Báo cáo nghiên cứu khoa học: "Điều tra hợp chất cumarin và flavonoit của một số loài thuộc họ Cúc (Asteraceae) và họ hoa Tán (Apinaceae) ở Nghệ An" doc

Đại học Vinh Tạp chí khoa học, tập XXXVI, số 1A-2007 67 Điều tra hợp chất Cumarin và flavonoit của một số loài thuộc họ cúc (Asteraceae) và họ hoa Tán (Apinaceae) ở nghệ an Nguyễn Thị Thu Loan (a) , Hoàng Văn Mại (b) , Phan Xuân Thiệu (b) Tóm tắt. Đã xác định đợc 8 loài thuộc họ Hoa tán và 32 loài thuộc họ Cúc ở thành phố Vinh và khu vực phụ cận. Kết quả phân tích các hợp chất cumarin và flavonoit cho thấy có đến 24 loài thuộc họ Cúc và 8 loài thuộc họ Hoa tán có chứa hợp chất cumarin. Còn hợp chất flavonoit có mặt ở tất cả các loài đợc nghiên cứu. I. mở đầu Họ Cúc và họ Hoa tán là hai họ lớn trong hệ thực vật Việt Nam, chúng có thành phần loài đa dạng và phân bố tơng đối rộng rãi vì thích nghi cao với điều kiện nhiệt đới nóng ẩm- gió mùa. Từ lâu nhân dân ta đã xem các loài thuộc hai họ này nh một nguồn thảo dợc quan trọng để làm thuốc chữa bệnh. Thực tế đã chứng minh nhiều cây thuốc, nhiều bài thuốc quý sử dụng những loài trong hai họ nói trên đã cứu con ngời thoát khỏi nhiều căn bệnh hiểm nghèo [1,2,7,]. Y học ngày càng phát triển, việc sử dụng phơng thức chữa bệnh dân gian từ cây cỏ dần càng đợc quan tâm nghiên cứu. Các hợp chất có hoạt tính sinh học cao từ thực vật nh ancaloit, cumarin, flavonoit, terpennoit, có tác dụng tốt trong việc phòng và chữa bệnh [11,12]. Tiềm năng về hợp chất thiên nhiên trong các họ thực vật là rất lớn, Vì vậy việc điều tra xác định các loài thuộc các họ thực vật có chứa hợp chất thiên nhiên là việc làm cần thiết, nhằm đánh giá khai thác các tiềm năng vốn có. Bài viết này trình bày một số kết quả điều tra ban đầu về hợp chất cumarin và flavonoit ở hai họ thực vật nói trên ở Nghệ An. ii. Đối tợng và Phơng pháp nghiên cứu 2.1. Đối tợng nghiên cứu Các loài thực vật thuộc họ Cúc (Asteraceae) và họ Hoa tán (Apinaceae) phân bố ở thành phố Vinh và vùng phụ cận thuộc tỉnh Nghệ An. 2.2. Phơng pháp thu mẫu Mẫu đợc thu hái là tất cả các loài thực vật thuộc họ Cúc và họ Hoa tán với đầy đủ các bộ phận rễ, thân, lá, hoa và quả. Xử lý mẫu theo tài liệu "Cẩm nang nghiên cứu đa dạng sinh vật" [8]. Thời gian thu mẫu: 2004. 2.2. Phơng pháp định loại Xác định tên khoa học bằng phơng pháp so sánh hình thái dựa trên các tài liệu: Nhận bài ngày 14/11/2006. Sửa chữa xong 04/12/2006. Đại học Vinh Tạp chí khoa học, tập XXXVI, số 1A-2007 68 "Cây cỏ Việt Nam" của Phạm Hoàng Hộ, "Cây cỏ thờng thấy ở Việt Nam" của Lê Khả Kế và cộng sự, "Từ điển cây thuốc Việt Nam" của Võ Văn Chi [2,5,6,]. 2.3. Phơng pháp phân tích định tính - Định tính cumarin bằng phản ứng đóng, mở vòng lacton dựa theo tài liệu [3,4]. - Định tính flavonoit bằng phản ứng với thuốc thử NaOH, FeCl 3 , Mg (trong môi trờng HCl) và phản ứng huỳnh quang tăng lên với NH 3 khi chiếu tia tử ngoại [3,9,10]. - Sử dụng phơng pháp sắc kí lớp mỏng để phân tích sơ bộ các thành phần hợp chất cumarin [9]. III. kết quả và thảo luận 3.1. Định tính hợp chất cumarin và flavonoit trong các loài thu đợc Qua thu thập và định loại chúng tôi đã xác định đợc 8 loài thuộc họ Hoa tán và 32 loài thuộc họ Cúc có mặt ở khu vực nghiên cứu, trong số đó phần lớn các loài đợc sử dụng làm rau, làm thuốc và gia vị. Kết quả định tính hợp chất cumarin và flavonoit trong các loài đợc trình bày ở bảng 1. Bảng 1. Kết quả định tính hợp chất cumarin và flavonoit Kết quả định tính flavonoit TT Tên khoa học Tên phổ thông Kết quả định tính cumarin NaOH 20% FeCl 3 NH 3 + UV (1) (2) (3) (4) (5) (6) (7) Apiaceae Họ hoa tán 1 Anethum graveolens L. Thì là + Vàng nâu Xanh thẫm Xanh lục Xanh da trời 2 Apium graveolens L. Rau cần tây + Vàng nâu Xanh thẫm Xanh lục 3 Centella asiatica (L.) Urb. Rau má + Vàng chanh Xanh thẫm Vàng lục tăng nhanh 4 Co riandrum sativum L. Rau mùi + Vàng nâu Xanh thẫm Xanh lục 5 Eryngium foetidum L. Mùi tàu + Vàng nâu Xanh thẫm Xanh da trời 6 Hydrocotyle vulgaris Db. Rau má lá sen + Vàng nâu Xanh thẫm Vàng xám 7 Hydrocotyle sibthorpioides Lam. Rau má mỡ + Vàng nâu Xanh thẫm Đỏ cam Xanh da trời 8 Daucus carota L. Cà rốt + Vàng chanh Xanh thẫm Xanh lục Đại học Vinh Tạp chí khoa học, tập XXXVI, số 1A-2007 69 asteraceae Họ Cúc 1 Ageratum conyzoides L. Cứt lợn + Vàng chanh Xanh đen Vàng lục sáng 2 Artemisia vulgaris L. Ngải cứu + Vàng chanh Xanh đen Vàng lục 3 Bidens pilosa L. Đơn kim + Vàng nâu Xanh đen Vàng tơi 4 Blumea balsamifera (L.) DC Đại bi + Vàng chanh Xanh đen Vàng nghệ đậm 5 Blumea hieracifolia var. macrostachya (DC.) Mooly Kim đầu chùm to - Vàng nâu Xanh đen Vàng lục 6 Blumea lanceolaria (Roxb.)Durce Xơng sông + Vàng cam Xanh đen Xanh nhạt 7 Chrysanthemum sp. Cúc đại đoá - Vàng cam Xanh đen - 8 Chrysanthemum coronarium L. Rau cải cúc + Vàng chanh Xanh đen Vàng nâu Xanh da trời 9 Cosmos sulphureus Cav. Cúc chuồn chuồn - Đỏ cam Xanh đen Vàng nghệ Xanh da trời 10 Dahlia pinnata Cav. Thợc dợc - Vàng cam Vàng thẫm Xanh lục 11 Eclipta prostrata L. Cỏ mực + Vàng sẫm Xanh đen Xanh lục Xanh da trời 12 Emilia sonchifolia(L.) DC Rau má lá rau muống + Vàng sẫm Xanh đen Vàng lục 13 Erigeron crispus Pourr. Thợng lão nhăn + Vàng sẫm Xanh đen Vàng lục sáng 14 Eupatorium fortunei Turez. Mần tới + Vàng chanh Xanh đen Vàng lục sáng 15 Eupatorium odoratum L. Cỏ lào + Vàng sẫm Xanh đen Vàng cam Xanh huỳnh quang 16 Gerbera jamesonii Bolus ex Hook. f. Cúc đồng tiền - Vàng sẫm Xanh đen Xanh lục 17 Gnaphalium luteo- album L. Rau khúc tẻ + Vàng cam Xanh đen Xanh lục sáng 18 Gynura crepidioides Benth. Rau tầu bay + Vàng chanh Xanh đen Xanh lục sáng Đại học Vinh Tạp chí khoa học, tập XXXVI, số 1A-2007 70 19 Gynura procumbens (Lour.) Merr. Rau bầu đất + Vàng chanh Xanh đen Vàng xám Xanh da trời 20 Heteropapus hispidus L. Dị mào phún - Vàng sẫm Xanh đen Vàng cam 21 Lactuca indica L. Bồ công anh + Vàng sẫm Xanh đen Vàng cam 22 Parthenium hysterophorus L. Cúc liên chi dại + Vàng tơi Xanh đen Xanh lục 23 Pluchea indica (L.) Less. Cúc tần + Vàng tơi Xanh đen Vàng tơi 24 Siegesbeckia orientalis L. Hy thiêm + Vàng đen Xanh đen Vàng xám 25 Sphaeranthus africanus L. Cúc chân vịt + Vàng tơi Xanh đen Vàng cam 26 Spilanthes orelacea L. Cúc áo hoa vàng + Vàng tơi Xanh đen Đỏ vàng 27 Tithonia diversifolia (Hemsl.) A.Gray Quỳ + Vàng sẫm Xanh đen Vàng lục 28 Tridax procumbens L. Cúc mai + Vàng nâu Xanh đen Đỏ + Xanh da trời 29 Vernonia chinensis Less. Cúc bạc đầu - Vàng cam Xanh đen Vàng lục 30 Vernonia cinerea (L.) Less. Bạch đầu ông + Vàng sẫm Xanh đen Vàng tơi 31 Wedelia chinensis (Osbeck) Merr. Sài đất + Đỏ vàng Xanh đen - 32 Zinnia elegans Jacq. Hoa cánh giấy - Vàng sẫm Xanh đen Vàng lục Ghi chú: - Phản ứng âm tính + Phản ứng dơng tính Kết quả định tính các hợp chất bằng phản ứng hoá học cho thấy: Có 75% các loài họ Cúc và 100% các loài họ Hoa tán đều có phản ứng dơng tính với thuốc thử của cumarin, còn đối với thuốc thử flavonoit thì tất cả các loài thuộc hai họ thực vật nói trên đều cho phản ứng dơng tính. Dựa vào màu sắc của các phản ứng có thể sơ bộ nhận định một số hợp chất flavonoit có mặt trong các loài nói trên là flavon, flavonol và isoflavanon (màu vàng chanh, vàng sẩm và đỏ cam đối với thuốc thử NaOH 20% hay phát quang xanh da trời, vàng lục, vàng cam đối với NH 3 + UV). Mặt khác khi quan sát mức độ và độ nhạy của việc hiện màu trong phản ứng định tính flavonoit chúng tôi nhận đinh sơ bộ các loài sau chứa nhiều flavonoit nh: Cúc chuồn chuồn (Cosmos sulphureus Cav.), Cỏ lào (Eupatorium odoratum L.), Rau má lá rau muống (Emilia sonchifolia(L.) DC.), Đại bi (Blumea balsamifera(L.) DC.). Đại học Vinh Tạp chí khoa học, tập XXXVI, số 1A-2007 71 3. Kết quả khảo sát sơ bộ xác định thành phần cumarin bằng sắc ký lớp mỏng Chúng tôi sử dụng phơng pháp sắc kí lớp mỏng để sơ bộ xác định các thành phần hợp chất cumarin trong các loài thuộc hai họ trên. Kết quả khảo sát đợc trình bày trong bảng 2. Bảng 2. Tóm tắt kết quả sắc ký lớp mỏng hợp chất cumarin Số vết trong sắc ký Không hiện vết 1 - 2 vết 3 - 5 vết Họ Số loài % Số loài % Số loài % Cúc 8 25,0 11 34,3 13 40,6 Hoa tán 0 0,0 5 62,5 3 37,5 Kết quả dẫn ra ở bảng 2 cho thấy: Tất cả các loài phản ứng âm tính với thuốc thử của cumarin đều không hiện vết, các loài còn lại hiện vết theo những mức độ khác nhau, từ 1 cho đến 5 vết. Họ Cúc có 11/24 loài (34,3%) có từ 1-2 vết, 13/24 loài (40,6%) có từ 3-5 vết. Họ Hoa tán có 5/8 loài (62,5%) có từ 1-2 vết, 3/8 loài (37,5%) có từ 3-5 vết. Các loài có 5 vết bao gồm: Rau má mỡ (Hydrocotyle sibthorpioides Lam.), Cúc tần (Pluchea indica (L.) Less.), Cúc áo hoa vàng (Spilanthes orelacea L.), Bạch đầu ông (Vernonia cinerea (L.) Less.). iv. Kết luận 1. Xác định đợc ở thành phố Vinh và các vùng phụ cận có ít nhất 32 loài thuộc họ Cúc và 8 loài thuộc họ Hoa tán, đã lập danh lục các loài và xác định tên khoa học của chúng. 2. Xác định đợc 24/32 loài họ Cúc và 8/8 loài họ Hoa tán có chứa cumarin, tất cả các loài thuộc danh lục đều chứa flavonoit. 3. Khảo sát đợc sơ bộ thành phần Cumarin trong các loài và đánh giá đợc một số loài có thành phần cumarin tơng đối đa dạng(5 vết), bao gồm: Cúc tần, Rau má mỡ, Cúc áo hoa vàng, Bạch đầu ông. Đại học Vinh Tạp chí khoa học, tập XXXVI, số 1A-2007 72 Tài liệu tham khảo [1] Đỗ Huy Bích và cộng sự, Cây thuốc và động vật làm thuốc ở Việt Nam, NXB KHKT, Hà Nội, 2003. [2] Võ Văn Chi, Từ điển cây thuốc Việt Nam, NXB Y học, Hà Nội, 1999. [3] Nguyễn Văn Đàn, Nguyễn Viết Tựu, Phơng pháp nghiên cứu hoá học cây thuốc, NXB Y học TP. Hồ Chí Minh, 1985. [4] Nguyễn Văn Đàn, Hợp chất thiên nhiên dùng là thuốc, NXB Y học, Hà Nội, 1999. [5] Phạm Hoàng Hộ, Cây cỏ Việt Nam, NXB KH-KT, Hà Nội, 1991-1993. [6] Lê Khả Kế và cộng sự, Cây cỏ thờng thấy ở Việt Nam, NXB KH KT, Hà Nội, 1973. [7] Đỗ Tất Lợi, Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, NXB Y học, Hà Nội, 2003. [8] Nguyễn Nghĩa Thìn, Cẩm nang nghiên cứu đa dạng sinh vật, NXB Nông Nghiệp, Hà Nội, 1997. [9] J. B. Harborne, Phytochemical methods, London New York, Chapman and Hall, 1973. [10] J. B. Harborne, The handbook of Natural Flavonoids, New York, 1999. [11] J. Mann, R. S. Dayidson, J. B. Hobbs, D. V. Banthorpe and J.B. Harborne, Natural products: their chemistry and biological significance, England, 1996. [12] Tiina Ojala, Biological screening of plant coumarin, Helsinki, 2001. SumMary Investigating coumarin and flavonoid compounds of some species belonging to Asteraceae and Apinaceae families in Nghe An province Based on themseles investiged data, the author showed a list of 32 species of asteraceae and 8 species of apiaceae in Vinh city and some next areas. The result also showed that there are 24 species of asteraceae and 8 species apiaceae in that total number containing cumarin and all of them containing flavonoit. (a) Cao học 12 Sinh, Trờng Đại học Vinh (b) Khoa Sinh học, Trờng Đại học Vinh . Đại học Vinh Tạp chí khoa học, tập XXXVI, số 1A-2007 67 Điều tra hợp chất Cumarin và flavonoit của một số loài thuộc họ cúc (Asteraceae) và họ hoa Tán (Apinaceae) ở nghệ an . loài thuộc họ Hoa tán và 32 loài thuộc họ Cúc ở thành phố Vinh và khu vực phụ cận. Kết quả phân tích các hợp chất cumarin và flavonoit cho thấy có đến 24 loài thuộc họ Cúc và 8 loài thuộc họ. Cúc và 8 loài thuộc họ Hoa tán có chứa hợp chất cumarin. Còn hợp chất flavonoit có mặt ở tất cả các loài đợc nghiên cứu. I. mở đầu Họ Cúc và họ Hoa tán là hai họ lớn trong hệ thực vật