GIÁO TRÌNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC TRONG SẢN XUẤT - PGS.TS. TRƯƠNG VĂN LUNG - 5 pps

34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng 90 Trương Văn Lung Trước đây, để phát bệnh thai nhi người ta phải lấy máu thử trực tiếp từ thai nhi Điều nhiều gây tổn hại cho thai nhi Gần đây, người ta bắt đầu phát vấn đề sử dụng phương pháp di truyền kĩ thuật DNA tái tổ hợp để chẩn đoán chữa trị bệnh người bắt đầu quan tâm từ đầu thập kỉ 80 kỉ trước Lần kĩ thuật áp dụng để chẩn đốn xem thai nhi có bị bệnh thiếu máu hồng cầu lưỡi liềm hay không Hiện bệnh phương pháp cắt phân đoạn đa hình RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) DNA tế bào dịch xung quanh thai nhi Sau so sánh chúng với phân đoạn DNA bổ trợ tách từ tế bào hồng cầu bình thường để phát có mặt gene bị hỏng Phương pháp an toàn khơng gây nguy hiểm cho thai nhi (Hình III.7) Nội dung phương pháp RFLP sau: tách DNA từ tế bào hồng cầu bố mẹ có bị thiếu máu hồng cầu lưỡi liềm, từ người khỏe mạnh từ dịch bào quanh thai nhi người mẹ nói Dùng enzyme endonuclease cắt DNA nói thành phân đoạn khác tách chúng điện di Mặt khác, từ tế bào hồng cầu lưới tách m-RNA, cho tổng hợp ngược để tạo DNA bổ trợ cDNA (complementary DNA) gắn 32p Trộn đoạn DNA với cDNA nhằm tạo đoạn lai (đoạn hòa hợp với thứ tự nucleotid cDNA) đoạn chứa gene mã hóa tổng hợp globulin Ở người khỏe mạnh gene βglubolin nằm phần đoạn có độ dài 7.6 kb Ở đứa bé bị thiếu máu hồng cầu lưỡi liềm, gene nói nằm phân đoạn có độ dài 13,0 kb, bố mẹ thai nhi phát thấy gene có mặt đoạn 7,6 kb 13,0 kb Điều chứng tỏ ba dạng dị hợp tử mang gene bệnh thiếu máu hồng cầu lưỡi liềm 4.2 Vai trò tác nhân di truyền bệnh lí học Các tác nhân di truyền số trường hợp nguyên nhân gây số bệnh (trong có bệnh hiểm nghèo) Cơ chế phân tử thể bệnh di truyền chưa biết nhiều Đơn cử thí dụ điển hình bệnh tiểu đường di truyền Nó thể số dạng khác Nhóm thứ bao gồm bệnh nhân trẻ, họ tế bào β chịu trách nhiệm tổng hợp insulin bị chết hoàn toàn Do vậy, thể bệnh nhân không tự tổng hợp insulin Nhóm thứ hai bao gồm bệnh nhân lớn tuổi, họ insulin tổng hợp bình thường Tuy nhiên, chế hấp thụ insulin lại không hoạt động, nên thể luôn thiếu insulin Nhờ phân tích RFLP người ta phát thấy có khác số lượng thứ tự xếp gốc nucleotid đoạn gần với đầu 5‘ gene mã hóa tổng hợp insulin Bằng phương pháp trên, người ta phát thấy liên quan tác nhân di truyền với 34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng 91 Trương Văn Lung thể rối loạn teo Duchenne bệnh tâm thần trí tuệ phát triển Huntington Triển vọng việc chữa trị bệnh có liên quan đến di truyền lớn Trong vài năm trở lại xuất số cách tiếp cận để giải vấn đề Đó việc gắn bổ sung gene bình thường vào máy di truyền người bệnh lai cấy tế bào khỏe mạnh vào thể người bệnh để chữa trị số bệnh hiểm nghèo bệnh di truyền Tuy phải khắc phục nhiều trở ngại, biện pháp chữa trị có triển vọng tương lai Kháng thể đơn dòng (monoclonal antibody) Hybridoma kháng thể đơn dòng Các kháng thể đơn dòng từ tế bào ung thư: người ta tiêm vào chuột hay thỏ chất lạ, thể phản ứng tạo loại phản ứng đặc hiệu để chống lại kháng ngun Một kháng thể có tính đặc hiệu cao chống lại kháng nguyên Trong thể có loại tế bào đặc biệt sản xuất kháng thể Nếu ta tách mơ để ni chọn dịng cho kháng ngun mà ta cần người ta dòng tạo kháng thể đặc hiệu với loại kháng nguyên Nhưng tế bào mà ta tách tế bào bình thường nên sinh sản có hạn (chỉ phân chia số chết) Trong đó, dịng tế bào ung thư Như đề cập đến, năm 1975, Kohler Milsstein phát minh kháng thể đơn dịng Ngun lí là: + Gây tế bào bình thường có khả tạo kháng thể + Lai tế bào với tế bào myeloma (tế bào tủy) ung thư Quá trình có hiệu dùng virus Sendaii phương pháp dung hợp tế bào + Chọn loài mà ta cần, dịng lai vừa mang tính chất tạo kháng thể, vừa có tính chất sinh sản vơ hạn (gọi dịng hybrodoma) Chúng ứng dụng nhiều lĩnh vực: - Tăng độ nhạy phép thử dùng phản ứng miễn nhiễm kháng nguyên khơng dung nạp (histocompability) thử kháng ngun nhóm máu, tinh trùng, thử có progesterol khơng, thử yếu tố làm đơng máu - Chẩn đốn xem bệnh có truyền theo đường sinh dục hay khơng việc chẩn đốn ung thư - Về liệu pháp, chỉnh đốn lại thuốc liều, giảm nguy hiểm trường hợp ghép tủy sống, chữa trị ung thư chỗ , vị trí cần thiết - Dùng làm tinh sản phẩm, sản phẩm protein Bằng kĩ thuật di truyền ta nuôi cấy vi sinh vật để sản xuất insulin 34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng 92 Trương Văn Lung - Trong nghiên cứu giúp người ta phát vị trí protein - Việc sử dụng kháng thể đơn dịng nhanh chóng thay phương pháp miễn dịch huyết học thông thường xét nghiệm sau: Thứ xác định mức độ hormone để đánh giá chức tuyến nội tiết thay đổi tổng hợp hormone khối u Thứ hai phát số protein có ý nghĩa chuẩn đốn khối u số điều kiện đặc biệt trước sinh đẻ Thứ ba xác định vi khuẩn gây bệnh Phát thuốc bị cấm máu kiểm tra nồng độ thuốc máu tổ chức nhằm đảm bảo liều dùng thuốc không vượt ngưỡng gây độc Các ứng dụng khác bao gồm: Ức chế phản ứng thải loại ghép quan Miễn dịch hóa thụ động chống lại kháng nguyên tham gia vào sinh sản (chống thụ thai phương pháp miễn dịch) Định vị khối u với kháng thể đặc hiệu Tác động độc tố định hướng tới tế bào ung thư, độc tố hóa học gắn với kháng thể Các chất sau dùng kháng thể đơn dòng để phát hiện: vitamin, thuốc giảm đau, thuốc ngủ, kháng sinh, thuốc chống viêm, thuốc chống tân sản (chống ung thư), thuốc tim mạch, thuốc gây ảo giác, thuốc hạ đường huyết, hormone động vật thực vật, thuốc làm dịu an thần , thuốc lợi tiểu, steroid (androgene, estrogene, progestin), thuốc trừ sâu, độc tố (aflatoxin) Nhờ tính đặc hiệu xác cao, sử dụng dễ dàng, kháng thể đơn dòng tạo nên nhánh phát triển mau lẹ CNSH Theo tạp chí “High Technology magazine" thị trường kháng thể đơn dòng từ 15 triệu USD năm 1982 đến năm 1992 vượt tỉ USD Loại sản phẩm kháng thể đơn dòng dùng chủ yếu thuốc thử nghiên cứu, thuốc thử cho chẩn đoán in vitro kháng thể dùng để phân lập chất sinh học Kháng thể đơn dòng nhà khoa học Nhật Bản sử dụng chẩn đoán ung thư đường tiêu hóa, cơng ti CNSH Centocor Inc Hoa Kì dùng chẩn đoán ung thư tụy, trường Đại học Y khoa Nhật Bản, trung tâm Ung thư Quốc gia cơng ti Kureha Chemical Industries dùng chẩn đốn ung thư tiền liệt tuyến Kháng thể đơn dòng dùng để chẩn đoán thử nghiệm điều trị carcinoma gan nguyên phát 34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng 93 Trương Văn Lung Đại học California trung tâm Y học Albert Einstein (Philadelphia) dùng iode phóng xạ gắn vào kháng thể đơn dịng để sau công phá đặc hiệu tế bào ung thư gan Kháng thể đơn dòng chống kháng nguyên đặc hiệu lymphocyte T có ứng dụng quan trọng dự phòng phản ứng thải ghép truyền tủy Ngày với CNSH sản xuất cytokin (giống hormone tham gia điều hòa chặt chẽ trả lời miễn dịch dịch thể miễn dịch trung gian tế bào), người ta sản xuất kháng thể đơn dòng dùng chẩn đoán điều trị miễn dịch Các kháng thể đơn dòng chuột dùng điều trị có số nhược điểm Một số nghiên cứu so sánh tần suất lai tạo tế bào lymphocyte người với dòng tế bào khác theo dõi tính bền chúng Myeloma (tế bào ung thư dẫn từ lymphocyte tiết kháng thể) chuột NS-I) hợp với tần suất cao bền tế bào lai người với người Vấn đề tìm kiếm tế bào thành viên thích hợp để hợp với lymphocyte người hướng Hiện gặp số khó khăn việc tìm kiếm tế bào thành viên thích hợp Người ta lựa chọn mơi trường thích hợp lai tạo hypoxanthine, aminopterine thymidine (HAT) tế bào lai myeloma lymphocyte có khả sử dụng hypoxanthine cung cấp mơi trường HAT Trong phương pháp phân tích miễn dịch phóng xạ RIA (Radio Immuno Assay), RAST (Radio Allergo Sorbent Test) RIST (Radio Immuno Sorbent Test), người ta xác định hàm lượng kháng nguyên độ đo phóng xạ phức kháng ngun kháng thể Cịn phương pháp ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Test), người ta xác định hàm lượng kháng nguyên cách đo độ phóng xạ phức kháng nguyên kháng thể tạo enzyme đặc hiệu gắn Sau phương pháp RIA – phương pháp có độ nhạy cao (hình IV.8) Nội dung sau: Gắn kháng nguyên lên ba thể nhạy cảm với Rửa, loại bỏ phân tử kháng nguyên không gắn Bổ sung kháng thể đơn dòng gắn đặc hiệu với kháng nguyên Rửa, loại bỏ phân tử kháng thể không gắn Gắn cầu nối đánh dấu đồng vị phóng xạ lên kháng thể Rửa, loại bỏ cầu nối khơng gắn Đếm đồng vị phóng xạ để biết số lượng kháng nguyên 94 34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng Các kháng nguyên Rửa Gắn kháng thể Rửa Gắn cầu nối Rửa Đếm phóng xạ Trương Văn Lung Kháng nguyên Kháng thể * Cầu nối đánh dấu * * Hình III Phương pháp A phân tích miễn dịch phóng xạ RIA Các phương pháp khác khác phần gắn vào kháng thể Thí dụ phương pháp RIA, RAST RIST - phần gắn có chứa đồng vị phóng xạ Cịn phương pháp ELISA - phần đuôi gắn chứa enzyme xúc tác phản ứng tạo màu Nghĩa là, thông qua phản ứng tạo màu để biết có (hay khơng có) kháng nguyên mẩu thử Hiện phương pháp phân tích sử dụng kháng thể đơn dịng nhanh chóng thay phương pháp phân tích miễn dịch huyết truyền thống phân tích Các vaccine vaccine đa trị 6.1 Các vaccine Vaccine chế phẩm kháng nguyên gây trạng thái miễn dịch mà khơng gây bệnh Vaccine dùng để kích thích đáp ứng miễn dịch nguyên phát, làm tăng tế bào nhớ khả đáp ứng miễn dịch nhớ tiếp xúc với kháng nguyên lần sau Từ đến 16 tháng 7- 1885, lần tìm cách tiêm chủng chống bệnh dại (một bệnh có khả tử vong 100%) cho em bé tuổi bị chó dại cắn, Louis Pasteur với cộng bác sĩ điều trị Grancher phải cấy truyền 13 lần virus dại tủy sống thỏ với độc tính tăng dần Ngày 27- -1885, em bé cứu sống khỏe mạnh Ngày 14-10-1888, viện Pasteur thành lập, Grancher trình bày phương pháp Pasteur số liệu thống kê chứng tỏ hiệu nó: 5374 người điều trị thời gian tư 16 - 7-1885 đến 01- 071888, tỷ lệ tử vong 1% Như vậy, Pasteur mở đầu cho kỉ nguyên đấu tranh chống bệnh nhiễm trùng đề phòng chúng tiêm chủng 34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng 95 Trương Văn Lung Vaccine sống hay vaccine giảm độc lực (Attenuated vaccines): chủng vi khuẩn giảm hoạt lực sinh sản mà khơng gây bệnh, kích thích sinh tổng hợp kháng thể bảo vệ Vaccine sống không ổn định quay trở lại dạng độc gây bệnh mà lẽ phải bảo vệ thể chống lại Ví dụ vaccine kháng bại liệt Vaccine dường khơng cịn phù hợp cho nước phát triển Hơn virus giảm hoạt lực sau trải qua nhiều chu kỳ nhân lên thể trẻ em tiêm chủng phục hồi lại hoạt lực gây triệu chứng bại liệt Số liệu thống kê Hoa Kì chứng tỏ số 10 trẻ em tiêm chủng vaccine gây bại liệt (viêm tủy xám) cho trường hợp Virus vaccine gây đến trường hợp viêm não triệu người tiêm chủng đậu mùa Vaccine bất hoạt: virus hay tế bào vi khuẩn nguyên vẹn đem bất hoạt, protein phân lập từ virus, thường gọi vaccine “tiểu đơn vị" (vaccine cúm chế từ haemagglutinin, vaccine chống viêm gan B chế từ kháng nguyên bề mặt viêm gan B HbsAg), độc tố vi khuẩn bất hoạt (giải độc tố bạch cầu uốn ván); kháng nguyên bề mặt tinh chế (vaccine viêm màng não) Sử dụng vaccine bất hoạt khơng có khả phục hồi lại dạng độc tính lành kiểm tra tốt Tuy nhiên vaccine bất hoạt lại đắt tính miễn dịch so với vaccine sống Vaccine sản xuất kĩ thuật gene: Có thể dùng tế bào vi khuẩn hay nấm men thay đổi kĩ thuật gene để sản xuất protein miễn dịch với số lượng lớn dùng để chế vaccine hiệu Ưu điểm vaccine là: + Kháng nguyên dùng để kích thích miễn dịch phân lập từ phần lành tính, khơng gây bệnh vi sinh vật gây bệnh, tổng hợp tế bào vi sinh vật hay động vật lắp ráp gene, đảm bảo ưu điểm lớn tính an tồn q trình sản xuất + Sản xuất vaccine vi khuẩn lắp ráp gene làm giảm mạnh giá thành thay công đoạn đắt tiền bao gồm môi trường nuôi cấy mô động vật phôi môi trường nuôi cấy vi sinh vật thông thường, tương đối đơn giản + Giá thành cịn giảm thêm nhờ khơng phải trang bị tốn cho đảm bảo độ an tồn cao (ví dụ vaccine thơng dụng chống bệnh lở mồm long móng thường có giá cao q trình sản xuất địi hỏi nhà xưởng có độ an tồn cao) + Tránh việc phải thử nghiệm tính an tồn qui mơ lớn, vaccine khơng chứa tác nhân gây bệnh 34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng 96 Trương Văn Lung + Giá thành bảo quản vận chuyển hạ thấp nhờ giảm yêu cầu làm lạnh đông khô Bằng kĩ thuật gene người ta sản xuất protein vỏ virus lở mồm long móng, dại, viêm gan B, herpes cúm Vaccine kĩ thuật gene cho người vaccine viêm gan B, chế từ kháng nguyên bề mặt (HBsAg), tổng hợp tế bào nấm men hay động vật nuôi cấy lắp ráp gene Chế phẩm tinh chế, loại bỏ protein đoạn DNA tế bào chủ Một ví dụ khác vaccine sởi kiểu chế Trung tâm Nghiên cứu Vi sinh học ứng dụng (Porton Down nước Anh), với hợp tác Đại học Nữ hoàng (Belfast), ưu việt hẳn loại vaccine sởi thông dung chế từ virus giảm độc lực Vaccine sởi kiểu chứa hai thành phần kháng nguyên: ngưng kết tố hồng cầu protein liên kết, hai tổng hợp kĩ thuật DNA tái tổ hợp 6.2 Vaccine đa trị Người ta chế vaccine đa trị cách ghép nối gene thành gene mã hóa cho protein lai ghép, mang đặc tính miễn dịch kháng nguyên khác Valenzuela cộng mình, năm 1985 ghép đoạn DNA mã hóa cho đoạn glycoprotein D (gồm 300 gốc aminoacid) virus herpes vào đoạn tiền-S, mã hóa cho protein vỏ virus viêm gan B Gene tái tổ hợp đươc ghép vào tế bào nấm men Khi hoạt động, tổng hợp hạt virus kiểu mới, mang đặc tính kháng ngun lai khơng tác dụng với kháng thể kháng HbsAg (viêm gan B) lẫn glycoprotein D (herpes) Hoạt tính kháng nguyên kháng hai loại virus đươc giữ lại, nhiên loạt virus không gây sinh tổng hợp kháng thể kháng hai virus Năm 1987, nhà nghiên cứu viện Pasteur Paris (phân viện Ứng dụng Công nghệ Di truyền phân viện Nghiên cứu Vi khuẩn đường ruột) công bố tổng hợp độc tố bạch hầu lai mang hai tiền đề kháng nguyên bề mặt virus viêm gan B (HbsAg) Khi tiêm chủng vào động vật thí nghiệm độc tố gây tổng hợp kháng thể kháng độc tố lẫn HbsAg Như vậy, ưu điểm lớn vaccine đa trị lúc sử dụng nhiều kháng nguyên thể vacine đơn trị lại ứng dụng mạnh mẽ tác dụng đặc trị Với phát triển mạnh mẽ sóng cơng nghệ sinh học giới, vừa qua, nhà khoa học Cuba vừa công bố sản xuất thành công vaccine nhân tạo phòng chống viêm phổi viêm màng não Khác với dạng vaccine sản xuất theo phương pháp truyền thống, loại vaccine 34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng 97 Trương Văn Lung sinh kháng thể tạo cách tổng hợp chất hóa học Loại vaccine chưa cơng bố giá thức chắn giá rẻ loại vaccine cũ vốn có giá đến đơla liều Chính phủ Cuba dự kiến tiêm vaccine cho tất trẻ em 15 tuổi nước Cùng với Cuba, Trung Quốc cơng bố điều chế vaccine phịng chống hội chứng viêm đường hô hấp cấp (SARS) Việc thử nghiệm vaccine Khỉ thu kết khả quan hồn tồn khơng gây phản ứng phụ Dự kiến đến cuối tháng 04 -2004 có 1.500 liều vaccine chống SARS xuất xưởng sau có thêm 20.000 liều sản xuất Hãng Vax Geneem gần tới đích việc nỗ lực điều chế vaccine phòng chống AIDS Những nghiên cứu ban đầu cho thấy kết đầy hứa hẹn Song song với nghiên cứu Vax Geneem, nhà nghiên cứu Anh thử khoảng 20 loại vaccine người động vật Giáo sư Andrew Mc Michael thuộc phịng thí nghiệm Oxford báo cáo số hội nghị khoa học Lucy Dorrel: vaccine điều chế từ DNA; đoạn đưa vào thể có khả mã hóa protein virus HIV, loại protein gây nên phản ứng tự vệ mạnh thể, theo hai cách: dạng DNA “trần” với virus gây bệnh đậu mùa bị suy yếu Nhưng tiêm hai lúc tốt Ở Anh châu Phi, nhà khoa học thử mũi tiêm người chờ đợi kết Trong tháng 09/2004, họ tiêm tổ hợp vaccine cho người bị nhiễm HIV với hy vọng tổ hợp kích hoạt hệ đề kháng với liệu pháp phối hợp ba loại thuốc sử dụng giúp người chiến thắng bệnh AIDS Làn sóng cơng nghệ sinh học thật mạnh mẽ khu vực châu Á-Thái Bình Dương mà Việt Nam công bố sản xuất thành công hàng trăm ngàn liều vaccine thương hàn vipolyssaccharide đạt tiêu chuẩn tổ chức y tế giới hiệu lực an toàn, với giá 1/7 so với giá nhập từ Pháp, đáp ứng nhu cầu phòng dịch xuất Việt Nam tự hào mà vừa qua dịch sốt gia cầm lan tràn khắp châu Á Trong viện Pasteur Nha Trang, viện Sinh học Nhiệt đới thành phố Hồ Chí Minh cơng bố sản xuất vaccine chống bệnh sốt gia cầm giải mã hoàn toàn gene virus sốt gia cầm (H5N1) (theo tin tức VTV) Gần (tháng 12/2005), Tiến sĩ Cao Bảo Vân, viện Pasteur thành phố Hồ Chí Minh giải mã virus H5N1 loại gia cầm khác Giáo Sư Nguyễn Thu Vân viện Pasteur Hà Nội công bố sản xuất vaccine A H5N1 tế bào 34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng 98 Trương Văn Lung thận khỉ tiên phát, chống bệnh dịch gia cầm lây qua người, chờ xác nhận Quốc tế để sản xuất hàng loạt vào đầu năm 2006 Hình III Virus H5N1 Một thành tựu vừa công bố sản xuất kháng nguyên kháng nọc độc rắn Tuy bước đầu sản xuất liều lượng hạn chế, giá thành cao.Tuy nhiên tương lai sản xuất với lượng lớn nhằm đáp ứng đầy đủ nhu cầu người loại vaccine Một hướng chế tạo vaccine phát triển thể kháng thể (antidio type antibodies).Khi kháng thể sinh để chống lại kháng nguyên loại kháng thể thứ hai kháng lại kháng thể thứ xuất Kháng sinh Năm 1929, Alexandre Fleming tìm tác dụng kháng sinh nghiên cứu đối tượng Penicillium notatum Nhưng thời đại kháng sinh thực năm 1941, 12 năm sau phát minh Fleming penicilline tung thị trường, loại thuốc kháng sinh tiêu thụ mạnh mẽ Từ trăm triệu đơn vị sản xuất đến năm 1949 số lượng đơn vị đưa thị trường hàng tháng lên 800 tỷ đơn vị Đến năm 1944 Schatz, Bugio, Waksman tìm streptomycine Đến năm 1972, 4000 đến 5000 loại thuốc kháng sinh phát 34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng 99 Trương Văn Lung có chứa 50 loại kháng sinh vận dụng lâm sàng điều trị dạng đơn độc hay kết hợp, tạo nên lượng kháng sinh đa dạng chống lúc nhiều loại bệnh Nhờ công nghệ sinh học lượng kháng sinh với số lượng lớn tạo nhờ nuôi cấy gene cấy gene tạo kháng sinh Trước có nấm vi khuẩn nên sản xuất kháng sinh với số lượng lớn thời gian ngắn Thuốc kháng sinh có nhiều, số thuốc có tác dụng “thần kì” năm đầu tìm nhiên thời gian sau giảm hẳn tác dụng hay hết tác dụng Một số thuốc kháng sinh tìm danh sách ngày dài Tuy nhiên việc sử dụng kháng sinh đòi hỏi phải có hiểu biết Sử dụng liều lượng có khoa học đem lại hiệu cao Ngược lại khơng đem lại lợi ích mà nguy hiểm Hiện liệu pháp kháng sinh phương pháp điều trị có hiệu thời gian qua thấy nhiều biến chứng virus, xuất nhiều “đối tượng mới” Nhiều vấn đề cần đặt cần giải đáp Ví dụ penicilline dùng lần đầu khơng thấy có dị ứng thử nghiệm cho thấy có gây tai biến Trong q trình phát triển y học bệnh thần kinh bệnh tâm thần ngày ý phát từ lâu Tỉ lệ người mắc bệnh cao, để lại di chứng vô nghiêm trọng, người bệnh mà cịn với tồn xã hội Bên cạnh phương pháp điều tri đại phẫu thuật, huấn luyên di chứng thích nghi, tâm lí liệu pháp xã hội liệu pháp phương pháp điều trị thuốc đóng vai trị quan trọng Mấy năm gần đây, việc nghiên cứu sản xuất loại thuốc thần kinh tinh thần có nhiều cống hiến lớn lao Nhiều loại thuốc áp dụng vào cơng tác điều trị có kết tốt, đưa số người bệnh với sống bình thường Cùng với phát triển mạnh mẽ công nghệ gene, công nghiệp sản xuất vaccine ngày nhân rộng phổ biến nhân tố quan trọng chiến lược y tế sức khỏe cộng đồng tương lai Công nghệ gene Ngày người ta sâu vào tìm hiểu vấn đề sinh hóa gene Nhờ hiểu biết sâu sắc sinh học phân tử gene người ta biết người có khoảng 35.000 gene có tới 2% trường hợp bị 34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng 100 Trương Văn Lung bệnh khuyết tật gene Ngày nhờ giải mã gene người, lập đồ gene người ta giải trường hợp bị bệnh khuyết tật gene cách thay gene bị khuyết tật gene khỏe mạnh Khoa học áp dụng công nghệ gene công nghệ sinh học để bắt động vật, vi khuẩn, nấm men, virus sản xuất thuốc chữa bệnh quí với liều lượng lớn để điều trị bệnh tật hiểm nghèo mà trước người ta tạo với lượng ỏi Bằng công nghệ gene ngưới ta tạo chuỗi tế bào tiết dopamine để chữa bệnh Parkinson Cũng cách người ta xây dựng phương pháp chữa trị bệnh Alzheimer (bệnh lú lẫn người già) Người ta cấy tế bào thần kinh lợn bao tử vào não Maribeth Cook, người phụ nữ 34 tuổi nạn nhân tai biến mạch máu não từ năm trước làm liệt nửa người sau phẫu thuật Cook lại gần bình thường, nói lưu lốt, phong độ tâm lí bình thường Jimmfimn 20 năm khổ bệnh liệt rung, khơng thể lại, nói hoạt động hai tay Sáu tháng sau ca phẫu thuật cấy tế bào thần kinh Lợn vào não bộ, Jimmfimn bắt đầu lại Maribeth Cook Jimmfimn tham gia đợt đầu chương trình nghiên cứu lâm sàng kĩ thuật điều trị chấn thương não tế bào thần kinh Lợn Kỳ lạ hơn, chàng trai 20 tuổi Robert Pennington bị bại gan trầm trọng, sinh mạng Robert cứu sống trường hợp ghép buồng gan lợn để trì sống suốt ngày chàng trai cứu sống nhờ buồng gan lấy từ gene lợn Việc cấy ghép tế bào lách sản xuất insulin cứu sống bệnh nhân bị bệnh tiểu đuờng thể khả tổng hợp insulin • Lợn nhân cung cấp nội tạng cho người- tượng tầm tay Một lợn nhỏ màu trắng, tai to tên Gordy đời phịng thí nghiệm trường Đại học Tổng hợp bang Mitsuri (Mĩ), kiện khoa học lớn gây chấn động khơng kiện cừu Dolly Đây loại lợn tai to tạo từ công nghệ nhân mở triển vọng lớn để cung cấp nội tạng cho người bệnh có yêu cầu thay số phận thể Từ trước đến việc ghép nội tạng lợn cho người chưa thành cơng phận ghép thường bị thể nhận đào thải nội tạng cho không phù hợp với gene thể nhận Lợn Gordy nhân thiếu gene khắc phục khó khăn gene khơng hoạt động bị loại bỏ Có hai gene chúng có nhiệm vụ sản sinh loại 34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng 101 Trương Văn Lung đường thể nhờ enzyme α-1,3-galactoziltransfease, viết tắt ggta1 Chất thủ phạm gây phản ứng đào thải loại bỏ gene đồng thời loại bỏ ggta1 kháng thể khơng cịn có tác dụng không xảy phản ứng đào thải phận lạ nội tạng lợn Gordy khơng bị đào thải Mới đây, phụ nữ Canada bị bệnh cholesterol máu cao gấp 10 lần mức nguy hiểm thông thường thường xuyên có đau tim lặng người tắc nghẽn mạch vành Nguyên nhân thiếu gene recepter LDL (low density lipoprotein) nên không làm nhiệm vụ chuyển vận choleterol gan gây mỡ huyết làm tắc nghẽn mạch vành Nhờ công nghệ gene đưa gene vào tế bào gan, sức khỏe người phụ nữ ngày cải thiện Mĩ nơi hoạt động nghiên cứu gene diễn hối Các nhà nghiên cứu trường Đại học Michijan thử nghiệm thuốc tiêm gene chống ung thư vú ung thư tử cung phụ nữ Tại viện Nghiên cứu Ung thư Quốc gia Mĩ người ta thử loại thuốc tiêm gene chống ung thư não • Gene ung thư cơng nghệ sinh học Có số dạng ung thư phát gene ung thư Phần lớn gene ung thư alen đột biến gene bình thường tế bào, gene mã hóa tổng hợp nên hormone Một số trường hợp riêng lẻ gene ung thư đủ để gây ung thư Người ta thực thành công việc truyền loại gene ung thư cho chuột làm cho chuột bị ung thư (1989) Một số trường hợp khác, gene ung thư thực tế gây nên ung thư gắn với số đột biến khác gắn với số nhân tố mơi trường Vì yếu tố gắn với gene ung thư nêu nghiên cứu, xác định qua ni cấy tế bào, người ta sử dụng động vật truyền gene để phát nhân tố dẫn tới phát triển ung thư bệnh lí khác người Nhiều nghiên cứu động vật người, xác nhận thân ung thư u ác tính không di truyền Người ta phát tố chất di truyền (về kiểu gene) việc tạo ung thư Năm 1982, người ta tách tế bào ung thư người, đoạn DNA làm biến đổi nguyên bào sợi chuột phát triển ni cấy, từ bình thường đến tế bào ung thư Các gene gọi gene ung thư 34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng 102 Trương Văn Lung Trước đây, giai đoạn dài, người ta cho nguyên nhân ung thư đột biến gene, đột biến NST (đứt gãy, tăng số lượng vô tổ chức ) Ngày nay, người ta có đủ kinh nghiệm chứng minh ung thư khơng phải có ngun nhân từ đột biến gene, đột biến NST mà hậu ung thư Khi tế bào bình thường biến thành tế bào ung thư, ung thư ác tính tế bào xảy nhiều biến đổi sâu sắc hóa, lí Tế bào khơng cịn chịu điều khiển có tổ chức thể Trong tế bào ung thư xảy đột biến gene, đứt gãy, tăng giảm số lượng NST không theo qui luật cả, đặc biệt làm cho tế bào có khả tăng sinh sản, phân bào liên tục điều kiện nuôi cấy thể người bị ung thư, mà ta thường gọi di ung thư Trong thực nghiệm nuôi cấy ống nghiệm người ta xác nhận virus biến đổi tế bào lành thành tế bào ác tính người Vi khuẩn than nỗi kinh hoàng cho tồn nhân loại nhà khoa học Mĩ xem “bảo bối”, nhân viên nghiên cứu phát protein bệnh than sau biến đổi gene có khả tiêu diệt tế bào ung thư không làm tổn thương đến tế bào khác Trong thể người ta phát đặc điểm quan trọng cho thấy nhân loại có nhiều khả tìm loại vũ khí cơng hữu hiệu chống ung thư Được tiến hành thí nghiệm 100 chuột cho chúng nhiễm chứng ung thư khác nhau: ung thư thịt tổ chức mềm, ung thư da ung thư phổi Sau lấy protein bệnh than (thành phần vi khuẩn bệnh than) biến đổi gene chia làm hai lần tiêm Kết đạt gây sửng sốt cho nhiều người, tế bào ung thư gần bị tiêu diệt hết suốt q trình thí nghiệm tế bào lành thể chuột khơng bị tổn thương • Dùng súng bắn gene chữa ung thư Một nhóm nhà nghiên cứu Mĩ vừa tuyên bố phát minh loại "súng di truyền gene" bắn viên đạn chứa DNA vào tế bào để chống khối u ung thư Bác sĩ Aruna, Tổ trưởng tổ nghiên cứu Đại học Winsconsin (Mĩ) nói:"dùng súng bắn gene có ưu việt phương pháp đưa gene vào thể để chữa bệnh chỗ khơng độc hại, dễ dàng xun qua vách tế bào" Tuy nhiên ông thừa nhận dùng súng bắn gene thích hợp cho việc chữa trị khối u gần bề mặt da Nhưng cắt bề mặt da dùng gene để chữa trị khối u nằm sâu bên Năm 2002, giáo sư Daniel thuộc Đại học Stanford (Mĩ) tiến hành thử nghiệm dùng virus để chữa trị cho 35 bệnh nhân ung thư gan 34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng 103 Trương Văn Lung giai đoạn cuối Sau tiến hành cấy virus vào gan người bệnh xuất biểu bệnh cúm đau họng, sổ mũi sốt cao Theo nhà khoa học biểu phản ứng phụ liệu pháp virus: "Các phản ứng nhẹ nhiều so với triệu chứng: buồn nôn, suy sụp thể chất bị rụng tóc " Các bệnh nhân theo dự đốn bác sĩ sống tối đa tháng Song sau cấy virus vào gan họ sống năm Qua siêu âm, khối u gan 35 bệnh nhân nhỏ dần không phát triển thêm Các nhà khoa học Đại học Southwestern medical center bang Texas (Mĩ ) tiến hành thí nghiệm dùng loại Adenovirus điều trị ung thư buồng trứng Nhóm nhà khoa học May Oclinic tiến hành thí nghiệm thành cơng trình việc dùng vaccine chống bệnh sởi, có chứa virus sởi để điều trị ca ung thư máu Hiện nhà khoa học Oclinic chuẩn bị bước thử nghiệm người Các loài virus sử dung liệu pháp gene coi dẫn xuất DNA Đây sở để nhà khoa học dùng virus biến đổi gene Trong điều trị bệnh ung thư phổi nhà khoa học phát DNA người mắc bệnh ung thư phổi có thiếu hụt phần gene Họ lấy phần gene thiếu hụt cấy vào virus biến đổi gene Qua đường thở virus người bệnh hít vào phổi, sau vào phổi virus sản xuất protein để chống lại ung thư Gần đây, giáo sư David Sandersen với cộng Đại học Purdue thành công việc biến đổi gene virus Ebola, loại virus khơng cịn nguy hiểm người mà cịn trở thành loại tân dược để điều trị bệnh phổi có hiệu Trường hợp insulin tổng hợp tự nhiên thể không đủ, glucose phải thải theo đường nước tiểu gây nên bệnh đái tháo đường Người bị bệnh đái tháo đường cứu sống bổ sung vào thể họ lượng insulin định Trước insulin đắt khó đáp ứng nhu cầu người bị bệnh Ngày với công nghệ sinh học đại người ta sản xuất đựơc nhiều insulin rẻ nên đáp ứng nhu cầu cho người bị bệnh đái tháo đường Công nghệ sinh học đại sản xuất insulin nhà máy tí hon vi khuẩn E coli Trong dây chuyền sản xuất này, khâu tách gene phụ trách tổng hợp insulin thể sống từ người từ Chuột Gene insulin tổng hợp nhân tạo ống nghiệm Sau tách plasmid từ loại vi 34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng 104 Trương Văn Lung khuẩn, tức vào tế bào vi khuẩn nhận (E coli) Khâu tạo dòng DNA mang gene insulin cách cho gắn gene vào plasmid tạo thành DNA plasmid tái tổ hợp mang gene insulin Ở có sử dụng vai trị enzyme cắt giới hạn Người ta chọn enzyme cắt thích hợp DNA mang gene insulin plasmid Enzyme cắt sợi đơn DNA nói thành đoạn, cắt mở vòng plasmid Dưới tác động loại enzyme nối, đoạn DNA có mang gene insulin chọn ghép vào plasmid, sau plasmid đóng vịng thành plasmid "lai" có mang gene insulin DNA plasmid tái tổ hợp chuyển vào nhà máy sản xuất insulin ( E.coli) Bằng phương pháp khác dùng CaCl2 tác động làm màng tế bào vi khuẩn E coli thấm qua loại plasmid nói Trong nhà máy DNA plasmid tái tổ hợp nhân gene, insulin nhân truyền liên tiếp cho hệ tế bào vi khuẩn qua chế phân bào cực nhanh tế bào vi khuẩn E coli, mã giải mã tổng hợp hàng loạt insulin Tất máy di truyền tế bào vi khuẩn nhận điều khiển • Cơng nghệ sinh học với gene khuyết tật Bệnh câm điếc có nguyên nhân vùng não có liên quan đến tiếng nói bị tổn thương Để chữa bệnh trước người ta phải lấy tế bào thai người (từ trường hợp phá thai) để cấy vào thể bệnh nhân Tuy có biện pháp làm thích nghi tế bào cấy thể bệnh nhân nhiều trường hợp gặp khó khăn phản ứng thải loại Một phương hướng giải CNSH đại nhà khoa học Nga viện Sinh học gene theo đuổi có nhiều kết tách gene có tác động làm tăng trưởng mơ thần kinh não Một phát minh gần công bố dùng tế bào thần kinh ruồi cấy vào não bệnh nhân câm điếc bẩm sinh, bệnh nhân teo não, nhũn não, bại liệt não thiếu loại tế bào định Quá trình thí nghiệm tiến hành ếch sau chuột thu kết tốt, chứng minh rõ tế bào thần kinh ruồi có tác dụng sinh chất kích thích sinh học Bệnh nhân câm điếc bẩm sinh cấy tế bào thần kinh ruồi phục hồi khả nói, giao tiếp bình thường Tìm loại gene khuyết tật gây nên bệnh rối loạn ngôn ngữ trẻ em: Các chuyên gia trung tâm Nghiên cứu gene người thuộc Đại học Oxford (Anh) vừa qua công bố nghiên cứu Tạp chí Nature 34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng 105 Trương Văn Lung số tháng 10- 2001 Theo người ta phát thấy NST số tổng số 23 NST thể người nhân tố định khả học ngôn ngữ người Trong loại gene có khuyết tật di truyền gọi FOX P2 gây cản phát triển não bào thai làm cho trẻ sinh mắc tật nói lắp Qua nghiên cứu giúp cho khoa học phát cấu phát triển khả phát ngôn ngữ trẻ thơ trình tiến hóa ngơn ngữ quan trọng hiểu chế gây bệnh từ tìm phương pháp khắc phục chứng nói lắp Năm 1998 nhà khoa học bắt tay vào nghiên cứu khuyết tật NST số phát có người khơng có tiền sử gia đình mắc bệnh rối loạn phát ngơn ngữ thân lại có gene FOX P2 Trong gene FOX P2 có chứa hóa chất dạng bậc thang gọi guanine, chất thay adenine thay đổi cực nhỏ gây hiểm hoạ lớn cho người FOX P thành viên tổ hợp gene tạo protein cho trình chụp gene biến chứng thành thể truyền tin RNA Đây q trình phức tạp, tạo protein cần thiết trì cho thể người tồn phát triển Các hợp chất guanine adenine thay làm giảm số lượng vật chất tạo nên thể truyền tin RNA cuối ảnh hưởng trực tiếp đến trình phát triển não bào thai làm cho trẻ em bị mắc chứng ngọng, nói lắp ảnh trực tiếp đến việc giao tiếp hay gọi bệnh rối loạn ngôn ngữ đặc trưng ( PLD) Nghiên cứu chuyên gia WCHC mở triển vọng việc tìm nguyên nhân gây bệnh có liên quan đến di truyền từ tìm biện pháp ngăn ngừa từ bố mẹ sang Gần công bố thành tựu nhà khoa học Pháp thuộc trung tâm Nghiên cứu Khoa học Quốc gia (CNRS) viện Nghiên cứu Di truyền Phân tử Paris phát nguyên nhân bệnh béo phì xuất gene đột biến béta 3, gene cảm nhận adrenaline kĩ thuật công nghệ sinh học đại, người ta tìm cách tác động, khơi phục hoạt động gene khiếm khuyết di truyền để giải "tận gốc" chứng béo phì sở phục hồi lại trạng thái cân thể Thật dịch vụ gene công nghệ gene hấp dẫn sơi động diễn biến từ bình cổ cong ống nghiệm để đến két sắt nhà băng Với đà công nghệ gene, người ta lạc quan tạo nhân tài kiểu Moza, Einstein.….và tạo người đẹp:" ngọc trắng ngà" Biện pháp thụ thai in-vitro 34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng 106 Trương Văn Lung Cách 26 năm, (năm 1978), giới kinh ngạc đón chào Louise Brown, người đời phương pháp thụ tinh ống nghiệm Hiện giới có khoảng 500.000 người sống đời ống nghiệm Đúng 20 năm sau, đứa trẻ đời giới phương pháp thụ tinh ống nghiệm, ngày 30 tháng 04 năm 1998, ba em bé thụ tinh ống nghiệm Việt Nam cất tiếng khóc chào đời Tính đến nay, bệnh viện Phụ sản Từ Dũ thành phố Hồ Chí Minh có 2000 bé từ chương trình (em bé thứ 2000 đời ngày 11-12-2005) Đó hành trình kì diệu, gian nan xúc động mà có chuyện ngẫm lại thấy bồi hồi… Để làm việc thụ tinh ống nghiệm, điều mẻ Việt Nam mặt: kĩ thuật khoa học, dư luận xã hội, luật pháp,… Bác sĩ – anh hùng lao động Nguyễn Thị Ngọc Phượng – Giám đốc bệnh viện Phụ sản Từ Dũ phải “chiến đấu” với chịu đựng kiên trì ghê gớm cho cú đột phá mang tính bước ngoặt lịch sử Y học Việt Nam Việc có đứa gia đình nỗi khao khát làm mẹ nhiều phụ nữ muộn, nỗi bất hạnh, chí dẫn đến tan vỡ gia đình cặp vợ chồng vơ sinh Theo tài liệu thống kê Trung tâm Brown Hall (Anh) – nơi đứa bé thụ tinh ống nghiệm đời, cơng bố năm 1999 tỉ lệ thành công phương pháp thụ tinh ống nghiệm thông thường (IVF) 30%, bệnh viện Từ Dũ đạt tới 38-40% Với kĩ thuật thụ tinh ống nghiệm phức tạp thụ tinh ống nghiệm kĩ thuật ICSI (bơm tinh trùng vào trứng) Bỉ, nơi áp dụng kĩ thuật này, tỉ lệ thành công 35,9% bệnh viện Từ Dũ thực 171 ca, mẹ trịn vng 31 ca, tỉ lệ thành công 41,5% Thụ tinh ống nghiệm xin trứng người khác Brown Hall đạt 33% bệnh viện Từ Dũ thật đáng kinh ngạc, tỉ lệ thành công đến 51% với 111 ca thực 56 ca thành cơng Thụ tinh ống nghiệm hướng phía trước nhiều vấn đề cần giải trước nhu cầu mượn tử cung, cho nhận tinh trùng …hiện “đóng băng” chờ định pháp luật Ở chưa nói đến việc thụ tinh ống nghiệm lúc “suôn sẻ” mong muốn Trong phóng khoa học tờ Tạp chí Thế giới năm 2000 có viết “Thụ tinh ống nghiệm; hạnh phúc nỗi lo” có viết: thụ tinh ống nghiệm dẫn đến đa thai sinh non Khi trẻ chào đời không đủ tháng đủ ngày thường mang số bệnh suy hơ hấp, xuất huyết màng não, chí phát triển tâm thần đặc biệt bệnh võng mạc mắt gọi tắt ROP 34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng 107 Trương Văn Lung (retinopathy of prematurity) bị RLF (retrolental fibrosis) dẫn đến mù hoàn toàn Thụ tinh ống nghiệm Tuy nhiên, nhân người, có lẽ vấn đề gây tranh cãi cho giữ sắc riêng cá nhân sinh đời Ngày 31 tháng năm 2001, Quốc hội Mĩ thông qua đạo luật cấm hình thức nhân phơi thai người Một số nhà khoa học lên tiếng phản đối đạo luật Xét khía cạnh y học việc nhân tế bào gốc phơi thai mở triển vọng chưa thấy để điều trị số bệnh gọi vô phương cứu chữa Nhưng dùng công nghệ nhân để tạo nên người hồn chỉnh lại điều hoàn toàn khác Dù nữa, phải thừa nhận rằng, khó ngăn bước nhà “nhân học” Còn tương lai cơng trình có khơng hai Gregor Pence, nhà triết học người Mĩ nhận xét: “Nếu đứa trẻ đời nhân khỏe mạnh dịu quen dần với Nhưng lại ốm yếu, quặt quẹo việc nhân bị cấm vòng 100 năm” Theo tin tức từ Seoul, Hàn Quốc (12/2/2004), nhà khoa học Hàn Quốc nghiên cứu từ 245 trứng nhân thành 30 phôi Phôi phát triển từ tế bào gốc có khả phân chia thành tế bào quan Các nhà khoa học Hàn Quốc khơng có ý định nhân vơ tính để hồn chỉnh người mà trình phân chia phôi thành quan, nhà khoa học dùng việc chữa trị số bệnh hiểm nghèo Gần nhà khoa học Australia Mỹ nghiên cứu tế bào gốc để thay quan mà người bị thương tổn quan TÀI LIỆU THAM KHẢO Đái Duy Ban, Lữ Thị Cẩm Vân, 1994 Công nghệ gene công nghệ sinh học ứng dụng y dược học đại Nxb Y học Hà Nội Phan Cự Nhân- Trần Đình Miên,1997.Tìm hiểu cơng nghệ sinh học đại.Nxb Giáo dục Hà Nội Trương Văn Lung, 1995 Chuyên đề công nghệ sinh học.Tủ sách Đại học Khoa học Huế Nguyễn Văn Uyển, Nguyễn Tiến Thắng, 1996 Những kiến thức công nghệ sinh học, Nxb Giáo dục Hà Nội Bezborodov A.M., Moxolov V.V., Rabinovitch M.I., Nguyễn Văn Uyển, Ngô Kế Sương nnk, 1994 Công nghệ sinh học số ứng dụng Việt Nam, Tập I, II Nxb Nông nghiệp Hà Nội 34 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng 108 Trương Văn Lung Tạp chí Thế giới số 565, trang 3, trang 67.Tạp chí Thế giới số 566, trang 3, Tạp chí Thế giới số 571, trang 57 Tạp chí Thế giới số 565, trang 3, trang 67 Tạp chí Thế giới số 595, tr: 50, 56, 60 Tạp chí Thế giới 613, trang 3-7 Nxb Giáo dục Hà Nội Tạp chí Tri thức trẻ số 78, trang 87,88 Tạp chí Tri thức trẻ số 80, Tạp chí Tri thức trẻ số 93, trang 101 Tạp chí Tri thức trẻ số 98, trang 71 Bệnh viện Bạch Mai, 1968 Thuốc điều trị bệnh thần kinh Nxb Y học Hà Nội 10 Báo cáo khoa học Hội nghị Công nghệ Sinh học toàn quốc lần thứ tháng 12/1999 11 Báo cáo khoa học Hội nghị Công nghệ Sinh học toàn quốc 2003, Hà Nội 16-/12/2003 12 Báo cáo khoa học Hội nghị “Những vấn đề nghiên cứu khoa học sống định hướng y dược học”, Học viện Quân y ngày 28 tháng 10 năm 2004 13 Albert Sasson,1988 Biotechnologies and development Công nghệ sinh học phát triển Người dịch: Nguyễn Hữu Thước, Nguyển Lân Dũng số dịch giả khác Nxb Khoa học & Kỹ thuật Hà Nội 109 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng Truong Văn Lung Chương IV Sự kết hợp công nghệ sinh học cổ truyền công nghệ việc nâng cao sức khỏe người Đây vấn đề mẻ nhiều nước sử dụng để nâng cao khả chữa trị bệnh cho người Đây hướng phát triển cho ngành y học giới có triển vọng lớn Kết hợp chẩn đốn Đơng y-Tây y để định hướng bệnh Một phương pháp đại hóa y học cổ truyền dùng phương pháp, kĩ thuật Tây y để chẩn đốn, từ thầy thuốc định nên chữa theo Tây y hay Đông y Nhiều bệnh cần phải theo Tây y có khả cứu chữa cứu sống bệnh cứu khẩn cấp, hôn mê, bệnh cần phẫu thuật, bệnh nhiễm trùng nặng Nhiều bệnh mang tính xác định rõ ngun nhân có tổn thương rõ ràng, chữa theo Tây y có kết rõ rệt lao phổi, loét dày, tá tràng, viêm phổi, ung thư phát sớm, … Các phương pháp đại nội soi dày, đại tràng siêu âm, siêu âm qua nội soi, CT scaner, chụp động mạch vành, thông tim, cắt đốt, … chẩn đốn sớm Đơng y khơng có khả xác định Ngược lại, Đông y, theo Tổ chức Y tế Thế giới, có khả chữa tốt bệnh mãn tính tiêu hóa, thần kinh, đau nhức, bệnh chức năng, (khơng có tổn thương rõ ràng) Thuốc bổ Đơng y, thuốc kích thích ăn uống có tác dụng tốt Châm cứu, bấm huyệt có tác dụng tốt cho bệnh đau dây thần kinh tọa, liệt dây thần kinh số 7, gây tê Một số bệnh chữa theo Đông y rẻ tiền, hiệu cao viêm dày, xung huyết, bệnh đại tràng chức Ngày nhiều thầy thuốc Đông y tiến hành khám bệnh theo phương pháp lâm sàng, xét nghiệm, siêu âm song song với chẩn đốn Đơng y theo thể bệnh Vì vậy, lương y thu kết tốt điều trị Kết hợp Đông y–Tây y để chữa bệnh Nhờ phương pháp phân tích hoạt chất xác, thí nghiệm súc vật mà người ta phát tác dụng khác hẳn trước Thí dụ: tả trạch, hà thủ ô chữa chứng mỡ máu cao, kim tiền thảo chữa thận, dầu hạt tiêu chữa hen, bạch hoa xà thiệt thảo chữa ung thư Khi phát thuốc có tác dụng tốt, khơng độc kết hợp thuốc Đơng-Tây y ngày làm thành viên thuốc có tác dụng tăng lên Ví dụ: thuốc tiêu khát hồn gồm có thuốc Đông y 110 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng Truong Văn Lung loại thuốc Tây y Daonil Thuốc tiêm phong hồn gồm thuốc Đơng y chất thuốc Tây y chữa giảm đau, chống viêm khớp Sai lầm lớn kết hợp Đông-Tây y quan niệm sai phủ tạng, quan Sai lầm thứ rõ tác dụng thuốc nên áp dụng sai Một số người quan niệm thuốc Bắc, thuốc Nam không độc, gây mát, nên dùng dài ngày hay liều cao Số người ngộ độc thuốc Đông y thường xảy Mức độ nặng gây mê, tụt huyết áp, suy gan, suy thận, …Mức độ nhẹ hơn, gây viêm gan ngộ độc, nơn mửa, suy thận mãn tính diễn biến chậm Nguyên nhân gây ngộ độc thường truyền miệng, tự dùng khơng biết rõ tác dụng chẩn đốn sai, hiểu sai chẩn đốn Đơng-Tây y Có người bị hôn mê uống vỏ vú sữa hi vọng chữa tiểu đường Nhiều người bị ngộ độc mật cá trắm uống (thực dùng ngồi bơi da) Khi kết hợp Đông-Tây y đợt, ngày, thông thường theo nguyên tắc không độc, không làm tác dụng thuốc kia, không gây biến chứng nặng tác dụng phụ Phải biết chắc, hiểu rõ tác dụng loại thuốc để kết hợp Ví dụ: vitamin kết hợp với nhân sâm, có tác dụng bổ dưỡng Người ta phát interferon dùng với tiểu sài hồ thang gây bệnh gan nặng Ngũ vị tử dùng chung với sorbetol gây tiêu chảy Thuốc tiên khát hồn có thêm thuốc Tây hạ đường huyết lại dùng thêm thuốc hạ đường huyết khác diabinese gây tụt đường huyết Không kết hợp hai loại thuốc độc với Ví dụ: lệ khô kết hợp với thuốc độc Tây y, hai thuốc làm tăng tác dụng dùng liều cao dùng liều, gây bệnh nặng Hoặc laxix dùng chung với râu ngô, mã đề, rễ cỏ tranh gây tiểu nhiều, nước, rối loạn điện giải Không dùng nhiều thuốc rõ tác dụng, thang thuốc Đông y thơng thường có từ đến 10 vị, chưa biết rõ hết vị lại dùng thêm thuốc Tây y gây ngộ độc cấp ngộ độc từ từ mà không nhận Các bệnh ngộ độc thường gặp suy gan, suy thận, chảy máu nặng dùng thuốc tiêm vào búi trĩ Phải biết rõ chẩn đốn Tây y Đơng y để kết hợp thuốc Nếu bệnh loét đại tràng mà lại dùng Đại Hoàn gây tiêu chảy nặng Tóm lại, kết hợp hai loại thuốc Đông y Tây y nên kết hợp việc làm tăng tác dụng chữa bệnh không gây tác dụng phụ Cần phải giảm liều, phải theo dõi dùng chung, không dùng nhiều thuốc chưa rõ tác dụng Không dùng loại dễ gây độc với Cần dựa vào 111 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng Truong Văn Lung hai chẩn đốn Đơng Tây y để lựa chọn thuốc Khi phối hợp thuốc nên cách thời gian để theo dõi Phương pháp đại hóa y học cổ truyền tiến hành dùng khoa học đại phân tích, chẩn đốn, phân biệt bệnh để từ chọn phương pháp điều trị thích hợp Chọn thuốc đặc trị từ dược thảo, tìm tác dụng mới, tìm hoạt chất áp dụng rộng rãi Sự kết hợp hai chẩn đốn Đơng-Tây y người bệnh tránh sai lầm Một điều nhiều bệnh viện hay sử dụng để tránh hại sức khỏe cho người gây mê ca mổ, người ta dùng phương pháp châm cứu Chỉ cần số kim châm vào huyệt người bệnh nằm bàn mổ thấy hết, biết hết thao tác bác sĩ mổ cho không thấy đau đớn Đương nhiên, số người yếu “bóng vía” họ sợ trước thao tác bác sĩ đưa dao vào rạch da thịt Chúng ta khơng nên qn lời dạy bác Hồ: “Thầy thuốc Tây y phải học Đông y, thầy thuốc ta phải học Tây y tốt” Một điều cần phải quan tâm giai đoạn điều tra hoạt chất sinh học (bioprospecting) Theo Ian Paterson (Giáo sư Đại học Cambridge, Mĩ) nói: Thế giới thể sống trải qua thời kì dài đấu tranh sinh tồn phát triển khả vô phức tạp ứng dụng nhiều khía cạnh y học Bộ gene sản phẩm tự nhiên khơng phí thời gian mà không tạo hợp chất không tác động tới hệ thống sinh học Điều tra thăm dò hoạt chất sinh học sinh vật sống mang lại lợi ích to lớn y dược học thương mại Đương nhiên lĩnh vực đầu tư mạo hiểm, thất bại thu lợi nhuận lớn Vì thế, quốc gia phát triển thường không đủ tiềm lực tài chính, trang thiết bị đặc biệt chuyên gia để triển khai công việc này, tài nguyên thiên nhiên tính đa dạng sinh học nước phong phú to lớn Hoạt động điều tra thăm dò hoạt chất đòi hỏi kết hợp chặt chẽ kinh nghiệm cổ truyền việc sử dụng động vật, thực vật, nấm vi sinh vật làm thuốc trang thiết bị đại phân tích hóa học sinh học Công việc thường bắt đầu với nhóm y học cổ truyền sử dụng, sau mở rộng cách có hệ thống đến khu vực vườn Quốc gia, tiếp đến hệ vi sinh vật sống hệ sinh thái đặc biệt rừng ngập mặn, kí sinh dược liệu, rong, tảo biển,… Về phương pháp tiến hành trước tiên điều tra tìm hiểu kinh 112 CNSH với bảo vệ sức khỏe cộng đồng Truong Văn Lung nghiệm sử dụng thuốc người dân, sau dùng phương pháp tách chiết, thường loại dịch chiết, đưa phịng thí nghiệm để tiến hành sàng lọc qua phép thử đặc trưng cho nhóm thuốc kháng khuẩn, kháng virus, chữa sốt rét, chữa rối loạn thần kinh, chữa bệnh lao, ức chế sinh trưởng tế bào ung thư Rất phải phối hợp nhiều phịng thí nghiệm để tổ chức sàng lọc cách có hệ thống có hiệu Những mẫu dương tính phân tích hóa học sắc kí cao áp, điện di, khối phổ để cuối đến hoạt chất Ví dụ, gần người ta tìm thấy chất chống HIV gọi conocurvone rễ Cotinus coggygria Rất nhiều quốc gia phát triển công nghiệp hóa (NICs) cơng ti hóa dược chất muốn đầu tư cho loại công việc Tại viện Nghiên cứu Eisai (bang Massachussets, Mĩ) nhà khoa học điều chế chất kí hiệu Halichondrin B, dẫn xuất từ loài bọt biển sống tầng nước sâu vùng biển New Zealand, cho đặc biệt công hiệu việc điều trị ung thư giai đoạn cuối Công ti Bristol-Myers Squibb thử nghiệm loại thuốc mang tên Ixabepilone , mô theo loại vi khuẩn có nhiều đất mùn bình thường chữa khỏi bệnh ung thư Tập đồn Wyeth gần giới thiệu thị trường sản phẩm biệt dược Rapamune phân lập từ loại giun đất đảo Easter có tác dụng phịng ngừa tượng thải loại ghép thận Rapamune chế phẩm chạy hãng thời gian qua (theo Tạp chí Thế giới số 664, tháng 12 năm 2005 trang55-58) Thế giới sinh vật thật đa dạng phong phú Nếu khai thác giới dù phần nhỏ, y học thu thành công vượt bậc phục vụ đắc lực cho sức khỏe cộng đồng Vì thế, nhiều tổ chức quốc tế cho đời văn nêu nguyên tắc chung bioprospecting, có việc thừa hưởng kết sử dụng phương pháp cổ truyền kết hợp phương pháp tạo nhiều sản phẩm dược học nhằm chữa trị ngày tốt bệnh mà trước cho vô phương cứu chữa TÀI LIỆU THAM KHẢO (Tham khảo tài liệu chương III ) ... 1994 Công nghệ gene công nghệ sinh học ứng dụng y dược học đại Nxb Y học Hà Nội Phan Cự Nhân- Trần Đình Miên,1997.Tìm hiểu cơng nghệ sinh học đại.Nxb Giáo dục Hà Nội Trương Văn Lung, 19 95 Chuyên... với công nghệ sinh học đại người ta sản xuất đựơc nhiều insulin rẻ nên đáp ứng nhu cầu cho người bị bệnh đái tháo đường Công nghệ sinh học đại sản xuất insulin nhà máy tí hon vi khuẩn E coli Trong. .. Trương Văn Lung, 19 95 Chuyên đề công nghệ sinh học. Tủ sách Đại học Khoa học Huế Nguyễn Văn Uyển, Nguyễn Tiến Thắng, 1996 Những kiến thức công nghệ sinh học, Nxb Giáo dục Hà Nội Bezborodov A.M.,