M anisopliae với bào tử dạng trụ khuẩn lạc xanh đen màu tối hồng vỏ quế Khuẩn lạc mọc chậm, môi trờng OA sau 10 ngày nuôi cấy 20oC có đờng kính 2cm M anisopliae có hai thứ (varieties) với đặc điểm: Bµo tư tói nhá lµ M anisopliae var anisopliae víi kích thớc bào tử túi 3,5-(5,0) - 8,0(-9,0) ì 2,5 - 3,5 (- 4,5)µm Bµo tư tói lín lµ M anisopliae var major víi bµo tư tói dµi lµ 10,0 - 14,0(-180) àm Để phân biệt hai thứ này, đà có nghiên cứu huyết học khác cđa M anisopliae var anisopliae vµ M anisopliae var major, M anisopliae M anisopliae chủng gây bệnh mạnh cho côn trùng thuộc Coleoptera Hơn 204 loài côn trùng thuộc họ Elaridae Curculionidae bị nhiễm bệnh M anisopliae Nấm phân bố rộng tự nhiên Đà có nhiều nghiên cứu phân bố chóng: Nepal, New Zealand, New Caledonia (IMI), Bahamas, Mü, Canada, Bắc Ireland, Italia, Turkey, Liên Xô (cũ) (IMI) nơi côn trùng phân lập đợc M anisopliae: nang Mematod (Heteroderas chachatii Globodera rostochensis), hạt đồng đất trồng Canada, đất trồng chuối Honduras, đất trồng dâu Brazil, đất đồng cỏ New Zeland (IMI) Ngay nơi có thời tiết khắc nghiệt nớc Đức, đất rừng sau đốt cháy, chất thải hữu (chuẩn bị ô nhiễm), trầm tích sông (IMI), đất đầm lầy trồng đớc, tổ số loài chim rễ dâu tây phân lập đợc M anisopliae Đặc điểm sinh lý, sinh hoá M anisopliae: - Không thể sinh trởng tốt chất kitin - Sống đợc nhiệt độ thấp (8oC), biên độ độ ẩm rộng, nơi tích luỹ nhiều CO2 thiếu O2 chúng sống sót tới 445 ngày Khi hoại sinh đất, bào từ dính bị ức chế nảy mầm bëi khu hƯ nÊm ®Êt, ®ã cã chđng Aeromonas (thí nghiệm in vitro) - dới 10oC 35oC hình thành bào tử xảy - Nhiệt độ tốt cho nảy mầm bµo tư lµ 25 - 30oC vµ chÕt ë 49oC 10 - NhiƯt ®é tèt nhÊt cho sù sinh tr−ëng lµ 25oC vµ pH 3,3 - 8,5 - M anisopliae có khả phân giải tinh bột, celluloza kitin (lông da côn trùng) 2.2 Nấm bạch cơng Beauveria bassiana Bệnh nấm đợc nghiên cứu tơng đối sớm Cuối kỷ XIX Hoa Kỳ ®· dïng nÊm B bassiana ®Ĩ trõ mét lo¹i bä xít cánh trắng Nấm B bassiana có đất h¬n nÊm M anisopliae Sau tiÕp xóc víi bỊ mặt thể vật chủ, conidi nấm B bassiana bắt đầu mọc mầm xâm nhập vào bên thể vật chủ Quá trình sau vật chủ bị nhiễm conidi khoảng 10 kéo dài vài ngày Sau xâm nhập vào thể vật chủ, nấm bắt đầu sinh trởng phát triển Nấm tiêu diệt dần tế bào bạch huyết bị công giai đoạn đầu xâm nhiễm thể ký chủ Khi nấm tiêu diệt hết tế bào bạch huyết côn trùng vËt chđ chÕt NÊm tiÕp tơc sinh tr−ëng ph¸t triĨn Lợng sợi nấm bên thể vật chủ ngày tăng xác côn trùng trở nên rắn lại Khi gặp độ ẩm thuận lợi, sợi nấm mọc bề mặt thể vật chủ tạo thành conidi Côn trùng bị nhiễm B bassiana điều kiện 25oC chết sau -7 ngày NÊm B bassiana tiÕt ®éc tè Beauvericin NÊm B bassiana có phổ ký chủ rộng Chỉ riêng vùng Bắc châu Mỹ đà ghi nhận đợc 175 loài côn trïng lµ ký chđ cđa nÊm nµy NÊm B bassiana nuôi cấy môi trờng thức ăn nhân tạo 2.3 Nấm châu chấu Entomophaga grylli Nấm E grylli chuyên tính loài châu chấu, có ý nghĩa thực tiễn lớn Sau dịch nấm gây ra, quần thể châu chấu giảm 80 - 90% Nó gây thành dịch lớn cho nhiều loài côn trùng cánh thẳng Trong trình phát triển bệnh, nấm E grylli phân huỷ toàn mô thể vật chủ Sợi nấm xâm nhập vào tất phận, kể chân côn trùng, trừ trứng buồng trứng không bị nấm xâm nhập Châu chấu bị bệnh thờng bò lên phía cỏ bám chết với t đầu hớng lên phía Xác chết tồn cỏ lâu Sau côn trùng chết, bề mặt xác chết tạo thành conidi Châu chấu khoẻ tụ tập quanh xác chết sau đêm bị nhiễm conidi nấm Nấm E grylli khó nuôi cấy quy mô lớn, loài nấm Entomophaga nói chung không nuôi cấy môi trờng thức ăn nhân tạo, mà nuôi cấy qua vật chủ sống Các conidi nấm tồn lâu điều kiện tự nhiên Quy trình sản xuất chế phẩm diệt sâu hại từ nấm 3.1 Phân lập tuyển chọn chủng giống nấm Môi trờng phân lËp tuyÓn chän nÊm th−êng chøa: glucoza, pepton, oxagall, chloramphenicol actidione Các chất kháng sinh đợc bổ sung vào môi trờng nhằm ức chế vi khuẩn Để bào tử đợc hình thành tốt nhất, nguồn cacbon phù hợp saccaro asparagin glyxin Trong sản xuất công nghiệp ngời ta chọn môi trờng chứa glucoza saccaroza có bổ sung cao ngô, cao men hay cao đậu tơng Tỷ lệ C/N đợc coi tối u đạt 10/1 3.2 Các phơng pháp lên men a) Lên men chìm: Bằng phơng pháp lên men chìm dễ dàng thu đợc sinh khối, bào tử, tinh thể độc sản phẩm khác nh chất kháng sinh, độc tố dạng hòa tan môi trờng dinh dỡng vi sinh vật diệt sâu hại côn trùng gây hại Lên men chìm thu đợc nhiều sản phẩm Đồng thời việc sản xuất phơng pháp lên men chìm dễ áp dụng khí hoá, tự động hóa, diện tích mặt không lớn ống giống nuôi 5-7 ngày Nhân giống bình 250ml máy lắc 200 vg/phút nhiệt độ 28- 30oC, 24 Lên men hệ thống tự động khoảng 7- lÝt m«i tr−êng khy 550 vg/ to = 28 - 30oC, 72 Ly tâm lạnh 3000 vg/phót 40 Sinh khèi + chÊt phơ gia Sấy khô, đóng bao nhÃn, bảo quản - 100C kiểm tra chất lợng - sử dụng Hình 12 Quy trình lên men chìm tạo chế phẩm nấm diệt sâu Nấm nuôi ống thạch nghiêng hay đĩa petri -10 ngày ỏ nhiệt độ 28-30oC Bột bào tử túi Môi trờng dịch nấu sôi 100oC 30' Các chậu thủy tinh lớn có lớp dịch môi trờng - 1,5cm Chậu sấy 100oC,30 phút Nuôi 12 ngày, toC = 25 - 30oC ThÊm cho r¸o n−íc + chÊt phơ gia NghiỊn nhá SÊy kh« ë 30 - 35oC, ngày Đóng bao nhÃn, kiểm tra chất lợng Bảo quản - 10oC sử dụng Hình 13 Quy trình lên men bề mặt không vô trùng tạo chế phẩm nấm diệt sâu côn trùng có hại b) Lên men bề mặt không vô trùng: Trong ®iỊu kiƯn thiÕu trang thiÕt bÞ ng−êi ta cã thĨ lên men bề mặt không vô trùng để thu đợc chế phẩm diệt sâu côn trùng có hại từ mét sè chđng nÊm Nh»m h¹n chÕ sù nhiƠm t¹p vi sinh vật lạ trình nuôi cấy, môi trờng nuôi cấy đợc đun sôi 100oC 30 phót, sau m«i tr−êng ngi, ng−êi ta bỉ sung kháng sinh (Streptomycin) với nồng độ 0,01% (hình 13) c) Lên men xốp: Có thể sử dụng phơng pháp lên men xốp tạo chế phẩm vi sinh vật diệt sâu, côn trùng có hại từ vi nấm, sau bổ sung dịch dinh dỡng vào chất lựa chọn khác nh bột đậu nành, bà đậu phụ, cám, gạo, lúa, mày ngô, ngời ta tiến hành nhiễm giống nấm cho lên men Khi sinh khối nấm đạt cực đại tiến hành thu hồi sinh khối, xử lý tạo sản phẩm chứa bào tử hệ sợi nấm Các chủng nấm có khả diệt côn trùng, sâu hại thờng đợc nhân sinh khối phơng pháp lên men xốp là: B bassiana; M anisopplie ống giống - ngày Môi trờng dịch thể, lắc 200 vòng/phút, nuôi tO = 28-30ƠC Môi trờng xốp bình 250ml, nuôi 4- ngày tO= 20 - 32ÔC Môi trờng xốp chËu thủ tinh so s¸nh (khư trïng 100OC 30- 40 phút) + 10% giống Nuôi 10 ngày tOC= 28 - 30OC Độ ẩm khoảng 90 - 95% Làm khô nhiệt độ phòng Có quạt Độ ẩm 10% sấy 40ÔC Nghiền nhỏ Đóng bao nhÃn Kiểm tra chất lợng Bảo quản - 10OC tối sử dụng Hình14 Quy trình lên men xốp tạo chế phẩm nấm diệt sâu côn trùng gây hại Hiệu phòng trừ sâu hại chế phẩm nấm Nấm Metarhizium anisopliae Beauveria đợc nghiên cứu sản xuất để trừ số sâu hại quan trọng nông nghiệp Hiệu lực chế phẩm đà thử rầy nâu, sâu đo đay, châu chấu xanh, châu chấu điều kiện phòng thí nghiệm nhà lới Chế phẩm có tác dụng giảm tỷ lệ rầy nâu 55,2 - 58,8%, rầy lng trắng 64 - 92%, rầy xanh 75 - 96% sâu đo xanh hại đay 43,9 - 64,2% Hiệu lực diệt loài rầy hại lúa đồng ruộng nấm B bassiana biÕn ®éng tõ 33 - 75% t theo vơ năm khác Hiệu lực nấm kéo dài 3-4 tuần sau phun nấm, cần phun nấm lần vụ đủ để quản lý loài rầy hại lúa vụ Dùng nấm B bassiana để quản lý loài rầy hại lúa đà làm tăng suất từ 19 tới 95% so với đối chứng (tuỳ theo vụ năm) Nấm B bassiana không gây ảnh hởng cho lúa không gây hại thiên địch sâu, rầy hại lúa Nấm M anisopliae có khả gây bệnh làm chết 84,6% châu chấu Nomadacris succincta sau 10 ngµy xư lý vµ nÊm M flavoviride gây chết 100% châu chấu thí nghiệm sau ngày Chế phẩm nấm diệt châu chấu đợc tiến hành Bà Rịa - Vũng Tàu, Đồng Nai cho kết tơng đối tốt, nhng không đồng IV Nguyên sinh động vật ký sinh côn trùng Khái quát nguyên sinh động vật ký sinh côn trùng Côn trùng động vật chủ trung gian phần lớn nguyên sinh động vật ký sinh Ngời ta cho rằng: nguyên sinh động vật có khả dùng để tạo thuốc trừ sâu sinh học với tác động nhanh thời gian ngắn, nhng đóng vai trò quan trọng hệ thống PTTH sâu hại nhờ tác động yếu chúng mà quần thể côn trùng hại giảm bớt phần, côn trùng vật chủ trở nên mẫn cảm tác nhân sinh học khác (virus, vi khuẩn, ), với thuốc hóa học trừ sâu (do cần dùng thuốc hóa học liều lợng thấp bình thờng) BPSH trừ sâu hại chủ yếu quan tâm tới loài nguyên sinh động vật có tác động làm giảm sức sinh sản sức sống côn trùng vật chủ Nguyên sinh động vật gây bệnh côn trùng bao gồm: - Lớp trùng roi Flagellata: Những loài ký sinh côn trùng thuộc họ Trypan osomatidae đặc biệt giống Leptomonas, Herpetomonas, Crithidia Blastocrithidia Loài trùng roi Leptomonas pyrrhocoris gây bệnh cho bọ xít Pyrrhocoris apterus, sâu hại sáp ong Galleria mellonella, bọ cánh cứng Tenebrio molitor, ruồi Calliphora sp Loài Leptomonas pyraustae ký sinh sâu đục thân ngô Các loài thuéc gièng Herpetomonas th−êng ký sinh c«n trïng bé hai cánh, cánh vảy cánh màng - Lớp trùng chân giả Sarcodina: Phần lớn trùng amip ký sinh côn trùng thuéc hä Amoebidae vµ Endamoebidae Loµi Malamoeba locustae (hä Amoebidae) ký sinh ống Manpigi biểu mô ruột 40 loài châu chấu Kết nghiên cứu cho thÊy loµi trïng amip M locustae cã thĨ sư dơng trừ loài châu chấu hại trồng - Lớp trùng bào tử Aporozoa: Gồm nhiều loài gây bệnh cho côn trùng, thờng ký sinh tế bào Côn trùng bị nhiễm nặng chết Các nguyên sinh động vật thuộc nhóm có giai đoạn ngủ nghỉ đợc gọi bào tử, có khả chống chịu tác động yếu tố môi trờng Đây điều kiện tốt cho trùng bào tử tồn thể vật chủ để lây lan bệnh Lớp trùng bào tử gồm có: + Đại diện phụ Eugregarinaria (thuộc Gregarinomorpha) ký sinh thông thờng côn trùng hại thực vật c«n trïng kho, thuéc gièng Gregarina (G cuneata, G polymorpha, G steini) ký sinh bä c¸nh cøng Tenebrio molitor, loµi G vizri ký sinh bä Zabrus tnenbrioides, loµi G typographi ký sinh mọt Ips typographus Các loài trùng bào tư thc bé phơ Schizogrega-rinaria cđa bé Gregarinomorpha lµ ký sinh rÊt nguy hiĨm cho c«n trïng ThÝ dơ: Mattesia dispora ký sinh s©u Ephestia kuhniella; M trogodermae, B thuringiensis ký sinh mät cøng ®èt Trogoderma granarium + Bé trïng Coccidiomorpha có giống Adelina ký sinh thể côn trïng Loµi Adelina tribolii ký sinh mät Tribolium castaneum vµ T confusum Loài A mesnili ký sinh sâu Ephestia kuhniella, Tineola biselliella vµ Plodia interpunctella Loµi A melolonthae ký sinh bä Melolontha melolontha + Bé trïng bµo tư nhá Microsporidia có nhiều loài gây bệnh cho côn trùng có ý nghĩa thực tiễn BPSH trừ sâu hại Chúng ký sinh bên tế bào vật chủ, phá huỷ nhiều loại mô thể côn trùng bị bệnh Ngời ta đà biết mô tả khoảng 200 loài trùng bào tử nhỏ ký sinh côn trùng Trùng bào tử nhỏ ký sinh nhiều nhóm côn trùng nhng cha gặp ký sinh côn trùng chích hút thực vật côn trùng BMăT Một số loài trùng bào tử nhỏ chuyên tính nh Nosema apis, N bombycis Một số khác lại đa thực nh loài Plistophora schubergi ký sinh 20 loài cánh vẩy thuộc họ Đặc điểm quan trọng trùng Microsporidia tạo thành bào tử nhỏ Sự lây nhiễm cho vật chủ nhờ bào tử Số lợng bào tử túi bào tử phụ thuộc vào loài giống nguyên sinh động vật Các loµi thc gièng Nosema cã mét bµo tư mét tói bµo tư Loµi Nosema bombycis vµ N apis lµ tác nhân gây bệnh nguy hiểm cho tằm ong mật (tơng ứng) Loài N locustae ký sinh số châu chấu đợc nghiên cứu để trừ châu chấu - Lớp thảo trùng Ciliophora: Nhiều loài thảo trùng ký sinh côn trùng, nhng số có khả gây bệnh cho côn trùng Thảo trùng gây bệnh chủ yếu cho côn trùng sống nớc: ấu trùng muỗi thuộc họ Chironomidae Culicidae Trong ấu trùng muỗi Chironomus plumosus bị nhiễm nặng có 100.000 - 200.000 cá thể thảo trùng loài Tetrahymena chironomi Khả sử dụng nguyên sinh động vật trừ sâu hại Trong số tất nguyên sinh động vật ký sinh côn trùng có trùng bào tử cỡ nhỏ Microsporidia có khả để phát triển BPSH trừ côn trùng hại Trùng bào tử nhỏ lây truyền theo cách chính: qua miệng, qua vết thơng vỏ thể vào dịch máu qua trứng Để có nguồn nguyên sinh động vật dùng bổ sung vào môi trờng sống côn trùng, nhân nuôi trùng amip Melamoeba locustae loài muỗi Melanoplus differentialis Sản xuất bào tử trùng Mattesia grandis Glugea gasit bọ vòi voi hại Anthonomus grandis; sản xuất bào tử trùng Nomesa serbica, N lymantriae, N muscularis sâu róm Lymantria dispar Nosema locustae đợc sản xuất thành chế phẩm trừ côn trùng có hiệu cao V Tuyến trùng ký sinh côn trùng (Nematode) Đặc điểm tuyến trùng ký sinh côn trùng Theo Poinar, 1975 có khoảng 1000 loài 19 côn trùng ký chủ cđa tun trïng Tun trïng ký sinh c«n trïng cã kích thớc thể khác nh loài có thân dài tới 30cm thuộc họ Mermithidae, loài có thân ngắn đạt 0,2mm thuộc giống Neoaplectana Có nhóm tun trïng lín lµ : - Tun trïng sèng ống tiêu hoá côn trùng; - Tuyến trùng bán ký sinh; - TuyÕn trïng ký sinh b¾t buéc Mét sè tuyÕn trïng ký sinh c«n trïng + TuyÕn trùng bán ký sinh loại côn trùng sống ký sinh hoại sinh ấu trùng tuyến trùng xâm nhập vào thể qua đờng lỗ thở đờng miệng theo thức ăn Cùng với vi khuẩn tuyến trùng phát triển hệ gây chết côn trùng sử dụng xác chết vật chủ làm thức ăn Tuyến trùng có họ Steinernematidae gåm cã hai gièng : Steinernema vµ Neoaplectane + TuyÕn trùng ký sinh bắt buộc không gây chết vật chủ: Chu kú ph¸t triĨn cđa tun trïng trïng víi chu kú ph¸t triĨn cđa ký chđ trøng cđa tun trïng qua thực quản vào ruột côn trùng phát triển, ấu trùng tuổi xuất chuyển xuống ruột sau để tiếp tục phát triển Tuyến trùng đẻ trứng, trứng đợc thải cïng víi ph©n cđa vËt chđ + Tun trïng ký sinh bắt buộc gây chết ký chủ: Nhóm gồm tuyến trùng ký sinh khoang thể côn trùng, tuyến trùng hoàn thành toàn chu kỳ phát triển Chúng sử dụng vật chủ làm nguồn dinh dỡng cho thân chúng gây chết ký chủ Tuyến trùng nhóm thuộc họ Mermithidae Tetradonematidae Tun trïng hä Mermithidae cã chu kú ph¸t triĨn dài năm, gồm giai đoạn: phát triển phôi, tr−íc ký sinh, ký sinh, sau ký sinh vµ tr−ëng thµnh Tun trïng hä nµy ký sinh ë nhƯn vµ nhuyễn thể Có ý nghĩa phòng chống côn trùng hại giống: Mermis Hexamermis Loài Mermis elegans ký sinh cánh thẳng M terricola ký sinh ấu trùng cánh vảy Loài Hexamermis albicans ký sinh nhiều sâu hại Sử dụng tuyến trùng trừ côn trùng hại Thí nghiệm đồng từ năm 1930 dùng tuyến trùng loài Neoaplectana glaseri để trừ bä NhËt B¶n Popillia japonica Sau thÝ nghiƯm mËt ®é Êu trïng bä gi¶m tõ 40 - 60% ThÝ nghiƯm sư dơng dßng dd-136 cđa tun trïng Neoaplectana carpocapsae để trừ sâu đục táo tây, sâu xanh Heliothis virescens cho hiệu diệt sâu non 60%, nhng hiệu lại không rõ ràng số sâu khác Dùng N carpocapsae trừ ruồi Delia platura thuốc cho hiệu dùng thuốc hoá học Sử dụng N carpocapsae trừ ruồi hại bắp cải Delia brassicae cho hiệu không dùng thuốc hoá học Sử dụng N carpocapsae trừ sâu xanh hại ngô Heliothis zea cho hiệu diệt sâu cao nhng không ngăn chặn đợc tác hại sâu gây Tuyến trïng cã thĨ sư dơng cïng víi mét sè thc hoá học (trừ nấm, trừ cỏ, ) với chế phẩm sinh học khác Ngoài vi sinh vật nêu ngời ta quan tâm đến Ricketxia, loại vi sinh vËt cã kÝch th−íc nhá gÇn nh− virus phát triển bên tế bào Thành tế bào Ricketxia giống với thành tế bào vi khuẩn điển hình Tế bào Ricketxia chứa ARN ADN Trong côn trùng, loài Ricketxia sinh trởng phát triển dịch tế bào, nhng thể nhện nhỏ Ricketxia sống nhân tế bào Các loài Ricketxia có ý nghĩa BPSH thuộc giống: Enterella, Rickettsiella Các loài Enterella sống bên tế bào biểu mô ruột vật chủ.Các loài Rickettsiella chđ u ký sinh thĨ mì vµ tÕ bào máu gây nhiễm trùng chung Các loài Rickettsiella tìm thấy ký sinh côn trùng cánh cứng, hai cánh, cánh thẳng Thí dụ R popilliae ký sinh Popollia japonica vµ R melolonthae ký sinh M melolontha Sự lây nhiễm bệnh Ricketxia xảy theo hớng ngang (truyền cá thể loài với nhau) hớng dọc (truyền từ đời cho đời sau qua trứng) Các loài Ricketxia nhóm tác nhân sinh học có tiềm để trừ côn trùng hại VI Vi sinh vật đối kháng với sinh vật gây bệnh Hiện tợng đối kháng phổ biến tự nhiên, vi sinh vật đất Vi sinh vật đối kháng thờng tiết kháng sinh, men chất có hoạt tính sinh học cao thờng độc hại vật gây bệnh Hoặc vi sinh vật đối kháng cạnh tranh sử dụng điều kiện sống vật gây bệnh Nấm đối kháng với vật gây bệnh Nấm đối kháng kìm hÃm sinh trởng phát triển nấm gây bệnh Dới số nấm đối kháng thờng gặp: Các nấm Penicillium oxalicum, P frequentans, P vermiculatum, P nigricans, P chrysogetum loài đối kháng nấm Pythium spp., Rhioctonia solani, Sclerotium cepivorum, Verticillium alboatrum (Martin et al., 1985) Cơ chế tác động nấm Penicillium cha đợc biết rõ ràng Trichoderma nhóm nấm đối kháng đợc nhiều nớc nghiên cứu để trừ bệnh hại Những loài phổ biến là: T hamatum, T harzianum Các nấm Trichoderma kìm hÃm nấm gây bệnh thông qua chế tiết kháng sinh, men đặc trng ký sinh nấm gây bệnh Hiện tợng ký sinh nấm Trichoderma nấm gây bệnh đợc gọi tợng "giao thoa sợi nấm" Trớc tiên sợi nấm Trichoderma vây quanh sợi nấm gây bệnh, sau sợi nấm Trichoderma thắt chặt lấy sợi nấm gây bệnh, cuối nấm Trichoderma xuyên qua sợi nấm gây bệnh làm thủng màng nấm gây bệnh, gây nên phân huỷ chất nguyên sinh sợi nấm gây bệnh Nấm Aspergillus niger ®èi kh¸ng víi c¸c nÊm Fusarium solani, Rhizoctonia solania, Alternaria alternata Nấm Aureobasidium pollulans Sporobolomyces roseus đối kháng với nấm Septoria nodorum Nấm Cercospora kikuchii đối kháng nấm Diaporthe phaseolorum var sojae Vi khuẩn đối kháng với vật gây bệnh Vi khuẩn đối kháng đợc nghiên cứu nhiều để trừ vi sinh vật gây bệnh đất Vi khuẩn Agrobacterium radiobacter dòng K-84 loài đối kháng vi khuẩn gây bệnh Agrobacterium tumefaciens Vi khuẩn Bacillus subtilis đối kháng với nhiều loại nấm gây bệnh Các vi khuẩn Pseudomonas fluorescens, P putida, P aureofaciens loài đối kháng với nấm Rhizoctonia solani Có nhiều loài vi khuẩn giống Streptomyces đối kháng với vật gây bệnh cho trồng Virus đối kháng với vật gây bệnh Có số virus gây bệnh có tính đối kháng với nấm gây bệnh Thí dụ, virut gây đốm thuốc đối kháng với nấm Colletotrichum, lagenarium gây bệnh thán th da chuột Virus gây khảm da chuột virus đốm vòng đen cà chua có tính đối kháng với nấm Cladosporium cucumerium Sự ức chế virus nấm bệnh đạt tới 85% Vi sinh vật phòng trừ sinh học cỏ dại Nguồn bệnh: Thân bị bệnh cỏ lồng vực (Echinochloa crus galli) cỏ đuôi phợng (Leptochloa chinensis) đợc tiệt trùng bề mặt dung dịch HgCl2 0,1% nuôi môi trờng PDA, xác định tên nấm diệt cỏ lồng vực Cochliobolus lunatus nấm diệt cỏ đuôi phợng Setosphaeria rostrata Kết thí nghiệm chậu đồng ruộng năm qua cho thấy: phun x 12 10 bµo tư /ha lóc cá có từ 1-3 đà diệt đợc hai loài cỏ hòa thảo quan trọng ruộng lúa Kỹ thuật đà đợc phép đa khu vực hóa vùng Đồng sông Cửu Long BPSH trừ dịch hại giới đà đạt đợc kết tốt nhiều lĩnh vực phòng chống dịch hại trồng Những nghiên cứu BPSH trừ dịch hại nớc ta cha đợc tiến hành mạnh mẽ, kết đạt đợc so với giới với yêu cầu thực tiễn bảo vệ môi trờng Tiềm thiên nhiên nguồn tác nhân sinh học phong phú, đa dạng Nhiệm vụ nặng nề nhà nghiên cứu BVTV phải nghiên cứu khai thác nguồn tác nhân sinh học phục vụ cho ®Êt n−íc 1 2 1 3 Ngài đêm hại xu hào, bắp cải (Barathra brassicae) Bớm; ấu trùng Sâu xanh hại ớt (Heliothis assulta) B−ím; Trøng; Êu trïng; S©u xám hại rau (Agrotis upsilon) Bớm; Trứng; Êu trïng 2 3 S©u xanh hại (Heliothis armigera) Bớm; Trứng; ấu trïng Bä xÝt rïa (Eurygaster integriceps) RÖp; Khèi trøng; Êu trïng 1 Bä l¸ khoai t©y (Leptinotarsa decemlineata) Bä; Khèi trøng; ấu trùng Sâu ăn bắp (Leucania separata) B−ím; Nhéng; Êu trïng H×nh 15 Mét số sâu bệnh hại trồng - đối tợng diệt trừ chế phẩm VSV Nấm bạch cơng diệt sâu (Beauveria bassiana) Sợi nấm thể côn trùng Bào tử trần cuống bào tử Chơng bÈy ChÕ phÈm vi sinh vËt dïng xö lý cải tạo môi trờng Hiện rác thải sinh hoạt, phế thải nớc thải chế biến, sản xuất nông công nghiệp cản trở lớn phát triển mạnh mẽ toàn xà hội Phế thải không làm ô nhiễm môi trờng sinh thái, ô nhiễm nguồn nớc, ô nhiễm đất, gây độc hại đến sức khỏe ngời, vật nuôi trồng mà làm cảnh quan văn hoá đô thị nông nghiệp nông thôn Vấn đề ô nhiễm môi sinh ngày trở lên trầm trọng phạm vi toàn cầu Việc sử dụng mức thuốc bảo vệ thực vật, phân hoá học gây hậu nặng nề đất đai sức khoẻ cộng đồng, mà lÃng phí trồng có khả sử dụng đợc 40-50% lợng phân hoá học bón vào đất, lại gây ô nhiễm môi trờng nặng nề A Nguồn gốc phế thải biện pháp xử lý I Nguồn gốc phế thải * Phế thải gì? Phế thải sản phẩm loại bỏ đợc thải trình hoạt động, sản xuất, chế biến ngời Phế thải có nhiều nguồn khác nhau: Rác thải sinh hoạt; rác thải đô thị; tàn d thực vật; phế thải trình sản xuất, chế biến nông công nghiệp; phế thải từ nhà máy công nghiệp nh: nhà máy giấy, khai thác chế biến than, nhà máy đờng, nhà máy thuốc lá, nhà máy bia, nớc giải khát, lò mổ, nhà máy xí nghiệp chế biến rau đồ hộp Việt Nam nớc nông nghiệp có nguồn phế thải sau thu hoạch lớn, đa dạng Chơng trình triệu đờng đà để lại hàng chục vạn bà mía, mùn mía tàn d phế thải từ sản xuất, chế biến mía đờng Ngành công nghiệp chế biến xuất cà phê đà thải môi trờng 20 vạn vỏ/năm Trên đồng ruộng, nơng rÃy hàng năm để lại hàng triệu phế thải rơm rạ, lõi ngô, sắn, thân thực vật Ngoài có tới hàng triệu rác thải sinh hoạt Tất nguồn phế thải phần bị đốt, lại trở thành rác thải, phế thải gây ô nhiễm nghiêm trọng môi trờng nguồn nớc, đất đai lại thiếu trầm trọng nguồn dinh dỡng cho hàng năm phải bỏ hàng triệu đôla để mua phân hoá học nớc Phế thải đợc xếp thành nhóm sau: + Phế thải hữu + Phế thải rắn + Phế thải lỏng II Biện pháp xử lý phế thải Nhìn chung có biện pháp xử lý phế thải sau: Biện pháp chôn lấp Chôn lấp phơng pháp xử lý lâu đời, cổ điển đơn giản Phơng pháp đòi hỏi nhiều diện tích đất, thời gian xử lý lâu, có mùi hôi thối, sinh khí độc nh CH4, H2S, NH3 rò rỉ, làm ô nhiễm đất, ô nhiễm nguồn nớc nhiều nớc để chống rò rỉ ngời ta xây bể lín, nh−ng rÊt tèn kÐm vµ thêi gian sư dơng bể không đợc lâu Biện pháp ngày bộc lộ nhiều khiếm khuyết Biện pháp đốt Đây biện pháp tạm thời lợng phế thải nhiều Biện pháp gây ô nhiễm môi trờng không khí nhiêm trọng, gây hiệu ứng nhà kính loại bệnh đờng hô hấp, mặt khác biện pháp tốn nguyên liệu đốt Biện pháp thải hồ sông ngòi đổ biển Đây biện pháp nguy hiểm, gây ô nhiễm không khí, nguồn nớc, tiêu diệt sinh vật sống dới nớc, gây ô nhiễm toàn cầu Biện pháp sinh học Hiện nay, biện pháp sinh học để xử lý phế thải biện pháp tối u nhất, đợc tất nớc sử dụng Biện pháp sinh học dùng công nghệ vi sinh vật để phân huỷ phế thải Muốn thực đợc biện pháp này, điều quan trọng phải phân loại đợc phế thải, phế thải nhiều phế liệu khó phân giải nh: túi polyetylen, vỏ chai lọ thuỷ tinh nhựa, loại phế liệu rắn bền phân giải lâu b Chế phẩm vi sinh vật xử lý phế thải hữu từ rác thải sinh hoạt, phế thải nông nghiệp sau thu hoạch I Xử lý rác thải sinh hoạt, Rác thải đô thị công nghệ VI SINH VậT Thành phần rác thải sinh hoạt Khác với rác thải phế thải công nghiệp, rác thải sinh hoạt tập hợp không đồng Tính không đồng biểu không kiểm soát đợc nguyên liệu ban đầu dùng cho sinh hoạt thơng mại Sự không đồng tạo số đặc tính khác biệt thành phần rác thải sinh hoạt Một đặc điểm rõ phế thải đô thị Việt Nam thành phần chất hữu chiếm tỷ lệ cao 55- 65% Trong phế thải đô thị cấu tử phi hữu (kim loại, thuỷ tinh, rác xây dựng ) chiếm khoảng 12-15% Phần lại cấu tử khác Cơ cấu thành phần học phế thải đô thị tỷ lệ bất biến, mà có biến động theo tháng năm thay đổi theo mức sống cộng ®ång ë c¸c n−íc ph¸t triĨn, møc sèng cđa ngời dân cao tỷ lệ thành phần hữu rác thải sinh hoạt thờng chiếm 35-40% So với giới rác thải đô thị Việt Nam có tỷ lệ hữu cao nhiều nên việc xử lý rác thải sinh hoạt Việt Nam công nghệ vi sinh vật để sản xuất phân hữu vi sinh thuận lợi Trong cấu tử hữu rác sinh hoạt, thành phần hóa học chúng chủ yếu là: C, H, O, N, S chất tro (bảng 15) Bảng 15: Thành phần cấu tử hữu rác đô thị(*) Cấu tử hữu Thành phần (%) ... thải sinh ho¹t th−êng chØ chiÕm 3 5-4 0% So víi thÕ giíi rác thải đô thị Vi? ??t Nam có tỷ lệ hữu cao nhiều nên vi? ??c xử lý rác thải sinh hoạt Vi? ??t Nam công nghệ vi sinh vật để sản xuất phân hữu vi sinh. .. tác nhân sinh học có tiềm để trừ côn trùng hại VI Vi sinh vật đối kháng với sinh vật gây bệnh Hiện tợng đối kháng phổ biến tự nhiên, vi sinh vật đất Vi sinh vật đối kháng thờng tiết kháng sinh, ... Chế phẩm vi sinh vật xử lý phế thải hữu từ rác thải sinh hoạt, phế thải nông nghiệp sau thu hoạch I Xử lý rác thải sinh hoạt, Rác thải đô thị công nghệ VI SINH VậT Thành phần rác thải sinh hoạt