bệnh học thực vật, chẩn đoán bệnh và một số kỹ thuật phân lập nấm bệnh và nấm đối kháng

KILOBOOKS.COM 1 Li cm n Trc ht em xin chõn thnh gi li cm n n Phũng bnh hc phõn t - Vin di truyn nụng nghip cựng cỏc cỏn b cụng nhõn viờn trong phũng ó to iu kin giỳp em trong sut thi gian thc tp va qua. Em cng xin gi li cm n n Vin Cụng ngh Sinh hc Thc phm - i hc Bỏch Khoa H Ni v cụ giỏo hng dn to iu kin cho em hon thnh t thc tp k thut. http://kilobooks.com THệ VIEN ẹIEN Tệ TRệẽC TUYEN KILOBOOKS.COM 2 Li m u Vin Di truyn nụng nghip c thnh lp ngy 10/10/1989, tin thõn ca Vin l Trung tõm Di truyn Nụng nghip (thnh lp nm 1984). Hin nay, Vin nm trờn a bn huyn T Liờm, H Ni. Chc nng chớnh ca Vin l : -Nghiờn cu, ng dỳng cỏc phng phỏp di truyn hc hin i v cụng ngh sinh hc chn to cỏc ging cõy trng cú nng sut cao, phm cht tt, chng chu sõu bnh v cỏc iu kin bt li ca mụt trng. -To cỏc chng vi sinh vt mi phc v bo qun v ch bin lng thc- thc phm, sn xut cỏc loi ch phm sinh hc phc v nn nụng nghip bn vng v bo v mụi trng. -Tng cng hp tỏc quc t v tham gia o to cỏn b v lnh v Di truyn v Cụng ngh sinh hc. thc hin c cỏc chc nng trờn, Vin ó t chc thnh 10 n v nghiờn cu v chuyn giao cụng ngh vi tng s cỏn b l 116 ngi trong ú cú 3 tin s , 6 phú giỏo s, 16 phú tin s v 8 thc s. Trong nhng nm qua, Vin ó t c rt nhiu thnh tu, ó thc hin v ch trỡ 18 ti nh nc, 42 ti cp ngnh, 8 d ỏn sn xut th, to c nhiu ging lỳa mi v cỏc ch phm sinh hc phc v nụng nghip, to ra cỏc quy trỡnh tin b k thut c cụng nhn. Ngoi ra, Vin cũn thc hin cỏc d ỏn hp tỏc quc t vi cỏc t chc UNDP, FAO Nh cỏc thnh t trờn m Vin ó nhn c nhiu gii thng cú giỏ tr c trong v ngoi nc: Gii thng quc t v úng gúp phỏt trin nụng nghiờph Chõu ỏ Thỏi Bỡnh Dng, huõn chng lao ng hng 3 http://kilobooks.com THệ VIEN ẹIEN Tệ TRệẽC TUYEN KILOBOOKS.COM 3 Gii thiu chung v bnh hc thc vt I. Quan nim v bnh hi thc vt Vic ch ra đc chính xác lúc nào cây b bnh ln là mt vn đ khó khn và đc các nhà khoa hc quan tâm nghiên cu. Ngi ta cho rng mt cây đc coi là kho mnh và phát trin bình thng khi nó biu hin các chc nng sinh lý  mc ti đa tim nng di truyn ca nó. Các t bào mơ phân sinh ca cây kho mnh thc hin chc nng phân chia và chun hố khi c th đòi hi là cn thit. Các kiu t bào chun hố khác nhau hp th nc và dinh dng t đt, đa nc và dinh dng đn tt c các b phn ca cây, tin hành q trình quang tng hp, các q trình chuyn hố và trao đi cht, hoc lu gi các sn phm ca q trình quang tng hp và to ht hoc các c quan tái to khc cho kh nng sinh tn và phát trin. Bt c khi nào các t bào ca mt cây hay mt b phn nào đó ca cây có kh nng thc hin mt hay nhiu chc nng đc bit b can thip do các vi sinh vt hoc là yu t mơt trng bt li thì các hot đng ca các t bào b gián đon, b thay đi hay b c ch hoc b cht và cây trng tr nên b bnh. u tiên bnh mi ch xy ra  mt vài t bào và vn cha biu hin ra nhng ch trong mt thi gian ngn, bnh lan rng và các b phn cây b bnh bt đu thay đi và biu hin ra ngồi các triu chng bnh mà mt thng có th thy đc. Da vào nhng thay đi mà cây th hin khi phn ng li s xâm nhim ca vi sinh vt hay nh hng ca các yu t mơi trng bt li mà chúng ta có th bit đc mc đ bnh ca cây. T đó bnh ca cây có th đc đnh ngha là : mt chui các phn ng ca các t bào và các mơ thc vt vi các vi sinh vt gây bnh hoc vi các yu t mơi trng mà ta có th nhìn thy đc hoc khơng nhìn thy đc, dn đn nhng thay đi bt li theo hình dng, chc nng, hoc tình trng ngun vn ca cây trng và có th dn đn s suy yu hoc có th gây cht tồn phn hoc tng phn ca cây. http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN KILOBOOKS.COM 4 Cỏc tỏc nhõn gõy bnh vi sinh vt thng gõy bnh bng cỏch can thip vo quỏ trỡnh trao i cht ca t bo cõy thụng qua cỏc enzyme, cỏc cht c t, cỏc cht iu ho sinh trng v cỏc loi cht khỏc m chỳng tit ra khi tip xỳc vi cõy ch, hoc hp th dinh dng ca t bo ch phc v cho mc ớch s dng ca chỳng. Mt s sinh vt khỏc li gõy bnh bng cỏch sng ký sinh v phỏt trin, sinh sn trong h thng bú mch mụ g hay bú mch libe v hu qu tt yu l lm tc nghn ng vn chuyn lờn xung ca nc v ca ng. Ngoi ra, cỏc yu t mụi trng cng gõy bnh trờn thc vt khi tỏc ng vi mc ngoi ngng chng chu ca cõy. Cú rt nhiu loi bnh hi cõy trng, chỳng c phõn nhúm theo rt nhiu tiờu chun: theo triu chng bnh, theo b phn cõy b bnh, theo loi cõy b bnh Hin nay, ph bin nht l ngi ta phõn loi bnh cõy da vo loi tỏc nhõn gõy bnh. Theo tiờu chun ny, bnh thc vt c chia lm 2 loi: bnh gõy ra do cỏc yu t sinh hc v bnh gõy ra bi cỏc yu t khụng sinh hc. Theo tiờu chun ny, ta cú th ch ra c nguyờn nhõn gõy bnh, quỏ trỡnh tin trin v cỏch lan truyn bnh t ú suy ra c bin phỏp phũng tr bnh http://kilobooks.com THệ VIEN ẹIEN Tệ TRệẽC TUYEN KILOBOOKS.COM 5 Phn i: Ni cy mơ t bào thc vt I. Khái nim chung: Ni cy mơ t bào là mt phm trù khái nim chung cho tt c các loi ni cy nhng ngun liu thc vt hồn tồn sch các vi sinh vt trên mơi trng dinh dng nhân to và trong điu kin vơ trùng. Bao gm: - Ni cy các c th thc vt hồn chnh. - Ni cy các c quan, b phn tách ri ca thc vt nh mu lá, mu r, mt đon thân, mt b phn ca hoa, qu - Ni cy phơi non (phơi cha phân hố hồn tồn), phơi trng thành. - Ni cy mơ so (callus) - Ni cy t bào: T bào thc vt đn (ni cy huyn phù t bào), t bào trn Cơng ngh ni cy mơ, t bào thc vt da trên tính tồn nng ca t bào do Haberlandtf phát biu (1898): Mi t bào ca c th đa bào có kh nng tim tàng đ phát trin thành mt c th hồn chnh trong điu kin phù hp. C s vt cht ca tính tồn nng là mi t bào trong c th đa bào đu cha đy đ vt cht thơng tin di truyn. Khi to đc mơi trng ni cy phù hp, s dng các cht điu khin sinh trng thc vt, ta có th hot hố gen cn thit đ bt mt t bào bt k ca c th thc vt phát trin đc thành cây hồn chnh. Phân hố và phn phân hố ca t bào cng là c s lý thuyt ca cơng ngh này. Trong đó, s phân hố là vic chuyn nhng t bào phơi sinh tr thành các t bào chun hố đ thc hin nhng chc nng khác nhau v sinh lý, sinh hố; còn s phn phân hố là s chuyn các t bào đã chun hố tr li trng thái phơi sinh, có kh nng phân chia đ cho ra các t bào mi. iu kin đ t bào th hin tính tồn nng qua con đng phân hố và phn phân hố là mơi trng ni cy. http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN KILOBOOKS.COM 6 II.Mơi trng ni cy mơ t bào thc vt: Mơi trng ni cy là yu t quan trng, nó quyt đnh cho s thành cơng ca vic ni cy mơ t bào thc vt tách ri. Thành phn chính bao gm: 1. Ngun t khống đa lng: Là các ngun t nh N, P, K, Mg, S, Ca ,chim nhiu trong mơi trng ni cy vi hàm lng ca mi ngun t thng ln hn 30mg/l. Chúng là ngun liu đ t bào, mơ thc vt xây dng nên thành phn cu trúc. 2. Các ngun t khống vi lng: Là các ngun t nh Fe, Mn, Mo, B, I, Cu, Zn, Co vi hàm lng mi ngun t nh hn 30mg/l. Chúng là thành phn ca coenzim đ xúc tác phn ng hố sinh din ra trong t bào sng. 3. Ngun cacbon: Trong ni cy mơ, t bào thc vt, các mơ và t bào chuyn sang phng thc sng d dng nên cn phi cung cp cho chúng mt ngun cacbon hu c, thng là đng mía saccaroza (trong mt s trng hp còn s dng glucoza, maltoza, lactoza ). Ngồi ra, manitol, sorbitol đc s dng rng rãi trong ni cy huyn phù và t bào trn vi chc nng n đnh áp sut thm thu. 4. Vitamin: T bào và mơ thc vt trong điu kin in vitro vn có kh nng tng hp vitamin nhng lng tng hp đc khơng đ nên phi b sung vitamin ngoi sinh vào mơi trng cy. Vitamin thng dùng là nhóm B d hồ tan vào trong nc nh B 1 , B 2 , B 3 , B 5 , B 6 vi hàm lng t mt đn mt vài mg/l. Chúng là thành phn coenzim ca hàng lot enzim xúc tác cho các phn ng hố sinh, vì vy khơng th thiu trong mơi trng ni cy. http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN KILOBOOKS.COM 7 *Myo-Inositol là mt hp cht th cp có vòng thm (cha đc xp vào vitamin), do s tham gia hình thành hp cht pectin to thành t bào, có tác đng kích thích mnh m s phân chia ca t bào, đc s dng vi lng ln ~ 100 mg/l. 5. Cht điu khin sinh trng: Là thành phn quan trng nht ca mơi trng ni cy, giúp điu khin đc q trình phân hố và phn phân hố t bào, th hin đc tính tồn nng ca t bào trong ni cy t bào và mơ thc vt tách ri. Ngi ta thng s dng ch yu hai nhóm cht điu khin sinh trng thc vt sau: - Auxin: kích thích q trình tng trng ca t bào, kích thích s hình thành mơ so và r bt đnh. Các loi thng dùng là IAA(axit indolaxetic), NAA(axit naphtyl axetic), IBA(axit indol butyric), 2,4 DAA(axit Diclofenoxy axetic) Hàm lng dùng nh 10 -5 -10 -7 mol/l. - Xytokinin: kích thích s phân chia t bào và to chi bt đnh. Các loi thng dùng là Kinetin, BAP(6-benzylaminopurin), Zeatin, TDZ(Thidiazuron) vi hàm lng 10 -5 -10 -7 mol/l. Ngi ta s dng phi hp auxin và cytokinin vi t l và hàm lng phù hp đ đt mc đích mong mun. Quy lut tng đi: t l auxin trên xytokinin ln thì các mu cy to r bt đnh, t l trung bình thì mu cy to mơ so, còn t l thp thì to chi. Ngồi ra hp cht Gibberillin có vai trò quan trng trong sinh lý ng ngh ca ht, chi, phát trin ca hoa, tng tng chiu dài thc vt, s dng nhiu trong ni cy mơ phân sinh; các hp cht c ch sinh trng: axit absisic (ABA), CCC… s dng trong bo qun ngun gen invitro. http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN KILOBOOKS.COM 8 5. õy l thnh phn thng dựng nhng khụng bt buc trong mụi trng nuụi cy. Bao gm nc da, dch nghin mt s rau, c, qu: khoai tõy, chui, tỏo, c rt dch chit nm men, hp cht cazein, pepton gia tng cỏc cht dinh dng, cỏc cht cú hot tớnh iu khin sinh trng v s phỏt trin ca mu cy. 6. Cht lm ụng cng mụi trng: L giỏ th cho mu cy. Thng dựng nht l Agar agar. õy l polysaccarit ca to bin, ho tan vi nc khi nhit ln hn 80 0 C thỡ dng lng cũn khi nhit nh hn 40 0 C li dng rn(gel). Agar cú kh nng ngm nc cao, ch cn 6-12 g cú th lm ụng c 1l nc v khi trng thỏi rn thỡ t bo v mụ thc vt vn d dng hp thu c cỏc cht dinh dng t mụi trng. III. Nguyờn tc, k thut chung trong nuụi cy mụ t bo: Ngy nay, hu ht cỏc nh nghiờn cu khoa hc u thng nht rng thnh cụng ca nuụi cy mụ t bo ch t c khi nú tri qua 5 bc sau: Bc 0: Bc chun b Chn lc cõy m t tiờu chun sau: - Cõy m cú c im di truyn, c im nụng, sinh hc quý ta cn. - Cú kh nng sinh trng v phỏt trin tt. - Sch bnh, c bit l sch virus. - Nu trong t nhiờn khụng cú nhng cõy t tiờu chun trờn, phi trng cỏc cõy m trong iu kin cỏch ly vi ngun bnh hoc ti u v iu kin chm súc, dinh dng, bo v thc vt cú cõy m t tiờu chun. Bc 1: Nuụi cy khi ng http://kilobooks.com THệ VIEN ẹIEN Tệ TRệẽC TUYEN KILOBOOKS.COM 9 Mc đích ca giai đon này là tái sinh mu ni cy. Mu ni cy thng s dng trong phòng thí nghim là chi đnh, chi nách ca cây m. Ngồi ra, tu thuc tng đi tng ni cy ngi ta còn có th s dng các mu ni cy nh mu lá, đài hoa, cánh hoa, mu r, phơi non. Cn xác đnh ch đ kh trùng cho mu cy trc khi tin hành đ đm bo mu sch vi sinh vt nhng t l sng cao. Hin nay s dng ch yu là phng pháp sát trùng b mt bng cht hố hc, thng là HgCl 2 0,1% sát trùng trong 5-10 phút. ít ph bin hn là các dung dch hypoclorit nh NaOCl, Ca(OCl) 2 5% trong 20-30 phút. Ngồi ra còn dùng H 2 O 2 15%,dung dch Brom 5-10% nhng hiu qu khơng cao. Sau khi kh trùng mu cy, ta tin hành đa mu cy vào mơi trng thích hp đ mu cy to thành chi mm hoc phơi vơ tính. Vic la chn mơi trng thích hp là rt khó khn, cn phi đc bit chú ý đn t l, hàm lng các cht điu khin sinh trng trong mơi trng đ làm cho mu cy phát sinh đc hình thái. Bc 2: Nhân nhanh mu Tồn b q trình ni cy mơ t bào xét cho cùng ch nhm mc đích chính là to ra h s nhân chi cao nht. Chính vì vy giai đon này đc coi là giai đon đánh giá tính u vit hay khơng u vit ca phng pháp ni cy mơ t bào.  giai đon này, mơi trng dinh dng nhân to đ ni cy thng đc đa thêm vào cht điu khin sinh trng, các cht b sung khác nh nc da, nc chit nâm men, dch thu phân casein kt hp vi các yu t nhit đ, ánh sáng nhm đt đc h s nhân chi cao nht mà vn đm bo sc sng, bn cht di truyn, có th to thành cây hồn chnh, đt tiêu chun cây ging  giai đon sau . Tuy nhiên, tu tng đi tng ni cy, ngi ta có th đt đc h s nhân cao bng vic kích thích s hình thành các cm chi hay kích thích s phát trin ca các chi nách hoc thơng qua vic to cây t phơi vơ tính. http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN KILOBOOKS.COM 10 Bc 3: To cây hồn chnh Khi đt đc mt kích thc nht đnh, các chi đc chuyn t mơi trng trong bc 2 vào mơi trng to r. Thng sau 2-3 tun, t nhng chi riêng l này s xut hin r.  giai đon này, ngi ta b sung vào mơi trng các auxin vì auxin là nhóm hormon thc vt quan trng có chc nng to r ph t mơ ni cy. Tuy nhiên,  mt s lồi nh chui hoc cây ngái s hình thành r tt hn c đt đc trong mơi trng khơng có cht điu hồ sinh trng. Bc 4: Thích ng cây in vitro trong điu kin t nhiên Giai đon đa cây hồn chnh t ng nghim ra đt là bc cui cùng ca quy trình ni cy mơ t bào. Cây ly ra ng nghim phi đc ra sch agar bám trên b mt r đ tránh s xâm nhp ca cơn trùng và nm mc.Theo Bhojwani và Razdan(1983), quy trình này s thành cơng hn nu trc khi đa cây con ra đt ta m cây trên cát có đ m 90% t 10 đn 15 ngày. Trong nhng khong thi gian này, r mi đcc sinh ra và bt đu hình thành lá mi. Sau đó chuyn cây ra đt vi ch đ chm sóc bình thng. Tuy nhiên vn còn mt s các vn đ tn ti trong vic ni cy mơ t bào.ó là: - S bt đnh di truyn + Khi s dng k thut ni cy mơ đ nhân ging vơ tính, có xy ra hin tng bin d soma: s sai khác v hình thái, đc đim sinh lí, sinh hố, di truyn ca nhng cây tái sinh nhn đc  ngay giai đon invitro hoc giai đon exvitro. + Khc phc: Chn mu cy là mơ non ít chun hố đ d điu khin và phát trin hình thái, gim lng cht điu khin sinh trng s dng, t đó gim đc nh hng ca chúng. ng thi, http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN [...]... lỗng kháng http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN o Tìm ra n à lỗng t án n KIL OBO OKS CO M s à lỗng th ành ly tâm - *Ngun lý c Dùng kháng th h hành -ELISA òng bao ph ên thích Cho kháng ngun vào Kháng th Cu ùng là s g tác v 21 àu http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN – KIL OBO OKS CO M Hình 1 Ngun lý c Kháng th฀ ฀฀t kháng th฀ ฀฀c hi฀u B฀ m฀t ฀฀t kháng ngun Kháng Enzyme ฀฀t kháng. .. cho k ch ch êm phân tích TSV Các y -ELISA: 1 -M -20 và -840C cho nh th -4, õr -840C cho giá tr 2 -M ành thí nghi nh à nêu skhơng b chính xác và nh -840C cho k ên dùng m 3 kháng th ên l - Khi so sánh giá tr ngh th 4 Giá tr àu vào trong m i gi ùng m khí trong các gi 25 à khơng có b http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN k ìv Ph à ch KIL OBO OKS CO M ngun, kháng th kháng àn I.T M v vào s gi ì nòi... Chúng là m ên ho nh KIL OBO OKS CO M các kháng th Ph m – kháng ngun là mycoplasma, tuy còn giúp chúng ta xác à m ã b b ên c peroxidaza, ch kháng ã ùng enzym (Alkaline phosphatasa), à Avidin – liên k ãs àn thi ào –sorbent assay) l th kháng th vài kháng à là m ên, ã virut th à hai trong nh ò à AWM ( Arabis háp ELISA, ta ph ch à bi cho phép nhìn th òc phóng x 35 ho ên kháng th 128 à enzym, ch ), kim lo àc... l฀c thu฀n ฀฀nh danh d฀฀i kính hi฀n vi và ch฀p ฀nh H1: K฀ thu฀t m฀i n฀m b฀nh Phytophthora và Pythium (theo GS Kasem soytong) 33 http://kilobooks.com KIL OBO OKS CO M THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN Ph฀n b฀nh và kho฀ Làm s฀ch ฀฀t vài mi฀ng lên mơi tr฀฀ng WA và ฀ ฀ nhi฀t ฀฀ phòng 3-5 ngày Tách s฀i n฀m sang mơi tr฀฀ng PDA t฀i khu฀n l฀c thu฀n ฀฀nh danh d฀฀i kính hi฀n vi và ch฀p ฀nh H2: K฀ thu฀t tách n฀m b฀nh... virus khơng còn kh àt - Cơn trùng sau vài gi mang virus t b ày ch ày g à bán v ài ngày liên t -persistent) - Cơn trùng ch truy truy à truy ên t ài tu à àn (persistent circulative) - Cơn trùng sau 15 phút lây virus có th ên t k ruy àc truy 3 K òn ngun kh à ên k ( ELISA – enzym linked immuno _sorbent assay) ên ph m mi ên và là nh ê ) b phân t ày kháng th 17 i là kháng th òng http://kilobooks.com THƯ... THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN M฀u ฀฀t ( Ph฀i khơ sau ฀ó nghi฀n nh฀ l฀y 100g ฀฀t vào ฀฀a) ฀฀t v฀t li฀u m฀i cellulose lên b฀ m฀t (Gi฀y whatman ho฀c c฀ng r฀m) ฀ ฀ nhi฀t ฀฀ phòng kho฀ng 30 ngày và gi฀ ฀m sau ฀ó quan sát d฀฀i kính lúp Phân l฀p t฀i khu฀n l฀c thu฀n ฀฀nh danh d฀฀i kính hi฀n vi và ch฀p ฀nh H4: K฀ thu฀t m฀i n฀m ฀฀i kháng (theo GS Kasem soytong) 36 ... có g฀n ENZYME g฀i là th฀ c฀ng h฀p (conjugate) Kháng th฀ Ch฀t n฀n cho ph฀n ฀ng nhu฀m màu Bi฀u hi฀n c฀a ph฀n ฀ng ành 1 ã vào gi à lỗng trong dung d l/gi 22 Th฀ c฀ng h฀p http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 0 o C o R – T ên c ã à lỗng trong dung d KIL OBO OKS CO M 2 Cho d T + PVP vào gi 0 o o R – l/gi C trong 2h ho êm 0 C – T 3 ã dung d – T + PVP vào gi 0 o o R C trong 2h ho êm 0 à lỗng trong... Quan sát bào t - Các ên th ùng ành: H4 * Ph Phân l **Thành ph Thành ph - - Khoai tây 200g/l - Agar 20 g/l - 31 ên c http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN : Thành ph - 20 g/l KIL OBO OKS CO M - Agar 32 http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN KIL OBO OKS CO M M฀u ฀฀t và nà฀c kh฀ trùng ฀฀t v฀t li฀u m฀i ch฀ c฀a m฀u lên b฀ m฀t cho n฀฀c vào và ฀ ฀ nhi฀t ฀฀ phòng, theo dõi trong 3-5 ngày... ào cây ày càng nhi nh v nói cách khác là tiêu di kháng v Hi ã tìm ra các c vào các ch + S phát tri v + Sinh ch + thích s ên vi sinh v àm bi à khơng gian s ành các ch ch 27 http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN + ào tác nhân gây b Nghiên c m ành thành t các vi sinh v à quan tr - Trong n b ào hay t òd ìn àn cây tr c 1.K òr KIL OBO OKS CO M phân gi ào àm ên c ên * Ngun t -S cây cùng lo có th... nghi - L làm - C mi - Gi à nó à gây b VSV c -L b ã kh 2 ên m òng và quan sát s trên mơ ch 28 ào http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN - C ình 1) ho ình 2) - ùng KIL OBO OKS CO M ên th ành: H1 * Ph -C phân l nh ã kh ùng s ên ên 2 K * Ngun t - Ni mơ th ùh ành khu * Cách ti êng chúng ành: - Các thành ph ên lá cây ho cành cây con và qu ên v àm s òi ùng b -C -2mm2 ch àm g 5 phút -C phòng ã kh ùng . đnh lng mt vài kháng th đc hiu. ây là phng pháp đc phát trin bi rt nhiu tác gi và là mt phng pháp nhanh nhy trong chun đốn và đnh lng mt s kháng ngun, kháng th. Nó. vt. Chúng là mt hn hp ca các kháng th khác nhau phn ng vi nhiu đim cui ca kháng ngun hoc nhng đnh ca phân t gây min dch. Phn ng kháng th – kháng ngun là mt cơng c rt. nm 1971 (Avrameanvà Cs; Van Weemen và Cs; Engvall và Cs ). Nhóm cui cùng đã s dng thut ng ELISA (Enzym linked immuno –sorbent assay) ln đu tiên vào nm 1971 đ áp dng vào phng pháp