đen cho thấy tinh bột tích trữ nhiều vùng vỏ lõi 32 Ảnh 3.5 Lát cắt ngang củ Nghệ đen vườn cho thấy tinh dầu (mũi tên) tích trữ nhu mô 33 Ảnh 3.6 Lát cắt ngang rễ Nghệ đen 33 Ảnh 3.7 Cây Nghệ đen in vitro sáu tuần tuổi môi trường MS (A) sau ba tháng tuổi môi trường MS bổ sung BA mg/l IBA 0,5 mg/l (B) .42 Ảnh 3.8 Mô phân sinh dày cấp thân Nghệ đen in vitro ba tháng tuổi .43 Ảnh 3.9 Sự hình thành bó mạch từ vùng mô phân sinh dày cấp lát cắt ngang thân Nghệ đen in vitro vị trí xa mô phân sinh 44 Ảnh 3.10 Nội bì trụ bì hình thành lát cắt ngang phần gốc thân Nghệ đen in vitro 45 Ảnh 3.11 Lát cắt dọc qua vùng mô phân sinh thân Nghệ đen in vitro cho thấy phần gốc thân (khoảng nách thứ bảy trở đi) vùng mô phân sinh dày cấp biệt hóa hoàn toàn (mũi tên) 45 Ảnh 3.12 Lát cắt dọc thân Nghệ đen in vitro sau tuần nuôi cấy với môi trường có bố sung chất điều hòa tăng trưởng thực vật khác cho thấy thay đổi đường kính vùng lõi thân 49 Ảnh 3.13 Sự phân bố hạt tinh dầu vị trí nách thứ sáu thân Nghệ đen in vitro sau hai tuần nuôi cấy (mũi tên: hạt tinh dầu) 50 iii 11 29 28 vi HÌNH DANH MỤC iv BẢNG 3sinh KẾT QUẢ THẢO Sau - 8VÀ tháng trồng,LUẬN từ củ mẹ làm giống ban đầu Nghệ đen hình thành hệ thống vớiQUẢ cấp củ khác nhau, từ củ cấp đến củ cấp ba Đến 10 - 12 Trang tháng 3.1củ KẾT Ảnh 3.14 Khúc cắt thân Nghệ đen in vitro sau hai tuần nuôi cấy với môi trường Bảng củ 3.1.cấp Số hạt tinh dầu/thị trường kínhthay có cắtgiai ngang phần củ cấp củ Hình 1.1 Sinh tổng terpen .12 trồng, có hợp đường kính không đổi solátvới đoạn tháng trồng, 3.1.1 Sự tăng trưởng, cấu tăng trúc giải vàqua tích lũy tinh dầu củaláin củ Hình 3.11 Sự thay đổi sốchồi hạt tinh dầu/lát cắtphẫu ngang thân Nghệ đen bổ sung BA mg/l mang bên trưởng phần gốc thân (vị trí nách thứvitro giai đoạn phát triển Nghệ đen vườn 34 cấp hai gia tăng đường kính, ba gia tăng số lượng đường kính củ so Hình Sinh tổng hợp monoterpen vànuôi sesquiterpen .13 vị trí nách khác saucủhaicấp tuần cấy với môi trường MS bổ sung bảycác và1.2 tám) .55 Nghệ đen vườn Bảng tích dầu phần củ cấp hai giai đoạn 10thu tháng BA 1, 3.2 3,đoạn Thể và87tháng mg/ltinh (đối chứng làgiữa môithân trường MS) .54 với giai trồng Hệ thống khímột, sinh bắt đầubalụi đi, củ hoạch Ảnh 3.15 Sự phân bố hạt tinh dầu nách 5, , (A -D) thân Hình 2.1 Sơ đồ ly trích cô lập chất điều hòa tăng trưởng thực vật 24 Sự tăngNghệ trưởng củvườn 35 Nghệ đen vườn tuổi>của đencủa Hình 3.12 lượng củnuôi cấp mộtvới củ cấp baởởlát giai đoạn 103phần tháng trồng (ảnh 3.2D) Nghệ3.1D đen inTrọng vitro tuầntinh cấy môi trường bổ sung BA mg/l 56 Hình 3.1 Sự thay sau đổi hai số khô hạt dầu/thị trường kính cắt ngang củcủa Câyđen Nghệ đen trồng vườn tạivàhuyện Vĩnh Cửu, Nghệ vườn sau khitrong xửđộ lý 58 Bảng 3.3 Trọng lượng khô, cường hô hấp hàmtrong lượng tinh tỉnh bột ởĐồng phầnNai giữaTừ củ cấp giai đoạn phát triển Nghệ Ảnh 3.16 Củ giải giai đoạn 10 tháng trồng câyđen Nghệ đenvườn 34 vườn sau xử lý >một Cấu trúc phẫu câycủa Nghệ đen cấpmẹ, giaimột, đoạncấp phát triển ba câyđược Nghệhình đenthành lần vườn 36 củ củ cấp hai cấp lượt từ chồi mầm ĩ 59 Hình 3.13 Sự thay đổi thể tích tinh dầu củ cấp củ cấp ba ởhai giai đoạn 10 Hình 3.2 Sự thay đổi hàm lượng tinh dầu phần củ cấp một, ba giai Củ Nghệ đen có cấu trúc thân đơn tử diệp với bó libe mộc xếp tháng trồng câyvà Nghệ đen vườn sau xửvật lý 58 Bảng 3.4 Hoạt tính chất điều hòa tăng trưởng thực củahiện củ cấp ởmầm giai củ mẹ,10 củtháng cấp củcây cấp hai Đôi khi, củ cấp bốn xuất từ chồi củ đoạn tuổi Nghệ đen vườn 35 chồng lên bó mạch chuyên hóa ly tâm Giữa libe mộc tượng đoạn cấp ba.4, 6, 10 tháng trồng Nghệ đen vườn 38 Hìnhlibe 3.3.mộc Sự với thaycác đổitếtrọng lượng hàm lượng bột phần phân chia củ cấp tầng bào dẹp dài,khô xếpvàtiếp tuyến vàtinh có khả mạnh Bảng 3.5 Đường kính thân số hạt tinh dầu/lát cắt ngang Nghệ đen in Củ mẹ trồng củ cấp hai có mang củ cấp ba Sau hai tuần trồng, giai đoạn phát triển Nghệ đen vườn 37 (ảnh 3.3) Củ tích trữ nhiều tinh bột vùng vỏ vùng lõi (ảnh 3.4) Bên cạnh có chồi trênsau củhai mẹtuần tái nuôi lập tăng thân sinh các(ảnh vitro vị trí nách mầm số sáu cấy trưởng với môithành trường có khí bổ sung chất Hình 3.4 Sự thay đổicủa cường độ hô hấp phần củ cấp mộtchiết cácquang giai đoạn phát có s ự diện hạt tinh dầu màu vàng, có tính nằm điều hòa trưởng thực vậttrưởng khác 47 3.1A) Khităng thân khí đen sinh tăng mạnh củ mẹ suy giảm, phần gốc thân triển Nghệ vườn 37 tế bào nhu mô tiết, tế bào thường có kích thước to so với tế bào Bảng 3.6 Sự thay đổi thành đườngcủ kính Nghệ đenSau in vitro vị trí nách khí sinh phình to hình cấpthân mộtcây (ảnh 3.1B) - 4tại tháng trồng, thân Hình 3.5 Sự thay đổi hoạt tính auxin củ cấp giai đoạn phát triển nhu mô bên cạnh (ảnh 3.5) khác sau hai cấymột với môi trườngkính MS2,5 có -bổ3,5 sung vàmầm mg/l khí mang - 7tuần lávườn 39 vànuôi củ cấp có đường cm,BA 1, các3,chồi câysinh Nghệ đen 5trong (đối chứng môi trường MS) 52 Rễ Nghệ đen đặccấp tính riêng củalên rễhình đơn thành tử diệp có bó khoảng mộc xếp phần phần đáymang củ phình củgồm cấp hai, Hình 3.6 Sự thay đổi hoạt tính cytokinin củ cấp giai đoạn phát triển Bảng 3.7 Số chồi có bênvùng đượcphân hìnhsinh thành tạimộc vị trí nách thứ bảy, támlibe mộc thay (ảnh đổi tâm,hai không libe xuyên tâm -hướng củcây cấp hình vườn 39 thành với đường kính xếp từ 0,5 - cm (ảnh 3.1C và 3.2A) Ở Nghệ đen số hạt tinh dầu/lát cắt ngang qua thân Nghệ đen in vitro vị trí nách 3.6).đoạn Nghệ đen tháng trồng, có gia tăng đường kính củ cấp (3,5 giai khác sauthay hai tuần nuôitính cấy gibberellin với môi trường MScấp làm đốiởchứng vàđoạn MS bổ sung Hình 3.7 Sự đổi hoạt củ giai phát triển >cây lũy tinh dầu củCác Nghệ đen vườngiữa đáy củ cấp hai BA 1, Sự 3,và 5tích vàcấp 7đen mg/l 53 -của cm) củ hai (1,5 - 3của cm) chồi mầm phần Nghệ vườn 40 phình hình thành cấp có khoảng -của củ cấp baởtinh hình thdần ành với Trên lát cắtcủ ngang phần củdầu cho thấy số hạtmột tăng theo Bảng lên Trọng lượng khô vàba, thể tích tinh củ cấp vàdầu củ cấp ba ởphát giai Hình 3.8 Sự thay đổi hoạt tính acid abscisic củ cấp giai đoạn đoạncủ, 10 tháng trồng đenMột saucao khinhất xử lý 57 triển câytrung vườn 40 đường kính từNghệ 0,5 -đen 1của cm (ảnh 3.2B) sốvườn tuổi, chồi mầm phần củ tuổi tập thấp ởNghệ giai đoạn tháng giai đoạncủa 10các tháng cấp hai tăng thành thânkính khí bành trướng tuổi củ cấp Nghệ đensinh 3.1 vàđen hình 3.1) Hình 3.9 Sựtrưởng thaycủa đổi đường thân vàvườn sốgiúp hạt(bảng tinh Nghệ dầu/thị trường kính vịrộng trí nách láTương thứ sáu thân Nghệ inhạt vitro saudầu, hai hàm tuần nuôi cấy vớidầu môicũng trường Đường kính củứng cấpvới mộtsựcây haiđen tiếp tụctinh gia tăng giai đoạn Nghệ đengia8 tậpcấp trung lượng tinh bổ sung chất điều hòa tăng trưởng thực vật khác (Các số sau kí hiệu IAA, tháng trồng (củcủ cấpCủmột đường -sớm cm, củ có cấphàm hai lượng có đường - 3giá cm), tăng theo tuổi cấpcómột hìnhkính thành tinhkính dầu đạt trị BA GA3 nồng độ, mg/l) 48 số lượng cấp haihai không thay lượng đổi Sốtinh lượng đường củ cấp ba cao nhiên nhất, tiếp đến làcủcủ cấp với hàm dầuvà giảm dầnkính thấp củ Hình 3.10 Sự thay đổi đường kính thân Nghệ đen in vitro vị trí nách giai đoạn 3.2 tháng trồng tăng cao so với giai đoạn tháng trồng (khoảng - 12 cấp banhau (bảng vàtuần hìnhnuôi 3.2) khác sau hai cấy với môi trường MS bổ sung BA 1, 3, mg/l củ cấp ba với đường kính đạt - cm) (ảnh 3.2C) Đôi chồi mầm phần (đối chứng môi trường MS) 54 củ cấp ba phình lên hình thành củ cấp bốn vài chồi mầm phần củ cấp ba tái lập tăng trưởng thành thân khí 30 Ảnh 3.1 Sự phát triển củ Nghệ đen từ củ mẹ (m) A, Chồi mầm tái lập tăng trưởng củ mẹ sau hai tuần trồng B, Thân khí sinh phát triển cho củ cấp (mũi tên) C, Củ cấp hai hình thành từ củ cấp sau tháng trồng D, Củ cấp một, hai, ba bốn thu hoạch sau 10 tháng trồng (1: củ cấp một; 2: củ cấp hai; 3: củ cấp ba) 32 33 34 3531 Bảng 3.2 3.1 Thể Số hạt trường có phần cấp tíchtinh tinhdầu/thị dầu phần giữakính củ cấp một, lát hai cắt ngang ba giai đoạn 10củtháng cáccây giai đoạnđen phát triểnvườn Nghệ đen vườn tuổi Nghệ cm Các số trung bình cột với mẫu tự khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Ảnh 3.3 ngang củ Nghệ với bó chồng lên bó hạt tinh dầu/thị trường kính (xvườn 10) libe Ảnh 3.5 Lát LátSốcắt cắt ngang củ Nghệ đenđen chomộc thấyxếp tinh dầu (mũi tên)và mộctrữ chuyên tâm tích tronghóa nhulymô 10,13 ± 0,24a 10,85 ± 0,15b cm WJ* JT r # T lip i /*4r Ảnh 3.2 Củ nghệ đen11,88 trong±vườn (A),* (B), (C) 10 (D) tháng trồng 0,22 sau c d* * Jí _ 12,76 ± 0,22d 10 -.m f Hl I riPWj í%f \ ft - i» * íl Hình 3.1 Sự thay đổi số hạt tinh dầu/thị trường kính lát cắt ngang phần củ cấp giai đoạn phát triển Nghệ đen vườn 500 ^m Cấp củ Thể tích tinh dầu (ml/100 g TLT) Ảnh 3.4 Lát cắt củ Nghệ đen cho thấy tinhđen bột tích trữ nhiều vùng vỏ angang Ảnh 3.6 Lát cắt ngang rễ Nghệ 1,35 ± 0,06 lõi 1,18 ± 0,04b 0,95 ± 0,03c 37 38 36 3.1.2 trọng khô,tăng cường độ hôthực hấp,vật hàm tinhđen bột > Sự thaySự đổithay hoạtđổi tính chấtlượng điều hòa trưởng củalượng củ Nghệ chất điều hòa tăng trưởng thực vật củ Nghệ đen cấp cấphoạt mộttính vườn vườncủa auxin, gibberellin acid abscisic cao giai đoạn củ tháng Hoạt tính Sự thay đổiở trọng lượng cường hô hấp vàkhi hàm tinh cytokinin bột tuổi,>giảm mạnh giai đoạn 6, 8khô, 10 thángđộtuổi Trong đó,lượng hoạt tính củ Nghệ cấptuổi, mộttiếp cao giai đoạn 4đen tháng tụcvườn trì cao giai đoạn tháng tuổi bắt đầu Trọng lượng lượng tinh bột tăng tuổi củ Trọng lượng giảm dần giai đoạnkhô vàvà 10hàm tháng tuổi (bảng 3.4, hìnhdần 3.5theo - 3.8) khô hàm lượng tinh bột thấp giai đoạn tháng tuổi, tăng mạnh (gấp đôi) Bảng 3.4 Hoạt tính chất điều hòa tăng trưởng thực vật củ cấp giai giai đoạn tháng tuổi tiếp tục tăng giai đoạn 10 tháng tuổi củ cấp đoạn 4, 6, 10 tháng trồng Nghệ đen vườn Các số trung bình cột với mẫu tự khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Nghệ đen vườn Trong đó, cường độ hô hấp lại giảm dần theo tuổi củ Cường độ hô hấp đạt giá trị cao giai đoạn tháng tuổi, giảm dần giai đoạn 6, tháng tuổi thấp giai đoạn 10 tháng tuổi củ cấp Nghệ đen vườn (bảng 3.3, hình 3.3 3.4) Tuổi (tháng) 10 Tuổi (tháng) 10 Trọng lượng khô Hàm lượng tinh bột Cường độ hô hấp Bảng 3.3 Trọng lượng khô, cường độ hô hấp hàm tinh lượng bộtgiữa phần giữamột củ Hình Sự thay đổi trọng lượng khô hàm lượng bộttinh phần củ cấp (mg/g TLT) (mg/g TLK) (pmolO2/gTLT/giờ) cấp giai vườn cácmột giaiở đoạn phátđoạn triểnphát củatriển Nghệ đenNghệ trongđen vườn 110 ± 4a 75,5 ± 5,0a 9,97 ± 0,21d 220 ± 10b 144,5 ± 4,5b 6,49 ± 0,18c 260 ± 3c 159,6 ± 3,7b 4,06 ± 0,08b 290 ± 3d 177,5 ± 5,4c 1,51 ± 0,01a Hoạt tính chất điều hòa tăng trưởng thực vật (mg/l) Auxin Acid abscisic Hình 3.2 Sự tinh dầu phần hai ba giai c thay đổi hàm lượng c c củ cấp một, 0,27số±trung 0,02bình trong0,29 ± 0,03 0,43nhau ± 0,04 ± 0,02 Các cột với mẫu tự khác khác biệt0,32 có ý nghĩa cmức p = 0,05 đoạn 10 tháng tuổi Nghệ đen vườn 0,11 ± 0,01ab 0,27 ± 0,02c 0,27 ± 0,03b 0,10 ± 0,01a 0,13 ± 0,01b Cytokinin Gibberellin 0,18 ± 0,01b 0,08 ± 0,01a 0,16 ± 0,01b Hình 3.4 Sự athay đổi cường độ ahô hấp phần cấp giai đoạn phát 0,07 ± 0,00 0,10 ± 0,01 0,06 ± 0,00 0,10 ± 0,01a triển Nghệ đen vườn 40 41 39 3.1.3 Sự nuôi cấy in vitro quan sát hạt động mô phân sinh dày cấp > Sự nuôi cấy in vitro Sau hai tuần nuôi cấy, chồi mầm bắt đầu tăng trưởng môi trường MS Ở tuần thứ sáu, chồi mầm tăng trưởng mạnh, phát triển thành mang - cấy chuyền sang môi trường MS có bổ sung BA mg/l IBA 0,5 mg/l để tạo cụm chồi (ảnh 3.7) > Quan sát hoạt động mô phân sinh dày cấp Thân Nghệ đen gia tăng đường kính từ vùng mô với tế bào phân chia mạnh, gọi mô phân sinh dày cấp Lát cắt dọc qua vùng mô phân sinh thân Nghệ đen in vitro ba tháng tuổi cho thấy mô phân sinh dày cấp bố thay ngayđổi môtính phân sinhcủa sơở khởi 3.8A) Ở láttriển cắt Hìnhphân 3.7 hoạt gibberellin củ cấp các(ảnh giai đoạn 3.5 Sự hoạt tính auxin củ cấp cácở giai đoạn phátphát triển ngang gần môtrong phânvườn sinh ngọn, mô phân sinh dày cấp xếp thành Nghệ câythân Nghệ đen đen vườn vòng tròn xung quanh bó mạch (ảnh 3.8B) Mô phân sinh dày cấp xuất vùng trụ bì, vùng vỏ có tương đối bó mạch vùng trung tâm có tập trung nhiều bó mạch hơn, bao gồm tế bào dẹp, dài, xếp xuyên tâm Các tế bào Các số trung bình cột với mẫu tự khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 phân chia tiếp tuyến hình thành nhu mô vỏ nhu mô lõi (ảnh 3.8 C - D) Trong đó, lát cắt ngang qua thân vị trí xa mô phân sinh hơn, số vùng mô phân sinh dày cấp phân chia lộn xộn hình thành nên bó mạch hướng vào ( ảnh 3.9) Ở lát cắt ngang thân Nghệ đen in vitro vị trí gần gốc thân cho thấy mô phân sinh dày cấp biệt hóa thành nội bì, trụ bì (ảnh 3.10) ngừng hoạt động (khoảng nách thứ bảy trở đi) (ảnh 3.11) 3.6 Sự thay đổi hoạt tính acid cytokinin củacủa củ cấp mộtmột giaigiai đoạn phátphát triển Hình 3.8 abscisic củ cấp đoạn đen vườn.vườn triển củaNghệ Nghệ đen 42 Ảnh 3.7 Cây Nghệ đen in vitro sáu tuần tuổi môi trường MS (A) sau ba tháng tuổi môi trường MS bổ sung BA mg/l IBA 0,5 mg/l (B) 43 PTM L A 500 nm PTM PTM 500^m Ảnh 3.8 Mô phân sinh dày cấp thân Nghệ đen in vitro ba tháng tuổi A, Lát cắt dọc thân cho thấy mô phân sinh dày cấp nằm mô phân sinh sơ khởi lá, phân bố dọc vùng ngoại vi thân B, Lát cắt ngang thân mô phân sinh cho thấy mô phân sinh dày cấp phân bố thành vòng tròn quanh trục C-D, Chi tiết vùng mô phân sinh dày cấp mô phân sinh cho thấy tế bào dài, dẹp xếp xuyên tâm PTM, mô phân sinh dày cấp 46 44 45 47 Bảng 3.5 Đường thâncủa số hạt điều tinh dầu/lát cắttrưởng ngang câyvật Nghệ in vitro 3.1.4 Ảnhkính hưởng chất hòa tăng thực lên đen gia tăng vị trí đường nách lákính số sáu sauvà haihoạt tuầnđộng nuôi tích cấy với môi trường có bổ sungđen cácinchất điều thân lũy tinh dầu Nghệ vitro hòa tăng trưởng thực vậtcác khác > Ảnh hưởng chất điều hòa tăng trưởng thực vật (IAA, GA 3, BA) lên gia tăng đường kính thân hoạt động tích lũy tinh dầu Nghệ đen in vitro Các chất điều hòa tăng trưởng thực vật có tác động khác lên gia tăng đường kính thân hoạt động tích lũy tinh dầu Nghệ đen in vitro Sau tuần nuôi cấy, đường kính thân Nghệ đen in vitro vị trí nách Ảnh 3.10 Nội bì trụ bì hình thành lát cắt ngang phần gốc thân Nghệ đen in thứ sáu nghiệm thức khác có thay đổi rõ rệt Bổ sung vào môi trường vitro nuôi cấy IAA mg/l BA 1, 3, hay mg/l làm tăng đường kính thân, A, Mô phân sinh dày cấp biệt hóa thành nội bì ngấm mộc tố (mũi tên) bổ sung BA mg/l cho đường kính thân đạt giá trị cao Ngược lại, bổ B, Chi tiết vùng mô phân sinh dày cấp bi ệt hóa thành nội bì trụ bì sung GA3 làm giảm đường kính thân nồng độ hay 10 mg/l (bảng 3.5, hình 3.9, nằm nội bì ảnh 3.12) Tương ứng với gia tăng đường kính, lát cắt ngang thân vị trí nách thứ sáu số hạt tinh dầu tập trung nhiều nuôi cấy khúc cắt thân với môi trường bổ sung IAA nồng độ hay mg/l BA hay mg/l Ở nghiệm thức có BA hay mg/l cho giá trị cao (ảnh 3.13) Trong đó, bổ sung GA hay 10 mg/l không làm gia tăng số hạt tinh dầu GA nồng độ 10 mg/l cho số hạt tinh kínhbó thân Số hạtmô tinh dầu/lát Ảnh 3.9 Sự Đường hình thành mạch từ vùng phân sinhcắt dày cấp lát cắt dầu thấp so với đối chứng (bảng 3.5 hình 3.9) (pm) ngang ngang thân Nghệ đen in vitro vị trí xa mô phân sinh A, Các tế bào1859 mô phân (PTM) phân bc chia mạnh hình thành nên Đối chứng (MS) ± 26cdsinh dày cấp 45,5 ± 0,7 ống sàng (s), tế bào kèm (k) thuộc bó libe tế bào nhu mô mộc (m) IAA mg/l 1865 ± 36cd 46,2 ± 1,4bcd B, Các tế bào nhu mô mộc ngấm mộc tố có màu xanh Bó libe mộc dần IAA mg/l d 38efdưới vùng mô phân 51,2 ± 1,7 hình thành2080 nằm ± sinh dày cấp d phân ± sinh hình thành nên bó mạch IAA mg/l C, Vùng mô 1970 55dedày cấp tiếp tục 50,7phân ± 1,1chia mớiLát gầncắt môdọc phân dàymô (nũi tên sinh tr ắng) Bócủa mạch thànhđen vớiinlibe Ảnh 3.11 quasinh vùng phân thântrưởng Nghệ vitro BA mg/l 2210 ± 49fg 49,5 ± 2,7cd mộc xếp chồng lên(khoảng bị đẩy xa vùng mô vùng phân mô sinhphân dày.sinh dày cấp cho thấy phần gốc thân náchdần thứ bảy trở đi) g e BA mg/l D, Sự hình thành 2330bó ± 44 57,4dày ± 2,3 mạch từ mô phân sinh cấp với bó mạch (gồm biệt hóa hoàn toàn (mũi tên) BA mg/l BA mg/l ef libe mộc) hướng lõi 2067 ± 56vào 2171 ± 67f 55,9 ± 0,9e 48,1 ± 1,5cd GA3 mg/l 1751 ± 48bc 44,4 ± 0,8bc GA3 mg/l 1633 ± 28b 42,5 ± 1,4ab GA3 10 mg/l 1451 ±39a 39,1 ± 0,9a 48 Hình 3.9 Sự thay đổi đường kính thân số hạt tinh dầu/thị trường kính vị trí nách thứ sáu thân Nghệ đen in vitro sau hai tuần nuôi cấy với môi trường bổ sung chất điều hòa tăng trưởng thực vật khác (Các số sau kí hiệu IAA, BA GA3 nồng độ, mg/l) Các số trung bình cột với mẫu tự khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 49 51 50 52 Ảnh Sự hưởng lên gia thân tăng đường kínhđen thâninvàvitro hoạttại động Bảng> 3.6 thaycủa đổiBA đường kính Nghệ cáctích vị trí nách lũy tinh dầu Nghệ đen in vitro khác sau hai tuần nuôi cấy với môi trường MS có bổ sung BA 1, 3, mg/l Ở nghiệm thức khác nhau, đường kính thân Nghệ đen in vitro gia (đối chứng môi trường MS) tăng từ vị trí nách (gần mô phân sinh) đến nách cuối (thứ tám) (bảng 3.6 hình 3.10) Cùng với gia tăng đường kính thân, số hạt tinh dầu gia tăng Tại vị trí nách thứ đến nách thứ ba, xuất hạt tinh dầu Bắt đầu từ vị trí nách thứ tư, hạt tinh dầu xuất tăng dần đến vị trí nách thứ sáu Tại vị trí nách thứ bảy tám, đường kính thân tiếp tục gia tăng đạt giá trị cao số hạt tinh dầu vị trí lại giảm cho kết mm A thấp so với vị trí nách thứ năm sáu (bảng 3.7, hình 3.11 ảnh 3.15) Nhìn chung BA hay mg/l tác động làm gia tăng đường kính thân số hạt tinh dầu thân Nghệ đen in vitro tác động rõ rệt vị trí nách thứ năm sáu Tại vị trí này, bổ sung vào môi trường nuôi cấy BA mg/l cho đường kính thân có giá trị sai biệt so với đối mchứng nghiệm thức khác AS'.* ụki WL° tập trung số hạt tinh dầu cao (bảng 3.6, 3.7, hình 3.10, 3.11 ảnh 3.15) %7 mg/l tác động hình thành nên chồi bên Bên cạnh • đó, BA 1, 3, hay tăng trưởng Với môi trường đối chứng (MS) chồi bên hình thành Bổ sung BA với nồng độ từ đến mg/l hình thành chồi bên, bổ sung BA hay mg/l cho số chồi bên cao (bảng 3.7 ảnh 3.14) ft A< fv mm V w* tCYyflBsj Ảnh O■ MpÊr fl Lát yJv 3.12 cắt dọc thân Nghệ đen in vitro sau tuần nuôi cấy với môi trường có sungSự cácphân điều thực vậtthứ khác cho thấyNghệ thay Ảnhbổ3.13 hạt hòa tinh ũng dầu trư vịởng trí nách sáunhau thân đenđổi in J *chấtbố '*đường ‘àtW ÎB O kính vùng lõi thân vitro sau hairv tuần nuôi cấy (mũi tên: hạt tinh dầu) Ị f} c < ' • 'Ni ■ chứng (MS) A, Đối *o , • A, Lát cắt A ngang qua thân Nghệ đen in vitro trồng với môi trường đối B, BA 3mg/l chứng (MS) C, IAA 2mg/l B, Lát cắt ngang qua thân Nghệ đen in vitro trồng với môi trường bổ D, GA3 5mg/l sung BA mg/l Đường kính thân (gm) ,f w Vị trí Đối chứng BA 1mg/l BA 3mg/l BA 5mg/l BA 7mg/l 53 Bảng 3.7 Số chồi bên hình thành vị trí nách thứ bảy, tám thay đổi số hạt tinh dầu/lát cắt ngang qua thân Nghệ đen in vitro vị trí nách khác sau hai tuần nuôi cấy với môi trường MS làm đối chứng MS bổ sung BA 1, 3, mg/l 132 ± 6a 151 ± 4a, 12 173 ± 12a, 174 ± 5a 280 ± 18a’ 316 ± 4a’ 12 394 ± 19b’ 367 ± 22b’ 351 ± 25a’ 577 ± 30b’ 737 ± 43b’ 961 ± 10c, 715 ± 41c 660 ± 52b’ 1011 ± 18c’ 1448 ± 12d’ 1859 ± 25e’ 1447 ± 81d’ 1939 ± 118e 1238 ± 42d’ 1651± 67e 1140 ± 60c 1239 ± 19c’ 1647 ± 43d’ 2210 ± 99e’ 2329 ± 66f 2067 ± 60f 1661 ± 109d’ 2171 ± 67e’ 2513 ± 87í; 2340 ± 54g, 2605 ± 71í; 2773 ± 2496 ± 49h g 12 94 ’ Nồng độ BA (mg/l) 2912 ± 99g’ 1 23 23 2275 ± 102í; 2491 ± 173í; 12 2535 ± 100g’ 2665 ± 99f 12 23 23 12 12 12 156 ± 4a, 23 12 Các số trung bình cột với mẫu tự khác số trung bình hàng với số thứ tự Số có hạtý nghĩa tinh dầu/lát cắt0,05 ngang khác khác biệt mức p = ± 0a ± 0a ± 0a, ± 0a, ± 0a, ± 0a’ ± 0a’ ± 0a ’ ± 0a’ ± 0a ’ ± 0a ± 0a, ± 0a, ± 0a, ± 0a, 9,7± 1,8b’ 19,0 ± 3,1b’ 21,0 ± 2,5b’ 13,0 ± 1,5b’ 23,3 ± 2,7c 17,4 ± 1,5b’ 23 30 ± 1,8c 12 39,0 ± 1,5cd’ 57,4 ± 2,3e’ 38,0± 3,6c23 33,3 ± 2,0c 55,9 ± 1,0e’ 48,1 ± 1,6d’ 42,3 ± 43,5 ± 2,4d’ 44,8 ± 1,9d’ 1 2,2d’ 36,8 ± 34 ± 2,3c’ 36,1 ± 1,6c’ cd 1 1,9 ’ Số chồi bên tăng trưởng 47,3 ± 2,2d’ 45,5 ± 0,8e’ 44,5 ± 1,9e 33,0 ± F 0,0 ± 0,0a 49 ± 2,7e’ 1,3 ± 0,3b 23 2,2 ± 0,2c 2,0 ± 0,3c 12 23 1 37,7 ± 1,5c’ 1,1 ± 0,1b 54 Hình 3.10 Sự thay đổi đường kính thân Nghệ đen in vitro vị trí nách khác sau hai tuần nuôi cấy với môi trường MS bổ sung BA 1, 3, mg/l (đối chứng môi trường MS) Đối với tiêu số hạt tinh dầu số chồi bên, số trung bình cột với mẫu tự khác số trung bình hàng với số thứ tự khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Hình 3.11 Sự thay đổi số hạt tinh dầu/lát cắt ngang qua thân Nghệ đen in vitro vị trí nách khác sau hai tuần nuôi cấy với môi trường MS bổ sung BA 1, 3, mg/l (đối chứng môi trường MS) Trọng lượng khô (mg/g TLT) Cấp củ Đối chứng 3.1.5 BA mg/l 57 55 56 Thể tích tinh dầu (ml/100 g TLT) Đối chứng BA mg/l Ảnh hưởng BA lên trọng lượng khô hàm lượng tinh dầu Nghệ đen vườn Xử lý BA mg/l tất Nghệ đen vườn giai đoạn tháng trồng quan sát kết sau tháng xử lý, trọng lượng khô thể tích tinh dầu củ cấp ngừng tăng trưởng thay đổi không đáng kể, tiêu gia tăng cóý nghĩa đ ối với củ cấp ba tăng trưởng, dù thấp so với củ cấp (bảng 3.8, hình 3.12, 3.13 ảnh 3.16) Bảng 3.8 Trọng lượng khô thể tích tinh dầu củ cấp củ cấp ba giai đoạn 10 tháng trồng Nghệ đen vườn sau xử lý Ảnh 3.14 Khúc cắt thân Nghệ đen in vitro sau hai tuần nuôi cấy với môi trường bổ sung BA mg/l mang chồi bên tăng trưởng phần gốc thân (vị trí nách thứ bảy tám) Ảnh 3.15 Sự phân bố hạt tinh dầu nách 5, 6, (A -D) thân Nghệ đen in vitro sau hai tuần nuôi cấy với môi trường bổ sung BA mg/l 1 a 299 ± ’ a 319 ± 11 ’ 59 58 64 65 67 68 60 61 62 63 66 1,33 ± 0,04a’ 1,40 ± 0,05a’ 186 ± 4b’ 247 ± 4b’ 0,93 ± 0,03b’ 1,20 ± 0,03b’ THÀNH PHẦN MÔI TRƯỜNG1 MURASHIGE & 2SKOOG (1962) KẾT 3.2 > Cấu THẢO LUẬN LUẬN VÀ giải ĐỀ phẫu NGHỊ Nghệ sung ternate IAA 2trúc Sengupta mg/l BA cs (1984) ởlà nồng ởđộ Dioscorea mg/l floribuda làm tăng đường cho thấy kính vai thân trò mô, gia chủ tăng yếu phận hoạt lượng vùng khác động tế lõi bào hướng củ, nhu thân mô tâm, Ngoài tích tạo cho ũy ra, bó nhu đ3đen mạch ểhay mô gia các5thứ tăng vị trí cấp kích này, với Tiếp thước cócũng theo sựbó tế hình sau bào mạch thành Một tăng (Esau, phần trưởng rễ 1967; bất Nồng độ (mg/l) với gia tăng số hạt tinh dầu Trong đó, ởở môi trường sung GA ởcó nồng độ Oriani, auxin định vàtrong 2007; chồi Rodrigues trình bên tăng tạothành củ, trưởng Estelita, mạnh, 2002; bổ sung Rudall, các auxin 1991) chất (2,4-D, dựbổ trữ IAA hay NAA) tinh dầu vào thứ lượng cấp, cần mô thiết phân cho sinh việc dày cấp lập hai củ biệt cấp hóa hai thành nội bì lũy gồm lớp tế 3bào 4.1 KẾT LUẬN Nghệ đen thuộc đơn tử diệp thể cấu trúc giải phẫu thân rễ Củ5 3.2.1 Sự tăng trưởng, cấu trúc giải phẫu tích tinh dầu củ Nghệ NH4NO3 1650 hay mg/l lại làm đường kính thân làm giảm tập trung số hạt tinh tích trữ tếgiảm bào dicủa chuyển ravà mô khác để tham gia vào môi 10 trường nuôi cấy với nồng độ thích hợp giúp tăng trưởng theo đường kính củ đen, mô phân sinh dày cấp hoạt hai bên, nhiên, Nghệ đen có cấu trúc giải phẫu thân đơn tửchất diệp vàtheo khác với cấu trúc Đến dự giai trữ đoạn chủ yếu 6tiết tháng tuổi, Nghệ tích lũy tinh bột trữ phân bố củ khắp xảy mạnh, củ đen KNO3 1900 - ỞChất SựNghệ tăng trưởng củ xảy racủmạnh ởđen giai đoạn 6động - dự 8được tháng trồng Nghệ dầu (bảng 3.5, ảnh 3.12 3.13) Tinh dầu tập trung nhiều ởvà vùng lõi thấp đường chuyển hóa, cung cấp nguyên cho hình thành tăng trưởng chồi củ Rodrigues (2009), tùy vào loài cách tăng trưởng mà rễ Củ vớivỏ bó mộc chuyên hóa ly tâm, rễ(gần có bó mộc xếp hướng tâm Bó (cả trọng vùng lượng khô vùng vàEstelita hàm lõi) Đặc lượng biệt, tinh củliệu bột chứa tăng tinh cao dầu, gấp hợp đôi chất so thứ với cấp giai đặc đoạn trưng 4ở CaCl2.2H2O theo > Sự tăng trưởng củ Nghệ đen 440 đen trồng vườn vùng thể lát cắt qua thân Nghệ đen (ảnh 3.13) bên vàvỏ, rễ định (hình 3.10, 3.11, ảnh 3.14 3.15) mô phân sinh dày cóNgọc hoạt động chức khác nhau: tạo dãy nhu mô libe-mộc ởbất củ xếp chồng lên nhau, vùng tượng tầng rõtiên rệt libe mộc tháng tuổi) (bảng (Lê 3.3 hình Thạch, 3.3) 2003) Tinh chất dầu dinh dưỡng tích ưu trữ cho việc tích bào tiết trữ Hoạt tính cytokinin cao ngang giai đoạn đầu trình ăng trư ỏng củtế cho MgSO4.7H2O 370 -loại Hoạt động phân tạo lượng lớnsinh nhu mô vàgiúp bó Ở Nghệ đen,của củ mô tạo sinh thànhdày bêncấp phần thân khí Khi thành Đường kính thân tập trung hạt tinh dầu gia tăng r ệt bổđơn sung phân bố Xử xuyên lý3.5) BA tâm 3tăng mg/l củ ởvà Cyperus Nghệ esculentus (đường vườn kính vào vài đoạn mm), hay 9khi tháng hoạt tuổi song tử diệp Do đó,hợp củđen Nghệ đen củ tử (ảnh tinhphân bột 3.4 nhằm vàcây Kết kích thước phù củ Trong với kết trình tích quan lũy chất sát cấu dinh trúc dưỡng, giải phẫu nhu chia bào xảy mạnh, chứng minh ởgiai đốirõ tượng khác (Bùi KH2PO4 170 ởtếgia phía sinh giúp thân Nghệ gia tăng đường lập, củ mạch cấp huytrong động mô chấtphân dự trữ từnày củ mẹ, nên sau thờiđen gian trồng, củ mẹ IAA BA Auxin hay cytokinin ởgiảm nồng độ thích hợp kích thích phân chia, tạo động cho thấy, hướng tùy vào thuộc vào đểcác cho giai đoạn bó mạch sinh ởlý Bulbostylis khác nhau, BA có tácNghệ động khác diệp khác không xảy tăng trưởng hậu lập từparadoxia tượng tầng (ảnh cầu Sherlija lượng cs (1998) hô hấp ởcung củcác cấp sốdần loài Lúc nghệ này, (trong củ bắt đầu có chuyển đen) sang giai củ Trang Việt, 2000) Hoạt tính cytokinin trì mức cao giai đoạn NaH2PO4 teo dầnkính hệ thống thân khí sinh bắt đầu170 tăng trưởng Trong ba tháng đầu, số lượng lớn tếtrồng bào giúp gia tăng đường kính biệt, tăng rộng tếđường bào tạo điều lên khả tích lũy.cs, Ở củ tăng trưởng (củgia cấp ba), BA tác động 3.3 3.6) gừng đoạn (Remachree tăng đường kính thông qua việc tích lũy giasự tăng kích thước tếphân bào Các 6Ởgia tháng giúp sự1997) tăng rộng tế bào thểĐặc qua việc tăng kính củ Nghệ đen, mô phân sinh không giữ đặc tính Khoáng lượnghình Nồng độ (mg/l) còncytokinin, thấp,dày nêncấp gibberellin chưa cung cấp dự trữ nhiều chotuổi củ,sinh - viđược Hàm lượngthành auxin, cao chất giai đoạn tháng kiện tích lũy chất dự trữ giúp cho trình tăng trưởng lại thuộc vai trò làm gia tăng kích thước tế bào giúp củ tăng tích lũy v ật chất tích lũy tế bào có nguồn gốc từ phân chia để tạo lượng lớn tế bào giai đoạn giai đoạn nàytế (bảng 3.4 hình 3.6).chia BA tiếp tácđtuyến) ộng tích cực đến tíchsinh lũy sinh (bao gồm bào dẹp, dài phân xa môviệc dày lên thân Nghệ đen (gia tăng kính), giống ởphân nhiều câyngọn đơn >Sự Sự tích lũy tinh củ3.1 Nghệ đen củ có kích thước nhỏ (ảnh A B).đường H3BO3 6,2 giảm sau chodầu tới 10 tháng tuổi, acid abscisic cao giai đoạn Điều lát cắt dọc qua thâncấp Nghệ đen in tinh dầu (bảng 3.8, hình 3.12, 3.13 ảnh 3.16) trước đó.khác, khối củ Nghệ vàng (Curcuma longa L.) (Matthew cs,mô 2008), vàvitro chồi, tế bào đãthểbi ệt hóa hoàn thành nhu mô vỏ, nhu lõi bóở tử diệp nhờ hoạt động vùng mô sinh dày một, nơi tập trung MnSO4.2H2O cytokinin 22,3 tính lũy tinh có liên hệtoàn mậtphân thiết với trình ũng củcác Nghệ 4Sự tháng Trọng lượng khô, hàm lượng bột gianhiều tăngtrư ởng cường độ hô Khi phầntuổi thân khídầu sinh tăng trưởng mạnh, látinh tổng hợp chất dinh dưỡng nghiệm thức có bổ sung BA với gia tăng đáng kể đường kính vùng lõi dùng tạo củ ởKhi Nghệ đen (Anisuzzaman, 2008) Ở (ảnh nghiệm 3.9D) thức đối chứng, cắt ngang 100 phần gmột trọng gốc thân tươi vị củ cấp nách ba thứ thu bảy, mô 0,93 phân ml tế bào phân chia mạnh phân sinh cấp hình thành từlượng vài lớp tế bào có Từđược giai đoạn 6đến tháng tuổi trở đi,dày trọng lượng khô hàm tinh bột tăng Hình 3.12 Trọng khô củ cấp vàlượng củ cấp bavườn ởtrí giai đoạn 10 tháng trồng ZnSO4.4H2O mạch 8,6 đen quan sát ởMô trồng Tinh dầu ngày hấp giảm từlượng 4được 10 tháng trồng cho củ cấp hình thành (Charles, 1993) Một phần chất đồng hóa di (bảng 3.5, ảnh 3.12) Dùng cytokinin (BA) giúp tăng trưởng theo đường kính tạo sinh tinh dầu dày cấp Trong đó, bicủệt nghiệm hóa thành thức nội xử bì lý (ngấm BA 3mộc mg/l, tố) 100 cao gtrụtrọng bì (ảnh 3.10) tươi Kết củ nguồn gốc môkhi phân sinh ngọn, xếp thành hàng xuyên tâm, nằm mô lên giữ ởtừmức cao, tiếp tục tích lũy chất dự trữ với việc tích lũy tinh dầu Hàm lượng acid abscisic tăng cao đồng thời với gibberellin ởlượng giai đoạn Nghệ vườn sau xử KI 0,83 tích nhiều thời tăng củ Tuổi củ ưngay dầu chuyển vềđen củ2 theo cấp thể ởtrưởng sự5lý gia tăng đường kính củkính làm củ phình - trữIAA mg/lmột, hoặcgian BAhiện hay mg/l làm tăng đường thân vàợng số tinh hạttotinh Nghệ đen (Anisuzzaman, 2008) Ngược lại, gibberellin lạivà có tác động kéo cấp basinh thu phù 1,2 hợp ml với tinh nghiên dầulá, cứu (bảng 3.8), Sherlija cs (1998) tăng lượng tinh dầu có phân sơ khởi vàvà ở3.8) vùng ngoại vigia đỉnh thân (Esau, 1967; Trong đó, cường độ hô hấp tiếp tục giảm củ già bắt đầu ngừng tháng tuổi củvà (bảng 3.4, hình 3.7 Như vậy, hiệu ứng cản tăng trưởng củaý Na2MoO4.2H2Ocủ 0,25 tích lũy tăng (cho tới củcủ thu hoạch) dễ quandầu sát Cùngkhúc với tăng đường kính một, cấp hai d ần cắtgia thân Nghệ đencủincấp vitro, GAcũng 10 mg/l hay đường kính thân giảm xuống kéo theo tập trung hạt tinh giảm nghĩa định, vìđẩy hoạt tính kháng khuẩn tinh dầu Nghệ cần ởdầu nồng độ Rodrigues Estelita, 2009; Rudall, 1991) (ảnh 3.8A) Quan sát látvới cắt ngang qua tănglàm trưởng Có nói, giaidày đoạn đầu, hô hấp đốt cháy nhiên liệu, tạo acid abscisic bịthể lùi bởihiện hiệu ứng đối nghịch gibberellin động mô phân sinh cấp có3.1C liên hệ mậtđen thiết đường kính CuSO4.5H2O dài 0,025 Điều thể qua hìnhHoạt thành từ chồi mầm củ cấp (ảnh 3.2A) làm giảm đường kính thân số hạt tinh dầu 3.5, ảnh 3.12) thấp (0,01 -hạt 0,15 mg/ml) (Wilson cs, 2005) thân Nghệ đen (vùng gần mô phân sinh cho thấy môđoạn phân sinh dàynăng cấp lượng cung cấp cho sựdần phân chia tếkính bào Ởlượng cácngọn) giai tiếp theo, xuất vùng lõi thân Từ mô phân sinh đến vịauxin, tríđoạn nách lágiai thứ sáu, mô phân sinh CoCl2.6H2O (bảng 0,025 Tinh dầu tăng hàm gibberellin vàsản cytokinin lại gia tăng số tinh dầu/thị trường củ cấp ởba khác Ở giai đoạn tháng trồng, củ cấp cấp bốn tiếp tục Ở giai đoạn 10 tháng tuổi Nghệ đen vườn, củ cấp ngừng Đối với tiêu trọng lượng khô hàm lượng tinh dầu, số trung bình cột với mẫu Tác động BA lên đường kính thân hoạt động tích ũy tinh dầu tạo thành vòng quanh bótế tiền tượng tầng (ảnh 3.8B), phù hợp với lượng giảm dần, phần nhiên liệu hô hấp tế bào trở thành nguyên liệu cho dày cấp hoạt động mạnh tạo bào nhu mô bó mạch làm gia tăng đường giảm theo tuổi củ (bảng 3.1, 3.4, hình 3.1, 3.5, 3.6 3.7), nên hoạt động auxin, (bảng 3.1 hình 3.1) Ở giai đoạn 10 tháng trồng, củ cấp ngừng tăng Dungtự dịch Fe-EDTA Nồng độ (mg/l) hình tăng trưởng đồng thời với củ cấp cấp hai (ảnh 3.2 B khácthành số trung bình hàng với số thứ tự khác khác biệt có ý nghĩa tăng trưởng tích lũy nhiều tinh dầu (1,33 ml/100 g TLT) so với củ cấpC) ba mối liên hệ tăng trưởng tích ũy tinh dầu tiếp tục tìm hiểu sâu nhận xét khác vị trí mô phân sinh dày cấp (Rudall, 1991; Rodrigues trình tích ũy t ạo tinh dầu Trong tạo tinh dầu, glucose cho pyruvate hay 3kính thân Từ vị trí nách thứ bảy trở đi, vùng mô phân sinh dày cấp bi ệt gibberellin vàlượng cytokinin động mạnh cấp chia bào tăng trưởng trưởng chứa tinhnày, dầu caotác so với củ cấp ba tế cònđang FeSO4.7H2O mức 27,8hai p = 0,05 Trong giai củ Nghệ đen tăng trưởng mạnh có số lượng củ tăng đoạn trưởng (0,93 ml/100 g TLT) Theo đổi đường kính thân đáng tập hạt trí Estelita; 2009) phosphoglycerate (3-PGA) hôVấn hấp tế bào Những chất nàytinh bâydầu lại theovịcon hóa đường kính vùng lõiqua không giađề t ăng kể (ảnh 3.11) nên củdõi làthay tích lũy tinh dầu đặt làtrung phải auxin, gibberellin Na2EDTA 37,3 (bảng 3.2 hình 3.2) kích thước củ tăng cao, củ tăng trưởng trở thành bể (sink) thu - láBA mg/l không làm thaycủa đổi BA hàmvới lượng tinh dầu củđểcấp (1,33 - 1,4 nách khác tác động cáctăng nồng độ ởkhác cho thấy, đường mevalonate methylerythritol phosphate (MEP) tổng hợp terpen, Cùng với mô phân sinh ngọn, mô phân sinh dày cấp có chức hình cytokinin có hoạt động đối nghịch trưởng củ tích lũy tinh Theo Rudall (1991), mô phân sinh dày hoạt động dọc theo thân cây, tạo nhiều Sự thay đổi trọng lượng khô, cường độ hô hấp, hàm lượng tinh bột vàtừ Vitamin MS chất Nồng độ (mg/l) hút 3.2.2 ml/100 mạnh dự trữ Ngoài thân khí sinh ban đầu hình thành trực tiếp g TLT) giúp gia tăng tích lũy tinhlũy dầu củ củ(từ cấp ba đường kính thân đạtmột đến mức độ định thực tích tinh dầu vịvật trí nách phần cấu tạo tinh dầu Nghệ đen (bảng 3.3, hình 1.1, 3.3 3.4) thành mô cấp Ở giai đoạn non, bó mạch hình thành từ tiền dầu, phải tích lũy tinh dầu củ cần auxin, gibberellin mạch dẫn thời gian giới hạn hay suốt đời sống thực hoạt tính chất điều hòa tăng trưởng thực vật củ Nghệ đen cấp Glycine 2hai củ cấp ba tăng trư Tuy chồi mầm củ mẹ, vài chồi mầm từ củ cấp ởng tăng trưởng (0,93 -ra, 1,2 ml/100 gtinh TLT) thứ Thị tư trở đi) xảy sốcấp hạthai dầu giavà tăng với giasố tăng đường (Trần Hoa, 2007; Đỗ Tất Lợi, 2009, Taiz Zeiger, tầng có nguồn gốc từ mô phân sinh Về sau, sự2002) gia tăng lượng bó cytokinin ởViệt hàm lượng thấp? nhiên, Cọ, mô phân sinh dày xuất nối tiếp trực phân Myo-inositol tượng 100 thành khí sinh giúp Nghệ đen bành trướng rộng với látiếp cần từ thiết cho > thân Sự thay đổi trọng lượng khô, cường độ hô hấp hàm lượng tinh bộtmô củsự 4.2 NGHỊ kính thân Như vậy, BA làmdày giacấp tăng đường kính thân vàđồng gián tiếp làm mạch làĐỀ hoạt động môphân phân sinh dày cấp Cóthực điểm tương mô >dày Sự thay đổi hoạt tính chất điều hòa ăng trưởng thực vật củ Nghệ sinh cấp một, vàtác cảđộng mô sinh mô phân sinh dày cấp hai Thiamin 0,1 Ảnh hưởng hòa tăng trưởng vật lên tăng trưởng tổng3.2.3 hợp chất dự cấp trữ củ chất điều Nghệ đen gia tăng tích lũycấp tinhmột dầuởđoạn (bảng 3.6,tiếp 3.7, hình 3.10 tầng 3.11) Tiếp tục tìm hiểu động chất điều hòa tăng trưởng thực vật đen cấp phân sinh dày đơn tử diệp tượng song tử diệp (Esau, xem hai giai nối loại mô phân sinh dày tích lũy tinh dầuhoạt Nghệ đen Sau 10 củ cấptrong ngừng tăngtăng trưởng củ đường củ với không Các hoạttháng độngtrồng, biến dưỡng trình trưởng xảy kính sự tăngGiai trưởng tíchrõ lũy tinh dầu ởtăng củkính Nghệ đen biệt ởtuổi), cácdầu mức sinh BA tác động rệtquá đến đường thân sốtháng hạt tạitế vịbào tríauxin nách 1967) Đó phân chia tiếp tuyến tạo lớp tếvàđặc bào dẹp,tinh dài (ảnh 3.8C-D) Tuy (Dickison, 2000) đoạn đầu trình trưởng củ (4 hoạt tính SựTrong gia đường thân liên thiết đến gia tăng hạt tinh thay đổi khihiện đó, củ cấp hai vàcó củ cấp hệ ba tăngsự trưởng cùngsố tăng trưởng củtăng thể quakính hình thái Sựmật gia tăng trọng lượng khô cóvới liên hệ Ảnh 3.16 Củ giai đoạn 10 tháng trồng Nghệ đen vườn sau xử hóa thứ năm thứ sáu Tại vị trí này, mô phân sinh dày cấp hoạt động nhiên, khác với tượng tầng song tử diệp, mô phân sinh dày cấp phân chia cytokinin ởSherlija mức cao Ởũng đây, cóởng thể sựdầu auxin cấp nồng độởđường cao giúp tế Theo cs (1998), không sựdiện hình thành mô phân cấp hai dầu Các điều hòa trư thực vật tác khác kính thân Hìnhlượng 3.13.chất thayvà đổi thể tích tinh củ cấpđộng vàtinh củ basinh giai đoạn 10 (số vàSự đường kính củ tiếp tục gia có tăng, ảnh 3.2D) mật thiết với hàm lượng tinh bột củ Hàm lượng bộtđến thấp ởdày giai đoạn củở mạnh, đường kính vùng lõi thân ăng caoở thân nên tích ũy tinh d ầuphân cũngchia tăng cao.cấp Tạicung lý tạo để cácmô bó mạch (cảloài libe lẫnmột mộc) phía củađen mô phân sinh dày bào vùng phân sinh dày cấp Nghệ mạnh để Nghệ đen Ở vài nghệ (Curcuma longa, phát nên tiếp tác đến lũyđược tinh dầu thánggián trồng câyđộng Nghệ đen vườn sau thành xửlập, lý.Curcuma non (4 tháng tuổi), khisự củtích aromatica), thân khícó sinh chưa vị nách thứ bảy vàphát tám, đường kính thân gia tăng, (ảnh 3.9), tượng tầngtriển phân chia để tạo libe gỗ ởvài hai tượng Mô cấptrí lượng lớn tế bào cho hình thành mô vỏ,Một nhu môtếbên lõi cácbìtầng bóđường mạch A, Đối chứng triển cấp sơ cấp hoàn thành bào trụ mô Sự gia tăng sốsự lượng vàsựkích thước tếnhu bào giúp tăng đường kính hoàn thứ thiện dẫnsau tớikhi việc cung cấp chất dự trữ không cao Cường độ hôthân, hấp(do ởtừgiai kính vùng lõi tăng không đáng k ể, điều đặc biệt tinh dầu lại tập trung phân sinh dày cấp hoạt động theo hai bên: hoạt động ly tâm cho dãy nhu (bảng 3.4 vàbiệt hình 3.5) Các nghiên cứu Wang vàvới cs (2009) ởcấp Pinellia phân sinh cấp tạodự thành) biến đổi thành mô phân hai giúp B, BA mg/l tạosau điều kiện để tích lũyhóa chất trữ Sau hai tuần nuôi cấy, môi trường bổ đoạn đạt giá trị cao (bảng 3.3, hình 3.3 3.4) Điềusinh nàydày cho thấycó cần cung cấp nguồn lượng lớn cho phân chia tế bào hình thành cấu trúc 71 72 69 70 73 TỔNG QUAN TÀI TÀI LIỆU THAM KHẢO 10 Nguyễn Du Sanh (1998), Sự trưởng cỏ ốngJ.(Panicum repens 38 Rodrigues A.C and Estelita M.tăng E M (2009), Morphoanatomy ofSons, the stem in 20 polysaccharides Esau K (1967), inLIỆU Plant cells of anatomy, zedoary The (Curcuma second zedoaria edition Wiley Roscoe) & cultured Inc in app: 10 Tiếng Việt Cyperaceae, Acta Botannica Brasilica 23:Đại 3.Engineering, L.), Luận Tiến sĩ Sinh học, Trường học Khoa học14: Tự619-624 nhiên, TP.HCM L bioreactor, 338 - 408.án Biotechnology and Bioprocess 1.1 NGHỆ ĐEN Nguyễn Thị Kim Cúc, Đỗ Ngọc Tú Phạm Việt Cường (2009),Tách chiết 39 11 Hong Rudall Lê Ngọc Thạch (1991), (2003), Lateral Tinh dầu, meristems NXB ĐH and Quốc stem gia thickening TP.Nhat Hồ Chí Minh growth in 21 30 Nguyen C P Hoang H., KimLoc, Y and Doan LeeThi S K Hong (2001), Diem, Sesquiterpenoids Doan Huu from Binh, the Dao rhizome Thi 1.1.1 Phân loại tinh dầu nghệ vàng (Curcuma longa) cất lôi nước dung môi Huong, Kim T (2000), G.Botanical andArch Yang S.Res (2008), and characterization of monocotyledons, Review 57, 150 - Isolation 163 zedoaria, (5): 424 - 426 12 of BùiCurcuma Trang Việt SinhPharm lýM.thực vật24 - phát triển, NXB ĐH Quốc gia TP Ngành hữu Angiosperm Lớp antioxidation from cells ofA.zedoaria (Curcuma zedoaria Roscoe) 40 Lobo Sengupta J., enzymes Mitra G.C and Sharma A.K (1984), A Organogenesis and 22 Prabhu K S., Shirwaikar and Shirwaikar (2009), Curcuma Hồ ChíR.,Minh cơ, Monocotyledon Báo cáo khoa học - Hội nghị công nghệ sinh học toàn quốc - Công nghệ cultured inRose a 5in-(white L bioreactor, Mol aBiotechnol 81 - 87 Cell tuberization ofTìm Dioscorea floribunda, Plant Tissue turmeric): of38: itscủa chemical, 13 zedoaria Bùi Trang Việtcultures (1992), hiểureview hoạt động chấtpharmacological điều hòaOrgan tăng sinh học phục vụ nông - lâm nghiệp, thủy sản, công nghiệp, y dược bảo vệ Bộ 31 and Zingiberales Omokolo N.vậtD., Boudjeko T.Journal and J.and T.Pharmacology In Tiêu vitro Culture 3: 325-331 ethnomedicinal properties, of Pharmacy 61: trưởng thực thiên nhiên Takadong tượng rụng J.“bông” và(2003), “trái non” môi trường, NXB Đại học Thái Nguyên, 519 - 522 tuberization ofL.),O Xanthosoma sagittifolium L Chemical Schott: effects of - 21.G., Singh Singh andkhoa Maurya S (2002), biocidal (Piper nigrum TậpP san học Trường ĐH Tổng hợp and TP Hồ Chí Họ 41 13 Zingiberaceae Trương Thị Đẹp (2007), Thực vật dược, NXB Y học, Hồ Chí Minh phytohormones, nitrogen Scientia Horticulturae 98, investigations onsucrose, essential oilsW of and some Indian Curcuma species, Progress in 23 Matthew M.,155-165 Cousins, Jeffrey and photoperiod, Adelberg (2008), Short-term and longMinh, số 1: Chi Curcuma 337-345 Phan Minh Giang, Văn Ngọc Hướng Phan Tống Sơn (1998), Crystal growth and studies Characterization of Materials - 81 L.) microrhizome time of turmeric (Curcuma longa 14 term Vũ Văn Vụ course (1997), Sinh lý học thực vật, Nxb Giáo75 Dục Loài Curcuma zedoaria.từRose Sesquiterpenoid thân rễ Nghệ đen Curcuma zedoaria Berg Rosc Việt 32 Oriani V Plant L andCell Sano P Unnikrishnan T (2007), architecture of development in vitro, Organ CultMorphological 93:283-293 42 Anh SherlijaA.,K.Scatena K., Remashree A Tiss B., K and Ravindran P N Tiếng Nghệ gọi tím, Ngải tím, Tam nại, Nga truật, Nam,đen Tạpcòn chíđược hóa học, T.Nghệ 36, 203, sốxanh, 4,341 70Nghệ 73 Actinocephalus (Koern.), Flora 349 (1998), Comparative rhizome anatomy of four Curcuma, Journal 24 Meidner H (1984), Class experiments in Plant physiolog, George Allen and 15 Anisuzzaman M., S.A., Mondal S.C.,species Sultanaof R., khalekuzzaman Bồng (Đỗ Tất Lợi,Sharmin truật, Grodzinxki A M và2009) Grodzinxki D M (1981), Tra cứu tóm tắt sinh lý of and Aromatic (2): -J.109 London 33 Uniwin, Ovono P.O., C.,7 Dommes (2009), Tuber formation and growth of M.,Spices Alam I Kevers and Alam M.F.103 (2008), In vitro microrhizome induction in 1.1.2 Đặc điểm sinh học thực vật, Nguyễn Ngọc Tân Nguyễn Đình Huy ền dịch, NXB Khoa học Dioscorea cayenensis-D rotundata interactions between 43 Mello Stanly C., O., Bhatt A.C and C L complex: (2010), comparative study Curcuma 25 M Dias T.Keng S., Amaral A F Conservation C.Aand Melo M (2001),ofexogenous Growth of Curcuma zedoaria (Christm.) Roscoe-A Prioritized Medicinal Kỹ thuật Hàloại Nội Nghệ đen thảo, cao 1,5 m Thân ễ (củ) hình nón với nhiều nhánh and jasmonic acid and polyamines, Growth DOI zedoaria and ofZingiber zerumbet plantlet usingRegul different Bauhinia forficate Link, Curcuma zedoaria Roscoe and Phaseolus vulgaris L Plant,endogenous Journal Biological Sciences Volume: 8production , Plant Issue: , Page No.: 1216Trần Thị hình Việtchân Hoa,vịt Trần ThịPhương Thảo nhạt, phụ5.tỏa10.1007/s10725-009-9441-5 xung quanh Cây, củ mẫmof vàBiotechnology Vỏ củ màu vàng micropropagation systems, 958:(28): cell suspension cultures withAfrican carbon Journal sources, ScientiaAgricola, 481 4326 - 485.1220 VũcủThị Thanh Tâmcó(2007), củ phụ Lá có bẹ to ôm vào thân phía 4333 34 Prabuseenivasan S., Jayakumar M.Amaral and Ignacimuthu S (2006), In vitro 26 J B., I M., Romani V.and L M., A F.Biochemistry C., Mello M.and O.,molecular Crocomo 16 Miachir Buchanan Gruissem W Jones R (2000), phầnđốm hóa tía họcđỏvàở tính khángmặt oxitrên, hóalácủa đenem, Curcuma dưới,Thành có gân dàinghệ 30 - 60 rộng zedoaria - 20 cm antibacterial activity of somesociety plant Physiology, essential oils, Complementary and 44 O Taiz and Zeiger E.(2004), (2002), Plant 3rdBMC ed, Sinauer Associates J L and M Micropropagation and callogenesis of Curcuma biology ofMelo plants, American ofplant physiologists Việt Nam, số 04 Hoa Berg màu trồng vàng nht Cánh môiTạp hẹpchí phát phía triển KH&CN, rộng tập phía10, trên, mọc ngang, cụm Alternative Medicine 6: 39 (Piracicaba, Braz), 61 (4): 427 - 432 Roscoe, Sci Agric 45 Wang J.,J., Wang J., Lu Y., Tieszen Xiao X.,L.Gong W.Vonshak and Liu A J (1987), (2009), 17 zedoaria Coombs HindQ., G.,Wang Leegood R C., L and hoa6.tậpPhạm trungHoàng thành Hộ hình trụ, từ thân rễ Nam, Lá bắc phíaTrẻ hình trứng (2006), Câymọc có vịlên thuốc Việt NXB 35 Murashige Ravindran P.and Nirmal Babu and K., K (2007), Turmeric - the genus 27 Skoog ASivaraman revied on medium a induction rapid growth and Effect of different plant (1962), growth regulators micro-tuber and plant Techniques inN., bioproductivity photosynthesis, In:for Measurement of starch hay hình mác tù màu xanh lục nhạt, đầu màu đỏ, không mang hoa (Đỗ Tất lợi, bioassay Nguyễn with Thị Phúc Võ Group, Châu Tuấn Nguyễn Hoàng Lộc (2010), Khảo Curcuma, Taylor &Lộc, Francis tobacco tissue culture Phyisol Plant 15: 473 -P.479 regeneration Pinellia ternate Briet, Biol.J.Plants; and sucrose inof leaves, Edicted by(Thunb) J.Inc Combs, D O.Physiol Hall, S.Mol Long, M O 2009) sát hoạt tính kháng khuẩn tinh dầu chiết xuất từ tế bào Nghệ 36 Nguyen Remachree A B., K.219 K., Unnikrishnan and Ravindran P.đen N 15(4): 359-365 Scurlock, Pergamon Press, - 228 28 Hoang Loc,Sherlija Doan pp Trong Duc, Kwon T H.K.and Yang M S (2005), (Curcuma zedoaria Roscoe) trongginger hệ lênrhizome men 10 (Zingiber lít, Tạp chíofficinale công nghệ sinh (1998), Histologycal studies Rosc.), ofG., zedoaria (Curcuma zedoaria Roscoe) - a valuable 46 Wilson Manju V S., Mathew M., Vimala B., Sundaresan S 18 Micropropagation Charles B., G Abraham and Rossignol M.on(1993), A synchronous model perfecting for học 8(3B): 1465 1471 Phytomorphology, 47 - 75 medicinal plant, Plant Cell Tiss Organ Cult 81: 119 and Nambisan B (2005), Antimicrobial activity of- 122 Curcuma zedoaria andfundamental studies on(1): the67 tuberization process, Plant Physiology 142: 474 Rodrigues Đỗ Tất LợiA.C (2009), câyM thuốc vị (2002), thuốc Việt Nam, NXB Khoa học 37 andNhững Estelita Curcuma malabarica tubers, of M Ethnopharmacology 99and 147secondary -Thi 151 479 29 Nguyen Hoang Loc, Vo ChauJournal Tuan,E.Doan Huu NhatPrimary Binh, Truong Bich kỹ thuật, Hà Nội development ofT Cyperus giganteus Vahlanatomy, rhizome (Cyperaceae), Revista and Yang M S (2009), Accumulation of sesquiterpenes 19 Phuong, Dickison Geum W C (2000), Intergrative plant Academic Press, Inc pp: and Đào Thị Ngọc Mai (2010), Tìm hiểu vài yếu tố ảnh hưởng đến khả Brasileira 195-200 de Botanica 25: phát sinh hình thái Nghệ đen Curcuma zedoaria Roscoe, Luận văn Thạc sĩ Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Tp 10 11 4597386 1.1.3 1.3.3 1.1.5 Phân Thành bốphần hóa học tổng dầu 1.3TINH DẦU - Nghệ Giai tăng trưởng tế bào Tìm Thân hiểuđoạn đen củ làhình nuôi tăng cấythân trưởng phình hệdịch lên to men thành treohợp 10 tếcủtinh bào lít.vìKết chứa củaquả ba nhiều cho loạichất thấy thựcdự hoạt vật trữtính là(củ Bahinia kháng khoai 1.2.1 Sự thành củcủ Thành phần cấu tạo củaquá tinh dầu phức tạp, đa đến số dẫn chất Sự hình thành củ trình phức tạp liên quan trình sinh forficate khuẩn Link, tinh Curcuma dầu tách chiết Rose chúng vàkhá Phaseolus có khả vulgaris ức chế với mạnh nguồn carbon tây).1.3.1 Trên mặt thân củ có chồi, phát triển cho Định nghĩa Trong Nghệ cózedoaria chừng -từ 1,5% tinh dầu; 3,5% chất nhựa chất nhầy Cây Nghệ đenđen mọc hoang 1khắp rừng núi Việt Nam, phát triển tốt trưởng Giai đoạn biểu qua tăng trưởng chậm ngừng tăng trưởng monoterpen sesquiterpen (Buchanan, 2000) Tinh dầu Nghệ đen có 48% thực vật Những yếu tố kích thích tăng trưởng ở11778, lại Staphylococcus có tác dụng ứcđổi chế tạo Tinh dầu hỗn hợp nhiều thành phần, thường có mùi thơm, không khác ba chủng Với vi mục khuẩn là tìm Bacillus nguồn cereus carbon ATCC khác thay cho sucrose, aureus nghiên Trong tinh dầu thành phần chủ yếu gồm có 48% sesquiterpen; 35% zingiberen; nơi ven suối nước vàđích rẫy, nương đất khô, xốp, có độ ẩm cao vùng trung Thân hành thân đứng ngắn, mặt mang xung quanh mang thân phía củ phình tothẳng mặt đất Sự tạo củ xảy rarễ, thay sesquiterpen (Đỗ Tấttrong Lợi, 2009) củ; ngược lại, táctăng động ức chế tăng trưởng lại kích sựvà củ tan nước, tan dung môi cơ, bay ởthích nhiệt độtạo cứu ATCC 6538 đãnúi dùng Escherichia glycerol, sorbitol coli ATCC galactose 25922 (Nguyễn Tuy nhiên Thị ktrọng Phúc ếtlàm Lộc cho thấy cs, 2010) sucrose 9,65% xyneol Tinh dầu có màu vàng xanh nhạt, sánh, tỷ 0,982, mùi vịởđộng gần du, miền Nghệ đen trồng đạ ihữu trà thân rễ để thuốc thường Ngoài ra, biến đổi thành vảy mọng nước chứa nhiều chất dự trữ Có ba loại thân hoạt động phân chia rộng tế bào Đây kết hàng loạt hoạt có khả tạo Chính vì(Phúc thế, hoá củ liên quan chịu ảnh hưởng điều chế thảo mộc, phương pháp cất kéo nước nguồn carbon tốt cho ba loại thực vật Galactose, glycerol sorbitol làm mùi Terpen long hay não (Đỗ terpenoid Tất Lợi, tạo 2009) thành lớp lớn sản phẩm thứNam, cấp Sesquiterpenoid thân rễhình Nghệ đen Curcuma zedoaria Nam Nghệ đen mọc ởtừ Trung Quốc Kiến, Quảng Đông, Quảng Tây, Hải hành: biến dưỡng, thể qua thái, kích thước, trọng lượng, Việt nhiều yếu tố khác chế độ dinh dưỡng, điềuthường kiện môi trường, tình trạng sinh (Ravindran cs, 2007) chậm ngừng tăng trưởng hệ thống dịch treo tếbọc bào cáctan loại thực vật Những chất gồm nhiều loại lớp không hoà được tìm hiểu từ sớm (Phan Minh Giang cs, 1998) Sự tích ũytrong Đài Vân Nam), Xrilanca nhiệt đới khác (Đỗ Tất Lợi, 2009) Theo Phạm Hoàng Hộ (2006), thành phần hóa học tinh Nghệ -Loan, Thân hành áo: Các lákhác mọng nước ởnước bên bao hoàn toàn vẩy ởđen Sự thành lập củrấtlà bước phát triển hoàn toàn đặc biệt xảy dầu đất lý, phân chia chất đồng hoá (Mello cs, 2001) Cần phân biệt rõ tinh dầu với béo (hỗn hợp mỏ (hỗn nước Chúng tổng hợp chất trung gian acetyl-CoA (hình 1.1 sesquiterpen polysaccharide hiểu tếtriglycerid) bào Nghệ đen (Curcuma gồm:ưu curcumol, curcumadiol, curzerenon, isocurzerenon, isogenrmafuran, bên trong, vẩy từ chết, tạo thành áodầu che chở điểm sinh sản vô tính ởdầu cáctìm loài cókhô, khả tạo củ Trong hầu hết hợp Rất khó để có định nghĩa xác cho tinh dầu thực 1.2) Tất terpen chuyển hoá từ sựloài liên 5trưởng phân tử cacbon Các zedoaria Thành Rosc) phần hóa nuôi học tinh hệ dầumột lên mộtcơ men số 10 nghệ lít.kếtđể Sự ởcủa tích Độ ũytrong sesquiterpen mặt có Quáhydrocarbon) trình hình thành bắt đầu vào cuối giai đoạn tăng Nghệ quan furanodien, procurcumanol, zederon, zedoarol, curdion, curculion hoàn toàn láđược ởcủ bên (hành, tỏi) thực vật có củ, người tacấy thường thấy quan nhỏ từÂn củ tạo nên Cơ hành,Nghệ tinh dầu xem “một hỗn hợp thiên nhiên có mùi, phần lớn nguồn terpen phân loại dựa vào số lượng đơn vịnuôi gồm phân tử cacbon mà đen, polysaccharide vàng, tế bào kiểm Nghệ tra đen từ phương 2của đến 18 pháp ngày GC GC cấy -được phân (Singh tích vàmái cs, dinh dưỡng bắt đầu ngừng sinh trưởng Sau đó, phình to củMS xảy racó vào giai quan chui vào đất sau vị trí đặc biệt có biệt hoá Các nghiên cứu nước Nghệ đen -1.1.6 Thân hành vẩy: Các mọng nước úp lên viên ngói gốc từ thực vật”, số ítrộng tinh có nguồn từ động vật, thể lỏng chúng chứa đựng Các terpen 10 cacbon gồm 2tumerone đơn vị Cchất gọi làlượng 2002) đặn Hai phương sesquiterpenoid pháp HPLC từ củvà Nghệ phenol đen - sulfuric argốc -dưỡng acid Kết pthường - cho tumerone thấy nhà (Lys) 5sinh đoạn phát triển sinh sản Khi quan dinh ngừng trưởng phân chia tăng tếdầu bào đồng thời tích luỹ dự trữ Sự tăng > cách Các nghiên cứu nước nhiệt độ phòng, bay hoàn toàn mà không hủy (Lê Ngọc Thạch, 2003) monoterpen; terpen 15 cacbon (3 đơn Cvì gọibị làphân sesquiterpen, (Buchanan, 2000; polysaccharide tìm hiểu (Hong tổng số gia cs, 2001) tăng sau 2vịcủa -to 10 ngày nuôi cấy đạt giá trịmột cao 5) quan sinh sản dự trữ hoạt động mạnh Do đó, ức chế sinh trưởng - theo Thân hành đặc: Phần thân phù chứa chất dựhiệu trữ, có số íthình rộng hướng tỏa tròn ởsẽ vùng chồi thân bò dấu Các vẩy chồi mầm từ củ nghệ đen nuôi cấy môi trường MS bổ sung 20 Ravindran vàdinh cs, Taiz Zeiger, 2002) 6,55% Phân tích HPCL đ phát hi ện vài 1998) sesquiterpen hàm gia tăng quan dưỡng (rễ, lá) sẽDu đẩy mạnh trình hình củ haycũng cácCurcuma quan 1.3.2 Cơ quan lũy Tìm hiều về2007; hoạt tính chống vira trùng củ haithành loàilượng nghệ thành tăng trưởng củtích (Nguyễn Sanh, gam đường sucrose, 20% nước dừa BA nồng độ từ 0,5 mg/l Tiếp tục cấy mỏng khô có nhiệm vụ che chở (la dơn) (Trương Thị Đẹp, 2007) sau Kết -Trong 10và ngày nuôi cấy (Nguyễn Hoàng Lộc cs, 2009) dự trữ khác (Vũ Văn Vụ, 1997) zedoaria Curcuma malabarica loại vi khuẩn loại nấm Kết cho quảthực tìmvào hiểumôi thành củatích tinhhydầu lácác nghệ đen vật, tinh dầuphần đượchoá tạohọc mô Hình d GC-MS ạng chuyền trường 1.2.3các chồi Hình thái MS củ bổ sung 20% nước dừa BA đơn lẻ hay kết 1.2.4 Các biến đổi cấucủa trúc phẫu trình tăng trưởng củ ởthể thấy, Kết hoạt tìm kháng hiểu khuẩn vài yếu Curcuma tốgiải ảnh hưởng đến khả cần phát nồng sinh độ iso-oborneol thấp hình (0,01 thái ởđã tính 23 hợp chất Trong chủ yếu làzedoaria a-terpenyl acetate (8,4%), mô thay đổi tùy theo vị trí chúng Những mô 1.2.2 Các giai đoạn trình tạo củ quan dự trữcủa nằm đất, ởthấy, thực vật có nhiều nguồn gốc phát sinh hợpnhận vớiCủ kinetin, IBA NAA Kết cho môi trường MS bổcósung 20% đơnđen tử Với diệp 0,15 Nghệ mg/ml) Curcuma kếthoá zedoaria đó, bước Rosc đầu cho giúp thấy chotrái, việc BA kích sửtác dụng thích mạnh loại cứu, đến củ làm (7%), deydrocurdione (9%), selino-4(15), 7(11)-dien-8-one (9,4%) diện nơi rễ, thân, hoa Sự tạo củ hay củ (tuberization) giả cácphát tác khác đótrong có hình thái lá, đa dạng Có nhiều loại củ: nước dừa, BA mg/l, IBA 0,5 mg/l lượng chồi cao saunghiên 30 ngày nuôi cấy Trong quá3trình tăng trưởng củ ởcho câysốmột mầm, tăng trưởng đường kính dược triển liệu chồi để điều môi trị trường nhiễm MS trùng chứa BA vi khuẩn 4giữ mg/l kích nấm thích (Wilson tạo vàtrưởng cs, chồi 2005) Môchiều Báo sẹo Dehydrocurdione, sesquiterpen chứng minh có tác dụng chống viêm giả cho củ nhìn chung giai đo ạn ngừng tăng -đều Tế bào tiết: tếhoá bào tiết tinh dầu lòng tếcụm bào (mô tiết), ví (Nguyễn Hoàng Lộc cs, 2005) Thân rễ thân dài, sống nhiều năm, mọc nằm ngang đất giống có mô phân sinh dày cấp Theo Esau (1967), mô phân sinh dày cấp cáo tám tuần thành tuổi phần nuôi hóa học môi vàcủa dược trường tính MS chứa Nghệ 2,4-D 0,5 cho mg/l thấy có khả khả năng kháng phát mạnh, liên quan đến tác dụng chất chống oxi Phân tích sesquiterpen từ dụ cánh hoa hồng, củ gừng, củ nghệ, hạt tiêu, cao mà phát triển vềcấy chiều ngang, củ phồng lên vàhóa tíchđen trữ chất dựcác trữ Quá trình tạo Ảnh 1.1 Cây Nghệ đen Curcuma zedoaria rễ khác rễ mang biến đổi thành vảy khô Thân rễ có mang Thành phần hóa học tính kháng oxi hóa Nghệ đen Curcuma zedoaria mô phân sinh có nguồn gốc từ mô phân sinh đỉnh, chịu trách nhiệm cho khuẩn, sinh chồi kháng vànghệ rễđộc, kháng ung chuyển thư,của sang chống môi oxi trường hóa, MS (Lobo không cs, bổ 2008) sung chất điềuchính hòa thân rễ đen tác động chúng chuột Những sesquiterpenoid củ chia thành hai giai đoạn dựa thay đổi vềthân sinh lý:bề Lông tiết: tế bào tiết, nằm nhô mặt thực chồi (chồi chồi nách) có rễ phụ Trong rễ thường có nhiều tìm hiểu Những phương pháp ly trích tinh dầu (chưng cất lôi việc1.1.4 gia tăng độ dày thường thấy mầm Tác dụng dược lý vật, sau hai tuần Cây Nghệ đen có khả cảm ứng tạo củ tốt môi trường MS đượcTìm nhận furanodiene, neocurdione, curcuminol, hiểubiết tạo củ in vitrogermacrone, Nghệcurdione, đen Từ 10 - 12 tuần tuổi, cụm chất trữnhiệt nhưđốt tinh bột Ở mặtthường, củagiathân rễ thường có thẹo, đóhóa vịhọc, trí -gia Giai đoạn tượng củthông nước,dự nóng nhiệt vi sóng), thành phần Ở Cyperus giganteus, mô phân sinh dày cấp tiền tượng tầng Nghệ đen cấy làkết thuốc dùng đông yPhong vàđơn tây y Theo tài 2010) liệu cổ, thường bắtvịtrên gặp ởvới láđược họ Hoa môi, Cúc, lữ, Cà, chứa BA 3nuôi mg/l hợp đường sucrose 60 g/lBAP (Đào Thị Ngọc Mai, isocurcuminol, acrugideol, zedoarondiol, curcumin Curcumol chồi môi trường MStrong bổcurcumenone, sung lẻ kết hợp với Nghệ NAA thân khí sinh kếtiên tiếp Thân rễ thường cấu tạo trục hoạtnhững tính kháng oxi hóa khảo sát hai loại nguyên làtạo củnhu Nghệ đen tươi Đây giai đoạn đầu cảm ứng hình thành củ Ởliệu giai đoạn này, thực vật biệt hoá từ mô phân sinh Mô phân sinh dày cấp mô vỏ, nội đen có vị đắng, cay, tính ôn Các chất Nghệ đen có tác dụng hành khí, > Các nghiên cứu nước -các Túi tiết: Các tếnhau bào tiết tinh dầu tìm không chứa mà dồnphá curdione tác nhân ung thư, biệtlại bên ungtrong thư cổ Người với nồng độcoi khác Ngoài rachống hiểu cácđặc nguồn carbon khác Kết năm ảnh từ thân rễ khảo mọc lên đôitrường nhiều cành khí Nhiều thân rễ trình sát cho thấy thành phần tinh dầusáng, thusinh, từ phương tạo củ tiêu chịu hưởng yếuhình tố môi ánh nhiệttiêu độ, độ ẩm, bì, khô trụ bìQua vàtích bó mạch (cũng thành từ tiền tượng tầng) cơNghệ thể thực huyết, hóa thực giúp chữa ngực vàđen bụng đau, ăn uống không đen chung chứa vào trống, tròn tạo chế lyTrong bào hay tiêu bào Trung Quốc nghiên cứu cho tính hữu ích việc khống chế ung thư cổ Sử củ dụng cáctạo chồi thành mầm sau 7xoang - củ thấy tuần Nghệ nuôi cấy, nuôi môi cấy trường với môi thích trường hợp MS cho bổ việc sung tạo làmyếu thuốc riềng,kích nghệ, phápsựdùng khác thìtốbộ khác r gừng, ất nhiều Kết khảo sát tính kháng oxi hóa cho thông qua nội sinh thích cóquả phản ứng chuyên biệt để tạo vật, biệt hoá phận liên quan đến chức mô sinh ngọn, giúp cho tiêu hóa, chữa đau bụng, kích thích, bổ Ngoài ravà cóphân tác dụng chữa Túi tiết thường bên biểu bì, ví dụtrị túi chứa tinhphóng dầu và cải BAP thiện hiệu học liệu điều trị xạ củ 30 g/lMS đường có bổ sucrose sung nằm 4mg/l mg/l BAP 6% để sucrose vi hoá nhân (Anisuzzaman giống Nghệ đen cs, (Miachir 2008) cs, thấy tinh dầu Nghệ đen có mức độ kháng oxi hóa tương đối cao nồng độ 20 mg/ml Rễ củ rễ trở thành phận tích trữ dưỡng liệu tinh bột củ Vào thời điểm này, chưa có biểu rõ rệt hình thái mà nhiên Lợi, đơn tử diệp chínhlálàcây hìnhEucalyptus, thành mô phân sinh dày cấp ho (Đỗ Tất 2009) vỏ trái Citrus, giống Curcumenol trích từgiống nghệcứu đenbốn trồng Brazil lượng dùng hiệu 2004) Kết nghiên hệ thống vivới nhân giống tạocần câythiết cho Curcuma 1.2 CỦ (Trần Thị Việt Hoa cs, 2007) inulin, rễ phồng to lên tạo thành rễ củ tập trung phản Thời kỳ cảm ứng - tuần Các mô phân sinh dàyứng cấpbiến mộtdưỡng tìm thấy vùngkéo trụdài bì,5chịu tráchsau nhiệm việc làm giảm đau Những kết chứng minh việc sửchống dụng phổ biến loài zedoaria Zingiber zerumbet thấy hệ thống nuôi cấy lỏng lắc ngập chìm dầu Nghệ dùng để tắmcho trị vàng da, trịờng bệnh da; histamin; làm - Tinh Ồng tiết: cách tạo thành trư hợp túi tiết, nằm sâu Từ tính “củ” dùng phổ biến để kháng quan nằm đất dogian thânnày, rễ tạo enzyme oxi hóa (peroxidase, superoxide dismutase, trồng theo loại củ,cấp trạng sinh lý Trong thời Một vài trường hợp củtình xuất nách lá, Dioscorea bulbifera cho Đặc sựtùy hình thành mô dày chức nóloài có ý nghĩa việc cho việc điều trị hợp bệnh (Ravindran cs, 2007) tạm thời kỹ thuật phù cho việc tạo conđộc haitếloại (Stanly tan cục máu đặc Tinh dầu chứavà nhiều chất bàocây (curzeronon, bên Củ thường chứa chất dự trữ có khả sinh sản vô tính (Nguyễn Du catalase) theo dõi tế bào Nghệ nuôi cấy hệyếu lêntương men đồng lít (Nguyễn chất đồng hoátăng sản từ sinh trình quang chủ dùng cho gọi làthích củ không giải trưởng Các phân tích đen Allium chohợp thấy điểm mô cs, 2010) diferuloilmetan, feruloil-p-counlaroil-metan, di-p-coumaroil-metan) trị bướu, phần gỗ chạy dài theo sớ gỗ, gặp giốngdùng Dipterocarpi, Sanh, 1998) Hoàng Lộc cs, 2008) Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn tinh dầu chiết xuất trình tăng trưởng phân sinh dày cấp tượng tầng, tạo thành lớp tế bào dẹp tiếp tuyến;từcác ung thư (Phạm Hoàng Hộ, 2006) Artemisia, Pinus, (Buchanan, 2000; Lê Ngọc Thạch, 2003) PTM liên tiếp với mô phân sinh (Rodrigues Estelita, 2002) 24 27 22 23 26 20 21 25 14 15 13 19 17 12 16 18 0 2.2PHƯƠNG 2.2.10 2.2.8 1.3.4 Xử Hoạt lý PHÁP tính số chất liệu sinh điều hoc hòa tăng trưởng dầu đối thực với vật in 2,4-D vườn ứng Hoạt Phần ởcho tính bã 105 100% gibberellin Ccấu lại 89,4% 2kháng giờ, sấy Nhưng khô tiếp đotinh ởtheo 70của ở0hợp tiếp C80 sinh C tục trắc cho 30 tăng đến nghiệm phút, nồng thêm trọng độ với 5vitro ml lượng nước mầm lên không 0,5 cất, xàcó mg/l lách đun đổi nghiên 2tương 2.2.7 VẬT Tạo cứu LIỆU phenol khảo VÀ in sát thấy vitro hoạt PHƯƠNG tính phần chế tác PHÁP động khuẩn Những ABA 21 chất loại lên tinh bắt dầu trình lấy thực tạo gốc vật, củ tự do, dokhông tác dụng cho 19 1.4.5 Acid jasmonic - thích Dẫn dụ: công tìmđ ến hoa làHClO hương thơm tỏa Ởđinh Trong hình thành củ in vitro ởPhotosynthesis Dioscorea cayenensis, JA 0,1gl cảm ứng (Lactuca cách thủy sativa L.) 15 phút, Hoạt để tính gibberelhn thêm 2khô tỷ ml lệ(Grodzinxki, thuận 9,2 với N, thêm sai biệt nước chiều cất dài tới 10 trụ ml hạ kích (khoảng tỉ lệ tạo 72 loại hấp giờ) củ tinh thu giảm để dầu sucrose xác có định Xử hoạt línguội, trọng 2,4-D tính lượng 2tế kháng mg/l bào nhu khuẩn hình môcắt dự tinh mô 1981) từ dầu sẹo mô chanh, vàhoa từ libe đócam, làm phản ứng peroxide hóa xảy ra, bảo vệ lipid 4thành Khúc cắt thân làtrùng đoạn thân khoảng 0,5 cm ratrữ từ Nghệ đen in vitro Số liệu xử lý thống kê chương tình SPSS (Statistical Program 2.2.1 Quan sát cấu trúc giải phẫu -2.1 Khử trùng mẫu VẬT LIỆU số loài hoa, tinh dầu nócho có khả dẫn dụ côn trùng đến giúp cho củ sớm JA (1, 0,3 0,1 gl) làm tăng trọng lượng chiều dài củ sau diệp ly so 4000 chuẩn vòng (dung dịch ba GA phút 10 Tiếp mg/l) tục sau ly 72 trích chiếu phần cặn sáng sau ly với 2phía ml PR MARY CARBON METABOL $M tăng áp suất hương, thẩm thấu Tinh (Nguyễn dầu quế biểu Du Sanh, hoạt 1998) tính kháng khuẩn ởtăng nồng độ thấp, tạo với tỉ lệ cao (98,2 100%) Tương tự xử lý IAA NAA 0,2 3trường tháng tuổi trồng môi tạo chồi Mặt đáy khúc cắt vị trí Scientific System) phiên 11.5 dùng Windows Sự khác biệt có ýtâm ngha ở60 mức 2.2.4 Đo cường độ hô hấp -tâm Dược phẩm: tinh dầu loại dược phẩm sử dụng nhiều yđược học +với Thao tác tủ-dọc cấy: cắt chồi mầm tái lập trưởng củ Các lát cắt ngang qua thân Nghệ đen in vitro ba tháng tuổi 2.1.1 Vật liệu dùng để phân tích xử lý thụ phấn 120 ngày nuôi cấy (Ovono cs, 2009) HClO 4,6 N chung phần lỏng đểmà xác định hàm lượng đường theo đường mg/l tỉ4đen lệ tạo củGộp cao (81,8 -hai 92%) (Wang cs, 2009) rễ mọc từ thân phần khúc cắt cách mặt đáy 0,5 cm -suất Diệt nấm: tinh dầu có hoạt tính diệt nấm ởtự nồng độ thấp Ví dụ xác phoa =cường 0,05 giá trị thể ký khác kèm theo cổ truyền Nhờ có chứa tinh dầu số dược thảo có mùi thơm đặc Nghệ vườn sau tuần trồng rửa vòi nước Dùng gòn thấm Erythrose-4-phosphate 3-Phosphoglycerate Đo độ hô hấp (lượng oxygen hấp thu/g TLT/giờ) máy Hansatech quan sát kính hiển vi quang sau nhuộm hai màu đỏVĩnh carmin 1.4.4 Cytokinin (3-PGA) - Củ Nghệ đen cấp từ học trồng vườn, ởbằng huyện Cửu,và Pyruvate Phosphoenolpyruvate chuẩn Quy đổi hàm lượng tinh bộtdụng theo lượng đường giải nhân với hệ số - khúc vệ: tinh dầuvào thực vật góp phần bảo vệ chúng chống lại loài 0cấy Các cắt cấy môi trường MS có bổ sung sucrose 30 g/l vàmột chất tinh trưng Tinh dầu có nhiều tác điều trị Có loại tác dụng Sau bốn tuần nuôi môi trường tạo củkhác (MS ^thủy bổ sung NAA 0,5 mg/l) nước xàBảo phòng lau bề mặt chồi Sau lắc mẫu dung dịch xà Bổ sung BAP 0,2 0,5 mg/l hay kinetin 0,2 mg/l hay zeatin 0,2 mg/l với điện cực oxygen, 27 C, tối Trong đo, phần củ cấp giai xanh iod ăn Đồng Nai, giai đoạn 4, 6, 10 tháng trồng tỉnh 0,9 điều hòa tăng trưởng thực vật khác nhau: dầu kinh giới tây với nồng độ máy -củ 10 đãvườn làm gi ảmcây) phát triển hệ kinh trung ương, có lại kích thích dịch tiêu hóa, dịch dạvới dày, Dioscorea floribunda đãtuổi hình thành không (15sẽ củ/1 (Sengupta phòng loãng 15 phút rửa lại nước 3pl/ml lần cho vào nuôi cấy láloại Pinellia ternate cảm ứng tạo10 củ tỉ đoạn 4,Củ 6,trường 8,thần 10 tháng Nghệ đen cho vào buồng đo 2.2.2 Theo dõi sựcuống tíchcủa lũy tinh dầu ởđen củ Nghệ đen vườn cỏ -môi cấp một, hai ba Nghệ vườn giai đoạn tháng Tricarboxylic o Acetyl CoA 2.2.6 Ly trích đo hoạt tính chất điều hòa tăng trưởng thực vật loài nấm sợi nhỏ Do này, tinh giữ vai trò bảo vệ dịch ruột dịch mật làm tacác ănmẫu ngon Chúng códầu thể giúp tiêu hóacồn tốtcác cs, 1984) + Thao tác tủ cấy: chuyển vào erlen sạch, lắc mẫu 70 acid cycle lệ (73,8 100%) Ngoài ra, kết hợp BAP 0,5 mg/l NAA 0,2 mg/l củacao máy BA 1, 3, mg/l; - Cótrồng Hỗ phát triển: đượclũy định nghĩa khảNghệ đen đặc biệt hai trợ phương pháp allelopathy theo dõi tích tinh dầu trongcủa vườn, mô bị loài vật ăn cỏ làm tổn thương điều hòa chức ruột Người ta dùng dung dịch etanol nước phút rửa mẫu nước cất vô trùng lần Tiếp tục khử trùng mẫu Aliphatic làm-1.4.2 gia Phần tăng số lượng củ cấp (khi chia giúp củđể củ cấp tăng trưởng thành ba đường phần có chiều (Wang dài cs, bao gồm: Khi có thu O thay đổi ápngăn suất O buồng đo, điện cực làm 2tháng cốiNghệ nhằm Gibberellin tạo racủ hóa chất chặn giúp ích cho Cây 9những tháng trồng củ sau xử lýkính chất điều hòa IAA 1, vàhấp 5đen mg/l; hay amino acids ngâm với vị thuốc có tinh dầu để chống bệnh thấp khớp tác dung dịch HgCl 0,1% 15 phút vàtuổi rửatrùng lại xoa nước cất vô trùng - 5Chúng lần.dùng trùng: - nhận Diệt côn tính diệt côn tinhđoạn dầu có biểu 2009) nhau) ởCủ giai đoạn 4, 8hoạt vàđổi 10 tháng đen máy> biết thay đổi hiệu điện thếsựtương đương với nồng Gibberelin coi chất cản sựcủa tạo củ Pinellia ternate Khi phân cấp (từ6,thay củ mẹ trồng) ởởNghệ giai 4, 6,thể 8vườn 10 chung quanh Những hóa chất ảnhcây hưởng đến sinh tồn tháng phát triển Ễng GA 1, 5, 10 mg/l (đối chứng MS có bổ sung sucrose 30 g/l) dụng cách tăng dồnhòa máu tạiđến cácsa vùng xử lý.bằng Mỗi diệt tinh trực dầupháp có thành - trích Môi trường nhiều dạng như: dẫncơ dụ trùng vào bẫy, tiêu tiếp để đo hoạt tính chất điều tăng trưởng thực vật phương acid Mevalonic Malonic Ở Xanthosoma sagittifolium, nuôi cấy đỉnh chồi môi trường MS chứa độ ly OShikimic buồng kín Trên sởcôn thay đổi hiệu điện thếcó điện cực, tích thay đổi chức năm nhóm hormone nội sinh (IAA, GA , ABA, 2của trồng Nghệ đen vườn chia thành ba phần chiều dài 3chương bao gồm ngăn chặn nẩy mầm hạt, làm biến dạng rễ cây, làm chậm MEP pathway trưởng thực vật pathway acid pathway acid pathway Sau hai chất tuần nuôiđối cấy, đocôn đường kính thân đếm số hạt tinh dầu cótrường phần hóa độc học cấu khác nên có tính trị bệnh +bản Các môi trường nuôi cấy sử dụng thí nghiệm làhoạt môi MS với trùng, tiêu diệt gián tiếp thông qua việc ngăn chặn sắc kíphần mỏng Silicagel Fphần (Bùi Trang Việt, 1992; Meidner, 1984; Yokota, 254 sucrose 80 g/l có bổ sung BAP 30pM cho khả tạo củ cao (Omokolo cs, trình mềm máy tính nồng độ O mẫu zeatin acid jasmonic) hình thành củ cho thấy hàm lượng IAA, 2sự Cắt ngang qua phần củ thành nhiều lát cắt Chọn 15 lát cắt, đếm số hạt tinh dầu phát triển cây, Một số sản phẩm biến dưỡng thứ cấp có vai trò 2.1.2 Vật thân liệu dùng trongđen nuôi cấy lát cắt ngang qua Nghệ khác (Lê Ngọc Thạch, Aromatic (Murashige Skoog, 1962) bổ sung đường sucrose 30acetic g/l Tùy thí80: nghiệm mà giai đoạn phát triển của2003) côn trùng Ngoài số tinh dầu có 1980), hệ dung môi làkhi chloroform: metanol: acid (theo tỷ lệ 15: 5), 2003) ABA, zeatin vàsự acid jasmonic tăng h ình thành trư ỏng củ thị trường dùng kính x10tnh cácra, lát cắt Kết giá trị amino acids hỗ trợ phát triển chủ Trong đất, đóng vaivà tòăng ch ất độc 2.2.5 Xác định lượng tinh bộtvật - trường Chồi mầm táicólập tăng trưởng củ đenNghệ vườn sau hai 0nuôi Cắt dọc quacấy vùng mô phân sinh thân đen inkhác vitro hai môi bổ sung chất điềukinh hòaNghệ tăng trưởng thực vật hoạt tính xua đuổi côn trùng Nhờ nghiệm dânba gian, sau có củ thể 1.4 Ảnh hưởng chất điều hòa tăng trưởng thực vật đến tăng trưởng nhiệt độ 30 Cthực (hình 2.1) Nitrogen-containing GA mạnh (Wang cs, 2009) trung bình 1giảm lần đếm 15 lát cắt Lặp lại ba lần củ khác cho vật (phytotoxicity) thông qua việc ngăn chặn kéo dài thời BA pM có tác động tích cực đến việc tích ũy sinh khối củ Hàm lượng tinhproducts bột phần củ cấp (khi chia củ cấp thành ba secondary tuần tuần nuôi cấythấy với cácđược môi làm trường có bổ agar sung chất tăng trưởng khác + Môi trường rắn với nồng độhòa 6vật g/l tìm khả sửvàcấp dụng tinh dầu qua hệđiều phong phú tiếp nước ta tích lũy hợp chất thứ Vị trílượng IAA, ABA zeatin sắc kíthực phát trực gian nảy mầm hạt giống khác Curcuma longa (Matthew cs, 2008) Ở Curcuma zedoaria, kết tạo Trên sỏ tác động loại hormone thực vật, nhà nghiên cứu > Định tinh dầu: phần củ cấp một, cấp hai cấp ba (khi chia củ phầntrồng có chiều dài nhau) giai đoạn 4, 6, 10 tháng tuổi Nghệ đen Đo đường kính thân trắc vi thị kính vị trí nách tính từ nách gần mô + pH môi trường trước hấp 5,8 ± (được điều chỉnh NaOH 1N Nhiều sảnvới phẩm thiên nhiên có nguồn gốc từ thực vật dùng Phenohe tia UV 254 nm so chuẩn IAA, ABA zeatin vòng 7được -thuyết 10 tuần nuôi cấy môiphần trường khác nhau, tỉtr lệọng thân rễ tạo thành xây giả điều hoà chúng trình hình thành củ hai Terpenes cấp một, cấp hai cấp ba thành ba có chiều dài nhau) giai đoạn -dựng Dung môi hữu cơ: số monoterpen không đảm nhiệm chức Ở thực vật, chất điều hoà tăng trưởng đóng vai trò quan trong vườn xác định phương pháp Coombs cs (1987) compounds Cây Nghệ đen in vitro sáu tuần tuổi trồng với môi trường MS phân sinh (nách thứ nhất) đến nách cuối phần gốc thân Lặp lại 5được lần HCl 1N) thuốc trừ sâu thuốc kiềm hãm phát triển sâu bọ Vịhợp: trí GAcủa phát cách phun hợpđể acid sulfuric-ethanol tốt ởriêng môi chứa BAP 4CARBON mg/l Ảnh tương tự BAP NAA hệ phức GA/ABA hình thành láhưởng vàđược ảnhhỗn hưởng trực tiếp đến hình 3chúng 10 tháng tuổi Nghệ đen vườn dùng định lượng tinh dầu trình hình thành cơđược (thân, rễ, củ, chồi, ) chuyển đổi từcó giai lẻtrường mà đóng tiò dung môi hữu cho số hợp chất hữu SECONDARY METABOLISM Nghệ đen inquan vitro bavai tháng tuổi trồng với môi trường MS bổ Lập đường chuẩn trên- khác +Cây Môi trường hấp khử trùng autoclave atm, 121 C 20 biết (5: 95) lên sắc kí, đem sấy 110 C 10 phút quan sát tia UV 254 tạo củ đãtính kiểm tra Curcuma Kết phù hợp thànhtăng củ; auxin/cytokinin tác động trực tiếpchi đến lũy hình thành củ Trong kiện phương pháp cất nước (Nguyễn Thị Kim Cúc vàdưỡng cs, điều 2009; Lê đoạn trưởng giai đoạn phát triển hay tích chất dinh Chính có hoạt sinh học BA sang mg/l 0,5 mg/l Pha glucose vịNgoài trí nách theo láIBA nồng thân độ 10, ta 20, Nghệ đen 40, in 50,hướng vitro, 60, 70, 80lát pg/l cắtNhuộm ngang dung phút Ởsung đến ngày người có30, khuynh ngày thiên sử với nghiên cứu Curcuma aromatic Tuy nhiên, số tác giả nhận thấy nmthế, so với chuẩn GA3 ngày dài, nhiệt độ cao, cân GA/ABA nghiêng phía GA, hình thành củ bị Ngọc Thạch, 2003) Cân 100 g mẫu, nghiền nhỏ cho vào bình cầu Thêm 300 cân hormone tế bào thực vật có ý ngha quy ết định Sự cân Hinh 1.1 Sinh tông hop terpen (T aiz Zeiger 2002) - Hoạt tính kháng sinh: khicó động vật ăn cỏ nguyên nhân học Vật liệu dùng sinh trắc nghiệm dịch-2.1.3 thực glucose Đếm số hạt phenol tinh dầu 5% H SO lát đậm cắt ngang đặc theo vị tỉ trí lệ glucose: nách phenol khác 5%: Điều kiện nuôi cấy: dụng thuốc trừ sâu có độc tính thấp người, thú nuôi BAP chất ức chế tạo củ Nghệ vàng 2008) ức chế Trong điều kiện ngày ngắn, nhiệt độ thấp, cân nghiêng phía ABA ml nước vào bình cầu Đậy kín (Anisuzzaman, gắn vào ống sinh hàn hồi lưu, thiết lập sở hai nhóm có hoạt tình trái ngược nhau: nhóm cóphía tác Hoạt tính IAA, Zeatin, GA ABA xác định sinh trắc 3bình làm tổn cơgiờ/ngày quan cây, tinh dầu từ mô thoát bảo vệ H2SO Lặp đậm 15 lần đặc (1: 15 1: hại theo khác Đo mật độ quang ởthuốc bước sóng 490 với Thời gian chiếu sáng: 16 + nhanh chóng phân hủythể sautích) khisativa sử dụng sát trùng cónm nguồn - lại Khúc cắt diệp tiêu lúa (Oryza L.) nên từ mầm 72 tuổi dùng kích thích hình thành củ Tương tự, sựtác cân auxin/cytokinin nghiêng vềxuống phía hứng buret cho giọt chất lỏng chảy từsinh đuôi ốngauxin sinh dụng kích thích sinh trưởng nhóm có dụng ức chế sinh trưởng (Vũhàn Văn Vụ, Cytokinin kích thích phân chia tế bào với điều kiện có Cytokinin nghiệm Hoạt tính auxin acid abscisic đo trắc nghiệm với diệp vết thương không cho bị nhiễm trùng thứ cấp (Lê Ngọc Thạch, 2003) Hình 1.2 Sinh tổng hợp monoterpen sesquiterpen (Taiz Zeiger 2002) chuẩn nước cất: phenol 5%: H SO đậm đặc (1: 1: theo thể tích) Từ giá trị + gốc Cường ánh sáng: ±tăng lux 4200 2.2.9 thực Xửđộ lý vật chất điều tinh2500 dầu hòa trưởng lưuvà thực tâm nghiên vật trêncứu câysửNghệ dụng đen trong sinh trắc nghiệm đo hoạt tính auxin acid abscisic cytokinin kích thích hình thành củ (Vũ Văn Vụ, 1997) rớt vào buret Đun sôi nhẹ Hơi nước tinh dầu bốc lên 1997) tác cảsativa hai bước tế bào: phân Cytokinin tiêuđộng lúavườn (Oryza L.).của Sự giaphân tăng chia về0 chiều dàiphân diệpnhân tiêu lúa bào đo sau 24 giờ, thu được, vẽdiệp đường chuẩn để dùng cho việc xác định hàm lượng tinh bộttrong + Nhiệt độ phòng nuôi: 25 C ± C Tử dưa chuột (Cucumis sativus L.) 24 tuổi dùng sinh Kháng oxi hóa: oxi hóa thường xuất thực phẩm để lâu 1.3.5 Sựtính dùng tinh dầu nông nghiệp vàvà yTinh dược gặpsự lạnh ngưng tụ lại rơi ống hứng nhẹ tách giúp gia tăng kích thước tế xuống bào Trong thân rễ, dầu cytokinin cảnnước kéo dài, tối Hoạt auxin tỷ lệ thuận với sai biệt chiều dài khúc cắt diệp tiêu so 1.4.3 Acid abscisic XửĐộlý dung dịch BAtính mg/l (đối chứng nước cất) cách phun ướt 1.4.1 Auxin thí nghiệm sau + ẩm: 55 ± 10% trắc nghiệm đo hoạt cytokinin - Kháng khuẩn: hoạt tínhchứa kháng tinh dầu điều kiện hợp phòng thídễ ngày có khuẩn nhiều chất bãotrong hòa chất khỏi lớp nước vàrộng lên Sau 3hợp giờ, quan thấy lượng tinh dầu kích thích tăng tế bào (sự tăng trưởng củ)sát (Bùi Trang Việt, 2000) với chuẩn (dung dịch IAA mg/l) Hoạt tính acid abscisic tỷ lệABA nghịch với sai Ở khoai môn hoạt tính ABA cao giúp hình thành củ con, xem Auxin kích thích phân chia tượng tầng, đồng thời giúp phân hóa trên- tấtĐo Nghệ đen vườn giai đoạn tháng trồng Mẫu cấy sau khử trùng cắtL.) bỏ phần bên dođưa bịkhuẩn tổn thương Cây hàm mầm lượng xàbởi lách tinh bột (Lactuca sativa củ.không 24 dùng sinh trắc nghiệm hiểu khả ức chế sựtuổi phát triển vi bị oxi hóa oxygen khí Sự oxi hóa đến hư ốngthích không thay đổiđặc đáng kể, kết thúc định lượng Dùng kim tiêm để làm hút tinh biệt mô chiều dài khúc cắt diệp tiêu so chuẩn (dung dịch ABA 1thành mg/l) chất kích tượng củ, biệt làvới giai đầu sựứng hình củ dẫn (libe mạch mộc) Auxin cóđoạn khả cảm trực tiếp hóa tế khoảng thờitiếp gian từ với đến 30 phút vàonăng ngày có nắng, liên tụcphân xúc dung dịch khử trùng Cấy mẫu vào ống nghiệm chứa 10 điều kiện in vitro Cáchcủa tác dụng lên vicồn khuẩn dầu tinh dầu thường thối, phẩm chất, thực phẩm Những tinh có chứa Nghiền g củ, chiết đường củ 90 nóng theo tỉ lệ cồn : mẫu dầu ratính đọc thể tíchđược tinh dầu thu Hoạt cytokinin đo sinh diệp chuột tác dụng gibberellin bào nhu thành MS tổlặp chức dẫn (Bùi Việt, 2000) tuần Thí nghiệm lại 3mô lần, lầnTrang với 5trắc cây.nghiệm Thu kếtvới quảtửsau mộtdưa tháng xử mlmô môi trường giống nhau, tác dụng vào tế bào chết lênphần váchbãtếbằng bào cồn Cơ chế dẫn (10:2.2.3 1) Lọc lặp lại ba lần Tiếp tục chiết đường lại 80 Xác định trọng lượng khô (Cucumis sativus L.) Hoạt tính cytokinin tỷ ởlệnồng thuận với sai củ biệt trọng lượng tươi lý với tiêu: trọng lượng định lượng tinh dầu cấp mộtsự củthân cấp ABA chất ức chế sinh trưởng, ngăn cản nảy mầm, kéo dài ngủ Ở Pinellia ternate bổkhô, sung 2,4-D độ thấp vào trường nuôi cấy - Tạo cụm chồi để làm nguyên liệu cho thí nghiệm tiếp môi theo: khúc cắt kháng khuẩn cấu phần tinh dầu tiếp xuất phenol hương nhu, đinh hương, húng, khả chống lại nóng Lặp lại hai lần Sấy khô g trọng lượng tươi phần củ cấp (khi chia củ thành ba phần tử diệp so với chuẩn (dung dịch Zeatin mg/l) sau 48 chiếu sáng ba chồi hạt Nótạo hình thành lá,tỉkích thích sựtạo phình toMS củ.sung tuầnphẩm, tuổimg/l cấycảm vàonăng môi trường bổ giúp cảm ứng củ,sau vớisáu 2,4-D 0,2 lệ ứng củdiệt từ cuống láMột BA lásố tục oxi hóa thực có khả tiêu vi trùng cao hơn2 nhau) giaichất đoạnđiều 4, 6,hòa 10 trưởng tháng tuổi Hình 2.1 có Sơchiều đồ ly dài trích cô lập tăng thựccủa vật.cây Nghệ đen mg/l IBA 0,5 nghiên Tinh dầu năngQuốc, tiêu diệt tế bào ung nghiên thư có nhận hoạt tinh dầucứu phimg/l - phenol khác.cóỞkhả Trung có nh ững cứu tính kháng HIV điều kiện in vitro Prabuseenivasan cs (2006) â [...]... sinh dày cây đơn tử diệp và tượng ở cây song tử diệp (Esau, được xem như hai giai nối nhau của cùng một loại mô phân sinh dày và tích lũy tinh dầuhoạt ở cây Nghệ đen Sau 10 củ cấptrong một ngừng tăngtăng trưởng và củ đường củ với không Các hoạttháng độngtrồng, biến dưỡng quá trình trưởng xảy kính ra cùng sự sự tăngGiai trưởng và tíchrõ lũy tinh dầu tăng củkính Nghệ đen biệt ởtuổi), cácdầu mức và sinh... thì thực sự tích tinh dầu vịvật trí nách phần cấu tạo chính của tinh dầu Nghệ đen (bảng 3.3, hình 1.1, 3.3 và 3.4) thành các mô cấp Ở giai đoạn cây còn non, các bó mạch hình thành từ tiền dầu, và phải chăng sự tích lũy tinh dầu trong củ sự cần auxin, gibberellin và mạch dẫn trong một thời gian giới hạn hay trong suốt đời sống của thực hoạt tính chất điều hòa tăng trưởng thực vật của củ Nghệ đen cấp... (Sengupta và phòng loãng 15 phút và rửa lại bằng nước 3pl/ml lần cho sạch vào nuôi cấy lá và láloại của Pinellia ternate cảm ứng tạo10 củ tỉ đoạn 4,Củ 6,trường 8,thần và 10 tháng của cây Nghệ đen trong được cho vào buồng đo 2.2.2 Theo dõi sựcuống tíchcủa lũy tinh dầu đen củ trong Nghệ đen trong vườn cỏ -môi cấp một, hai và ba cây Nghệ vườn ở giai đoạn cây tháng Tricarboxylic o Acetyl CoA 2.2.6 Ly trích và. .. trồng của cây Nghệ dầu (bảng 3.5, ảnh 3.12 và 3.13) Tinh dầu tập trung nhiều và vùng lõi và thấp hơn đường chuyển hóa, cung cấp nguyên cho sự hình thành tăng trưởng của chồi của củ Rodrigues và (2009), tùy vào từng loài và cách tăng trưởng của cây mà rễ Củ vớivỏ bó mộc chuyên hóa ly tâm, trong khi rễ( gần có bó mộc xếp hướng tâm Bó (cả trọng vùng lượng và khô vùng vàEstelita hàm lõi) Đặc lượng biệt, tinh. .. điều hòa ăng trưởng thực vật của củ Nghệ sinh cấp một, vàtác cảđộng mô sinh một và mô phân sinh dày cấp hai Thiamin 0,1 Ảnh hưởng của hòa tăng trưởng vật lên sự tăng trưởng tổng3.2.3 hợp chất dự cấp trữ trong củ chất điều Nghệ đen một gia tăng tích lũycấp tinhmột dầu đoạn (bảng 3.6,tiếp 3.7, hình 3.10 và tầng 3.11) Tiếp tục tìm hiểu động của các chất điều hòa tăng trưởng thực vật trong đen cấp một phân... biệt cấp hóa hai thành nội bì lũy gồm một lớp tế 3bào 4.1 KẾT LUẬN Nghệ đen thuộc cây đơn tử diệp thể hiện cấu trúc giải phẫu của thân và rễ Củ5 3.2.1 Sự tăng trưởng, cấu trúc giải phẫu và tích tinh dầu của củ cây Nghệ NH4NO3 1650 hay mg/l lại làm đường kính thân do đó làm giảm sự tập trung số hạt tinh tích trữ trong các tếgiảm bào dicủa chuyển ravà các mô khác để tham gia vào các con môi 10 trường nuôi... trong của en mô phân sinh dày một bào vùng phân sinh dày cấp của cây Nghệ mạnh để Nghệ đen Ở một vài nghệ (Curcuma longa, sự phát nên tiếp tác đến lũy ược tinh dầu thánggián trồng của cây ộng Nghệ đen trong vườn sau thành khi xửlập, lý .Curcuma còn non (4 tháng tuổi), khisự c tích mới vì bộ lá aromatica), của thân khícó sinh chưa vị nách lá thứ bảy vàphát tám, mặc dù đường kính thân vẫn gia tăng, nhưng... khuẩn và 2 loại nấm Kết quả cho quảthực tìmvào hiểumôi thành củatích tinhhydầu ở lácác nghệ đen bằng vật, tinh dầuphần đượchoá tạohọc ra và trong mô Hình d GC-MS ạng của chuyền trường 1.2.3các chồi Hình thái ngoài của MS củ bổ sung 20% nước dừa và BA đơn lẻ hay kết 1.2.4 Các biến đổi cấucủa trúc phẫu trong quá trình tăng trưởng củ ởthể cây thấy, Kết hoạt quả tìm kháng hiểu một khuẩn vài yếu Curcuma. .. giữa tăng trưởng và tích ũy tinh dầu được tiếp tục tìm hiểu sâu hơn nhận xét khác về vị trí của mô phân sinh dày cấp một (Rudall, 1991; Rodrigues và quá trình tích ũy và t ạo tinh dầu Trong sự tạo tinh dầu, glucose cho pyruvate hay 3kính thân Từ vị trí nách lá thứ bảy trở đi, vùng mô phân sinh dày cấp một đã bi ệt gibberellin vàlượng cytokinin có vẻ động mạnh sự và cấp chia bào và tăng trưởng trưởng... 56 Thể tích tinh dầu (ml/100 g TLT) Đối chứng BA 3 mg/l Ảnh hưởng của BA lên trọng lượng khô và hàm lượng tinh dầu ở cây Nghệ đen trong vườn Xử lý BA 3 mg/l trên tất cả các lá của cây Nghệ đen trong vườn ở giai đoạn 9 tháng trồng và quan sát kết quả sau một tháng xử lý, trọng lượng khô và thể tích tinh dầu ở củ cấp một ngừng tăng trưởng thay đổi không đáng kể, trong khi các chỉ tiêu này gia tăng cóý ... 3.15 Sự phân bố hạt tinh dầu nách 5, , (A -D) thân Hình 2.1 Sơ đồ ly trích cô lập chất điều hòa tăng trưởng thực vật 24 Sự tăngNghệ trưởng củvườn 35 Nghệ đen vườn tuổi >của đencủa Hình... lũy tinh dầu Nghệ đen in vitro Các chất điều hòa tăng trưởng thực vật có tác động khác lên gia tăng đường kính thân hoạt động tích lũy tinh dầu Nghệ đen in vitro Sau tuần nuôi cấy, đường kính thân. .. tácđtuyến) ộng tích cực đến tíchsinh lũy sinh (bao gồm bào dẹp, dài phân xa môviệc dày lên thân Nghệ đen (gia tăng kính), giống ởphân nhiều câyngọn đơn >Sự Sự tích lũy tinh củ3.1 Nghệ đen củ có kích