NGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNG

NGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNGNGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA, ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNG

NCS ĐỖ THỊ LAN PHƯƠNG

NGHIÊN CỨU BỆNH GẠO LỢN DO ẤU TRÙNG

Cysticercus cellulosae GÂY RA TẠI TỈNH SƠN LA,

ĐIỆN BIÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNG

Ngành: Ký sinh trùng và Vi sinh vật học Thú y

Mã số: 9.64.01.04

TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ THÚ Y

Thái Nguyên, 2020

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN

Người hướng dẫn khoa học: 1 GS TS Nguyễn Thị Kim Lan

Vào hồi giờ ngày tháng năm 2020

Có thể tìm hiểu luận án tại:

- Thư viện Quốc gia

- Trung tâm học liệu Đại học Thái Nguyên

- Thư viện Trường Đại học Nông Lâm – ĐH Thái Nguyên

CÓ LIÊN QUAN ĐẾN ĐỀ TÀI LUẬN ÁN

1 Đỗ Thị Lan Phương, Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Thị Ngân (2019), “Tình hình

mắc bệnh gạo (Swine Cysticercosis) trên đàn lợn tại một số huyện của tỉnh Điện Biên”, Tạp chí Khoa học và Công nghệ Đại học Thái Nguyên, tập 202, số

9, tr 23 - 28

2 Nguyễn Thị Kim Lan, Đỗ Thị Lan Phương, Phan Thị Hồng Phúc, Nguyễn Thị

Ngân, Phạm Diệu Thùy (2018), “Nghiên cứu nhiễm ấu trùng Cysticercus

cellulosae trên lợn tại tỉnh Sơn La”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, tập

XXV, số 5, tr 56 - 64

3 Nguyen Thi Kim Lan, Do Thi Lan Phuong, Phan Thi Hong Phuc, Pham Dieu

Thuy, Đao Van Cuong (2018), “A Study on the Prevelence of Cysticercus

cellulosae in pig of Son La Province, Viet Nam”, Saudi J Med Pharm Sci 4

(5), pp 587 - 591

MỞ ĐẦU

1 Tính cấp thiết của đề tài

Bệnh gạo lợn do ấu trùng Cysticercus cellulosae (C cellulosae) là một bệnh truyền lây giữa động vật và người Ở Việt Nam, bệnh do ấu trùng C cellulosae có

ở hầu hết các tỉnh, thành trong cả nước, đặc biệt là các tỉnh miền núi phía Bắc Tỷ

lệ lợn nhiễm ấu trùng C cellulosae bình quân ở miền Bắc Việt Nam là 1,0 - 7,2%, ở

miền Nam là 4,3% (De N.V., 2004, De N.V and Le T H 2010)

Khi lợn mắc bệnh, ấu trùng C cellulosae gây tác hại rõ rệt tới sức khỏe của

lợn Phần lớn lợn mắc bệnh bị còi cọc và chậm lớn Nếu ấu trùng ký sinh ở não thìlợn có triệu chứng thần kinh, lợn đi lại mất thăng bằng Nếu ấu trùng ký sinh ở lưỡi,

có thể thấy liệt lưỡi và hàm (Nguyễn Thị Kim Lan và cs., 1999, Phạm Sỹ Lăng vàPhan Địch Lân, 2011)

Sán dây Taenia solium ký sinh ở ruột non người Ngoài bệnh do sán dây trưởng thành gây ra, người còn bị bệnh ấu trùng sán dây Ấu trùng C cellulosae

ký sinh ở nhiều vị trí khác nhau trong cơ thể người: cơ, mắt, tim, não… Nguyhiểm nhất là neurocysticercosis - một chứng bệnh gây co giật, sùi bọt mép, hôn mê

và tử vong

Trong những năm gần đây, nghề chăn nuôi lợn rất phát triển ở các tỉnh, thànhphố trong cả nước Tuy nhiên, nhiều hộ gia đình ở miền núi vẫn nuôi lợn theophương thức nhỏ lẻ, nhiều hộ gia đình vẫn chưa có nhà vệ sinh Ngoài ra, việc kiểmsoát giết mổ lợn ở các địa phương chưa được thực hiện nghiêm ngặt, đồng thời việckiểm tra, phát hiện người mắc bệnh sán dây để điều trị còn chưa được tiến hành triệt

để khiến bệnh vẫn lưu hành ở nhiều địa phương trong cả nước, đặc biệt là ở các tỉnhmiền núi, trong đó có tỉnh Sơn La và Điện Biên

Theo nhiều tác giả, bệnh gạo lợn là loại bệnh khó phát hiện, việc chẩn đoánbệnh trên con vật sống rất khó khăn vì triệu chứng bệnh không điển hình, bệnh gâythiệt hại về kinh tế và nguy hiểm hơn là dễ truyền lây sang người

Những vấn đề trên cho thấy, việc nghiên cứu bệnh gạo lợn và biện phápphòng chống hiệu quả tại tỉnh Sơn La và Điện Biên là rất cần thiết

2 Mục tiêu của đề tài

Xác định đặc điểm bệnh gạo lợn do ấu trùng C cellulosae gây ra tại tỉnh Sơn

La và Điện Biên Xác định nguy cơ lợn mắc bệnh gạo do ấu trùng C cellulosae gây

ra theo tập quán chăn nuôi tại tỉnh Sơn La và Điện Biên Đề xuất được biện phápphòng chống bệnh gạo lợn, từ đó phòng chống bệnh sán dây và bệnh ấu trùng sándây cho người

Kết quả của đề tài góp phần làm thay đổi nhận thức và tập quán sinh hoạt,phương thức chăn nuôi của bà con các dân tộc vùng núi phía Tây Bắc

3 Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài

3.1 Ý nghĩa khoa học

Kết quả của đề tài là những thông tin khoa học về đặc điểm dịch tễ bệnh gạolợn tại tỉnh Sơn La và Điện Biên, đặc điểm về bệnh lý và lâm sàng của bệnh, biện

pháp phòng chống bệnh hiệu quả, xây dựng được bản đồ dịch tễ sự lưu hành bệnhgạo ở lợn, có một số đóng góp mới cho khoa học.

3.2 Ý nghĩa thực tiễn

Kết quả của đề tài là cơ sở khoa học để khuyến cáo người chăn nuôi lợn ápdụng các biện pháp phòng chống bệnh gạo ở lợn, nhằm hạn chế tỷ lệ mắc bệnh,góp phần phát triển đàn lợn, đồng thời giảm nguy cơ mắc bệnh sán dây và bệnh ấutrùng sán dây ở người

4 Những đóng góp mới của đề tài

- Đề tài là công trình nghiên cứu có hệ thống về đặc điểm dịch tễ, bệnh lý vàlâm sàng bệnh gạo ở lợn tại tỉnh Sơn La và Điện Biên

- Đề xuất được biện pháp phòng chống bệnh gạo cho lợn có hiệu quả,khuyến cáo và áp dụng rộng rãi tại các hộ chăn nuôi lợn trên địa bản tỉnh Sơn La,Điện Biên và các tỉnh khác

- Xây dựng được bản đồ dịch tễ sự lưu hành bệnh gạo ở lợn tại tỉnh Sơn La

và Điện Biên

5 Cấu trúc của luận án

Luận án gồm 167 trang (nội dung chính), được chia thành 3 chương: mở đầu(3 trang); chương 1: Tổng quan tài liệu (34 trang); chương 2: Vật liệu, nội dung vàphương pháp nghiên cứu (17 trang); chương 3: Kết quả nghiên cứu và thảo luận:(54 trang); Kết luận và đề nghị (3 trang)

Tài liệu tham khảo (12 trang); Hình ảnh của đề tài (16 trang); Phụ lục (27 trang).Luận án có 36 bảng, 20 biểu đồ và đồ thị, 2 bản đồ, 88 ảnh màu thể hiện cáckết quả của đề tài, 132 tài liệu tham khảo (51 tài liệu tiếng việt, 81 tài liệu tiếngnước ngoài, trong đó 30,30% là tài liệu từ năm 2015 - 2019)

Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

Sán dây T solium có chu kỳ sống phức tạp Người là vật chủ cuối cùng duy nhất của sán dây T solium, cả người và lợn đều đóng vai trò là ký chủ trung gian

Lợn nhiễm ấu trùng C cellulosae do ăn thức ăn, nước uống có lẫn đốt hoặc trứng sán dây T solium được thải ra theo phân của những người nhiễm sán dây

(Bouteille B., 2004; Satyaprakash K., 2018)

Ấu trùng C cellulosae có thể ký sinh ở bất cứ vị trí nào trong cơ thể lợn

hoặc người, như: tổ chức liên kết, tổ chức mỡ, cơ cổ, cơ mông, cơ tim, cơ liênsườn, cơ lưỡi, não, mắt, ít gặp ở cơ quan nhu mô Trường hợp nhiễm nặng thấy ấutrùng ở cả các cơ quan nhu mô của cơ thể vật chủ (Phạm Văn Khuê và Phan Lục,1996; Chu Thị Thơm và cs., 2006; Phan Lục, 2006)

Khi lợn nhiễm ấu trùng C cellulosae nhẹ thường ít quan sát thấy dấu hiệu lâm

sàng, lợn dường như vẫn khỏe mạnh bình thường (Trevisan C và cs., 2016)

Mổ khám lợn bị bệnh thường thấy ấu trùng ký sinh ở tổ chức cơ vân, chèn

ép các mao mạch, gây trở ngại tuần hoàn, gây tụ huyết; chèn ép thần kinh gây bại

liệt Ấu trùng cũng gây ra các ổ viêm xơ hóa ở cơ và các tổ chức mà nó ký sinh(Nguyễn Thị Kim Lan, 2012).

Chẩn đoán bệnh do ấu trùng C cellulosae gây ra ở lợn không thể căn cứ vào

triệu chứng lâm sàng, vì triệu chứng của bệnh không điển hình Để chẩn đoánchính xác bệnh gạo ở lợn, cần mổ khám tìm ấu trùng ký sinh ở các cơ của lợn.Cũng có thể chẩn đoán bệnh bằng phương pháp huyết thanh học (Nguyễn Thị Kim

cs., 2016)

Để phòng bệnh gạo cho lợn nuôi ở phía Đông, Nam và Tây của Zambia, cầnhạn chế làm nhà vệ sinh cho người một cách tạm bợ, vì lợn có thể tiếp cận dễ dàng với

phân người và mắc bệnh ấu trùng C cellulosae (Sikasunge C.S và cs., 2008).

Ngoài ra, nuôi nhốt lợn trong chuồng, đồng thời xây dựng chuồng nuôi lợncách xa khu nhà ở cũng là biện pháp phòng bệnh gạo cho lợn một cách hiệu quả(Zirintunda G và Ekou J., 2015; Madinga J và cs., 2017)

Tăng cường kiểm soát giết mổ lợn tại các lò mổ Những lợn có ấu trùng

C cellulosae ký sinh phải hủy bỏ, không được dùng thịt của những lợn đó làm

thực phẩm cho người (Lê Bách Quang, 2008; Meester M 2019)

Theo Phạm Sỹ Lăng và Phan Địch Lân (2011), khi phát hiện lợn mắc bệnhgạo cần phải xử lý ngay, có sự giám sát của cơ quan thú y để tránh sử dụng thịt tùytiện, làm lây lan bệnh sang người Nếu điều trị, có thể dùng hai loại thuốc điều trịvới liều lượng như sau: albendazol: liều 30 mg/kg TT và oxfendazol: liều 30mg/kg TT Cho lợn uống trong 3 ngày liên tục, sau 24 ngày ấu trùng sẽ chết(Zirintunda G và Ekou J 2015)

Chương 2 VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 Đối tượng, thời gian và địa điểm nghiên cứu

2.1.1 Đối tượng nghiên cứu

- Lợn các lứa tuổi nuôi ở nông hộ tại 6 huyện thuộc tỉnh Sơn La và Điện Biên

- Bệnh ấu trùng C cellulosae (bệnh gạo) ở lợn.

2.1.2 Tthời gian và địa điểm nghiên cứu

* Thời gian nghiên cứu: 2016 - 2019.

* Địa điểm nghiên cứu:

- Địa phương lấy mẫu: 3 huyện của tỉnh Sơn La (Bắc Yên, Mường La, Mai Sơn)

và 3 huyện của tỉnh Điện Biên (Mường Ảng, Tủa Chùa, Nậm Pồ)

- Địa điểm xét nghiệm mẫu: Phòng thí nghiệm Trường Đại học Nông LâmThái Nguyên, Viện Công nghệ sinh học, Viện Khoa học sự sống Đại học TháiNguyên, Viện sốt rét - Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ương, Bệnh viện Đa khoaTrung ương Thái Nguyên

2.2 Vật liệu nghiên cứu

2.2.1 Động vật và các loại mẫu nghiên cứu

* Động vật nghiên cứu:

- Lợn các lứa tuổi nuôi ở nông hộ tại tỉnh Sơn La và Điện Biên (xác định tỷ

lệ nhiễm ấu trùng C cellulosae).

- Lợn lai F1 (Landrace x Móng Cái), 2 tháng tuổi, khỏe mạnh, khối lượng

17 - 18 kg/con: 41 con (trong đó có 21 con bố trí thí nghiệm nghiên cứu đặc điểmbệnh lý và lâm sàng; 20 lợn bố trí thử nghiệm thuốc điều trị bệnh gạo)

Toàn bộ số lợn thí nghiệm được sinh ra từ lợn mẹ khỏe mạnh, nuôi dưỡngtrong môi trường đảm bảo vệ sinh thú y, ăn hoàn toàn thức ăn tổng hợp; lợn consinh ra được quản lý, nuôi dưỡng và vệ sinh thú y nghiêm ngặt, kết quả xét nghiệm

huyết thanh bằng bộ Kit ELISA Taenia solium âm tính.

* Mẫu nghiên cứu: mẫu sán dây T solium; mẫu máu lợn mắc bệnh gạo do

gây nhiễm và mẫu máu lợn khỏe; mẫu tim, gan, phổi, thận, lách, ruột, não, mắt của

lợn gây nhiễm và các mẫu tương ứng ở lợn khỏe

2.2.2 Dụng cụ, thiết bị và hóa chất

Máy giải trình tự gen tự động, máy cắt tế bào Microtom; máy Celltac Fphân tích các chỉ tiêu sinh lý máu; máy AU 480 xét nghiệm sinh hóa máu; tủ lạnhđiều chỉnh được nhiệt độ âm; kính hiển vi quang học, kính lúp; bộ kit ELISA

Taenia solium của hãng Scimedx/Mỹ; Bộ hóa chất làm tiêu bản vi thể, thuốc

nhuộm Hematoxilin - Eosin, cồn 70o, 90o Các hóa chất và dụng cụ thí nghiệm khác

2.3 Nội dung nghiên cứu

2.3.1 Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh gạo lợn do ấu trùng Cysticercus cellulosae gây ra tại tỉnh Sơn La và Điện Biên

- Thực trạng nhiễm ấu trùng Cysticercus cellulosae ở lợn tại một số huyện của

tỉnh Sơn La và Điện Biên

- Thực trạng nhiễm sán dây Taenia solium ở người tại một số huyện của tỉnh

Sơn La và Điện Biên

- So sánh nguy cơ lợn bị nhiễm ấu trùng Cysticercus cellulosae theo tập quán

chăn nuôi của nhân dân ở tỉnh Sơn La và Điện Biên

- So sánh nguy cơ người bị nhiễm sán dây Taenia solium theo thói quen ăn

uống ở Sơn La và Điện Biên

- Xác định tương quan giữa tỷ lệ nhiễm sán dây Taenia solium ở người và tỷ

lệ nhiễm ấu trùng Cysticercus cellulosae ở lợn tại tỉnh Sơn La và Điện Biên.

2.3.2 Nghiên cứu bệnh gạo trên lợn gây nhiễm

- Thẩm định loài sán dây

- Gây nhiễm trứng sán dây Taenia solium cho lợn.

- Theo dõi triệu chứng lâm sàng của lợn mắc bệnh gạo

- Nghiên cứu sự thay đổi một số chỉ tiêu hệ hồng cầu của lợn, hệ bạch cầu

và sinh hóa máu lợn mắc bệnh

- Xác định tổn thương đại thể và vi thể của lợn mắc bệnh gạo

2.3.3 Nghiên cứu một số biện pháp phòng chống bệnh gạo cho lợn

- Xác định thời gian chết của ấu trùng Cysticercus cellulosae

- Thử nghiệm thuốc điều trị bệnh gạo cho lợn gây nhiễm

- Xây dựng bản đồ dịch tễ sự lưu hành bệnh gạo lợn ở tỉnh Sơn La và Điện Biên

2.4 Phương pháp nghiên cứu

2.4.1 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh gạo lợn ở tỉnh Sơn La và Điện Biên

2.4.1.1 Phương pháp nghiên cứu dịch tễ

Sử dụng các phương pháp nghiên cứu dịch tễ học mô tả, dịch tễ học phântích và dịch tễ học thực nghiệm (Nguyễn Như Thanh, 2011)

* Thu thập mẫu: Đã kiểm tra 2.078 lợn giết mổ ở 2 tỉnh Sơn La và Điện

Biên; mỗi tỉnh 3 huyện; mỗi huyện 5 xã Ở mỗi xã, lợn giết mổ được kiểm trangẫu nhiên

* Phương pháp xác định nguy cơ tương đối (Relative Risk - RR):

Xác định nguy cơ gia súc bị mắc bệnh bằng cách tính nguy cơ tương đối(RR) theo Nguyễn Như Thanh (2011)

2.4.1.2 Phương pháp xác định lợn mắc bệnh gạo và thu thập mẫu

- Áp dụng phương pháp mổ khám toàn diện của Skrjabin (1928), kiểm tra

cơ, tim, não, thận, gan, lách của lợn để phát hiện ấu trùng C cellulosae

- Tỷ lệ nhiễm ấu trùng được xác định trên cơ sở đã xác định được những lợnmắc bệnh trong tổng số 2.078 lợn đã mổ khám

- Cường độ nhiễm ấu trùng được xác định bằng số lượng ấu trùng ký sinh/40

cm2 lát cắt cơ của lợn (dựa theo thông tư số 09/2016/TT - Bộ NNPTNT ngày

01/6/2016) Riêng ở não, thận, tim: cường độ nhiễm được tính bằng số ấu trùng

C cellulosae có trên toàn bộ não, thận, tim của mỗi lợn.

2.4.1.3 Phương pháp định danh sán dây Taenia solium

Căn cứ vào khóa định loại của Nguyễn Thị Kỳ (1994) để xác định sơ bộ loàicủa 10 mẫu sán dây đã thu thập từ người mắc bệnh (dựa vào hình thái, cấu tạo đầusán dây và các đốt sán dây trên tiêu bản nhuộm carmin) Từ đó đã xác định được

trong 10 mẫu có 6 mẫu là loài Taenia solium.

Tiếp theo, 6 mẫu sán dây (ký hiệu là SL1, SL2, SL3, ĐB1, ĐB2, ĐB3) đã xác định sơ bộ là loài Taenia solium nói trên tiếp tục được thẩm định bằng kỹ thuật phân tử để khẳng định chính xác là loài Taenia solium

2.4.1.6 Phương pháp điều tra một số tập quán chăn nuôi, sinh hoạt và tình hình nhiễm sán dây của nhân dân tại Sơn La và Điện Biên

Phỏng vấn và ghi phiếu điều tra các hộ dân trên địa bàn nghiên cứu, kết hợp

với các cơ sở y tế địa phương để xác định người bị nhiễm sán dây T solium Tổng

hợp phiếu điều tra và kết quả từ các cơ sở y tế địa phương

2.4.2 Nghiên cứu bệnh do ấu trùng Cysticercus cellulosae gây ra trên lợn

2.4.2.1 Phương pháp gây nhiễm trứng sán dây Taenia solium cho lợn

Bố trí 3 lô thí nghiệm, trong đó có 2 lô gây nhiễm và 1 lô đối chứng, mỗi lô

gồm 7 lợn Lô gây nhiễm I: cho mỗi lợn nuốt 100.000 trứng sán dây T solium; lô

gây nhiễm II mỗi lợn nuốt 150.000 trứng Dùng xi lanh nhựa 5 ml hút dung dịch

nước muối sinh lý 0,9% có trứng sán dây T solium, bơm vào miệng cho lợn nuốt.

Lô đối chứng gồm 7 lợn cho nuốt số ml dung dịch nước muối sinh lý tương đươngvới lô gây nhiễm

2.4.2.2 Phương pháp nghiên cứu thời gian hoàn thành giai đoạn phát triển của

ấu trùng Cysticercus cellulosae trong cơ thể lợn gây nhiễm

Sau khi cho lợn nuốt trứng sán dây T solium, nhốt lợn của mỗi lô thí

nghiệm và đối chứng trong một ô chuồng Mổ khám 1 lợn ở mỗi lô vào các thờiđiểm 15, 30, 45, 60, 75, 90 và 120 ngày để kiểm tra bệnh tích và tìm ấu trùng

C cellulosae Theo dõi thời gian hoàn thành giai đoạn phát triển của ấu trùng

trong cơ của lợn gây nhiễm

2.4.2.3 Phương pháp nghiên cứu sự thay đổi một số chỉ tiêu huyết học và một số chỉ tiêu sinh hóa máu của lợn mắc bệnh gạo do gây nhiễm

- Lấy mẫu máu: Mỗi lợn lấy 01 mẫu máu Đối với lợn gây nhiễm: Bắt đầu từ

ngày thứ 45 sau gây nhiễm, lấy mẫu máu của tất cả số lợn còn sống tại các thời điểmgiết mổ để xác định sự thay đổi một số chỉ tiêu sinh lý và sinh hóa máu của lợn Cụthể: lấy 10 mẫu máu của 10 lợn gây nhiễm vào ngày thứ 45; 8 mẫu máu ở ngày thứ60; 6 mẫu máu ở ngày thứ 75; 4 mẫu máu ở ngày thứ 90 và 2 mẫu máu ở ngày thứ

120 sau gây nhiễm (tổng số 30 mẫu máu)

Đối với lợn đối chứng: Lấy 5 mẫu máu lợn ở ngày thứ 45 sau gây nhiễm; 4mẫu máu ở ngày thứ 60; 3 mẫu máu ở ngày thứ 75; 2 mẫu máu ở ngày thứ 90 và 1mẫu máu ở ngày thứ 120 (tổng số 15 mẫu) Các mẫu máu được xét nghiệm ngaytrong ngày

- Phương pháp xét nghiệm máu: Một số chỉ tiêu hệ hồng cầu, bạch cầu và một

số chỉ tiêu sinh hóa máu được phân tích trên máy Celltac F và AU 480

2.4.2.4 Phương pháp xác định triệu chứng lâm sàng, tổn thương đại thể và vi thể

ở lợn gây nhiễm

- Triệu chứng lâm sàng được xác định bằng cách quan sát những biểu hiệncủa 14 lợn gây nhiễm (thể trạng, ăn uống, da và niêm mạc, vận động, trạng tháiphân, thân nhiệt…) So sánh biểu hiện của lợn gây nhiễm với lợn đối chứng

- Tổn thương đại thể: Mỗi lô mổ khám 1 lợn vào ngày thứ 15, 30, 45, 60, 75,

90 và 120 sau gây nhiễm Tìm ấu trùng C cellulosae ký sinh ở cơ và các khí quan

khác trong cơ thể Quan sát tổn thương bằng mắt thường và kính lúp, chụp ảnhvùng có tổn thương điển hình So sánh với lợn đối chứng mổ khám cùng thời điểm

để thấy sự khác biệt giữa lợn bệnh và lợn khỏe

- Tổn thương vi thể: Nghiên cứu tổn thương vi thể bằng phương pháp làmtiêu bản tổ chức học theo quy trình tẩm đúc paraffin của Robert (1969), Burn(1974), nhuộm Hematoxilin - Eosin, đọc kết quả dưới kính hiển vi quang học vàchụp ảnh

2.4.3 Nghiên cứu biện pháp phòng chống bệnh gạo cho lợn

2.4.3.1 Nghiên cứu khả năng sống của ấu trùng Cysticercus cellulosae

Triển khai 4 thí nghiệm, các thí nghiệm được thực hiện trên mẫu thịt của 14lợn mắc bệnh gạo do gây nhiễm

* Xác định thời gian chết của ấu trùng C cellulosaeở ngoại cảnh trong mùa

hè và mùa đông (đợt 1: mùa hè, đợt 2: mùa đông)

Mỗi đợt thí nghiệm gồm 3 lô, mỗi lô 120 ấu trùng (chia vào 4 đĩa petri, mỗiđĩa 30 ấu trùng) Mùa hè: ở mỗi thời điểm sau 1, 2, 3, 4 giờ; Mùa đông: ở mỗi thờiđiểm sau 1, 2, 3, 4, 5 giờ tiến hành kiểm tra ấu trùng trong 1 đĩa petri để xem ấutrùng còn sống hay đã chết

Cách kiểm tra: Cho ấu trùng vào đĩa petri có chứa dịch mật bò (80%) phavới nước sinh lý (20%), để ở tủ ấm 39 - 40oC trong 15 phút Kết quả: màng ngoài

của ấu trùng bị phân hủy giải phóng đầu sán dây, nếu thấy đầu sán dây khôngchuyển động thì ấu trùng đã chết Từ đó xác định được thời gian chết của ấu trùng

ở ngoại cảnh (Nguyễn Thị Kim Lan, 2012)

* Xác định thời gian chết của ấu trùng C cellulosae trong thịt khi xử lý

bằng nhiệt độ cao (luộc thịt)

Cắt thịt thành 9 mẫu có độ dày 5 cm và 15 mẫu có độ dày 8 cm, khối lượng1,5 - 2 kg Luộc thịt và kiểm tra ấu trùng trong thịt còn sống hay đã chết kể từ thờigian nước luộc thịt bắt đầu sôi (30, 45 và 60 phút đối với các mẫu thịt dày 5 cm;

45, 60, 75, 90 và 105 phút đối với các mẫu thịt dày 8 cm) Mỗi mức thời gian nhưtrên xử lý 3 mẫu thịt (8 mức thời gian xử lý 24 mẫu thịt)

Cách kiểm tra: sau khi nước luộc thịt sôi với mỗi mức thời gian trên, vớt mẫuthịt ra, phân lập những ấu trùng ở sâu trong mẫu thịt, kiểm tra ấu trùng còn sốnghay đã chết theo phương pháp trên

* Xác định thời gian chết của ấu trùng C cellulosaebằng cách bảo quản

thịt ở nhiệt độ thấp -15oC

Bố trí 2 lô thí nghiệm, một lô gồm 12 mẫu thịt của lợn mắc bệnh gạo do gâymhiễm, mỗi mẫu có độ dày 5 cm; một lô gồm 12 mẫu có độ dày 8 cm; khối lượngmỗi mẫu khoảng 1,5 đến 2 kg Để các mẫu thịt vào tủ lạnh, điều chỉnh ở mức nhiệt

độ -15oC Duy trì mức nhiệt độ này trong 2, 3, 4 và 5 ngày Sau mỗi thời điểmtrên, lấy 3 mẫu thịt ở mỗi lô thí nghiệm, phân lập những ấu trùng nằm sâu trongmỗi mẫu thịt để kiểm tra theo phương pháp trên, nếu thấy đầu sán dây khôngchuyển động thì ấu trùng đã chết Từ đó xác định được thời gian cần thiết để diệthết ấu trùng trong thịt ở nhiệt độ -15oC

* Nghiên cứu sức sống của ấu trùng trong thịt hun khói

- Theo dõi thời gian sống của ấu trùng theo cách treo thịt gác bếp tại giađình người Thái

Thịt lợn nạc thái dọc thớ, dày 5 cm, dài 20 - 25 cm Cho thịt vào chậu vàướp muối 4%, trộn đều thịt cho ngấm muối khoảng 25 - 30 phút

Số lượng thịt hun khói là 15 miếng (mỗi ngày kiểm tra 3 mẫu) Thời giankiểm tra sức sống của ấu trùng trong thịt hun khói là sau 1 ngày, sau 2 ngày, sau

3 ngày, sau 4 ngày và sau 5 ngày

Cách kiểm tra: Sau mỗi ngày hun khói, lấy thịt ra, tách ấu trùng, kiểm tra ấutrùng còn sống hay đã chết theo phương pháp trên

- Theo dõi thời gian sống của ấu trùng hun khói trong lò tại cơ sở sản xuấtthịt hun khói Cụ thể như sau:

Thịt lợn nạc thái dọc thớ, dày 5 cm, dài 20 - 25 cm Cho thịt vào chậu vàướp muối 4%, trộn đều thịt cho ngấm muối khoảng 30 phút Cho thịt vào lò hunkhói củi với nhiệt độ 60 - 65oC, trong 24, 48, 72, 96 và 120 giờ, đảm bảo độ ẩmcủa thịt là 45%

Số lượng thịt hun khói kiểm tra là 15 mẫu (mỗi ngày kiểm tra 3 mẫu) Thờiđiểm kiểm tra sức sống của ấu trùng là sau 1, 2 3 ngày, 4 và 5 ngày hun khói

Cách kiểm tra: kiểm tra ấu trùng trong thịt còn sống hay đã chết sau mỗi ngày

hun khói theo phương pháp trên

2.4.3.2 Nghiên cứu phác đồ điều trị bệnh gạo cho lợn

* Phương pháp đánh giá hiệu lực của phác đồ điều trị bệnh gạo ở lợn

a) Bố trí thí nghiệm đánh giá hiệu lực của phác đồ điều trị bệnh gạo trên lợn gây nhiễm

Bố trí thí nghiệm trên 20 lợn gây nhiễm ấu trùng C cellulosae Sau 60 ngày gây nhiễm, dùng bộ kit ELISA Taenia solium của hãng Scimedx/Mỹ để xét nghiệm

huyết thanh Kết quả thấy cả 20 lợn đều có huyết thanh dương tính với kháng nguyên

của ấu trùng C cellulosae Từ đó, bố trí thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh gạo cho lợn

gây nhiễm

+ Lô I: gồm 5 lợn, sử dụng thuốc praziquantel, liều 20 mg/kg TT/ngày x 2ngày Lô II: gồm 5 lợn, sử dụng thuốc albendazole, liều 15 mg/kg TT/ngày x 3ngày Lô III: gồm 5 lợn, sử dụng thuốc praziquantel, liều 20 mg/kg TT/ngày trongngày đầu Sau đó dùng thuốc albendazol, liều 15 mg/kg/ngày trong 2 ngày tiếptheo Các thuốc đều được sử dụng bằng cách cho uống

Lô đối chứng: gồm 5 lợn, không dùng thuốc điều trị

Mỗi ngày mổ khám lợn ở 3 lô thí nghiệm và lô đối chứng vào các ngày 11,

12, 13, 14, 15 sau khi dùng thuốc

Đánh giá độ an toàn của phác đồ điều trị bệnh gạo: Độ an toàn của phác đồ

điều trị bệnh gạo lợn được đánh giá bằng kết quả theo dõi trạng thái cơ thể, sự vậnđộng, ăn uống của 15 lợn ở 3 lô thí nghiệm trước và sau khi dùng thuốc trong vòng

24 giờ

b) Đánh giá hiệu lực của phác đồ điều trị trên lợn mắc bệnh ở thực địa

* Xác định những lợn nhiễm ấu trùng C cellulosae để điều trị (thông

qua việc xác định những lợn có huyết thanh dương tính - có kháng thể kháng

ấu trùng C cellulosae)

Sử dụng bộ kit ELISA T solium của hãng Scimedx/Mỹ để xét nghiệm các mẫu

huyết thanh của 150 lợn thể trạng gày yếu tại Sơn La và 150 lợn có thể trạng gày yếutại Điện Biên Lợn có huyết thanh dương tính được coi là mắc bệnh gạo

* Theo dõi triệu chứng lâm sàng của những lợn có huyết thanh dương tính trên thực địa: Những lợn có huyết thanh dương tính bằng bộ Kit ELISA được theo dõi

triệu chứng lâm sàng Kết hợp các triệu chứng quan sát được trên lợn mắc bệnhgạo tự nhiên với triệu chứng của lợn mắc bệnh gạo do gây nhiễm, từ đó rút ra một

số triệu chứng tương đối đặc thù của lợn mắc bệnh gạo để có khuyến cáo phục vụcông tác chẩn đoán, phát hiện lợn mắc bệnh ở các địa phương thông qua triệuchứng lâm sàng của bệnh

* Xác định hiệu lực của phác đồ điều trị bệnh gạo lợn trên thực địa: Điều trị thử

nghiệm cho những lợn có huyết thanh dương tính bằng phác đồ có hiệu lực cao nhất(lựa chọn từ kết quả thử nghiệm trên lợn gây nhiễm)

Sau khi dùng thuốc 20 và 30 ngày, lấy mẫu huyết thanh của những lợn điều trị

xét nghiệm lại bằng bộ kit ELISA Taenia solium Từ đó đánh giá được hiệu lực của

phác đồ điều trị bệnh

2.4.3.3 Đề xuất biện pháp phòng chống bệnh gạo cho lợn

Biện pháp phòng chống bệnh gạo cho lợn được xây dựng dựa vào đặc điểmdịch tễ, đặc điểm bệnh lý, lâm sàng và kết quả thử nghiệm phòng trị bệnh mà đề tài

3.1 Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh gạo lợn do ấu trùng Cysticercus

cellulosae gây ra tại tỉnh Sơn La và Điện Biên

3.1.1 Thực trạng nhiễm ấu trùng Cysticercus cellulosae ở lợn tại tỉnh Sơn La và Điện Biên

3.1.1.1 Tỷ lệ và cường độ nhiễm ấu trùng Cysticercus cellulosae ở lợn tại một số huyện trên địa bàn tỉnh Sơn La và Điện Biên

Kết quả về tỷ và cường độ nhiễm ấu trùng được trình bày ở bảng 3.1

Bảng 3.1 Tỷ lệ và cường độ nhiễm ấu trùng C cellulosae

ở một số huyện của tỉnh Sơn La và Điện Biên

(con)

Tỷ lệ nhiễm

(%)

Số lợn nhiễm/cường độ nhiễm

(min - max) ấu trùng

Ở cơ Ở não Ở thận Ở tim

* Ghi chú: - Ở tỉnh Sơn La (H Bắc Yên: Trong 11 lợn nhiễm có 11 con thấy

ấu trùng ở cơ và não, 10 ở thận, 8 ở tim Tương tự như vậy với 2 huyện Mường La và Mai Sơn).

Ở tỉnh Điện Biên (H Mường Ảng: Trong 10 lợn nhiễm có 10 con thấy ấu trùng ở cơ 9 con thấy ở não, thận và tim Tương tự như vậy với 2 huyện Tủa Chùa

và Nậm Pồ).

- Theo hàng dọc, các tỷ lệ nhiễm mang chữ cái giống nhau thì khác nhau không rõ rệt (P >0,05).

Bảng 3.1 cho thấy:

Lợn ở hai tỉnh Sơn La và Điện Biên nhiễm ấu trùng với tỷ lệ 2,98%

Tỷ lệ nhiễm ấu trùng C cellulosae ở lợn của tỉnh Điện Biên và tỉnh Sơn La có

sự khác nhau không rõ rệt (P > 0,05)

Kết quả nghiên cứu của chúng tôi về tỷ lệ nhiễm ấu trùng C cellulosae trên lợn

ở tỉnh Sơn La và Điện Biên thấp hơn kết quả nghiên cứu của Nguyễn Quốc Doanh và

cs (2002) Theo tác giả, khi kiểm tra ấu trùng C cellulosae trên lợn ở Bắc Ninh và

Bắc Kạn bằng phương pháp ELISA, thấy tỷ lệ nhiễm ở lợn là 9,91%, biến động từ6,06 đến 15,49% Chúng tôi nhận thấy, tập quán sinh hoạt và phương thức chănnuôi lợn ở các vùng có sự khác nhau nên có tỷ lệ nhiễm ấu trùng khác nhau Sựkhác nhau về kết quả trên có thể do phương pháp nghiên cứu khác nhau, phươngpháp phát hiện ấu trùng mà chúng tôi thực hiện là phương pháp mổ khám lợn, đây

là phương pháp có độ chính xác rất cao, loại trừ được khả năng phản ứng chéo màcác phương pháp khác, trong đó có kỹ thuật ELISA gặp phải

3.1.1.2 Tỷ lệ nhiễm ấu trùng Cysticercus cellulosae theo tuổi lợn

Tỷ lệ nhiễm ấu trùng C cellulosae theo tuổi lợn được trình bày ở biểu đồ

hình 3.2

0 1,29 3,113,49

0 1,45 2,19 6,70

0 1,36 2,65 5,21

0 1 2 3 4 5 6 7 8

Sơn La Điện Biên Tính chung Địa phương

Tỷ lệ (%)

≤ 2 > 2 - 6 > 6 - 12 > 12

Hình 3.2 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm ấu trùng C cellulosae theo tuổi lợn

Biểu đồ hình 3.2 cho thấy:

Tính chung: lợn dưới 2 tháng tuổi chưa thấy nhiễm ấu trùng C cellulosae.

Lợn 2 - 6 tháng tuổi nhiễm ấu trùng với tỷ lệ thấp (1,36%); lợn 6 - 12 tháng tuổinhiễm ấu trùng với tỷ lệ cao hơn (2,65%), lợn trên 12 tháng tuổi tỷ lệ nhiễm ấu

trùng cao nhất (5,21%) Như vậy, tỷ lệ nhiễm ấu trùng C cellulosae tăng dần theo

tuổi lợn Quy luật này thấy rõ ở cả những lợn mổ khám tại tỉnh Sơn La và nhữnglợn mổ khám ở tỉnh Điện Biên