Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống
1
/ 24 trang
THÔNG TIN TÀI LIỆU
Thông tin cơ bản
Định dạng
Số trang
24
Dung lượng
521,5 KB
Nội dung
ĐHKT Y HD - TT KN ATTP QUANG PHỔ HẤP THỤ UV-VIS PGS Phạm gia Huệ Hà Nội 24-11-2010 Ph H p Th UV-VISổ ấ ụ Là phương pháp phân tích dùng phổ biến nhất trong các PTN Ví dụ ứng dụng: PT nước, các màu thực phẩm, acid amin, kháng sinh, kim loại Ph H p Th UV-VISổ ấ ụ Các đại lượng đặc trưng cho bức xạ ánh sáng Sự hấp thụ ánh sáng và màu sắc Các yếu tố ảnh hưởng lên độ hấp thụ Các ứng dụng của phương pháp phổ hấp thụ UV-Vis Máy quang phổ UV-VIS Bức xạ ánh sáng UV-VIS Tính chất sóng: Các đại lượng đặc trưng: Bước sóng λ (nm) (1 nm =10 -9 m) thay đổi theo môi trường Tần số ν (Hz) k hông đổi ν = Tính chất hạt: photon có năng lượng: E = h ν = h λ c λ c Bức xạ ánh sáng UV-VIS Sự hấp thụ ánh sáng và màu sắc Vùng tử ngoại (UV) 50 – 400 nm • Tử ngoại gần: 200 – 400 nm Vùng khả kiến (Vis) 400 - 750 nm Vùng hồng ngoại (IR) 750 nm – 100 μm Sự hấp thụ ánh sáng và màu sắc Vùng khả kiến: AS trắng = 7 màu Màu phụ nhau: Vật màu đỏ H T màu lục Vật màu lục H T màu đỏ Lục-Đỏ = 1 cặp màu phụ nhau Chùm tia đơn sắc Các yếu tố ảnh hưởng lên độ hấp thụ. Cấu trúc phân tử Môi trường: • Dung môi • thuốc thử • pH Các yếu tố khác Sự pha loãng, ánh sáng, thời gian, nhiệt độ Các ứng dụng của pp phổ UV-Vis Định tính và thử tinh khiết Ít có ý nghĩa Định lượng quan trọng ứng dụng chủ yếu định luật Lambert-Beer Định tính b ng ph UV-VISằ ổ Max 1 Max 2 Max 3 [...]... Máy quang phổ UV-VIS Khoảng đo: 200-800 nm (hay 190-1100 nm) Các bộ phận chính: Nguồn sáng: đèn W, đèn D2 Bộ đơn sắc: cách tử Detector: nhân quang Cốc đo (cuvet): thuỷ tinh, nhựa, quartz Máy quang phổ UV-VIS 1 chùm tia 1 Nguồn sáng 2 chùm tia 3 Cách tử 4 Tia đơn sắc 5 Chắn sáng 6 cốc đo (cuvet) 7 Detector Máy quang phổ UV-VIS 1 chùm tia (detector DAD) Nguồn sáng Mảng diod Cuvet Cách tử Máy quang. .. thuận với nồng độ C A=E=D E = độ tắt D = mật độ quang = OD C I I0 L Định luật Lambert-Beer A = kλ L C Hệ số hấp thụ kλ phụ thuộc vào λ (đường cong phổ hấp thụ) thay đổi theo đơn vị của C kλ=ε = hệ số hấp thụ mol nếu C = Cmol/L kλ=E1%1cm=hệ số hấp thụ riêng nếu C = C% Các kỹ thuật định lượng Đo phổ trực tiếp Phương pháp so sánh: Phương pháp thêm Phương pháp đường chuẩn Phương pháp đường chuẩn... bằng phổ UV-VIS Định lượng ngay (đo A, tính C) Chuẩn bị, xử lý mẫu (chiết, làm phản ứng ) trước khi đo A Tách bằng sắc ký hay điện di rồi phát hiện và đo bằng phổ hấp thụ (phổ UVVIS dùng làm detector cho máy sắc ký, điện di) Nguyên tắc: dựa vào định luật Lambert-Beer Định luật Lambert-Beer A = kλ L C A =log (Io/I) = log (1/T) Độ hấp thụ A tỷ lệ thuận với nồng độ C A=E=D E = độ tắt D = mật độ quang. .. UV-VIS 1 chùm tia 1 Nguồn sáng 2 chùm tia 3 Cách tử 4 Tia đơn sắc 5 Chắn sáng 6 cốc đo (cuvet) 7 Detector Máy quang phổ UV-VIS 1 chùm tia (detector DAD) Nguồn sáng Mảng diod Cuvet Cách tử Máy quang phổ UV-VIS 2 chùm tia 1 Nguồn sáng 2 chùm tia 3 Cách tử 4 Tia đơn sắc 5 Chắn sáng 6,7 cốc đo (cuvet) 8 Detector Điều cần chú ý !!! Máy cần được thường xuyên bảo dưỡng định kỳ hiệu chuẩn (KT A và bước sóng) . Th UV-VIS ấ ụ Các đại lượng đặc trưng cho bức xạ ánh sáng Sự hấp thụ ánh sáng và màu sắc Các yếu tố ảnh hưởng lên độ hấp thụ Các ứng dụng của phương pháp phổ hấp thụ UV-Vis Máy quang. ĐHKT Y HD - TT KN ATTP QUANG PHỔ HẤP THỤ UV-VIS PGS Phạm gia Huệ Hà Nội 24-11-2010 Ph H p Th UV-VIS ấ ụ Là phương pháp phân tích dùng phổ biến nhất trong các PTN Ví dụ ứng. hấp thụ A tỷ lệ thuận với nồng độ C A = E = D E = độ tắt D = mật độ quang = OD I 0 I C L nh lu t Lambert-BeerĐị ậ A = kλ L C Hệ số hấp thụ kλ phụ thuộc vào λ (đường cong phổ hấp thụ) thay