Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống
1
/ 70 trang
THÔNG TIN TÀI LIỆU
Thông tin cơ bản
Định dạng
Số trang
70
Dung lượng
7,83 MB
Nội dung
Chủ đề: NUÔI CẤY MÔ – TẾ BÀO THỰC VẬT BẰNG TẾ BÀO TRẦN VÀ KĨ THUẬT CHUYỂN GEN KHÁI NIỆM KHÁI NIỆM Nuôi cấy mô- tế bào thực vật là kĩ thuật cho Nuôi cấy mô- tế bào thực vật là kĩ thuật cho phép nuôi cấy dễ dàng những tế bào thực vật phép nuôi cấy dễ dàng những tế bào thực vật hay mô phân sinh sạch bệnh trong môi trường hay mô phân sinh sạch bệnh trong môi trường nhân tạo thích hợp để tạo ra những khối tế bào nhân tạo thích hợp để tạo ra những khối tế bào hay những cây hoàn chỉnh trong ống nghiệm. hay những cây hoàn chỉnh trong ống nghiệm. C C Ơ SỞ SINH LÍ CỦA CÔNG NGHỆ Ơ SỞ SINH LÍ CỦA CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ- TẾ BÀO NUÔI CẤY MÔ- TẾ BÀO TÍNH TOÀN NĂNG TÍNH TOÀN NĂNG : : Là khả năng của 1 tế Là khả năng của 1 tế bào hình thành 1 cây bào hình thành 1 cây hòa chỉnh trong điều hòa chỉnh trong điều kiện nuôi cấy thích kiện nuôi cấy thích hợp, do trong tế bào hợp, do trong tế bào có chứa bộ AND(NST) có chứa bộ AND(NST) hoàn chỉnh, chứa toàn hoàn chỉnh, chứa toàn bộ thông tin di truyền bộ thông tin di truyền cho 1 chu kì sống cho 1 chu kì sống hoàn chỉnh. hoàn chỉnh. AND mARN AND mARN Protêin tính trạng Protêin tính trạng Tùy từng tế bào, từng Tùy từng tế bào, từng loại mô, từng thời kì sinh loại mô, từng thời kì sinh trưởng, phát triển mà trưởng, phát triển mà các gen phù hợp hoạt các gen phù hợp hoạt động; các gen không động; các gen không cùng hoạt động như cùng hoạt động như nhau trong các giai đoạn nhau trong các giai đoạn phát triển của cơ thể (do phát triển của cơ thể (do cơ chế điều hòa hoạt cơ chế điều hòa hoạt động của gen). động của gen). SỰ PHÂN CHIA, PHÂN HÓA, PHẢN PHÂN HÓA SỰ PHÂN CHIA, PHÂN HÓA, PHẢN PHÂN HÓA CỦA TẾ BÀO: CỦA TẾ BÀO: Phân hóa Phân hóa : 1 tế bào 1khối tế bào(phân hóa) mô cơ : 1 tế bào 1khối tế bào(phân hóa) mô cơ quan hệ cơ quan. quan hệ cơ quan. Phản phân hóa Phản phân hóa : khi các tế bào đã phân hóa thành các : khi các tế bào đã phân hóa thành các mô chức năng riêng biệt nhưng vẫn có thể quay về mô chức năng riêng biệt nhưng vẫn có thể quay về trạng thái chức năng phôi sinh ban đầu ki gặp điều trạng thái chức năng phôi sinh ban đầu ki gặp điều kiện thuận lợi. kiện thuận lợi. • Các đặc tính trên được xác định dựa trên cơ sở là đặc điểm di truyền nhưng sự thay đổi môi trường cũng có ảnh hưởng trực tiếp đến các đặc tính đó. CÁC NHÂN TỐ ĐẢM BỎ THÀNH CÁC NHÂN TỐ ĐẢM BỎ THÀNH CÔNG TRONG CÔNG NGHỆ NUÔI CÔNG TRONG CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ- TẾ BÀO THỰC VẬT CẤY MÔ- TẾ BÀO THỰC VẬT : : Đảm bảo điều kiện Đảm bảo điều kiện vô trùng, phòng thí vô trùng, phòng thí nghiệm phải chuyên nghiệm phải chuyên hóa cao. hóa cao. Chọn đúng môi Chọn đúng môi trường và chuẩn bị trường và chuẩn bị môi trường đúng môi trường đúng cách. cách. Chọn mô cấy, xử lí Chọn mô cấy, xử lí mô cấy thích hợp mô cấy thích hợp trước và sau khi cấy. trước và sau khi cấy. CÁC BƯỚC TRONG KĨ THẬY NUÔI CÁC BƯỚC TRONG KĨ THẬY NUÔI CẤY MÔ- TẾ BÀO THỰC VẬT CẤY MÔ- TẾ BÀO THỰC VẬT Tạo vật liệu khởi đầu Tạo vật liệu khởi đầu : thường chọn chồi là bộ : thường chọn chồi là bộ phận nuôi cấy thích hợp nhất khử trùng cấy phận nuôi cấy thích hợp nhất khử trùng cấy trong môi trường khởi động để tái sinh trong môi trường khởi động để tái sinh Giai đoạn nhân nhanh Giai đoạn nhân nhanh : vật liệu : vật liệu khởi đầu được khởi đầu được chuyển sang môi trường nhân nhanh có bổ sung chuyển sang môi trường nhân nhanh có bổ sung Xitokinin để tái sinh 1 thành nhiều chồi. Xitokinin để tái sinh 1 thành nhiều chồi. Giai đoạn tạo cây hoàn chỉnh Giai đoạn tạo cây hoàn chỉnh : tách riêng các : tách riêng các chồi cho vào môi trường tạo rể (bố sung Auxin) chồi cho vào môi trường tạo rể (bố sung Auxin) mỗi chồi ra rể thành 1 cây hoàn chỉnh. mỗi chồi ra rể thành 1 cây hoàn chỉnh. Giai đoạn ra cây Giai đoạn ra cây : cây trong ống nghiệm đủ tiêu : cây trong ống nghiệm đủ tiêu chuẩn (chiều cao, số lá, số rể) sẽ được chuyển chuẩn (chiều cao, số lá, số rể) sẽ được chuyển sang môi trường tự nhiên. sang môi trường tự nhiên. CÁC HÌNH TH C NUÔI Ứ CÁC HÌNH TH C NUÔI Ứ C Y MÔẤ C Y MÔẤ • Nuôi c y mô th c v tấ ự ậ Nuôi c y mô th c v tấ ự ậ • Nuôi c y mô b ng t ấ ằ ế Nuôi c y mô b ng t ấ ằ ế bào tr nầ bào tr nầ [...]... sinh trưởng: Từ 1 mơ phân sinh của đỉnh sinh trưởng của rễ hoặc thân ni cấy trong mơi trường dinh dưỡng sẽ tạo nên cây con Ni cấy mơ sẹo từ hạt phấn( Auxin rất quan trọng): Ni cấy bao phấn có hạt phấn chín mơi trường thuận lợi bao phấn chín sẽ phân hóa bằng cách: nhân sinh sản sẽ tiêu biến nhân sinh dưỡng sẽ ngun phân tạo mơ sẹo ni dưỡng cây đơn bội(n) xử lí cơnxixin cây trưởng thành(đơn bội kép) NI... sinh chất nơi tiếp xúc giữa 2 tế bào trần khác lồi do tác động của các nhân tố bên ngồi Sau đó là sự tái tổ chức các màng ban đầu thành 1 và bao lấy tế bào chất và 2 nhân cha mẹ CÁC HÌNH THỨC DUNG HỢP • Tự dung hợp: Vì màng sinh chất của tế bào(-) do nhóm P và Protein nên các tế bào trần đẩy nhau nên khơng tự dung hợp Do đó phải làm các rế bào trần tiếp xúc nhau nhờ PEG hay sốc điện Hóa dung hợp:... xác định hướng kéo dài tế bào, vị trí và hướng của mặt phẳng phân chia • Thuận lợi cho sự nghiên cứu về sinh lí tế bào: tính thấm của màng, vận chuyển các chất hòa tan, ion, cơ chế hoạt động của hoocmon thực vật… • Tế bào trần có thể chịu các xử lí gây đột biến và được dùng để tạo ra các dòng tế bào có nguồn gốc đơn bào • Tế bào trần thiết yếu cho sự lai thể hệ( dung hợp tế bào trần) và áp dụng các . quan trọng): trọng): Nuôi cấy bao phấn có hạt Nuôi cấy bao phấn có hạt phấn chín môi trường phấn chín môi trường thuận lợi bao phấn chín thuận lợi bao phấn chín sẽ phân hóa bằng cách: