Thực nghiệm thành phần hóa học của cây kim thất lá tô mách

Thực nghiệm thành phần hóa học của cây kim thất lá tô mách

[...]... tử khác Do trong thời gian tiến hành thí nghiệm, dung dich enzyme chịu ảnh hưởng bởi nhiều yếu tố khách quan như chịu ảnh hưởng của 2 yếu tố oxy trong không khí và sự tự thủy phân của papain, nên hoạt tính của các chế phẩm sẽ giảm dần theo thời gian Theo kết quả ở bảng, hoạt tính của các chế phẩm giảm dần mỗi ngày Sạu 5 ngày chúng tôi khảo sát thì hoạt tính của các chế phẩm giảm đi rất nhiều so với... Hình 3.8 Hoạt tính của protein P(UI/ml) trong nhựa khô biến đổi theo pH Nhận xét: LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC CHIÊM LÂM PHÚC DIỄM 45 Khi tăng dần giá trị pH lên thì đồng thời hoạt tính protein cũng tăng lên sau đó giảm xuống rất nhanh, đều này chứng tỏ rằng pH đóng một vai trò rất quan trọng cho sự tồn tại của enzyme trong môi trường do pH ảnh hưởng đến mức độ ion hóa của các enzyme và phần nào quyết định... phân hủy hay oxy hóa thành dạng hoạt hóa nên dẫn đến hoạt tính tăng cao, nhưng khi nhiệt độ tăng quá cao thì nó lại chuyển thành dạng bất hoạt có khi bất hoạt hoàn toàn do cấu trúc tâm hoạt động đã bị thay đổi Qua các kết quả khảo sát trên chúng tôi nhận thấy rằng: hoạt tính của enzyme papain sau các giai đoạn tinh chế giảm dần đồng thời với lượng protein cũng giảm dần Do đó, chúng tôi sử dụng nhựa... LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC CHIÊM LÂM PHÚC DIỄM 44 3.10 KHẢO SÁT CÁC YẾU TỐ ẢNH HƢỞNG ĐẾN HOẠT TÍNH CỦA ENZYME PAPAIN 3.10.1 Khảo sát ảnh hƣởng của pH Tiến hành thí nghiệm xác định hoạt tính enzyme ở các pH khác nhau từ 7.5 đến 9.0 Xác định hoạt tính theo phương pháp Anson, mẫu được đo độ hấp thu quang ở bước sóng 720nm Kết quả được trình bày trong bảng 3.9 (phụ lục 20) Bảng 3.9 Hoạt tính của protein P(UI)... toàn Chế phẩm được bảo quản ở 4oC để dùng dần, thời gian tiến hành thí nghiệm là 5 ngày Hút 1ml dung dịch trong bình định mức tiến hành xác định hoạt tính protease theo phương pháp Anson Thí nghiệm được lặp lại mỗi ngày và kết quả được thể hiện trong bảng 3.8: LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC CHIÊM LÂM PHÚC DIỄM 42 Bảng 3.8 Hoạt tính protein của các chế phẩm theo thời gian ∆OD P(UI/ml) Ngày M0 M1 M2 M3 M0 M1... amoniac trung bình của dịch thủy phân 0.06 (g/l) Nhận xét: Hàm lượng đạm amin = hàm lượng đạm formol – hàm lượng đạm amoniac Qua kết quả khảo sát trên, hàm lượng đạm amoniac của dịch thủy phân dao động từ 0.06 – 0.07g/l Như vậy hàm lượng đạm amoniac của dịch thủy phân rất thấp so với các chỉ tiêu cho phép của nước chấm và xem như không đáng kể Do đó trong các khảo sát về ảnh hưởng của tỉ lệ enzyme so... chất cũng như các điều LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC CHIÊM LÂM PHÚC DIỄM 49 kiện ảnh hưởng đến phản ứng thủy phân chúng tôi không xét đến hàm lượng đạm amoniac của dịch thủy phân Sau 24 giờ phản ứng, hàm lượng đạm formol đạt tối đa là 9.2 và nếu cứ tiếp tục phản ứng thủy phân thì hàm lượng đạm formol không tăng lên nữa điều này chứng tỏ phản ứng đã kết thúc Do đó chúng tôi đã ngưng tất cả các phản ứng khảo... Sự phụ thuộc của hiệu suất vào thời gian phản ứng (pH 6.0, Nồng độ xúc tác 0.25%) Hiệu suất phản ứng (%) 40.00 35.00 30.00 60oC 25.00 70oC 80oC 20.00 15.00 10.00 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 Thời gian phản ứng (giờ) Hình 3.11 Sự phụ thuộc của hiệu suất vào thời gian phản ứng ở pH 6.0 và hàm lƣợng xúc tác là 0.25% LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC CHIÊM LÂM PHÚC DIỄM 53 Tại pH 7.0 chúng tôi thu được... do nhiệt độ tăng cao làm bất hoạt tâm hoạt động của enzyme LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC CHIÊM LÂM PHÚC DIỄM 55 Sự phụ thuộc của hiệu suất vào thời gian phản ứng (pH 7.0, Nồng độ xúc tác 0.25%) Hiệu suất phản ứng (%) 40.00 35.00 30.00 60oC 25.00 70oC 80oC 20.00 15.00 10.00 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 Thời gian phản ứng (giờ) Hình 3.12 Sự phụ thuộc của hiệu suất vào thời gian phản ứng ở pH 7.0 và... enzyme thu được bằng phương pháp tủa bằng ethanol sau khi đông khô LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC CHIÊM LÂM PHÚC DIỄM 41 M3: mẫu enzyme thu được bằng phương pháp tủa bằng dung môi aceton sau khi đông khô Nhận xét: Qua biểu đồ trên chúng ta thấy rằng hàm lượng protein của các chế phẩm hầu như không thay đổi nhiều theo thời gian chúng tôi khảo sát Chế phẩm M0 có hàm lượng protein cao nhất còn M1 có hàm lượng protein 123doc.vn