tìm hiểu thành phần hợp chất thứ cấp trong cây lược vàng callisia fragvan l

KHÓA LU N T T NGHI PẬ Ố Ệ GVHD: CN.Bùi V n Th Vinhă ế BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC KỸ THUẬT CÔNG NGHỆ TP.HCM KHOA MÔI TRƯỜNG VÀ CÔNG NGHỆ SINH HỌC  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TÌM HIỂU THÀNH PHẦN HỢP CHẤT THỨ CẤP TRONG CÂY LƯỢC VÀNG Callisia fragrans (Lindl). Wood. Ngành: Công nghệ Sinh học Mã ngành: C73 GVHD: CN. Bùi Văn Thế Vinh. SVTH : Nguyễn Tấn Thịnh. MSSV: 207111054. -TP.HỒ CHÍ MINH , THÁNG 07 NĂM 2010- SVTH: Nguy n T n Th nhễ ấ ị 1 KHÓA LU N T T NGHI PẬ Ố Ệ GVHD: CN.Bùi V n Th Vinhă ế L I C M NỜ Ả Ơ V i s h ng d n t n tình, s góp ý, giúp c a các th y cô, b n bè, tôi ã hoànớ ự ướ ẫ ậ ự đỡ ủ ầ ạ đ thành khóa lu n t t nghiêp. Tôi xin chân thành bày t lòng bi t n sâu s c n:ậ ố ỏ ế ơ ắ đế Tr ng i H c K Thu t Công Ngh Tp. H Chí Minh. Các Th y Cô Khoaườ Đạ ọ ỹ ậ ệ ồ ầ Môi Tr ng & Công Ngh Sinh H c ã t o i u ki n thu n l i nh t trong th iườ ệ ọ đ ạ đ ề ệ ậ ợ ấ ờ gian 03 n m tôi theo h c t i tr ng i H c K Thu t Công Ngh Tp.HCM.ă ọ ạ ườ Đạ ọ ỹ ậ ệ Tôi xin bày t lòng bi t n sâu s c n th y Bùi V n Th Vinh, ng i ã truy nỏ ế ơ ắ đế ầ ă ế ườ đ ề t nh ng ki n th c, kinh nghiêm quý báu c ng nh h ng d n, ng viên tôi trongđạ ữ ế ứ ũ ư ướ ẫ độ su t quá trình làm khóa lu n t t nghi p, ng i ã d n d t tôi n v i ni m am mêố ậ ố ệ ườ đ ẫ ắ đế ớ ề đ th c v t và luôn có nh h ng l n trong cu c i tôi sau này. ự ậ ả ưở ớ ộ đờ Các anh, ch chuyên ngành công ngh sinh h c th c v t khóa 05, 06DSH Tr ngị ệ ọ ự ậ ườ i i H c K Thu t Công Ngh Tp.HCM, ã t n tình h tr , giúp tôi trongĐạ Đạ ọ ỹ ậ ệ đ ậ ỗ ợ đỡ nh ng ngày u tôi theo h c ngành sinh h c th c v t. ữ đầ ọ ọ ự ậ Tôi xin g i l i c m n n t t c các b n bè cùng h c l p 07CSH, ã cho tôiử ờ ả ơ đế ấ ả ạ ọ ớ đ nh ng k ni m ng t ngào, v th i sinh viên.ữ ỷ ệ ọ ề ờ Và cu i cùng phép tôi c g i l i c m n chân thành n gia ình v i ba m làố đượ ử ờ ả ơ đế đ ớ ẹ ng i tôi th ng yêu nh t, ã cho tôi c h i c i h c và tr ng thành nh ngàyườ ươ ấ đ ơ ộ đượ đ ọ ưở ư hôm nay. TP. HCM, ngày 11 tháng 07 n m 2010ă Sinh Viên: Nguy n T n Th nh.ễ ấ ị SVTH: Nguy n T n Th nhễ ấ ị 2 KHÓA LU N T T NGHI PẬ Ố Ệ GVHD: CN.Bùi V n Th Vinhă ế M C L CỤ Ụ CH NG 1. T V N ƯƠ ĐẶ Ấ ĐỀ 9 1.1. t v n :Đặ ấ đề 9 1.2.M c ích và yêu c u:ụ đ ầ 11 2.1. Khái ni m chung v các ch t ho t tính sinh h c (HTSH)ệ ề ấ ạ ọ 13 2.2.Alkaloid: 13 2.2.1.Khái niệm: 13 2.2.2.Nguồn gốc: 14 2.2.3.Phân loại: 14 2.2.3.1.Phân loại theo bản chất hóa học: 14 2.2.3.2. Phân loại theo loài thực vật chứa alkaloid và theo tác động sinh lý 17 2.2.4.Tính chất vật lý: 21 2.2.5.Tính chất hóa học: 22 2.3.Coumarin: 22 2.3.1. Khái niệm và nguồn gốc: 22 2.3.2.Phân loại: 24 2.3.2.1 Coumarin đơn giản: 24 2.3.2.2 Furanocoumarin (furocourmarin): 25 2.3.2.3 Nhóm pyranocoumarin: 25 2.3.3.Lý tính: 26 2.3.4.Hóa tính: 26 2.3.5.Tác dụng và công dụng: 27 2.4.Flavonoid: 28 2.4.1.Khái niệm: 29 2.4.2.Nguồn gốc: 30 2.4.3.Phân loại: 31 2.4.3.1.Euflavonoid: 32 2.4.3.2.Isoflavonoid: 37 2.4.3.3.Neoflavonoid: 37 2.4.3.4.Biflavonoid và Triflavonoid: 37 2.4.4.Lý tính: 38 SVTH: Nguy n T n Th nhễ ấ ị 3 KHÓA LU N T T NGHI PẬ Ố Ệ GVHD: CN.Bùi V n Th Vinhă ế 2.4.5.Hóa tính: 38 2.5.Glycosid steroid (glycosid tim) 40 2.5.1.Khái niệm: 40 2.5.2.Nguồn gốc: 41 2.5.3.Phân loại: 41 2.5.3.1.Phần aglycon: 41 2.5.3.2.Phần đường: 42 2.5.4.Tính chất lý học: 42 2.5.5.Tính chất hóa sinh: 43 2.6.Saponin: 44 2.6.1.Khái niệm và nguồn gốc: 44 2.6.2.Phân loại: 44 2.6.2.1.Saponin triterpenoid: 44 2.6.2.2.Saponin steroid: Gồm có: 45 2.6.3.Tính chất lý hóa 46 CH NG 3: THÀNH PH N H P CH T TH C P TRONG CÂY L C ƯƠ Ầ Ợ Ấ Ứ Ấ ƯỢ VÀNG 48 3.1.Gi i thi u v cây L c Vàngớ ệ ề ượ 48 3.1.1.Thực vật học: 48 3.1.2.Mô tả cây: 48 3.1.3.Sinh học và sinh thái: 49 3.1.4.Phân bố: 49 3.1.5.Cách trồng: 49 3.1.6.Thu hái và chế biến: 50 3.2.Thành ph n hóa h c c a cây L c Vàngầ ọ ủ ượ 51 3.2.1.Hợp chất Flavonoid có trong cây Lược vàng: 51 3.2.1.1. Quercetin: 51 3.2.1.2. Kempferol: 53 3.2.1.3.Tác dụng sinh học của flavonoid 53 3.2.2.Hợp chất saponin steroid có trong cây Lược vàng: 59 3.2.2.1.Saponin steroid 59 3.2.2.2.Tác dụng và công dụng: 60 3.2.3. Hợp chất isoorientin chiết từ cây lược vàng: 61 3.2.4.Vitamin & khoáng dinh dưỡng: 62 3.2.5.Acid amin có trong cây Lược Vàng: 62 SVTH: Nguy n T n Th nhễ ấ ị 4 KHÓA LU N T T NGHI PẬ Ố Ệ GVHD: CN.Bùi V n Th Vinhă ế 3.2.6.Kết quả định tính & định lượng các loại nhóm chất trong cây Lược vàng 63 3.2.6.1.Kết quả định tính: 63 3.2.6.2.Kết quả định lượng: (www.dongyvietbac.com.vn) 64 a)Hàm l ng ch t hoà tanượ ấ 64 b) Hàm l ng ch t hoà tan trong eylacetatượ ấ 65 c) Hàm l ng ch t hoà tan trong clorofomượ ấ 66 3.3.Công d ng ch a b nh c a cây L c Vàngụ ữ ệ ủ ượ 67 CH NG 4. K T LU N & KI N NGHƯƠ Ế Ậ Ế Ị 70 4.1.K t lu nế ậ 70 4.2.Ki n nghế ị 72 TÀI LI U THAM KH OỆ Ả 73 SVTH: Nguy n T n Th nhễ ấ ị 5 KHÓA LU N T T NGHI PẬ Ố Ệ GVHD: CN.Bùi V n Th Vinhă ế DANH M C CHỤ VI T T TỮ Ế Ắ DNA : Deoxyribonucleic Acid. HIV : Suy gi m mi n d ch ng i (human immunodeficiency virus).ả ễ ị ở ườ HTSH : Ho t tính sinh h c.ạ ọ kDa : Kh i l ng nguyn t .ố ượ ử MIC : N ng đ c ch t i thi u (Minimal Inhibitory Concentration).ồ ộ ứ ế ố ể MW : Tr ng l ng phân t (molecular wieght).ọ ượ ử RNA : Ribonucleic acid. S.K.G : S c ký gi y.ắ ấ S.K.L.M : S c ký l p m ng.ắ ớ ỏ SVTH: Nguy n T n Th nhễ ấ ị 6 KHÓA LU N T T NGHI PẬ Ố Ệ GVHD: CN.Bùi V n Th Vinhă ế DANH M C CÁC B NGỤ Ả B ng 3.1.ả K t qu nh tính các lo i nhóm ch t h u c trong cây L c vàng.ế ả đị ạ ấ ữ ơ ượ 54 B ng 3.2ả . Hàm l ng ch t hoà tan trong c n 70% c a m u khô ( m 24%).ượ ấ ồ ủ ẫ độ ẩ 55 B ng 3.3ả . Hàm l ng ch t hoà tan trong nượ ấ c c a m u t i.ướ ủ ẫ ươ 56 B ng 3.4.ả Hàm l ng ch t hoà tan trong etylacetat chi t m u b ng dung môi làượ ấ ế ẫ ằ n c.ướ 56 B ng 3.5ả . Hàm l ng ch t hoà tan trong etylacetat chi t m u b ng dung môi là c nượ ấ ế ẫ ằ ồ 70%. 57 B ng 3.6ả . Hàm l ng ch t hoà tan trong clorofom chi t m u b ng dung môi c nượ ấ ế ẫ ằ ồ 70%. 57 SVTH: Nguy n T n Th nhễ ấ ị 7 KHÓA LU N T T NGHI PẬ Ố Ệ GVHD: CN.Bùi V n Th Vinhă ế DANH M C CÁC HÌNHỤ Hình 2.1. C u trúc m t s ch t tiêu bi u thu c nhóm ch t Morphin.ấ ộ ố ấ ể ộ ấ 8 Hình 2.2.C u trúc m t s ch t tiêu bi u thu c nhóm ch t Cocain.ấ ộ ố ấ ể ộ ấ 10 Hình 2.3. C u trúc m t s ch t tiêu bi u thu c nhóm ch t Quinine.ấ ộ ố ấ ể ộ ấ 11 Hình 2.4. C u trúc m t s ch t tiêu bi u thu c nhóm ch t cophein.ấ ộ ố ấ ể ộ ấ 11 Hình 2.5. C u trúc Coumarin n gi n.ấ đơ ả 15 Hình 2.6. C u trúc Furanocoumarin.ấ 16 Hình 2.7. C u trúc Pyranocoumarin.ấ 17 Hình 2.8.C u trúc m t s nhóm ch t tiêu bi u thu c nhóm Flavonoid.ấ ộ ố ấ ể ộ 21 Hình 2.9. C u trúc Flavonoid.ấ 21 Hình 2.10.C u trúc Catechin, Gallocatechin.ấ 25 Hình 2.11. C u trúcFlavan 3,4-diol và Leucofisetinidin.ấ 26 Hình 2.12. C u trúc Flavanon và Chalcon.ấ 27 Hình 2.13. C u trúc Dihydroflavanol và Silybin.ấ 28 Hình 3.1. Cây L c vàng.ượ 39 Hình 3.2. Chu n b t và tr ng L c vàng.ẩ ị đấ ồ ượ 41 Hình 3.3. C u trúc Quercetinấ 43 Hình 3.4. C u trúc Kempferolấ 44 SVTH: Nguy n T n Th nhễ ấ ị 8 KHÓA LU N T T NGHI PẬ Ố Ệ GVHD: CN.Bùi V n Th Vinhă ế CH NG 1.ƯƠ TĐẶ V N Ấ ĐỀ 1.1. t v n Đặ ấ đề: SVTH: Nguy n T n Th nhễ ấ ị 9 KHÓA LU N T T NGHI PẬ Ố Ệ GVHD: CN.Bùi V n Th Vinhă ế T ngàn x a, con ng i đã bi t tìm cây c trong t nhiên đ ch a b nh và t ngừ ư ườ ế ỏ ự ể ữ ệ ă c ng s c kh e. Qua tr i nghi m t cu c s ng, kho tàng cây d c li u c a conườ ứ ỏ ả ệ ừ ộ ố ượ ệ ủ ng i càng ngày càng phong phú, đa d ng và tr thành m t ph n không th thi u trongườ ạ ở ộ ầ ể ế cu c s ng c a con ng i. ộ ố ủ ườ N c ta n m trong vùng khí h u nhi t đ i, đ c s u đãi c a thiên nhiên nênướ ằ ậ ệ ớ ượ ự ư ủ thu n l i cho s phát tri n c a nhi u lo i th o m c. N u nh tr c đây, nh ngậ ợ ự ể ủ ề ạ ả ộ ế ư ướ ữ nghiên c u trên cây thu c ch y u theo h ng phân l p, tách chi t và th nghi m ho tứ ố ủ ế ướ ậ ế ử ệ ạ ch t, thì hi n nay xu th m i là tìm ph ng pháp đ nâng cao hi u qu s n xu t cácấ ệ ế ớ ươ ể ệ ả ả ấ ho t ch t nh m đáp ng nhu c u nghiên c u khoa h c và c i thi n, nâng cao ch tạ ấ ằ ứ ầ ứ ọ ả ệ ấ l ng cu c s ng và b o v môi tr ng. ây chính là v n đ đ t ra cho ngành Côngượ ộ ố ả ệ ườ Đ ấ ề ặ ngh Sinh h c th c v t. ệ ọ ự ậ Công ngh Sinh h c th c v t ra đ i đã và đang m ra nh ng tri n v ng m iệ ọ ự ậ ờ ở ữ ể ọ ớ đ i v i vi c b o t n và phát tri n ngu n cây thu c d i dào c a nhân lo i. Th c s làố ớ ệ ả ồ ể ồ ố ồ ủ ạ ự ự trong h n 20 n m qua, b ng ph ng pháp nuôi c y huy n phù t bào trong các hơ ă ằ ươ ấ ề ế ệ th ng bioreactor, hàng tr m lo i ho t ch t có giá tr đ c t ng h p v i giá thành th pố ă ạ ạ ấ ị ượ ổ ợ ớ ấ h n, kh c ph c nhi u nh c đi m c a ph ng pháp t ng h p hóa h c. B ngơ ắ ụ ề ượ ể ủ ươ ổ ợ ọ ằ ph ng pháp tái sinh cây tr c ti p ho c gián ti p qua mô s o, t bào và phôi mà nhi uươ ự ế ặ ế ẹ ế ề loài cây thu c quí đ c b o t n và khai thác hi u qu , ph c v đ c l c cho cu c s ngố ượ ả ồ ệ ả ụ ụ ắ ự ộ ố c a con ng i.ủ ườ Cây L c vàng (ượ Callisia fragrans) có ngu n g c t Mexico và hi n nay đangồ ố ừ ệ đ c tr ng nhi u Vi t Nam, đ c bi t là Thanh Hóa và Hà N i. ây là m t lo i câyượ ồ ề ở ệ ặ ệ ở ộ Đ ộ ạ thu c m i đ c bi t đ n trong th i gian g n đây và đã gây xôn xao d lu n v tínhố ớ ượ ế ế ờ ầ ư ậ ề n ng “th n d c” c ng nh nh ng tác d ng ph mà nó mang l i.ă ầ ượ ũ ư ữ ụ ụ ạ Chính vì lý do đó mà vi c tìm hi u và xác đ nh các h p ch t th c p có trong câyệ ể ị ợ ấ ứ ấ L c vàng là r t c n thi t. c s đ ng ý c a B môn Công ngh Sinh h c –ượ ấ ầ ế Đượ ự ồ ủ ộ ệ ọ Tr ng i H c K Thu t Công Ngh và d i s h ng d n c a th y Bùi V nườ Đạ ọ ỹ ậ ệ ướ ự ướ ẫ ủ ầ ă SVTH: Nguy n T n Th nhễ ấ ị 10 [...]...KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP GVHD: CN.Bùi Văn Thế Vinh Thế Vinh, tôi đã thực hiện khóa luận tốt nghiệp: Tìm hiểu thành ph ần h ợp ch ất thứ cấp trong cây L ợc vàng (Callisia fragrans L. ) 1.2.Mục đích và yêu cầu: - Tổng quan về một số hợp chất thứ cấp có nguồn gốc từ thực vật SVTH: Nguyễn Tấn Thịnh 11 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP GVHD: CN.Bùi Văn Thế Vinh - Tìm hiểu thành phần các hợp chất thứ cấp có trong cây L ợc Vàng. .. Alkaloid l hợp chất có chứa Nitơ nguồn gốc thực vật Hàm l ợng alkaloid có thể đạt đến 10% trong các loại rau quả thông dụng như khoai tây, chè, cà phê… - Hầu hết các alkaloid hiện diện trong cây có hoa, loại 2 l mầm, nhưng ng ười ta cũng thấy alkaloid trong động vật, côn trùng, sinh vật biển… 2.2.3.Phân loại: Alkaloid được phân loại theo một số cách khác nhau: Phân loại theo loài thực vật chứa alkaloid,... coumarin có tác dụng kháng khu ẩn, đặc biệt chất novobiocin l một chất kháng sinh có phổ kháng khuẩn r ộng có trong nấm Streptomyces niveus Một số có tác dụng chống viêm, ví dụ calophyllolid có trong cây mù u, Calophyllum inophyllum có tác dụng chống viêm bằng 1/3 oxyphenbutazon còn các chất calanolid l các dẫn chất coumarin trong cây mù u – calophyllum lanigerum thì gần đây được phát hiện thấy có... acid để chuyển thành chalcon màu vàng đ ậm Trong cây người ta thường gặp chalcon bên cạnh flavanon tương ứng ví dụ: liquiritin và isoliquiritin trong cam thảo Hình 2.12: Cấu trúc Flavanon và Chalcon e) 3-Hydroxyflavanon (dihydroflavanol hay flavanonol): Dihydroflavanol có 2 carbon bất đối ở C-2 và C-3 Có thể tồn tại 6 đồng phân: 2d, 2l và 2dl Ph ần l ớn các chất dihydroflavanol ở dạng aglycon, cũng có... cũng cần chú ý rằng các chất aflatoxin l những coumarin đ ộc có trong mốc Aspergillus flavus có thể gây ung thư 2.4.Flavonoid: SVTH: Nguyễn Tấn Thịnh 28 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP GVHD: CN.Bùi Văn Thế Vinh 2.4.1.Khái niệm: Flavonoid (hoặc bioflavonoid) l một nhóm hợp chất l n thường gặp trong trong thực vật Flavonoid l nhóm chất thứ cấp gồm khoảng hơn 5.000 chất có cấu tạo chủ yếu l C15 Chúng thường được... còn l i không có vị ngọt Khi đun nóng m ột d ẫn ch ất dihydroflavonol trong môi trường acid thì có sự chuyển đồng phân và tính quang hoạt có thể mất Silybin, silychristin, silidiamin l những chất có trong quả của cây Silybum marianum Gaertn Hỗn hợp các chất trên gọi l “Silymarin” l những chất có tác d ụng bảo vệ tế bào gan rất tốt Đây l những dẫn chất do sự kết hợp m ột phân t ử alcol conyferilic... duy trì sự sống Đó l protein, nucleic acid, carbonhydrat, lipid Chúng thường l các polyme sinh học có trong l ợng phân tử (MW) cao, l các polyme sinh học Nhóm chất thứ cấp thường có MW nhỏ Đa số chúng được tổng hợp de novo, nhưng cũng không ít chất sinh học l sản phẩm phân rã ho ặc ở d ạng dẫn xuất từ các chất sơ cấp hay từ những đơn vị tạo thành chất sơ cấp Đó l nhóm chất phenol, isoprenoid, các... vật chứa alkaloid, theo bản chất hóa học tự nhiên hoặc theo tác động sinh l của chúng 2.2.3.1.Phân loại theo bản chất hóa học: Do cách phân loại dựa vào cấu trúc nhân cơ bản không đáp ứng đ ược s ố l ượng alkaloid rất nhiều và đa dạng, nên để tiện l i, các alkaloid được chia thành ba lo ại: alkaloid thật, protoalkaloid và giả- alkaloid (Pseudoalkaloid): SVTH: Nguyễn Tấn Thịnh 14 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP... 12 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP GVHD: CN.Bùi Văn Thế Vinh CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN VỀ CÁC HỢP CHẤT THỨ CẤP CÓ NGUỒN GỐC THỰC VẬT 2.1 Khái niệm chung về các chất hoạt tính sinh học (HTSH) Về nguyên tắc chung tất cả sinh chất tùy điều kiện cụ thể điều l các chất có hoạt tính sinh học (cả theo có l i và không có l i) Sinh chất thường được phân loại thành nhóm chất sơ cấp và thứ cấp Nhóm chất sơ cấp l những chất cơ... có trong l cây Asperula odorata L, họ Cà phê; Trong một số cây thuộc chi Melilotus họ Đậu Chất này có mùi thơm dễ chịu, được dùng l m hương liệu Trong kỹ nghệ, benzo -pyron được tổng hợp từ aldehyd salicylic, anhydrid aetic và natri acetat Người ta có thể coi -pyron l một lacton (este nội) c ủa acid hydroxycinnamic vì khi có tác dụng acid vô cơ l n acid hydroxycinnamic, nh ư HCl thì sẽ đóng vòng lacton . VÀ CÔNG NGHỆ SINH HỌC  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TÌM HIỂU THÀNH PHẦN HỢP CHẤT THỨ CẤP TRONG CÂY L ỢC VÀNG Callisia fragrans (Lindl). Wood. Ngành: Công nghệ Sinh học Mã ngành: C73 GVHD: CN. Bùi. c c a cây L c Vàng ọ ủ ượ 51 3.2.1 .Hợp chất Flavonoid có trong cây L ợc vàng: 51 3.2.1.1. Quercetin: 51 3.2.1.2. Kempferol: 53 3.2.1.3.Tác dụng sinh học của flavonoid 53 3.2.2 .Hợp chất saponin. amin có trong cây L ợc Vàng: 62 SVTH: Nguy n T n Th nhễ ấ ị 4 KHÓA LU N T T NGHI PẬ Ố Ệ GVHD: CN.Bùi V n Th Vinhă ế 3.2.6.Kết quả định tính & định l ợng các loại nhóm chất trong cây L ợc vàng