Khóa luận tốt nghiệp Hóa học: Tổng hợp dẫn xuất amide mới của vanillic acid và amino acid

Việc tìm kiểm những loại thuốc mới, những hợp chất có hoạt tính sinh học phục vụ cho việc tăng cường khả năng đề kháng hoặc điều trị các bệnh do vi sinh vật,virus gây ra cũng đang được c

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHAM THÀNH PHO HO CHÍ MINH

KHOA HÓA HỌC

TP Ss Ƒ MINH DAO HONG QUYEN

VANILLIC ACID VA AMINO ACID

KHOA LUAN TOT NGHIEP

Chuyên ngành: Hóa Hữu co

Thành phố Hồ Chí Minh — 2024

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHAM THÀNH PHO HO CHÍ MINH

KHOA HÓA HỌC

TONG HỢP DẪN XUAT AMIDE MỚI CUA

VANILLIC ACID VA AMINO ACID

Giảng viên hướng dẫn: TS Lê Tin Thanh Sinh viên thực hiện: Đào Hồng Quyên

MSSYV: 46.01.106.060

Thanh pho Hồ Chí Minh — 2024

BON CAMION Guunsnniinoiintiainiittittiiiti01100008130801008003001000030450898130058884041130144000388g i

TCT SAIN cscs 5222122212202222272257207222012110210222E022372207E202221:13000222022711387E21:2210: iiDANH MỤC VIET TAT .cccsscsessessesssessesvensessessesvsssnsreesenssarenstentnetareensnrsarvarneeteananees iiiDANH MUƯGHINHANH s ê iv

DANH MỤC SƠ ĐỒ osaoniioooa-aanriia-nnnniidiiidiiiiiiiiiiiiSH40001000850003038885800388 V

BNHIMO ĐAU scsi sntisios201056005111001062116200921011109331100011211921013016711036093111131163112311631131002315 I

0/009) 06000(09)0019)090 S7 3

1.1 Khái quat và ứng dụng của vanillic acid c.cccccccccccctceseeenestecnsterseccesteeennens 3 1.2 Khái quát và ứng dụng của E-vaÌinee - - - ss te sen eeexke 4

1.3 Khái quát về hợp chất atmide 2-2-2222 222212211 2117211721721723721222 xe 6

1:3.1 Ứng dụng của hop Chat amide ssccsssssisssssscssscssecsssasssaiisnssssssiscssssassasasesionii 6 1.3.2 Tông hợp các hợp GHHEATHIUE- 6 55s:222005212122032106-1002231222-2163221132121323316821) 8

CTU 2 THỊ NGHIẾN Gieeereaeieeeaeoereneiaooroarooanenrnnune 12

Oe GHẾP saeeniinniiinirniittiiiiiittiiiist021153010088B85008505800018080800513800308800132388800Đ 122.2 Phương pháp nghiên cứu và xác định cau trúc các hợp chất tong hợp được 12

2.2.1 Phô cộng hưởng từ hạt nhân 'H-NMR và '3C-NMR - 12

2.2.2 PhO khôi lượng HRMS - 22-222 2022112211121111112 2122220222222 ee 12

2.3 Quy itrinh hye NEHISM :.cciscisierssesssecsseessessisnsiesessnassscssiesdsasiscsisesssscsseassecsias 12

2.3.1 Tong hợp dẫn xuất amide từ vanillic acid và amine -.- 122.3.2 Tông hợp dẫn xuất amide từ vanillic acid, Boc-L-valine va amine 13

CHUONG 3: KET QUA VÀ THẢO LUẬN 252222222222 ccsccccsreee 16

3.1 Phan ứng ghép cặp amide của vanillic acid và các amine - 16

3.2 Phan ứng ghép cặp amide của vanillic acid, Boc-L-valine và các amine 17

CHUGNG 4: KET LUẬN = KIÊN NGHỊ, ii 20

A IR CHẾT see 2ptnsc se rprrereatrietipeererrrittittircosicl†EEiEESirEEEi1E2EEritrStfÐreEseresrerstt 20

Ve HT sac ntexnictrertte+t003109200860310210586153000931010010035/281095170510123302210221022L0020225 20TÀI LIEU THAM KHẢO 22s S21 2 911121811211 21211 1121 111112 111101112121 xC 21

LỜI CẢM ƠN

Em xin gửi lời cảm ơn chân thành và bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc của mình đến

TS Lê Tín Thanh vì những kiến thức vả kinh nghiệm ma cô đã truyền đạt cho em

trong suốt quá trình học tập tại trường Em cảm ơn cô vì đã là một người truyền lửa, truyền cảm hứng cho em từ những budi học lí thuyết đầu tiên, dan đắt em theo chuyên

ngành hóa học hữu cơ cũng như hướng dẫn tận tinh dé em có thé hoàn thành khóa

luận tốt nghiệp của mình

Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến quý thay, cô giảng viên Khoa Hóa học —

trường Đại hoc Sư Phạm Thành phố Hỗ Chí Minh vì những bai học từ lí thuyết đến

thực hành, những kiến thức và kinh nghiệm quý bau ma thầy cô đã giảng dạy cho em

trong quá trình học tập và rèn luyện tại trường.

Em cũng xin gửi lời cảm ơn đến các anh, chị học viên cao học và các bạn sinhviên trong Phòng thí nghiệm Tổng hợp Hữu cơ M.305 đã giúp đỡ em rất nhiều trongquá trình thực hiện và hoàn thiện đề tài Cảm ơn chị Lê Thanh Vy và bạn Nguyễn Thị

Mỹ Hiền vi đã luôn đồng hành, động viên cũng như giúp đỡ em rất nhiều trong quá

trình thực hiện dé tài Em cũng xin gửi lời cảm ơn đến gia đình và bạn bè vì đã luôn

tin tưởng, ủng hộ va bên cạnh em trong suốt hảnh trình vừa qua.

Do thời gian làm thực nghiệm và kinh nghiệm của bản thân em chưa đủ nhiều

cũng như chủ quan cá nhân trong quá trình thực hiện đề tải mả không thẻ tránh khói

sự thiểu sót Em rat mong nhận được những nhận xét và đánh giá của thầy cô dé khắcphục những hạn chế và thiếu sót trong bai báo cáo khóa luận của minh và đó cũng sẽ

là bài học kinh nghiệm cho bản thân trong chặng đường học tập và làm việc sắp tới.

Một lần nữa, em xin chân thành cảm ơn

TP HCM, tháng 05 năm 2024

Đảo Hồng Quyên

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan những kết quả thu được trong đè tài này dưới sự hướng dẫn

khoa học từ TS Lê Tin Thanh là do chính ban thân thực hiện từ đầu đến cuỗi, không

có người làm hộ và cũng không có bat kỳ sự sao chép nào từ các công trình nghiên cứu và dé tài khác.

Những nhận xét, đánh giá hay kết quả của các tác giả khác trong khóa luận nàyđều được trích dẫn và chú thích đầy đủ theo đúng quy định

Nếu có bất kỳ sự gian lận nảo, tôi xin hoàn toàn chịu trách nhiệm.

TP HCM, tháng 05 năm 2024

Dao Hong Quyên

Trifluoroacetic acid

Tetrahydrofuran

DANH MUC HINH ANH

Hình 11.1), CA tet của vanillle: 46lll -ssessassnssnaninriniinsnisninliisnrsiisaisse 3

Hiilili2./E50iif©iE0atfzVNiiiEssnssiniutrieiniettiegiil0108046211300883151500381018011931042018281400836 5

Hình 1.3 Cau trúc các hợp chat chứa liên kết amide 22z+2cz+zzzsccee 7

Hình 1.4 Dẫn xuất VA -06 của Ligustrazine-vanillic acid :5s:5:s 26 8Hình 1.5 Cấu trúc các tác nhân ghép cặp amide thường dùng -. 9

DANH MỤC SƠ ĐỎ

Sơ đô 1.1 Quy trình tông hợp dẫn xuất amide 3a và 3g từ vanillic acid §

Sơ đô 1.2 Phan ứng tạo dẫn xuất amide từ amine và carboxylic acid sử dụng xúc tác

B0TGII:86Ì0::::-::::::22i:222222102220223172211033123216315833103335953823366335135333558335383359552239523355352892388 10

Sơ đô 1.3 Quy trình và các dẫn xuất amide tông hợp được 10

So dé 1.4 Phan ứng tong hợp dẫn xuất amide từ Boc-L-valine và

4-amino-N-(4-methoxvbenzy])benzarmide c1 cv nh n1 n1 HH nh nh 1x9 1]

Sơ đồ 2.1 Phan ứng tong hop dẫn xuất amide từ vanillic acid va các amine 13

Sơ đô 2.2 Phản ứng tổng hợp dẫn xuất amide từ vanillic acid, Boc-L-valine và các

LOI MO DAU

Ngày nay, các van dé về sức khỏe ngảy cảng được quan tâm bởi sự biến đôi khí

hậu và các van đề môi trường khác đã và đang tác động trực tiếp lên sức khỏe con

người Việc tìm kiểm những loại thuốc mới, những hợp chất có hoạt tính sinh học

phục vụ cho việc tăng cường khả năng đề kháng hoặc điều trị các bệnh do vi sinh vật,virus gây ra cũng đang được chú ý Minh chứng cho điều đó có thé nhắc tới đại dichCovid- 19 đã xảy ra trong những năm gan đây, bên cạnh việc điều trị và phòng chồngdai dich thì việc chạy dua với thời gian dé tim ra những hợp chất có khả năng chéng

lại virus lây lan và điều trị đứt điểm bệnh lúc đó cũng trở thành một van đẻ nan giải.

Do đó, việc tim kiếm những hợp chất mới có hoạt tính sinh học và tác dụng diệt khuấn, diệt nam hay các loại vi sinh vật, virus hiện nay đang ngày càng được quan

tâm và chú trọng.

Các hợp chất chứa liên kết amide có mặt trong hau hết các protein đóng vai tròkhông thé thiếu đối với con người, các liên kết này cũng xuất hiện trong các khángsinh hay những hợp chất có tác dụng để kháng hoặc điều trị bệnh cho con người Các

nghiên cứu trong những năm gần đây cũng đã cho thấy những công dụng tuyệt vời của các hop chất chứa liên kết amide như tác dụng kháng nam kháng khuẩn hay

kháng các loại virus, vi sinh vật được tổng hợp ngay trong phòng thí nghiệm bằng

những phương pháp tông hợp hóa học vốn có Phương pháp tông hợp từ các hợp chất

đơn giản nhưng có hoạt tính sinh học đang ngày càng được quan tâm Việc tìm hiểu

và lựa chọn cũng dựa trên những mong muốn vé tác dụng điều trị, phòng ngừa bệnh

mà các hợp chat sau khi tong hợp mang lại Quy trình tổng hợp đi từ những carboxylic

acid và amine có sự tham gia của các chất xúc tác được thực hiện ngay tại nhiệt độ phòng thí nghiệm có thê tạo ra những dẫn xuất amide mới mang lại tiêm năng về hoạt

tính sinh học và các tác dụng điều trị bệnh khác.

Vanillic acid là một phenolic acid thơm được tìm thấy trong dịch chiết xuất từcác loại cây, nam Vanillic acid cùng với một số hợp chất khác trong cây có khả năng

điều trị những chứng bệnh thường gặp ở con người Các nghiên cứu cũng đã cho thay

được bên cạnh những tác dụng trên thì vanillic acid cũng có các tác dụng kháng viêm,

tiem năng về kháng ung thư hay có tác dụng hỗ trợ điều trị các bệnh về gan, than

kinh Từ đó cho thấy được tiềm năng không nhỏ của vanillic acid trong y học.

Trên cơ sở lý luận và thực tiễn được phân tích ở trên, dé tài “Tổng hợp dẫnxuất amide mới của vanillic acid và amino acid” được thực hiện với mục đích nghiêncứu tông hợp các hợp chất amide mới từ nhiều dẫn xuất amine khác nhau khi kết hợp

với vanillic acid với mong muốn những hợp chat này có tính ứng dụng về hoạt tinh

sinh học cũng như các khả năng điều trị, phòng chống bệnh do vi sinh vật, virus gây

ra.

CHƯƠNG 1: TONG QUAN1.1 Khái quát và ứng dụng của vanillic acid

Vanillic acid (4-hydroxy-3-mcthoxybenzoic acid) (Hình J.J) là một phenolic

acid thơm có khối lượng phân tử 168.1480 g/mol, là chất rắn có màu hơi vàng.

Vanillic acid là sản phẩm của vanillin khi bị oxy hóa va cũng là hợp chất trung giantrong quá trình sản xuất vanillin từ ferulic acid [1] Vanillic acid có mùi hương déchịu, được sử dụng làm chat tạo hương vị trong ngành công nghiệp thực phẩm [2]

Hình 1.1 Cấu trúc của vanillic acid

Vanillic acid được chiết xuất từ nhiều loại cây thuốc, đặc biệt thu được lượng

lớn từ rễ cây Angelica sinensis [3] Day là một loại cây thuộc họ Hoa tán lâu năm, rễ

của cây (còn có tên là Radix Angelica sinensis) là một loại thuốc truyền thống ở Trung Quốc, được sử dụng để bô máu và tiếp thêm sinh luc, giảm đau, cũng như điều trị

kinh nguyệt không đều và vô kinh ở phụ nữ [4] Vanillic acid được hình thành bởi

quá trình trao đôi chất thứ cấp ở thực vật có trong 6 liu, ngũ cốc nguyên hat, trái cây.

trà xanh, v.v Đây là những thành phan cần thiết của chế độ ăn uống hằng ngày

Vanillic acid cũng giúp giảm căng thang nhờ khả năng chong oxy hóa của nó [2]

Trong một nghiên cứu khác của Ayano Itoh và các cộng sự vào năm 2009 cũng

đã cho thấy vanillic acid chiết xuất từ cây nam Lentinula edodes (nam hương) có tác dụng bảo vệ gan và có thé ngăn chặn tình trạng xơ hóa gan trong chan thương mãn

tính [5].

Bên cạnh đó, vanillic acid và một số hợp chất khác được tìm thấy trong cây

Clerodendrum petasites đã được xác định có khả năng chống viêm, chống ung thư,

có tác dụng chóng tiêu xương vả chong bệnh Alzheimer [6] Một nghiên cứu khác đãcho thay rằng B-Amiloid (AB) gây ra stress và góp phan tiến triển bệnh của bệnhAlzheimer Nghiên cứu đã xác định sử dụng vanillic acid trong quá trình điều trị làm

giảm viêm do Af 1-42 gây ra, đồng thời cải thiện nhận thức than kinh, không gây độc

tế bào và tăng khả năng sống sót cho tế bào thần kinh giúp giảm bệnh Alzheimer [7].

Một nghiên cứu năm 2015 về tác dụng bảo vệ than kinh của vanillic acid đối với sự thoái hóa thần kinh do streptozotocin gây ra ở chuột thông qua các thông số hành vi và sinh hóa cho thấy vanillic acid đã cải thiện khả năng duy trì trí nhớ so với động vật đối chứng và sự giảm acetylcholinesterase, TNF-a va corticosterone với các

chat chống oxy hóa được cải thiện dé góp phan bảo vệ thần kinh [8]

1.2 Khái quát và ứng dụng của L-valine

L-Valine là một trong số ba amino acid chuỗi nhánh (Branched-chain amino

acids — BCAAs) gồm valine, isoleucine va leucine được tổng hợp hau hết bởi vi

khuẩn, nam và thực vật Các amino acid này thường nam trong lõi của protein, đóngvai trò quan trọng trong việc xác định cấu trúc các protein hình cầu cũng như trong

sự tương tác giữa các miễn xuyên màng của protein màng với lớp phospholipid kép.

Đây cũng là các amino acid thiết yếu, là thành phần chính trong chế độ đỉnh đưỡng

của con người và động vật [9] [10] được ứng dụng làm chất phụ gia cho thực phẩm

và thức an chăn nuôi, sử dụng trong điều trị y tế và là tiền chất tông hợp sinh hóa

[L1].

Bên cạnh đó, các amino acid này còn được sử dụng trong được pham, chính nhờ

khả năng làm giảm quá trình phân hủy protein trong cơ cũng như thúc đây quá trìnhtông hợp protein trong cơ xương và ngăn ngừa tình trạng mỏi cơ sớm mà chúng được

sử dụng trong các sản phẩm dinh dưỡng dành cho những người thường xuyên chơi

thê thao [12], [13] Những amino acid này cũng được ứng dụng trong lĩnh vực y học,rat cần thiết cho chức nang miễn dịch của các tế bào, có thé cải thiện kha ning miễn

địch cho những bệnh nhân sau phẫu thuật hoặc những bệnh nhân bị nhiễm trùng huyết

[14].

L-valine ((2§)-2-amino-3-methylbutanoic acid) (H»ï 7.2) là amino acid thuộc

họ pyruvate, có công thức phân tử là CsH¡;NO: với khối lượng phân tử 117.1480

g/mol, có một đồng phân là D-valine ((2R)-2-amino-3-methylbutanoic acid) L-valine

đóng vai trò như một chất dinh dưỡng, vi chất đỉnh dưỡng và là chất chuyên hóa ở

người và các loại tảo.

oor

NH

Hình 1.2 Cấu trúc của L-valine

Vẻ ứng dụng, L-valine được ứng dụng trong nhiều lĩnh vực khác nhau như thực

pham, thức ăn chăn nuôi, mỹ pham và được phẩm L-valine được sử dụng rộng rãi

trong dược phẩm như một thành phan của dich truyền amino acid thế hệ thứ ba có

khả năng chịu đựng cao trong quá trình tông hợp và phân hủy protein trong cơ [15],

nó đóng vai trò quan trong trong việc cung cấp chất dinh dưỡng cho những bệnh nhân

mắc bệnh gan mãn tính [16]

Zhang va cộng sự đã phân lập được L-valine từ môi trường nuôi cay Streptomyces jitjiangensis JXI 0074(T) cho thay duge kha nang chéng lai

Mycrocystis aeruginosa — một loại vi khuân lam nước ngọt có khả năng gây hại cho

con người gây ra các triệu chứng như sốt cao, khó thở, buồn nôn hoặc thậm chí là

ảnh hưởng đến nội tạng va thần kinh Đây cũng là báo cáo đầu tiên cho thay L-valine

có khả năng chống lại vi khuẩn lam [17]

Một nghiên cứu năm 2017 đã cho thấy L-valine có khả năng thúc đây quá trình

thực bảo dé tiêu điệt các mam bệnh vi khuân đa kháng thuốc [18] L-valine kích hoạt con đường PI3K/Aktl và thúc đây sản xuất NO thông qua việc ức chế hoạt động

arginase Từ đó có thé cho thấy L-valine làm tăng khả năng thực bào của đại thực bào

làm giảm lượng mầm bệnh Nghiên cứu cũng cho thay tác dụng này cua L-valine

không chỉ giới hạn ở Klebsiella pneumoniae mà còn bao gồm các chủng Escherichia

coli phân lập lâm sàng trong các mô bị nhiễm bệnh.

Bên cạnh đó, L-valine còn được sử dụng làm phôi tử để vận chuyên các hạt nano

poly(lactic-co-glycolic acid) mang insulin với mục đích cung cấp insulin qua đường uống [19] Không những vậy, nó còn có hoạt tính kích thích và là tiền chất của con đường sinh tổng hợp Penicillin [20] Người thiếu L-valine có thé bị anh hưởng đến

sự phát triên của cơ thê, gây ra các trở ngại về thân kinh và gây thiêu máu.

1.3 Khái quát về hợp chất amide

Liên kết amide — còn được gọi liên kết peptide — đóng vai trò quan trọng trong câu trúc của protein và các quá trình sinh học Chúng tạo nên chuỗi polypeptide trong

protein, giúp protein thực hiện các chức năng sinh học như xúc tác enzyme, vậnchuyên, lưu trữ bảo vệ miễn dịch và hỗ trợ cơ học Amide cũng đóng vai trò quan

trọng trong y học vì sự xuất hiện của chúng trong nhiều hợp chất khác nhau đã mang lại những hoạt tính sinh học, hỗ trợ cho việc điều trị nhiều loại bệnh khác nhau như

sử dụng làm thuốc giảm đau, thuốc chống viêm, chống vi khuẩn, virus Bên cạnh đó,liên kết amide cũng xuất hiện trong các kháng sinh tự nhiên hay bán tông hợp từ cáccon đường sinh học Các kháng sinh này có thé có một hay nhiều liên kết amide giúpchúng có kha năng chống lại sự phát triền của vi khuẩn và một số loại nam

1.3.1 Ứng dụng của hợp chất amide

Tam quan trong của hợp chat amide duge thé hién qua sự hiện điện của liên kết amide trong các hợp chất sử dụng trong hóa chất nông nghiệp, thuốc trừ sâu, polymer,

được phẩm [21], bao gom khoang 25% thuốc có sẵn trên thị trường [22] Bên cạnh

đó liên kết amide có tam quan trọng đặc biệt trong việc hình thành peptide, protein

và vô sé phân tử sinh học khác [23] Có thé nói, phản ứng tông hợp các dẫn xuấtamide là một trong những phản ứng quan trọng nhất trong tông hợp hữu cơ hiện nay

Trong một nghiên cứu năm 2011 người ta ước tính rằng có 16% tông số cácphản ứng liên quan đến quá trình tong hợp được phẩm hiện đại là acyl hóa amine,

khiến phản ứng tạo thành amide trở thành phản ứng được thực hiện phô biến nhất

trong lĩnh vực này [24] Các polymer được tạo thành dựa trên liên kết amide được

ứng dụng nhiều tử các vật dụng làm từ nylon đến những ứng dụng tiên tiền hơn trong

hệ thống phân phối thuốc, chất kết dính và chữa lành vết thương [25].

Trong y học, amide hiện diện trong nhiều nhóm thuốc quan trọng như xuất hiện

trong các kháng sinh Penicillin, Chloramphenicol có tác dụng chống lại vi khuẩn và

các loại nắm; có mặt trong Methotrexate — là một tác nhân hóa trị liệu và chất ức chế

miễn dịch sử dụng trong điều trị ung thư; Neratinib — tên thương mại là Nerlynx — là

một thuốc chống ung thư ức chế tyrosine kinase; một hợp chất khác cùng nhóm ức

chế tyrosine kinase là Afatinib — tên thương mai là Gilotrif — sử dụng điều trị ung thư

phôi không tế bào nhỏ (NSCLC); Brivaracetam — tên thương mại là Briviact — là một

dẫn xuất racetam có khả năng chồng co giật (động kinh); Atorvastatin — một hoạt chat trong nhóm thuốc statin - điều trị mỡ máu cao, giảm nguy cơ mắc các bệnh tim mạch;

ngoài ra liên kết amide còn xuất hiện trong Aliskiren — tên thương mại là Rasilez —dùng trong điều trị tăng huyết áp: Saquinavir sử dụng trong điều trị HIV/AIDS: hay

gan gũi nhất là trong thuốc hạ sốt, giảm đau thường gặp như Paracetamol (Hình 1.3)

Một nghiên cứu năm 2017 cho thay rằng các dẫn xuất của Ligustrazine-vanillic

acid có khả năng chéng lại độc tinh thân kinh do CoCl› gây ra ở các tế bào PC12 [28].

Khi thực hiện ester hóa nhóm carboxylic acid của vanillic acid thành các liên kếtamide, kết quả thu được là các hợp chất có khả năng tăng cường hoạt động bảo vệthan kinh Nghiên cứu đã tông hợp được 20 dẫn xuất amide từ việc ghép Ligustrazine-

vanillic acid với các amine khác nhau và cũng cho thấy được hợp chất VA-06 (Hình

1.4) có tác dụng bảo vệ thần kinh cao nhất với giá trị ECs¿ là 17.39 + 1,34 pM.

Trong một nghiên cứu năm 2021, N Gupta và cộng sự đã tiến hành tổng hợp

các dan xuất amide từ vanillic acid dé làm thuốc hạ đường huyết mạnh bằng đường

uống ngăn ngừa bệnh tiêu đường (Sơ đỏ 1.1) [29] Thí nghiệm sử dung #-amylase và

a-glucosidase dé xác định hoạt tính của các dẫn xuất tông hợp được Các nòng độ

khác nhau của các dẫn xuất amide từ vanillic acid được thử nghiệm khả năng ức chế

cho giá trị ICso là 3.71 và 4.56 mM cho hợp chất 3a, 4.92 và 5.35 mM cho hợp chất

3g đối với z-amylase và ø-glucosidase thấp hơn so với một số chất tương tự khác và

chất đối chứng dương 1a acarbose.

fe)

Ow Z : l6) fe] H