Nghiên cứu lên men sinh tổng hợp kháng sinh nhờ streptomyces 10 19

IIỘ Y r è ’ m 'ỏ ltG ĐẠI HỌC Dược IIÀ SỘI £Q Ị iXg o^> NGUYỄN THỊ THU HƯỜNG NGHIÊN CỨU LÊN MEN SINH TổNG HỌP KHÁNG ■ SINH NHỜ STREPTOMYCES 10.19 (KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Dược SỸ KHÓA 1998-2003) Người hướng dẫn TS. C A O V Ă N T H U N ơi thực hiện Phòng vi sinh - Bộ môn Công nghiệp Dược Thời gian thực hiện : 09/01/2003 - 20/05/2003 HÀ NỘI, 05/2003 £Ờ5i@ [...]... biến gây lên bỏi tia u v 1.4 Lên men sinh tổng hợp kháng sinh [1], [7], [8], [10] , [11] Lên men sinh tổng hợp kháng sinh là quá trình nuôi cấy v s v trong môi trường dinh dưỡng Nó ảnh hưởng lớn đến hiệu suất của quá trình sản xuất kháng sinh Bình lên men thực chất là các bình phản ứng sinh học, trong đó các phản ứng hoá sinh được thực hiện nhờ các phức hệ enzym trong tế bào v s v 1.4.1 Giống vi sinh. .. làm môi trường lên men chìm cho các nghiên cứu tiếp theo 2.2.7 Lựa chọn biến chủng có khả năng sinh tổng hợp kháng sinh cao nhất khi lên men chìm Dùng môi trường lên men là MT5 dd để tiến hành lên men chìm cho 3 biến chủng 15, 17, 19 Kết quả trình bày ở bảng 8 Bảng 8 Kết quả thử hoạt tính kháng sinh của 3 biến chủng 1 5,17 ,19 sau khỉ lên men chìm Biến chủng Slta D (mm) 19, 82 15 17 19 Nhận xét: SIli... 0,23 11,22 10, 68 s 0,15 0,82 0,52 Nhìn vào bảng 8 nhận thấy biến chủng 15 có khả năng sinh tổng hợp kháng sinh cao nhất Trong khi đó biến chủng 19 khi lên men bề mặt sinh tổng hợp kháng sinh cao nhưng khi lên men chìm lại cho giá trị thấp nhất Giữ lại dịch lọc của biến chủng 15 để tiến hành nghiên cứu tiếp theo 2.2.8 Ảnh hưởng của pH đến độ bền vững của kháng sinh Đánh giá hoạt tính kháng sinh bằng... hiệu suất thấp * Lên men chìm: -Là quá trình lên men mà v s v được nuôi cấy trong môi trường dịch thể, chúng sẽ phát triển theo ba chiều của cột môi trường 7 -Sơ đồ quá trình lên men chìm được giới thiệu ở hình 3 Hình 3: Sơ đồ tổng quát quá trình lên men chìm -Tỷ lệ giống trong môi trường lên men: Vgiống: Vmôi trường lên men =1 :10 -Ưu điểm : + Hiệu suất sinh kháng sinh cao + Thiết bị lên men dễ cơ giới... Gy Streptomyces tendae Gy 0 1 1 0 1 1 RA sm ± ± + + + + + RAS sm + + + + + + + - - Nhận xét: Như vậy về căn bản kết luận Streptomyces 10. 19 có tên là: s.tendae 2.2.2 Khả năng sinh tổng hợp kháng sinh của chủng Streptomyces 10. 19 trên môi trường phân lập (MT1) Chủng Streptomyces 10. 19 được cấy trên MT1 có chứa v s v kiểm định, kết quả được trình bày ở bảng 3 Bảng 3: Hoạt tính kháng sinh của chủng Streptomyces. .. môi 5ml, ngâm sinh khối trong butyl acetat Đánh giá hoạt tính kháng sinh bằng phương pháp khoanh giấy lọc Kết quả được trình bày ở bảng 11 Bảng 11 Kết quả thử hoạt tính kháng sinh trong sinh khối Mẫu thử Dịch chiết sinh sta Shi D(inm) s D(mm) s 7,50 0,15 10, 97 0,45 khối Nhận xét: - Chủng streptomyces 10. 19 có khả năng sinh tổng hợp kháng sinh cả ngoại bào lẫn nội bào Tuy nhiên phần kháng sinh nội bào... chìm của biến chủng 15 Môi trường lên men sta Shi D (min) s D (mm) s MT1 dd 12,33 0,05 15,40 0,34 MT2 dd 12,93 0,32 14,03 0,59 MTỔdd 12,06 0,92 14,90 0,31 MT5 dd 19, 16 0,46 24,16 0,25 Nhận xét: Nhìn vào bảng 7 nhận thấy MT5 dd là môi trường lên men chìm tốt nhất Như vậy chủng Streptomyces 10. 19 cỏ khả năng sinh tổng hợp kháng sinh tốt nhất khi lên men bề mặt và lên men chìm ở MT5, MT5 dd Đó là những... của chủng Streptomyces kasugaensis khi lên men liên tục, hiệu suất kháng sinh đạt được từ 9,8 - 16,1 mg/l/h cao gấp 1 4 - 2 3 lần so với lên men mẻ gián đoạn thông thường Như vậy vấn đề cố định tế bào trong lên men liên tục cần được nghiên cứu để ứng dụng trong sản xuất kháng sinh với quy mô rộng 1.6.3 Ảnh hưởng của các tác nhân gây thoái biến acid Clavulanỉc trong lên men có bổ sung chủng Streptomyces. .. Kháng sinh do chủng Streptomyces 10. 19 tổng hợp bền vững trong một khoảng pH hẹp 29 - Sau 1 ngày, pH = 1,2, pH 9 —>12 mất hoạt tính - Sau 5 ngày pH = 3, 8 bắt đầu mất hoạt tính - Kháng sinh bền vững nhất ở pH = 5 Giữ dịch lên men ở pH = 5 để tiến hành các nghiên cứu tiếp theo 2.2.9 Lựa chọn dung môi chiết thích hợp của dịch lên men Sử dụng các dung môi chiết khác nhau Tiến hành chiết 1 lần pH = 4, 7 , 10. .. đột biến khả năng sinh tổng hợp kháng sinh của biến chủng 15 tăng lên rõ rệt 27 - Biến chủng 15 22 có % biến đổi hoạt tính dương cao nhất cả đối với Sh Flexleri và St aureus 2.2.6 Kết quả lựa chọn môi trường lên men Tiến hành lên men chìm biến chủng 15 trên máy lắc để lựa chọn môi trường lên men tốt nhất, kết quả được giói thiệu ở bảng 7 Bảng 7 Kết quả thử hoạt tính kháng sinh khi lên men chìm của biến ... định Streptomyces 10. 19 chủng xạ khuẩn có khả sinh tổng hợp kháng sinh phổ rộng có khả ứng dụng thực tế Từ sở đó, lựa chọn khoá luận có tiểu đề Nghiên cứu lên men sinh tổng hợp kháng sinh nhờ Streptomyces. .. có khả sinh tổng hợp kháng sinh cao Trong biến chủng 19 lên men bề mặt sinh tổng hợp kháng sinh cao lên men chìm lại cho giá trị thấp Giữ lại dịch lọc biến chủng 15 để tiến hành nghiên cứu 2.2.8... trường lên men chìm cho nghiên cứu 2.2.7 Lựa chọn biến chủng có khả sinh tổng hợp kháng sinh cao lên men chìm Dùng môi trường lên men MT5 dd để tiến hành lên men chìm cho biến chủng 15, 17, 19 Kết