giáo án điện tử môn sinh vật học:Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrom) pps

HỘI CHỨNG RỐI LOẠN HÔ HẤP SINH SẢN (PRRS: Porcine Reproductive and Respiratory Syndrom) TS Nguyễn Ngọc Hải Virus PRRS • M protein: protein màng • E protein:glycoprotein vỏ envelope • GP: glycoprotein màng • AAA: đuôi polyadenine • RNA: hệ gen virus • Lipid bilayer: màng đôi lipid TS Nguyễn Ngọc Hải LÂM SÀNG TS Nguyễn Ngọc Hải • Mô bệnh học tế bào phổi bình thường • Mô bệnh học tế bào phổi bị bệnh TS Nguyễn Ngọc Hải CHẨN ĐOÁN Lâm sàng: Triệu chứng bệnh tích Trong vòng 14 ngày, gặp tiêu sau việc chẩn đoán xác định bệnh PRRS coi đúng: - Sẩy thai, đẻ non vượt 8% - Chết thai vượt qua 20% - Lợn chết tuần vượt 25% Chủng virus: Châu u chủng Châu Mỹ??? TS Nguyễn Ngọc Hải CHẨN ĐOÁN: Phòng thí nghiệm Phân lập virus Kỹ thuật IPMA ( immunoperoxidase monolayer assay) Kỹ thuật IFA ( indirect immunofluorescence assay) có độ nhạy cao, chuẩn độ kháng thể phát lợn ngày sau bệnh Kỹ thuật ELISA ( enzyme-linked immunosorbent assay) đơn giản, không đắt tiền có hiệu Phát kháng thể trung hòa (Seroneutralisant) RT-PCR (Reverse Transcriptase PCR) TS Nguyễn Ngọc Hải KỸ THUẬT IPMA Gắn đại thực bào vào microtitre plate Gây nhiễm PRRS virus vào tế bào (mẫu bệnh phẩm) Cố định tế bào Chuẩn bị kháng thể (huyết thanh) pha loãng Ủ kháng thể (huyết thanh) với đại thực bào cố định Ủ nhuộm Đọc phân tích kết quả: theo màu TS Nguyễn Ngọc Hải Kết • * Dương tính: tế bào chất 30 -50% số tế bào giếng có màu đỏ đậm • * m tính: tế bào chất không nhuộm màu • * Phản ứng không chuyên biệt: tất tế bào nhuộm màu ⇒ Dương tính âm tính giả TS Nguyễn Ngọc Hải Tế bào có màu nâu đỏ bị nhiễm virus TS Nguyễn Ngọc Hải KỸ THUẬT IFA Gắn gây nhiễm tế bào MARC-145 microtitre plate Chuẩn bị huyết pha loãng Ủ huyết với tế bào MARC-145 cố định Ủ với IgG gắn huýnh quang Đọc phân tích kết qua kính hiển vi huỳnh quang TS Nguyễn Ngọc Hải Kết • Dương tính: tế bào bị nhiễm phát huỳnh quang màu xanh tế bào không bị nhiễm màu xanh (đối chứng âm) • m tính: phát huỳnh quang màu xanh tế bào nhiễm không nhiễm TS Nguyễn Ngọc Hải Kỹ thuật ELISA TS Nguyễn Ngọc Hải KỸ THUẬT ELISA (tt) Kết quả: xác định cách tính tỉ lệ S/P (mẫu / mẫu đối chứng dương), ví dụ kit IDEXX: * S/P < 0.4 ⇒ âm tính * S/P ≥ 0.4 ⇒ dương tính TS Nguyễn Ngọc Hải Biến đổi hàm lượng kháng thể Hàm lượng kháng thể SN.Ab IFA, IPMA tháng TS Nguyễn Ngọc Hải Giải trình tự chuỗi nucleotide • Chủng virus Châu Mỹ: VR-2332 • Chủng virus Châu Âu: Lelystad • Tương đồng chuỗi axit amin: – 63% ORF2 – 58% ORF3 – 68% ORF4 TS Nguyễn Ngọc Hải TS Nguyễn Ngọc Hải TS Nguyễn Ngọc Hải Helmi mardassi vaø cs., 1994 TS Nguyễn Ngọc Hải ... (mẫu / mẫu đối chứng dương), ví dụ kit IDEXX: * S/P < 0.4 ⇒ âm tính * S/P ≥ 0.4 ⇒ dương tính TS Nguyễn Ngọc Hải Biến đổi hàm lượng kháng thể Hàm lượng kháng thể SN.Ab IFA, IPMA tháng TS Nguyễn... tính: tế bào bị nhiễm phát huỳnh quang màu xanh tế bào không bị nhiễm màu xanh (đối chứng âm) • m tính: phát huỳnh quang màu xanh tế bào nhiễm không nhiễm TS Nguyễn Ngọc Hải Kỹ thuật ELISA TS Nguyễn... bệnh học tế bào phổi bị bệnh TS Nguyễn Ngọc Hải CHẨN ĐOÁN Lâm sàng: Triệu chứng bệnh tích Trong vòng 14 ngày, gặp tiêu sau việc chẩn đoán xác định bệnh PRRS coi đúng: - Sẩy thai, đẻ non vượt